基质金属蛋白酶-9及其抑制物TIMP-1表达与醋柳黄酮治疗大鼠缺血-再灌注损伤心肌的关系研究

目的：观察基质金属蛋白酶（MMP）-9及其抑制物TIMP-1表达与醋柳黄酮治疗大鼠缺血-再灌注损伤心肌的关系研究,探讨醋柳黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法：将50只大鼠随机分组：模型组、氯沙坦组、醋杉P黄酮大小剂量组及假手术组。结扎左冠状动脉前降支,30min后松开制作心肌缺血再灌注模型,免疫组织化学检测再灌注心肌组织MMP-9及其抑制物TIMP-1表达。结果：免疫组化结果示模型组较假手术组MMP-9、TIMP-1表达增高;醋柳黄酮大小剂量组较模型组MMP-9表达减少,TIMP-1表达增多。且有统计学意义。结论：醋柳黄酮对再灌注损伤心肌有保护作用,其作用机制与抑制心肌中MMP-9表达,促进TIMP-1表达有关。     

醋柳黄酮对高脂血症的疗效观察

目的观察醋柳黄酮对高脂血症的疗效.方法将98例高脂血症患者随机分为治疗组(50例,醋柳黄酮片10mg tid po)和对照组(48例,常规药物治疗),疗程均为3个月.结果治疗组血胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(apoB)、载脂蛋白A(apoA)均较治疗前下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)较治疗前升高(P＜0.05),与对照组相比有显著性差异(P＜0.05),醋柳黄酮对TC、TG、HDL-C的总有效率分别为78%、56%、56%,较对照组有显著性差异(P＜0.05). 结论醋柳黄酮能有效地降低TC、TG、LDL-C,升高HDL-C.     

醋柳黄酮对高血压病靶器官的影响

目的观察醋柳黄酮对高血压靶器官的影响.方法采用前瞻性随机同期单盲对照方法,将72例合格对象按随机分为醋柳黄酮组(TFH)和卡托普利组(CAP),共治疗8个月,治疗前后分别心超测量左心有关指标、观察肾功能有关指标及眼底变化.结果 (1)TFH能显著降低高血压患者血压( P<0.01);(2)TFH可以显著降低高血压病人LVMI(由166.46±42.73降至116.89±29.67)(P<0.05)并改善左心室舒张功能(P<0.05),其降低LVMI作用同降压幅度无相关性,其与SBP/DBP相关系数r分别为0.265,0.297(P>0.05),其降低LVMI及改善左心室舒张功能作用同卡托普利相当.(3)TFH可以显著降低高血压病人尿微量蛋白的排泄量(尿β2-MG(4.68±4.41 比2.1±2.11 mg/L及晨尿白蛋白30.68±27.17比16.26±12.02 μg/ml)及血β2-MG水平(5.6±5.75降至2.43±2.01 mg/L,P<0.01),其下降幅度同CAP相当(P>0.05).两组治疗后尿白蛋白下降幅度与SBP、DBP 下降幅度均无显著相关,与SBP下降幅度的r值分别为-0.321 、-0.34(P均>0.05);与DBP下降幅度的r值分别为-0.211、-0.390(P均>0.05).(4)TFH对高血压病人眼底病变亦有明显的改善作用(P＜0.05).结论 TFH在降低血压同时,有较好的改善及逆转高血压病靶器官损害作用,值得临床推广使用.     

菟丝子黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的观察菟丝子黄酮对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min,再灌注2 h建立心肌缺血再灌注模型。将40只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、菟丝子黄酮低、高剂量组及消心痛组。再灌注结束后检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH),DNA末端标记法(TUNEL法)计算凋亡指数(AI)与免疫组化法检测心肌Bcl-2和Caspase-3蛋白表达。结果与空白对照组比较,其余四组心肌酶CK、LDH和AI显著增高(P<0.01),Bcl-2和Caspase-3蛋白表达增强(P<0.01);与模型组比较,菟丝子黄酮低、高剂量组及消心痛组能降低CK、LDH含量和AI(P<0.05),增加Bcl-2和减少Caspase-3的表达(P<0.01);菟丝子黄酮高剂量组与消心痛组比较无差异(P>0.05)。结论菟丝子黄酮预处理能够减少心肌酶CK、LDH含量,上调Bcl-2蛋白表达,下调Caspase-3蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡,与消心痛效果相近。     

