卵巢低反应患者抗苗勒管激素与干细胞生长因子表达及其相关性研究

目的:研究卵巢低反应患者抗苗勒管激素(AMH)和干细胞生长因子(SCF)的表达情况及二者的相关性。方法:选择年龄均小于35岁行体外受精-胚胎移植或卵细胞浆内单精子注射的卵巢低反应患者132例(卵巢低反应组)和正常对照组91例。采用ELISA检测两组患者血清和卵泡液中AMH蛋白和SCF蛋白的表达。分离并培养颗粒细胞,采用RT-PCR检测两组患者颗粒细胞中AMH mRNA和SCF mRNA表达相对灰度值,并对卵巢低反应患者颗粒细胞中两者表达进行相关性分析。结果:1与正常对照组比较,卵巢低反应组血清AMH蛋白表达(2.21±1.11 ng/ml vs 10.49±3.29 ng/ml)和卵泡液AMH蛋白表达(4.21±0.73 ng/ml vs 5.42±0.64 ng/ml)均显著降低,差异均有统计学意义(P0.01;P0.05)。2卵巢低反应组颗粒细胞中AMH mRNA表达相对灰度值较正常对照组显著降低(4.10±0.80 vs 6.20±1.40,P0.01),而SCF mRNA表达相对灰度值较正常对照组明显增加(4.69±1.12 vs 3.10±1.40,P0.05)。3卵巢低反应组颗粒细胞中AMH mRNA和SCF mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.56,P0.05)。结论:AMH的表达水平与卵巢反应性有关,卵巢低反应患者颗粒细胞中AMH表达显著降低,并与SCF的表达负相关,二者可能存在调控关系。     

卵泡刺激素对多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞分泌抗苗勒管激素的影响

目的 研究卵泡刺激素(FSH)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞分泌抗苗勒管激素(AMH)的影响.方法 选择2008年8月至2009年12月于中山大学附属第六医院生殖中心就诊的33例PCOS患者,从其直径为8～10 mm的窦卵泡中分离颗粒细胞,并分为以下3组进行培养:未经FSH刺激的颗粒细胞(未刺激组,n=12);外源性FSH刺激的颗粒细胞(体外刺激组,n=12),此组颗粒细胞来源同未刺激组;对患者行FSH促排卵治疗,采集FSH体内刺激的颗粒细胞(体内刺激组,n=21).分别采用ELISA法和实时荧光定量PCR技术检测培养液中颗粒细胞分泌的AMH水平,及AHM mRNA表达水平;构建AMH荧光报告载体,检测卵巢颗粒细胞中AMH启动子的活性.结果 培养液中颗粒细胞分泌的AMH水平,未刺激组为(11.4±4.0)μg/L,体外刺激组为(7.9±1.1)μg/L,体内刺激组为(5.6±1.7)μg/L,体内、体外刺激组分别与未刺激组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).AMH mRNA表达水平未刺激组为2.5±1.2,体外刺激组为1.5±0.5,体内刺激组为1.1±0.7,未刺激组高于体内、外刺激组,分别比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).未刺激组颗粒细胞中AMH启动子的活性为11.5±2.3,体外刺激组为8.7±2.4,体内刺激组为6.8±2.4,未刺激组高于体内、外刺激组,分别比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 FSH可能通过抑制PCOS患者卵巢颗粒细胞中AMH的启动子活性及其mRNA表达,抑制AHM的过度分泌,促进卵泡的生长发育.     

