肉碱棕榈酰转移酶1A缺乏症患儿六例临床特征及基因突变分析

本文通过分析肉碱棕榈酰转移酶1A（CPT1A）缺乏症患儿的临床、生化资料及基因测序结果,以提高临床医师对该病的认识。2008至2019年上海交通大学医学院附属新华医院儿童内分泌遗传代谢科CPT1A缺乏症患儿6例,男5例,女1例,年龄1~8岁。2例由新生儿筛查发现,无临床症状,另4例均以“发热或呕吐、腹泻”为诱因,以“抽...     

5-羟色氨_(2A)受体对新生大鼠延髓脑片节律性呼吸放电的调制作用

目的探讨5-羟色氨2A(5-HT2A)受体对新生大鼠延髓脑片节律性呼吸放电的调制作用。方法制作新生大鼠离体延髓脑片标本,给予灌流恒温改良Kreb′s液,记录舌下神经根呼吸相关节律性放电活动(RRDA)。标本分2组:第1组使用含5-HT2A受体特异激动剂2,5-二甲氧基-4-碘苯基丙烷(DO I)的Kreb′s液灌流脑片,观察其对RRDA的影响;第2组使用含5-HT2A受体特异拮抗剂酮舍林的Kreb′s液灌流脑片,观察其对RRDA的影响。结果DO I延长RRDA吸气放电时程(TI)、缩短呼气时程(TE)、缩短呼吸周期(RC)、增强RRDA放电积分幅度(IA),对RRDA有兴奋作用(P<0.01)。酮舍林缩短RRDA的TI,延长TE和RC、减弱IA,对RRDA有抑制作用(P<0.01)。结论5-HT2A受体参与了新生大鼠基本呼吸节律的产生和调节。     

CPT1A基因外显子纯合缺失变异导致的肉碱棕榈酰转移酶1A缺乏症1例

肉碱棕榈酰转移酶1A(carnitine palmitoyltrans-ferase 1A,CPT1A)缺乏症(OMIM#255120)是一种长链脂肪酸氧化障碍的常染色体隐性遗传疾病,由CPT1A基因(OMIM#600528)变异导致.CPT1A是长链脂肪酸进入线粒体进行β氧化的限速酶.当CPT1A缺乏症患者长期禁食或...     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸对肌成纤维细胞分化的作用

目的矽肺是我国最严重的职业病之一。文中研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline,Ac-SDKP)对血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ诱导的细胞外信号调节激酶信号(extracelluler signal-regulated kinase,ERK1/2)信号和Jun氨基末端激酶信号(Jun N-terminal kinase,JNK)的调控,抑制人胚肺MRC-5成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化。观察AngⅡ是否经由ERK1/2和JNK信号诱导人胚肺MRC-5成纤维细胞向肌成纤维细胞分化以及Ac-SDKP对此过程的调节作用。方法实验分为5组:对照组(无血清培养基培养)、AngⅡ诱导组(采用100 nmol/L AngⅡ诱导MRC-5细胞)、SP600125干预组(予以JNK信号阻断剂SP600125预处理)、PD98059干预组(ERK1/2信号阻断剂PD98059预处理)和Ac-SDKP干预组(Ac-SDKP预处理)。MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及其上游转录因子血清反应因子(serum response factor,SRF)、p-ERK1/2和p-JNK的定位及表达;Western blot法检测Ⅰ型胶原、α-SMA、SRF和p-ERK1/2、p-JNK的表达水平。结果 AngⅡ诱导组A值(0.56±0.08)为对照组(0.27±0.05)的2.07倍;SP600125干预组、PD98059干预组和Ac-SDKP干预组A值分别为(0.39±0.02)、(0.40±0.03)、(0.36±0.05)与AngⅡ诱导组(0.56±0.08)比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);AngⅡ诱导组的Ⅰ型胶原、α-SMA、SRF蛋白水平明显上调,分别是对照组的4.50、3.50和3.00倍;AngⅡ诱导组能够上调p-JNK和p-ERK1/2的表达,分别是对照组的6.71和7.90倍;而Ac-SDKP干预组能够抑制p-JNK和p-ERK1/2的表达,分别是AngⅡ诱导组的29.79%和46.84%。结论Ac-SDKP能够通过对AngⅡ介导的ERK1/2信号、JNK信号的调节,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化。     

5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体及组胺/组胺受体与脑疾病

脑疾病的神经生物学基础研究,对于疾病防治和脑功能认识都有积极意义。脑疾病涉及面极广,其中,相关的神经调质及其受体近年来受到关注。例如,在脑缺血与外伤等损伤性病变中,脑内5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受体系统有明显变化;癫痫、痴呆等病变中,脑内组胺系统发挥重要的调节作用。深入研究这些变化特点,有助于认识脑疾病发生机制,并研制出新的治疗药物。     