醋柳黄酮治疗老年冠心病无症状心肌缺血的疗效观察

醋柳黄酮治疗老年冠心病无症状心肌缺血的疗效观察贾连旺毛振华浙江省金华市中心医院心内科（３２１０００）无症状心肌缺血（ＳＭＩ）在老年人冠心病中十分常见，因其发作隐匿，易被忽视，故急性心肌梗塞及心原性猝死的发病率都高于有症状心肌缺血。为此，ＳＭＩ的防治日...     

缺血后处理对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察在体条件下缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及可能的途径。方法建立大鼠在体缺血再灌注模型,将30只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组、缺血预适应组。于再灌注末测定心肌酶,超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量,并测定心肌组织梗死面积。结果与缺血再灌注组相比,缺血后处理组与缺血预适应组心肌梗死面积明显减小,血浆肌钙蛋白I及MDA的含量均降低(P<0.05),血浆SOD活性升高(P<0.05)。结论缺血后处理可减轻心肌缺血再灌注损伤,具有心肌保护效应。     

醋柳黄酮对高脂血症的疗效观察

目的：观察醋柳黄酮对高脂血症的疗效。方法：将98例高脂血症患者随机分为治疗组(50例，醋柳黄酮片10mg tid po)和对照组(48例，常规药物治疗)，疗程均为3个月。结果：治疗组血胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B(apoB)、载脂蛋白A(apoA)均较治疗前下降，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)较治疗前升高(P＜0．05)，与对照组相比有显著性差异(P＜0．05)，醋柳黄酮对TC、TG、HDL-C的总有效率分别为78％、56％、56％，较对照组有显著性差异(P＜0．05)。结论：醋柳黄酮能有效地降低TC、TG、LDL-C，升高HDL-C。     

醋柳黄酮治疗大鼠非酒精性脂肪性肝病的研究

目的初步研究醋柳黄酮对大鼠非酒精性脂肪性肝病的疗效。方法雄性SD大鼠54只随机分组，正常对照组20只喂饲普通饲料，其余大鼠喂饲高脂饲料（88％标准普通饲料＋10％猪油＋2％胆固醇）。正常对照组和高脂饮食大鼠各10只于12周末处死观察造模效果。剩余高脂饮食大鼠24只分为模型对照组和醋柳黄酮治疗组。治疗组自13周开始进行醋柳黄酮灌胃治疗（10mg／d），于20周末处死各组大鼠，测定血清丙氨酸氨基转移酶（AI。T）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、r谷氨酰转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（Tc）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）活性，同时观察肝组织病理学改变。结果20周末试验结束时，与正常对照组相比，模型组肝指数、血清ALT、AST、ALP、TP、TC、LDL水平显著升高（P≤0．01），肝组织脂肪变性、炎症及纤维化程度均较对照组重（P≤0．01）。醋柳黄酮治疗组血清ALT、AST、TC较模型对照组明显降低（P〈0．05），ALP、GGT、TG等也有所下降，但差异无统计学意义；肝纤维化程度较模型组明显减轻（P≤0．01），而肝组织脂肪变及炎症程度较模型组有改善趋势，但差异无统计学意义。醋柳黄酮治疗组大鼠血清脂质过氧化产物MDA含量较模型组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05），血清SOD活性较模型组有升高趋势，但差异无统计学意义。结论醋柳黄酮对高脂饮食大鼠非酒精性脂肪性肝病有一定的治疗作用。     

心肌缺血再灌注损伤研究进展

正心肌缺血本质是心肌的氧供需求平衡失调,缺血心肌可呈现功能、形态及代谢等方面的损伤[1,2],减少心肌缺血后损伤的最有效办法就是恢复组织灌注。但是,目前遇到的问题是缺血心肌在恢复血液再灌注后,出现了心律失常、心肌能量代谢障碍、心肌细胞超微结构的变化及微血管内皮细胞(VEC)损伤和功能障碍等一系列的功能、结构、代谢及心肌细胞电生理特性等各个方面的损伤进一步加重的现象,即心肌缺血/再灌     

