巨噬细胞与动脉粥样硬化及中医药干预作用研究进展

动脉粥样硬化是全球的常见病、多发病,同时是导致心脑血管疾病的主要的病理基础,严重影响到人类生命健康。AS一个慢性炎性反应的过程,高脂血症、高血压、高血糖、高尿酸、肥胖等多种因素导致血管内皮损伤,血管壁增厚,弹性改变等一系列变化。在AS发生的不同阶段,巨噬细胞凋亡、自噬分别发挥着不同的作用,以及不同表型的巨噬细胞在AS的进程中也发挥着不同作用,适度的凋亡和自噬会降低炎症反应发生,保证AS斑块的稳定性,将M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化亦会增强AS斑块的稳定性,减少临床不良事件的发生。文章就巨噬细胞凋亡、自噬和极化等与AS发生发展的关系以及中医药干预作用研究进展作一综述,为临床防治AS以及新药研发提供新的理论依据。     

基于“正邪理论”探讨自噬在动脉粥样硬化发展中的作用

动脉粥样硬化是一种慢性进行性的疾病,多伴随有大、中动脉的脂质代谢异常、炎症反应及细胞自噬等病理变化。在研究进展中发现自噬在动脉粥样硬化发展过程中越来越受到重视,自噬是真核细胞自我调节机制,其中血管内皮细胞、血管平滑肌细胞及巨噬细胞等细胞自噬在动脉粥样硬化发展过程中密切相关。中医的“正邪理论”阐述了疾病发展到转归的整个过程,笔者发现细胞自噬对上述细胞的调节作用与“正邪理论”似乎有着相似性,以此为启示,简要探讨基于此理论下的细胞自噬在动脉粥样硬化发展中的作用,为今后中西医结合防治动脉粥样硬化提供新的思路。     

从细胞自噬角度浅析化痰祛瘀法防治动脉粥样硬化

自噬是由溶酶体所引起的,分解损伤的细胞器或蛋白质的行为,与动脉粥样硬化形成和发展息息相关。痰瘀互结引起巨噬细胞在脂质物质代谢不正常的情况下,产生细胞自噬乏力,炎症反应加剧,胆固醇的逆转运被遏制,血管壁中内皮细胞的功能受到影响,引起血管粥样硬化性病变的出现和发展。化痰祛瘀可以祛除人体的痰浊、瘀血之邪,改变痰瘀状况,减慢动脉粥样硬化的发展。可能对细胞自噬起到一定的辅助效果。     

艾灸对小鼠活性巨噬细胞自噬作用的影响研究

研究表明,艾灸对于机体免疫系统具有双向良性调整作用,既能发挥抗感染作用也能防止炎症过当［1-2］。观察艾灸时主要淋巴细胞的信号转导有助于揭示艾灸作用机制。巨噬细胞对抗感染抗炎免疫类型和强度具有重要意义,其极化状态和吞噬能力是可变的,自噬可能是影响巨噬细胞功能状态的因素之一。自噬是真核细胞内一种广泛的蛋白和细胞器的自我清除过程。研究表明,温和、持续的高温刺激可能激活细胞自噬反应［3］。本研究通过对艾灸后自噬标志物［4］和相关信号通路［5-6］的检测,分析艾灸与自噬之间的关系,揭示艾灸调节细胞免疫的分子基础和途径,为艾灸用于感染与炎症的治疗提供理论依据。     

中药及天然化合物靶向自噬调控动脉粥样硬化的研究进展

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是众多缺血性心血管疾病共同的病理基础,其形成过程涉及血管内皮损伤、血小板活化等多个方面。血管内皮损伤是AS斑块产生的始动因素,内皮受损处招募单核细胞分化为巨噬细胞,并吸收氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)慢慢转变为泡沫细胞。平滑肌细胞(smooth muscle cells, SMCs)则不断增殖、迁移,作为纤维帽中唯一产生间质胶原纤维的细胞,很大程度上决定了斑块是否破裂。AS形成过程中不断放大的炎症反应招募血小板黏附至血管内皮受损区域,并刺激血小板过度聚集。自噬活动与血管病变和血小板异常激活有关,过度自噬被认为是斑块稳定的不利因素。因此,精确调节不同类型血管细胞自噬和血小板自噬以治疗AS可为防治动脉粥样硬化性缺血性心血管疾病提供新的治疗视角。目前,AS的治疗策略仍主要集中在使用高强度他汀类药物降低血脂水平,药物通常会引起明显的副作用。因此开发更安全、有效的药物和治疗模式是现阶段研究的重点方向。中药及天然化合物具有靶向自噬治疗AS的潜力,已在我国心血管疾病的防治中发...     