肝性脑病患者血氨、血清色氨酸、5-羟色胺及5-羟吲哚乙酸的测定

血氨浓度、血清游离色氨酸浓度及游/总色氨酸比值在肝性脑病患者明显高于失代偿性肝硬化、原发性肝癌与亚急性重症肝炎(P<0.01)。在肝性脑病患者血清5-羟色胺浓度增高不显著,但血清5-羟吲哚乙酸浓度明显高于正常对照(P<0.01)。血清游离色氨酸浓度及游/总比值与肝性昏迷的分级呈密切正相关。血氨浓度与肝性昏迷分级无相关性。文章对氨代谢和色氨酸代谢紊乱在肝性脑病发生机理中的重要作用进行了讨论     

5-HT细胞移植对慢性不可预见性抑郁症大鼠多器官损伤的作用与可能性机制

目的探讨外源性5-HT神经细胞移植对慢性不可预见性应激大鼠多内脏器官损伤的作用。方法将40只雄性SD大鼠（购置第二军医大学实验动物中心）随机分为4组（10只／组）：正常对照组（I）、慢性应激组（Ⅱ）、慢性应激细胞移植组（Ⅲ）、慢性应激氟西汀治疗组（Ⅳ）。采用慢性不可预见性应激抑郁模型法造模后，将5-HT神经细胞1次性移植于Ⅲ组大鼠的蛛网膜下腔，Ⅳ组每天给药1次3周；经Open—field行为测试，解剖观察、取材、切片，HE和免疫组化法等染色，镜下观察。结果（1）与Ⅱ组相比，Ⅲ和Ⅳ组大鼠行为明显改善；（2）大体解剖显示：Ⅱ组大鼠肺出现灶状充血，30％出现肺脓肿现象；Ⅲ组大鼠肺病变明显减轻，未见肺脓肿发生；（3）HE和免疫组化染色：Ⅱ组大鼠出现胃腺萎缩，肺组织间炎症细胞增多；Ⅲ和Ⅳ组大鼠胃腺和食管黏膜上皮萎缩以及肺组织炎症反应减轻，5-HT免疫反应增强，阳性细胞数目增多，与Ⅱ组相比差异有显著性（P〈0．01）；Ⅲ组与Ⅰ、Ⅳ组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论5-HT神经细胞移植对慢性不可预见性抑郁症大鼠多器官损伤具有改善作用，其机制可能与移植细胞释放5-HT，调节了中枢至周围神经的胆碱能抗炎通路，并促进了周围器官的5-HT合成有关。     

色氨酰tRNA合成酶对淋巴瘤小鼠细胞增殖的影响

目的 ①探索非霍奇金淋巴瘤(NHL)动物模型建模方法;②探讨吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)及色氨酰tRNA合成酶(TTS)参与的色氨酸代谢紊乱与NHL细胞增殖及NHL免疫耐受的相关性.方法 将近交系BALB/c小鼠随机分为对照组(4只)、肿瘤组(8只)和治疗组(8只),以鼠源性NHL细胞株A20皮下注射(5×106个/只)建立NHL动物模型,瘤旁及瘤内注射IDO抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT),并采用免疫组化SP法和Western blot技术检测肿瘤组织和淋巴结中TTS的表达水平.结果 ①BALB/c小鼠皮下接种A20细胞建立淋巴瘤动物模型,成瘤率高,小鼠死亡率低,伴有明显的淋巴结和脾脏转移;②免疫组化示肿瘤组织及转移淋巴结TTS表达均升高(P＜0.05);③Western blot结果显示,与正常对照比较,肿瘤组及治疗组小鼠肿瘤组织TTS表达明显升高(P ＜0.001);与肿瘤组相比,治疗组TTS表达水平显著下降(P＜0.01),肿瘤转移淋巴结TTS表达无变化(P＞0.05).结论 IDO诱导的低色氨酸微环境中,TTS表达上调是肿瘤细胞对抗IDO诱导的色氨酸耗竭、维持自身代谢过程的重要机制之一.1-MT对色氨酸代谢活性及表达水平的调控有望成为辅助治疗恶性肿瘤的新方向.     