多囊卵巢综合征患者颗粒细胞自噬的发生及影响因素

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者颗粒细胞自噬的发生及影响因素。方法取卵日收集行体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)的PCOS患者和非PCOS患者的卵泡液和颗粒细胞,检测患者卵泡液性激素以及颗粒细胞自噬相关基因的表达,进一步将患者的颗粒细胞自噬相关基因与卵泡液性激素和临床结局等指标进行相关性分析。结果 PCOS患者颗粒细胞自噬相关基因BECN1(2.13±0.94)和ATG7(1.38±0.45)mRNA水平显著高于非PCOS组患者颗粒细胞(1.46±0.52,P=0.002;1.16±0.29,P=0.026)mRNA水平;PCOS患者卵泡液黄体生成素(LH)[(5.32±4.14)IU/L]、雌二醇(E2)[(990.36±390.53)mg/L]和睾酮(T)[(53.18±28.36)nmol/L]水平显著高于非PCOS组患者卵泡液[(2.38±1.34)IU/L,P=0.001;(715.61±325.18)mg/L,P=0.007;(24.44±15.12)nmol/L,P=0.000],PCOS患者卵泡液P4[(12.81±6.78)mg/L]水平显著低于非PCOS组患者[(17.77±9.60)mg/L,P=0.036]。相关性分析显示,颗粒细胞中BECN1 mRNA水平与血清基础T水平(r=0.490,P=0.000)、卵泡液T水平(r=0.329,P=0.031)、血清抗苗勒管激素(AMH)(r=0.337,P=0.018)均呈显著正相关。结论 PCOS患者颗粒细胞自噬可能存在异常激活,可能为PCOS发生的重要机制。     

GPR30/EGFR在多囊卵巢综合征患者卵巢组织中的表达

目的:探讨雌激素膜受体G蛋白偶联受体30(GPR30)及表皮生长因子(EGFR)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢组织中的表达。方法:选取2012~2015年在青岛市妇女儿童医院生殖中心行手术治疗的PCOS患者25例,以及同期因良性卵巢肿瘤行剥除术的25例患者为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测卵巢组织中ERα、ERβ、GPR30及EGFR mRNA的表达水平;Western blot法检测卵巢组织中ERα、ERβ、GPR30及EGFR蛋白表达;免疫组化法检测卵巢组织中ERα、ERβ、GPR30及EGFR蛋白的表达定位。结果:PCOS卵巢组织中GPR30及EGFR mRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。始基卵泡及初级卵泡中,GPR30蛋白主要定位表达于卵母细胞胞浆与胞膜以及颗粒细胞的细胞核,始基卵泡卵母细胞表达明显高于初级卵泡卵母细胞,较对照组GPR30在PCOS组卵母细胞及颗粒细胞中表达均升高;EGFR蛋白主要表达于颗粒细胞的细胞核,在PCOS组表达升高。结论:GPR30及EGFR在PCOS患者的卵泡发育障碍过程中可能具有重要作用。     

Expression of CHOP/GADD153 in Luteinizing Granulosa Cells of Ovary with Polycystic Ovary Syndrome

目的:探讨内质网应激相关因子CHOP/GADD153在多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢黄体颗粒细胞上的表达.方法:收集因PCOS不孕、行IVF-ET取卵时的黄体颗粒细胞(PCOS组,n=45)及因男方因素不孕、行IVF/ICSI-ET取卵时的黄体颗粒细胞(对照组,n=45),应用RT-PCR和Western blotting方法检测患者卵巢黄体颗粒细胞CHOP/GADD 153的表达.结果:PCOS组CHOP/GADD153mRNA水平(0.45±0.20)及蛋白水平(0.62±0.26)均较对照组(分别为0.40±0.18、0.56±0.17)有增高趋势,但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:内质网应激标志蛋白CHOP/GADD 153在PCOS患者卵巢黄体颗粒细胞上的表达无明显改变,推测PCOS患者卵巢黄体颗粒细胞内质网应激尚处于保护性阶段.     

颗粒细胞凋亡率联合卵泡液孕激素预测IVF-ET结局

目的:探讨颗粒细胞凋亡率联合卵泡液中孕激素水平检测对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的预测价值。方法:选取2011年3月～2012年6月在我院行IVF-ET患者34例,分离收集颗粒细胞及卵泡液,33258荧光染料着色,记录颗粒细胞凋亡率,放射免疫法测定外周血及卵泡液中雌孕激素水平。比较妊娠组与非妊娠组的年龄、基础FSH、Gn用量及持续时间、卵泡数、取卵数、颗粒细胞凋亡率、雌孕激素水平、受精率。对颗粒细胞凋亡率及卵泡液雌孕激素水平进行相关性分析。以丘颗粒细胞凋亡率≤4‰,卵泡液孕激素浓度≤5.0ng/ml为阳性标准,进行联合检测。结果:妊娠组与非妊娠组的年龄、基础FSH、Gn用量及持续时间、卵泡数、取卵数、受精率及雌激素水平均无显著差异(P>0.05),颗粒细胞凋亡率、外周血及卵泡液中孕激素水平差异显著(P<0.05)。相关性分析发现,颗粒细胞凋亡率随孕激素含量升高而升高,但无显著差异(P>0.05)。联合检测阳性组妊娠率为75.8%。结论:颗粒细胞凋亡率、外周血及卵泡液孕激素水平与IVF-ET结局有关。联合检测能较好提高对妊娠结局的预测。     