巨噬细胞在动脉粥样硬化中的研究进展

目的综述巨噬细胞在动脉粥样硬化病程中的主要作用,为动脉粥样硬化的诊断、治疗及药物研究和开发提供文献依据和新的策略。方法对近几年关于巨噬细胞在动脉粥样硬化中作用的文献进行查阅、分析、归纳和总结。结果与结论巨噬细胞参与了动脉粥样硬化病理进程中的多个环节,巨噬细胞相关细胞因子、趋化因子、酶、转运蛋白、miRNA等生物大分子发挥着重要作用。认识巨噬细胞及相关生物大分子在动脉粥样硬化发生发展中的作用,对于深入理解动脉粥样硬化的病因、发病机制,为其提供诊断、治疗及药物研发依据具有重要意义。     

补阳还五汤对LPS诱导巨噬细胞活化与自噬的影响

目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/m TOR)信号通路在补阳还五汤抗脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞活化与自噬中的作用。方法:细胞增殖毒性检测(CCK-8)法筛选诱导RAW264.7巨噬细胞活力值的最适LPS浓度。在最适LPS浓度下,利用PI3K阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)(5 mmol·L~(-1)),Akt阻断剂MK2206(5μmol·L~(-1)),m TOR阻断剂Rapamycin(10μmol·L~(-1)),Beclin-1阻断剂Spautin-1(5μmol·L~(-1))及不同剂量的补阳还五汤含药血清(5%,10%,20%)处理RAW264.7巨噬细胞24 h后,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测RAW264.7巨噬细胞炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定磷酸化(p-)PI3K,p-Akt,p-mTOR通路蛋白的表达及微管轻链蛋白3(LC3),泛素结合蛋白1(p62),Beclin-1的水平。自噬双标腺病毒转染检测RAW264.7细胞自噬流的变化。结果:CCK-8结果显示10 mg·L~(-1)LPS作用时,细胞活性显著增强。模型组IL-1β,IL-6,TNF-α浓度显著高于空白组(P0.01),与模型组比较,Rapamycin显著升高IL-6浓度,其他给药组均可降低IL-1β,IL-6,TNF-α的水平(P0.05,P0.01)。模型组p-Akt,p-PI3K,p-mTOR蛋白表达量明显低于空白组(P0.05),LC3,p62蛋白表达量显著高于空白组(P0.01),与模型组比较,Rapamycin显著降低p-Akt蛋白表达量,不影响p-mTOR表达,补阳还五汤各剂量组与其他各阻断剂组均可明显升高p-Akt,p-PI3K,p-mTOR蛋白表达量(P0.05,P0.01),降低LC3,p62蛋白表达量(P0.05,P0.01),各组Beclin-1蛋白表达量均无显著性差异。与空白组比较,模型组中有明显的自噬体斑点形成,自噬流顺畅;与模型组比较,补阳还五汤含药血清组,3-MA,Spautin-1组自噬斑点的形成明显减少或消失,MK2202,Rapamycin组自噬体斑点大小明显减小,但自噬活力仍较强。结论:补阳还五汤抗LPS诱导巨噬细胞活化与自噬与抑制巨噬细胞炎症反应,调控PI3K/Akt/m TOR信号通路,抑制自噬的过度发生有关。     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控巨噬细胞自噬探讨黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制