金属基质蛋白酶9及其组织抑制物1在肾组织中的表达和调控

目的:观察STZ鼠肾组织及高糖状态下正常人类系膜细胞(NHMC)中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、金属基质蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达状况及磷酸肌酸激酶(PKC)抑制剂对其表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)时PKC抑制剂在细胞外基质降解中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组、PKC抑制剂组。PKC抑制剂组采用根皮素10mg/(kg.d)混悬液灌胃进行干预。第8周处死大鼠(每组6只)。检测24h尿蛋白定量、血肌酐水平。用免疫组化方法检测肾脏组织MMP-9、TIMP-1的表达。用ELISA方法检测肾脏组织PKC活性。体外实验,将NHMC置37℃,5%CO2培养箱中进行培养。并将NHMC分为N组(对照组):糖浓度5mmol/L,H组(高糖组):糖浓度30mmol/L,P组(高糖加PKC抑制剂):糖浓度30mmol/L加chelery thrine chloride 10-5mmol/L,M组(甘露醇组):甘露醇30mmol/L。于培养24、48、72h后用MTT法测定细胞增值。采用ELISA方法检测四组PKC活性。分别用RT-PCR及Western Blot检测各组MMP-9、TIMP-1mRNA及蛋白表达。结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P<0.01),血肌酐上升(P<0.05),PKC活性明显增高,MMP-9和TIMP-1出现表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。PKC抑制剂干预后其尿蛋白排泄明显减少,血肌酐水平降低,PKC活性下降,MMP-9、TIMP-1表达上调,其MMP-9/TIMP-1比值增高。体外实验中,高糖能促进NHMC增殖,且NHMC的增殖状况随时间的递增而明显增加。高糖(30mmol/L)能增加系膜细胞PKC的活性,MMP-9、TIMP-1较高表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。而PKC抑制剂使PKC的活性降低同时,MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1比值增高。结论:高糖可诱导PKC活性,PKC抑制剂能使MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1表达比值升高,推测PKC的活性状况可影响DN细胞外基质降解过程。     

葶苈生脉饮对压力负荷大鼠心肌组织MMP-9及TIMP-1表达的影响

治疗CHF的作用机制之一.     

缺血期急性高血糖对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血期急性高血糖对大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)后心肌损伤的影响,并分析血糖水平与心肌损伤之间的关系.方法 在制备急性大鼠MI/R(缺血30min,再灌注6h)模型的基础上,静脉输注高浓度的葡萄糖溶液,造成2个不同浓度的缺血期急性高血糖动物模型.将32只SD大鼠随机平均分配为4组:(1)假手术组(SHAM),(2)生理盐水对照组(CON),(3)高糖1组(HG1)和(4)高糖2组(HG2).术中监测血糖水平,再灌注结束后检测心肌酶谱水平和心肌梗死面积(IS).结果 (1)与CON组相比较,HG1组和HG2组缺血期血糖水平均显著升高,分别为(10.5±1.0)、(18.0±1.2)mmol/L vs(4.7±0.7)mmol/L(P<0.05).(2)HG1组和HG2组的血肌酸激酶和乳酸脱氢酶水平明显升高,且心肌酶谱与血糖水平存在正相关(r分别为0.80和0.73,P<0.01).(3)HG1组的IS较CON组有扩大趋势,但差异无统计学意义[(40.8±5.2)%vs(37.6±5.8)%,P>0.05),HG2组的IS明显扩大[(45.6±8.5)%v8(37.6±5.8)%,P<0.05],且IS与血糖水平存在正相关(r=0.57,P<0.01).结论 缺血期急性高血糖加重大鼠MI/R损伤,且血糖水平与心肌酶谱和IS之间存在正相关.     