PCOS患者卵巢胰岛素抵抗的发生机理探讨

目的:探讨胰岛素抵抗/高胰岛素血症在PCOS生殖功能障碍中的作用。方法:收集行IVF-ET治疗的11例PCOS患者(PCOS组)和15例排卵正常的输卵管性不孕患者(对照组)促排卵后卵巢黄素化颗粒细胞,行体外培养,分别用不同浓度胰岛素处理细胞48h,采用RT-PCR和Westernblot检测黄素化颗粒细胞胰岛素受体底物(IRS)-1和IRS-2mRNA及蛋白的表达。采用放射免疫法检测血清性激素及空腹血清胰岛素(FIN)水平;采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FPG)水平;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:①PCOS患者血清LH、LH/FSH、T、FIN及HOMA-IR均明显高于对照组(P<0.05);②0mU/ml胰岛素时,PCOS组黄素化颗粒细胞IRS-1mRNA及蛋白的表达水平明显高于对照组(P<0.05),而IRS-2mRNA及蛋白的表达水平较对照组明显降低(P<0.05);③10mU/ml胰岛素对二组患者黄素化颗粒细胞IRS-1和IRS-2mRNA及蛋白的表达均无影响(P>0.05);④100mU/ml或1000mU/ml胰岛素作用后,二组患者IRS-1mRNA及蛋白的表达水平均明显增高(P<0.05),而IRS-2mRNA及蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:PCOS患者胰岛素抵抗/高胰岛素血症通过提高卵巢颗粒细胞IRS-1的表达,降低IRS-2的表达参与患者卵巢生殖功能障碍的发生。     

TRAIL及其受体DR4、DCR1在多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育中的作用

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)及其受体——死亡受体4(death receptor 4,DR4)、诱骗受体1(decoy receptor 1,DcR1)在PCOS大鼠卵泡发育中的作用。方法:采用硫酸普拉睾酮钠诱导大鼠PCOS模型,免疫组织化学染色、RT-PCR分析观察TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞的表达情况。结果:①免疫组织化学结果显示,TRAIL蛋白在PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞的表达较对照组明显增强(P<0.05),在窦前卵泡颗粒细胞的表达两组无显著性差异(P>0.05)。DR4蛋白在两组大鼠窦前卵泡和窦状卵泡的表达无显著性差异(P>0.05)。DcR1蛋白在PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞的表达较对照组明显减弱(P<0.01),在窦前卵泡颗粒细胞的表达两组无显著性差异(P>0.05)。②RT-PCR分析显示,PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞TRAIL mRNA的表达较对照组明显增强(P>0.01),DR4mRNA的表达两组无显著性差异(P>0.05),DcR1 mRNA的表达较对照组明显减弱(P<0.01)。结论:TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS大鼠卵泡发育颗粒细胞凋亡中发挥了调控作用。TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS颗粒细胞的表达异常可能是导致PCOS卵泡发育障碍的机制之一。     