目的观察黄芪甲苷对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的调控,研究黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制。方法体外细胞实验中,将小鼠巨噬细胞RAW264.7随机分为5组,即对照组、黄芪甲苷组、康士得组、雷帕霉素组以及si RNA组。分别用黄芪甲苷含药血清、Akt抑制剂康士得、mTOR抑制剂雷帕霉素及mTOR-si RNA体外处理RAW264.7细胞48 h,透射电镜观察巨噬细胞自噬体的变化,免疫荧光法及Western blotting法检测微管相关蛋白LC3-II表达,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blotting法检测Akt、mTOR及自噬相关蛋白Beclin 1的表达,ELISA检测RAW264.7细胞分泌炎症因子白细胞介素-4(IL-4)、IL-10、IL-2和γ-干扰素(IFN-γ)水平。体内实验采用HE染色检测各组小鼠主动脉横截面病理损伤程度;q RT-PCR和Western blotting法分别检测小鼠主动脉组织中Akt、mTOR的mRNA和蛋白表达。结果体外实验结果显示,与对照组比较,黄芪甲苷含药血清组和各抑制剂组细胞透射电镜下观察到自噬体明显增多(P0.05),LC3-II和Beclin1蛋白的表达水平明显上调(P0.05),而Akt及mTOR的mRNA及蛋白表达水平明显减少(P0.05),巨噬细胞分泌的IL-10明显降低,而分泌的IFN-γ显著增加(P0.05)。小鼠主动脉HE染色结果显示,与模型组比较,黄芪甲苷组小鼠血管各层结构正常,排列整齐,局部有小灶性的钙化颗粒物沉积,病变轻、斑块小,泡沫细胞和脂质减少,弹力板基本完整,病变程度明显较轻,并较各抑制剂组轻。黄芪甲苷组小鼠主动脉组织Akt、mTOR的mRNA和蛋白表达均较低(P0.05)。结论黄芪甲苷抑制动脉粥样硬化斑块的形成机制与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路、抑制炎症反应有关。     

稳斑汤含药血清对巨噬细胞泡沫化自噬相关蛋白LC3B和Beclin 1表达的影响

目的探讨稳斑汤防治动脉粥样硬化的可能作用机制。方法 20只SD大鼠随机分为空白组及稳斑汤低、中、高浓度组各5只。稳斑汤低、中、高浓度组分别给予稳斑汤4.275、8.55、17.1 g/(kg·d)灌胃,空白组给予4 ml蒸馏水灌胃,每天1次,连续灌胃7天。灌胃第8天腹主动脉取血,离心后分离血清。体外培养小鼠巨噬细胞,分为空白对照组、模型组、雷帕霉素组及稳斑汤低、中、高浓度组,每组6孔。除空白对照组外其余各组均进行巨噬细胞泡沫化。空白对照组及模型组予10%大鼠空白血清培养;雷帕霉素组用雷帕霉素10μl/孔(终浓度10 nmol/L)培养;稳斑汤低、中、高浓度组分别用10%稳斑汤低、中、高浓度含药血清200μl/孔培养。48h后收集细胞,在透射电镜下观察各组细胞自噬体的变化,Western Blot法检测各组细胞LC3B和Beclin 1蛋白表达水平。结果透射电镜下观察到,空白对照组无明显自噬体出现,模型组可见少量自噬体出现;与模型组比较,稳斑汤各浓度组与雷帕霉素组的自噬体数量均明显增加,雷帕霉素组数量更多。与空白对照组比较,其余各组LC3B和Beclin 1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,稳斑汤各浓度组及雷帕霉素组LC3B和Beclin 1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与雷帕霉素组比较,稳斑汤高浓度组LC3B和Beclin 1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论稳斑汤含药血清能够上调巨噬细胞泡沫化自噬相关蛋白LC3B和Beclin 1表达,促进泡沫化的巨噬细胞的自噬,从而抑制巨噬细胞泡沫化的进展,这可能是稳斑汤防治动脉粥样硬化的分子机制之一。     

自噬研究进展

自噬在细胞生存和死亡中都发挥着重要作用,随着研究的深入,已经发现大量新的自噬基因,其中,有些自噬基因调控细胞由自噬性死亡向凋亡性死亡转变,这些基因的发现有助于对自噬和凋亡的交叉研究。自噬还参与胚胎发育、免疫系统疾病等的病理过程。回顾自噬的研究进展,为细胞死亡机制和疾病治疗研究提供线索。     

Bushen Kangshuai tablet inhibits progression of atherosclerosis by intervening in macrophage autophagy and polarization