大鼠脑出血后脑组织MMP-2、MMP-9表达及其与脑水肿关系的研究

目的研究大鼠脑出血后基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的表达规律及其与脑水肿之间的关系。方法采用向大鼠尾状核注射自体不凝血制作大鼠脑出血模型,实验动物随机分为假手术对照组和脑出血组,免疫组化法测定脑组织MMP-2、MMP-9的表达及干湿重法测定脑组织含水量。结果（1）血肿边缘MMP-9阳性微血管数在脑出血6h明显升高（P〈0.01）,48h达高峰,2w降至零表达（P〉0.05）;MMP-248h始在巨噬细胞上表达（P〈0.05）,120h达高峰,2w仍保持较高水平（P〈0.01）;（2）脑组织含水量在脑出血12h显著增加（P〈0.05）,72h达到高峰,2w与假手术对照组无差异（P〉0.05）。（3）脑出血后MMP-9与脑组织含水量之间呈正相关关系（r=0.8716,P〈0.01）。结论脑出血后MMP-2、MMP-9有高表达,MMP-9参与了脑出血急性期脑水肿的形成,MMP-2则可能参与了脑出血后期的脑组织损伤修复。     

Survivin、MMP-9在大肠腺瘤癌变过程中的表达及其临床意义

目的研究存活素(Survivin)和MMP-9在大肠腺瘤癌变过程中的表达,探讨他们在大肠癌发生、发展、浸润和转移中的作用及其相互关系。方法用免疫组化SABC法和原位杂交技术检测59例大肠腺癌、35例大肠腺瘤(包括21例低度异型增生和14例高度异型增生)和12例癌旁正常大肠黏膜组织中Survivin蛋白、SurvivinmRNA和MMP-9的表达。结果在大肠腺瘤-癌序列演变过程中,Survivin蛋白、mRNA和MMP-9的表达率逐渐升高;正常大肠黏膜、低度异型增生腺瘤与高度异型增生腺瘤、大肠癌间Survivin、MMP-9表达有显著性差异(P<0.05),大肠癌和高度异型增生腺瘤的Survivin、MMP-9表达无显著性差异(P>0.05);SurvivinmRNA阳性强度均低于蛋白表达水平;大肠癌组织中,Survivin的表达与临床病理分型之间均无相关性(P>0.05);MMP-9的表达与浸润深度、Dukes分期、淋巴道转移之间有显著性差异(P<0.05);Survivin与MMP-9两者在大肠腺瘤癌变过程中的表达密切相关(r=0.573,P<0.01)。结论Survivin在大肠腺瘤至癌的演变阶段起重要作用;MMP-9在大肠癌浸润、转移过程中起重要作用;Survivin蛋白表达的调控可能发生在转录以后水平;Survivin与MMP-9存在协同作用或相互调节机制,共同促进肿瘤的发生、发展、浸润和转移。     

肝细胞癌患者血清leptin和MMP-9的表达及其临床意义

目的 探究肝细胞癌患者血清瘦素(leptin)及金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定80例肝细胞癌患者血清leptin及MMP-9的表达水平,并与40例健康志愿者进行比较,分析影响肝细胞癌患者血清leptin和MMP-9水平的因素.两组比较采用t检验,多组比较采用方差分析,相关性检验采用Pearson分析.结果 肝细胞癌患者血清leptin、MMP-9表达水平明显高于健康对照组,升高水平与其临床分期成正比.肝细胞癌患者血清leptin、MMP-9的水平与患者合并腹水、体质量指数、肿瘤数目和大小、血管和淋巴转移情况、肿瘤胞膜完整度和肿瘤分化程度相关,且二者呈正相关(r=0.381 7,P＜0.05).结论 leptin和MMP-9在肝细胞癌患者体内出现异常表达,二者可能共同参与了其发生发展的过程.     