卵巢黄素化颗粒细胞瘦素信号转导分子STAT3磷酸化在多囊卵巢综合征发病中的作用

目的:探讨瘦素在多囊卵巢综合征(PCOS)发病中的作用。方法:选择行IVF-ET治疗的30例PCOS患者根据体重指数(BMI)分为肥胖者(BMI≥24)15例和非肥胖者(BMI<24)15例,及同期排卵功能正常或单纯输卵管因素不孕的非PCOS肥胖者和非肥胖者各15例,采用ELISA检测各组血清瘦素水平;采用放射免疫法检测各组空腹血清胰岛素(FIN)水平;采用葡萄糖氧化酶法测定各组空腹血糖(FPG)水平,利用稳态模型(HOMA)计算胰岛素抵抗指数(即HOMA-IR);采用Western blotting检测卵巢黄素化颗粒细胞信号转导分子STAT3磷酸化水平;同法检测不同浓度的瘦素(0ng/ml、10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)体外对正常人卵巢黄素化颗粒细胞STAT3磷酸化(p-STAT3)的影响。结果:①血清瘦素水平PCOS肥胖者最高,其后依次为对照组肥胖者、PCOS非肥胖者和对照组非肥胖者,各组之间两两比较,差异均具有显著性(P<0.05);②PCOS患者血清瘦素水平与BMI和HOMA-IR均呈显著正相关(r=0.707,P<0.01;r=0.761,P<0.01);③STAT3水平肥胖PCOS组最高,其后依次为肥胖对照组、非肥胖PCOS组和正常对照组,各组间两两比较,差异均具有显著性(P<0.05);④正常人卵巢黄素化颗粒细胞经不同浓度瘦素处理48h后,p-STAT3水平呈不同程度增加,至瘦素浓度达到100ng/ml时,p-STAT3水平达到高峰,随后呈下降趋势。结论:瘦素可能通过激活JAK2/STAT3信号传导通路参与PCOS排卵障碍的发生。     

多囊卵巢综合征患者卵泡发育不良与干细胞因子表达水平的相关性研究

目的:研究辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡中干细胞因子(SCF)、生长分化因子-9(GDF-9)和骨形态发生蛋白-15(BMP-15)的表达水平与卵泡发育异常的关系。方法:收集30例PCOS患者和40例正常对照者的卵泡液和颗粒细胞。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测卵泡液中SCF、GDF-9和BMP-15的表达水平,采用免疫荧光染色法测定颗粒细胞中SCF的表达水平。结果:PCOS患者(n=30)卵泡液中GDF-9、BMP-15和SCF的浓度均明显低于正常对照组(n=40),差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,PCOS患者颗粒细胞中SCF的表达水平显著下降(P0.05)。结论:PCOS患者卵泡液中GDF-9、BMP-15和SCF的表达均明显降低,并且PCOS患者颗粒细胞中SCF的表达也显著下降,这可能与其卵泡发育不良有关。     

Differences in female and male perception of information and decision-making in single-embryo transfer in in vitro fertilization in Sweden

Purpose The aim of this study was to evaluate the information and the factors that contribute to the decision to accept and choose single embryo transfer (SET) in females and males. Materials and methods Fifty-four females and males undergoing SET were interviewed separately using a structured questionnaire. Results The women were significantly more satisfied with the information than the men (odds ratio 3.3), but the decision to accept SET was nevertheless more difficult for women (OR 3.1). Only one-third of both female and males were aware of the increased maternal risks with twin pregnancies. There was a tendency that the women who accepted SET had previous children, shorter duration of infertility, and were younger. Cryopreservation of embryos and a good pregnancy chance were important irrespective of gender. Conclusion The female needs more support to choose SET. The male needs better information and further involvement in decision-making. The females were more aware of the fetal risks, but the awareness of the increased maternal risks with twin pregnancies was low. The female need more support to accept and choose single embryo transfer, compared to the male and information should in some areas be directed differently to females and males.     

Abortion in France in 1977

This update of legal abortion in France begins with the history of abortion, the French abortion law, and application since its passage in 1975, and evaluates current acceptance by French physicians. In France, abortion was outlawed in 1923, with the highest numbers of convictions, 5521, in 1946. Increasingly since the late 1960s, the law was neither heeded nor enforced, resulting in a new liberalized law passed in 1975, and put into effect over the next 2 years. Some of the difficulties encountered in implementing legal abortion were: the decision to permit abortion only in approved hospitals, rather than to allow establishment of abortion clinics; resistance of many hospitals or individuals against performing abortions; fixed prices for physicians fees (160 F.) and quotas of 25% of the total surgical and obstetrical patient load; regional variations in availability of abortion; and waiting periods. These problems have led to continuation of black market abortions, fraud in reporting numbers of abortions performed, and have forced some women to travel to other regions of the country or to other countries to obtain safe abortions. Only the 1975 figures are available: there were 45,085 legal abortions, 32,923 in public hospitals and 12,792 in private hospitals. Abortions are easily obtained in large cities and the Southeast, Central and Breton regions but less so in the North and Southwest.