OBJECTIVE: To investigate the efficacy of Bushen Kangshuai(BS-KS) tablet on autophagy and polarization in mouse macrophage RAW 264.7.MEYHODS: Macrophage autophagy was induced by oxidized low-density lipoprotein(100 μg/m L). To detect the levels of autophagy, macrophage were transfected with double fluorescence LC3 autophagy adenovirus, then the numbers of autophagosomes and autophagic lysosomes were asessed by confocal microscopy. The autophagy related proteins expression of PI3 K, Akt, phospho-m Akt(p-Akt) and m TOR, phospho-m TOR([p-TOR), p62,microtubule-associated protein 1(LC3-Ⅱ)were determined by western blotting. The macrophage polarization model was induced by lipopolysaccharide(1 μg/m L). The m RNA levels of i NOS, CD86(M1 macrophages marker molecules), and CD206, Arg-1(M2 macrophages marker molecules) were detected by real-time quantitative PCR. The concentration of cytokines TNF-α and IL-10 was determined by enzyme-linked immunosorbent assay. The protein expression of nuclear proteins PPAR-γ, NF-κB,and cytoplasmic protein IKB α was determined by western blotting.RESULTS: The expression of the autophagy-related protein LC3-Ⅱ was increased and the expression of p62 was decreased in the BS-KS intervention group. The protein expression of PI3 K, p-Akt, and p-m TOR was also reduced. BS-KS also inhibited the m RNA expression of i NOS and CD86 on M2 macrophage, but promoted the expression of CD206 and Arg-1 on M2 macrophage. With respect to the regulation of inflammatory factors, BS-KS could inhibit the secretion of pro-inflammatory TNF-α and promote the secretion of anti-inflammatory IL-10. It also inhibited the protein expression of IKB-α and NF-κB, and promoted the expression of nuclear protein PPAR-γ.CONCLUSION: We believe that BS-KS promotes macrophage autophagy by increasing the level of autophagy protein and inhibiting the PI3 K/Akt/m TOR signaling pathway. Furthermore, BS-KS seems to inhibit macrophage M1 polarization and promote M2 polarization via the PPAR gamma/NF-κB signaling pathway, thus playing an inhibitory role in atherosclerosis.     

运用“脉络癥积”探讨动脉粥样硬化病机

动脉粥样硬化是心脑血管疾病、周围血管疾病等重要的发病机制,对人体健康有较大的影响以及危害。运用中医理论解释及中药治疗动脉粥样硬化领域仍较少涉及。结合动脉粥样硬化现代病因、病理及临床特点与中医“癥积”理论、病因病机对比,并通过临床观察认为动脉粥样硬化斑块属于中医学“癥积”范畴,创新性提出动脉粥样硬化微型癥积理论,故本文主要从脉络癥积的理论基础、动脉粥样硬化病因病机、动脉粥样硬化形成与脉络癥积关系、运用脉络癥积理论治疗动脉粥样硬化等方面进行认识动脉粥样硬化微型癥积新机理,为临床治疗动脉粥样硬化提供新思路。     

从痰、瘀、虚探讨动脉粥样硬化的中西医病机

中医无动脉粥样硬化相对应病名,常归属于"胸痹"、"心痛"、"真心痛"、"中风"等范畴,其病机以痰、瘀、虚为主。现代医学研究表明,动脉粥样斑块的形成和发展过程始终伴随着炎症反应及其诱发的细胞坏死,而炎症反应与中医的痰、瘀、虚存在紧密的联系。以"虚"是炎症产生的根本,"痰瘀"是炎症激发和加剧的条件,痰瘀为标,互为因果,恶性循环的理论为指导,从痰、瘀、虚与炎症的关系,进一步探讨动脉粥样硬化的中西医病机,并结合最新研究发现,如清道夫受体内陷导致胆固醇逆转运异常、清道夫受体同时可介导低密度脂蛋白进入血管内皮、巨噬细胞转化为泡沫细胞、激活炎症通路诱发血管慢性炎症持续状态和激活细胞坏死相关通路诱发细胞坏死,最终引起动脉粥样硬化的发生和进展,为临床认识动脉粥样硬化的病机提供理论依据,有助于拓展临床对于动脉粥样硬化相关疾病的诊疗思路。     