HMGB1对心脏成纤维细胞MMP-9表达的影响及其机制研究

目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响及其可能的机制。方法培养大鼠心脏成纤维细胞,予以100ng/ml浓度HMGB1干预,采用CCK-8检测细胞活力;Westernblot方法检测胞内及细胞上清中MMP-9水平,RAGE与TLR4表达水平及ERK1/2的磷酸化水平。结果 (1)HMGB1干预心脏成纤维细胞24小时,细胞活力与对照组相比无显著差异。(2)HMGB1干预心脏成纤维细胞24小时,胞内MMP-9蛋白水平显著降低(P<0.05),而细胞上清中MMP-9水平显著升高(P<0.05)。(3)HMGB1干预心脏成纤维细胞24小时,TLR4表达升高(P<0.05)而RAGE表达无显著差异。(4)HMGB1干预心脏成纤维细胞5分钟,ERK1/2显著活化(P<0.05)。(5)TLR4中和抗体(20ug/ml)阻断TLR4后,HMGB1+TLR4阻断组的p-ERK1/2表达较HMGB1干预组明显降低(P<0.05)。结论 HMGB1可能通过TLR4活化ERK1/2,促进心脏成纤维细胞分泌MMP-9,进而破坏心肌胶原结构,参与心肌重构。     

白花前胡丙素对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察白花前胡丙素（Pra—C）对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤（MI／R）的机制及其保护作用。方法48只健康雄性SD大鼠随机分为6组：假手术组（A组）、缺血再灌注组（B组）、溶剂±缺血再灌组（C组）、Pra—C5mg／kg组（D组）、Pra—C15mg／kg组（E组）和Pra—C30mg／kg组（F组）。Pra—C各剂量组分别于实验前3d腹腔注射,每天2次,于实验前2h加强1次;A组给予等量的生理盐水腹腔注射;B组采用冠状动脉左前降支结扎40min,再灌120min建立;C组给予等量的50％PEG400,10ml／kg溶剂腹腔注射。分光光度计法检测心肌组织SOD活性和MDA含量。苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织病理改变,透射电镜观察心肌超微结构的变化,并比较各组之间的差异。结果六组SOD值（U／mgprot）分别为154．78±10．94、78．16±7．13、79．15±7．12、88．77±8．53、115．80±7．09和145．07±7．24;MDA值（nmol／mgprot）分别为2．70±0．26、6．77±0．23、6．48±0．64、5．07±0．38、3．41±0．32和2．72±0．32。B组和C组心肌组织SOD活性和MDA含量差异无统计学意义（P〉0．05）;与它们相比较,D、E、F组SOD活性显着增加（P〈0．05或P〈0．01）,MDA含量显著降低（P〈0．01）。D、E、F组心肌组织的病理改变有不同程度的减轻。结论Pra—C可以减轻MI／R对心肌组织的损伤作用。其机制可能与对抗氧自由基、对抗脂质过氧化有关。     

rt-PA静脉溶栓对脑缺血大鼠血脑屏障通透性及MMP-2、MMP-9活性和表达的影响

目的 探讨重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓对脑缺血大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2和MMP-9活性及表达的影响.方法 46只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=10)、大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)组(n=18)和rt-PA溶栓组(n=18).采用自体血栓栓塞法制作MCAO模型.假手术组不注入血栓栓子,MCAO组仅制作MCAO,rt-PA溶栓组在MCAO后3h给予rt-PA静脉溶栓.2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死体积.伊文思蓝渗出法检测BBB通透性.分别采用明胶酶谱法和蛋白质印迹法检测脑组织MMP-2和MMP-9活性和表达.对各组神经功能评分、脑梗死体积、出血评分、BBB通透性以及MMP-2和MMP-9活性和表达情况进行比较.结果 rt-PA溶栓组神经功能较MCAO组显著改善,脑梗死体积也显著缩小(t=7.365,P=0.005),但出血评分(t=-3.286,P=0.017)和BBB通透性(t=-3.947,P=0.029)均显著增加.假手术组MMP-2和MMP-9活性和表达水平均较低,MCAO组MMP-2(t=-45.121,P=0.000;t=-11.624,P=0.000)和MMP-9(t=-71.849,P=0.000;t=-8.992,P=0.000)活性和表达均显著性增高和上调,而rt-PA溶栓组MMP-2(p-28.792,P=0.000;t=-3.809,P=0.013)和MMP-9(t=-53.506,P=0.000;t=-2.640,P=0.046)活性和表达较MCAO组显著性增高和上调.结论 rt-PA静脉溶栓治疗后BBB通透性增加,MMP-2和MMP-9活性和表达增高和上调.MMP-2和MMP-9可能参与了BBB通透性增加,从而诱发脑缺血大鼠rt-PA静脉溶栓治疗后的出血性转化.