基于浊邪与铁死亡相关性探析动脉粥样硬化之病机

动脉粥样硬化(AS)作为一种血管退行性病变,是心血管疾病共同的病理基础。铁死亡是一种铁依赖性脂质活性氧积聚的细胞程序性死亡方式。越来越多的研究发现AS的发病机制与铁死亡相关。中医学认为“浊邪”是AS的主要病机,铁死亡与中医学“浊邪”存在一定相关性。本文从铁代谢、脂代谢、氨基酸代谢、三羧酸循环、芬顿反应及铁死亡的主要通路探究中医浊邪产生的机制,以细胞的铁死亡方式具化中医学“浊邪”,分析不同形式的“浊邪”,提出铁蓄积的“瘀浊”以活血化瘀法,脂代谢异常的“脂浊”以健脾化浊法,抗氧化系统异常的“浊邪”以补肾固精等治法抑制铁死亡抗AS,为中医药精准化防治AS提供新视角。     

中药治疗巨噬细胞：针对动脉粥样硬化的一种独特策略

动脉粥样硬化是心血管疾病的主要原因,是全球死亡人数最多的疾病之一。巨噬细胞是动脉粥样硬化过程中的主要参与者,是药物抑制炎症和调节脂质代谢的靶标。在本文中主要综述了传统中药和它们的活性化合物在治疗动脉粥样硬化方面的作用和机制。     

海参的抗肿瘤作用研究进展

海参味美可口,营养丰富,具有较高的药用价值,在我国一向被视为佐膳珍品,中医认为:其性温补,足敌人参,故曰海参。文章通过对近年来一些国内外文献进行整理,简要概括海参中的抗肿瘤活性成分的研究状况以及临床复方的应用情况。海参中含有多种抗肿瘤活性成分,主要有海参多糖和海参皂苷。这些抗肿瘤活性成分在肿瘤发生发展及转移的不同阶段,起着重要作用。海参中新的抗肿瘤活性成分的发现,对海参的抗肿瘤临床应用具有推动作用。     

巨噬细胞极化与动脉粥样硬化相关性及中药干预作用研究进展

综述巨噬细胞极化与动脉粥样硬化的相关性及中药干预作用的研究进展。M1型巨噬细胞极化可以促进动脉粥样硬化的发展,而M2型巨噬细胞极化对动脉粥样硬化的发展起到双重作用;丹参、穿心莲、姜黄、肉桂、黄连等中药的提取物,可以通过调节巨噬细胞极化,起到控制动脉粥样硬化进程的作用。     

Bushen Jiangzhi formula reduces atherosclerosis in apoE~(-/-)mice through autophagy

OBJECTIVE: To study the effect of Bushen Jiangzhi formula(BSJZF) on atherosclerosis(AS) in apolipoprotein E knockout(apo E-/-) mice and the underlying mechanism.METHODS: We used a high fat diet to induce AS in apo E-/-mice. The mice were randomly divided into four groups: model, BSJZF, atorvastatin, and3-methyladenine groups. Syngeneic C57 BL/6 mice of the same age were used for the control group.Autophagosomes in the aorta were examined by transmission electron microscopy. Morphology, lipid accumulation, and collagen deposition in the aorta were examined by hematoxylin and eosin, Oil Red O, and Masson's staining, respectively. Serum levels of tumor necrosis factor alpha(TNF-α), interferon gamma(IFN-γ), and interleukin 10(IL-10)were measured by enzyme-linked immunoassays.Protein expression of microtubule-associated protein light chain 3(LC3), Beclin 1, and p62 in the aorta were examined by Western blot analyses.RESULTS: Apo E-/-mice fed a high fat diet exhibited AS symptoms including less autophagosomes in the aorta, higher serum levels of TNF-α, IFN-γ, and p62, and lower serum levels of IL-10, LC3, and Beclin 1. Treatment with BSJZF significantly reduced the area of the aortic plaque, decreased expression of TNF-α, IFN-γ, and p62, and increased expression of IL-10, LC3, and Beclin 1.CONCLUSION: Our findings suggest that BSJZF promotes autophagy and reduces inflammation by regulating the expression of autophagy-related proteins LC3, Beclin 1, and p62, thereby effectively treating AS.     

缺血性中风病机探析

中风病的致病原因,历代多有争议,现在"风、火、痰、瘀、气、虚"等病因被广大学者认同,但多强调气血逆乱。对于基本病机,观点不一,试参照历代医家对本病的病机认识,结合现代医学,探求缺血性中风病病因病机。     

糖尿病肾病发病机制研究

糖尿病肾病(DN)属糖尿病微血管病变范畴,是糖尿病(DM)常见而又严重的并发症之一.欧美发达国家慢性肾功能衰竭(CRF)透析患者中DN占43%左右[1].