H_2O_2对SD大鼠海马AMPA受体棕榈酰化水平的影响

目的研究H_2O_2对SD大鼠海马-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体棕榈酰化水平的影响。方法用400 M H_2O_2孵育正常大鼠急性脑片后,分离海马组织;酰基生物素交换技术提取AMPA受体亚基GluA1、GluA2棕榈酰化蛋白;蛋白免疫印迹技术检测上述蛋白表达水平。结果与对照组相比,H_2O_2升高大鼠海马蛋白棕榈酰化总水平、Glu A1(P0.05)和Glu A2(P0.01)棕榈酰化水平。结论400 MH_2O_2可显著提高SD大鼠海马AMPA受体棕榈酰化水平。     

抗抑郁剂对慢性应激抑郁大鼠脑内5-HT 1A受体和5-HT2A受体的影响

目的以慢性不可预见性应激抑郁模型为基础,探讨三环类抗抑郁剂(TCAs)和5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)在5-羟色胺受体水平的药理学机理.方法将24只SD雄性大鼠随机分对照组、抑郁模型组、阿米替林治疗组、氟西汀治疗组.应用[ 3H]8-OH-DPAT、[ 3H]Ketanserin作为标记配基,采用放射性配体受体结合法,分别测定大鼠海马5-HT 1A受体、大脑皮层5-HT 2A受体的特异性结合.结果与正常对照组比较,抑郁大鼠海马 [ 3H]8-OH-DPAT 特异性结合明显下降(18.78±5.62 vs 26.12±5.52,P ＜ 0.05),抑郁大鼠大脑皮层[ 3H]Ketanserin特异性结合显著增加(86.28±4.24 vs 112.58±4.21,P ＜0.05).阿米替林治疗3周后,抑郁大鼠海马[ 3H]8-OH-DPAT特异性结合回升到正常水平,大脑皮层[ 3H]Ketanserin特异性结合下降至正常水平(P ＜0.05).氟西汀治疗3周后,抑郁大鼠海马[ 3H]8-OH-DPAT特异性结合(26.63±5.50)、大脑皮层[ 3H]Ketanserin特异性结合(83.16±2.54)与抑郁组比较差异无显著性(P >0.05).结论 1.阿米替林通过增强海马5-HT 1A受体功能、抑制大脑皮层5-HT 2A受体功能发挥抗抑郁作用.2.氟西汀可能不通过影响海马5-HT 1A受体和大脑皮层5-HT 2A受体功能发挥抗抑郁作用.     

清醒大鼠下丘脑后部5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸的释放及药物对其释放的影响

应用推-挽灌流法和高效液相电-化学检测技术，研究清醒大鼠下丘脑后部5-羟色胺（5-HT）和5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）的释放及药物对其释放的影响。结果表明：5-HT的基础释放量为4～15fmol／min，而5-HIAA为50～150fmol／min，高K~+（80、100mmol/L）可依剂量性增加5-HT的释放，对5-HIAA无明显影响，藜芦定（Veratridin，lμmol／L）也有类似的作用,而河豚毒素（Tetrodotoxin，5μmol／L）使其释放减少。     

辛基酚对5-羟色胺转运及受体通路的影响

目的 通过观察人肝7702细胞暴露于辛基酚(OP)后5-羟色胺(5-HT)转运体SERT、5-HT3b受体表达以及5-HT水平的变化,探讨OP对5-HT转运通路和受体结合通路的影响.方法 实验分5个组,分别为OP高(5.0μg/L)、中(1.0μg/L)、低(0.2μg/L)剂量组、盐酸氟西汀组和空白对照组,体外细胞培养48 h,采用ELISA试剂盒检测细胞上清液中5-HT含量的变化,运用实时荧光定量PCR法检测转运体SERT及5-HT3b受体的表达.结果 中、高剂量组细胞上清液中5-HT含量高于空白对照组(P＜0.05),细胞中5-HT3B受体的表达降低(P＜0.05);低、中、高剂量组细胞中SERT的表达均低于空白对照组(P＜0.05);与盐酸氟西汀组检测结果一致.结论 OP可引起5-HT再摄取障碍,同时减少5 HT.受体的表达,对机体5-HT代谢网络的转运通路及受体结合通路产生毒效应作用.     

束缚应激对血清胰岛素样生长因子-Ⅰ含量的影响

目的胰岛素样生长因子(IGFs)是一类与神经 内分泌 免疫系统有广泛联系的多肽物质 ,对机体组织细胞的生长发育、代谢和免疫功能有着重要作用。为了研究胰岛素样生长因子 Ⅰ(IGF Ⅰ)在应激引起的免疫抑制中的作用。方法应用放射免疫分析法(RIA)观察了应激小鼠血清IGF Ⅰ的含量变化。结果应激小鼠血清IGF Ⅰ的含量与正常对照组相比约减少了58 %(P<0 01) ,并且随着应激强度的增加而减少(P<0 05)。结论这一结果为进一步研究应激机制和IGF Ⅰ的免疫调节作用提供了一条新线索。     

酪氨酰肼对大鼠黄体细胞孕酮合成代谢的影响

作者采用放射免疫分析法，观察酪氨酸类似物酪氨酰肼对离体培养大鼠黄体细胞3β-羟-甾体脱氨酶（3β-HSD）活性的影响，同时还观察了酪氨酰肼在拮抗hCG诱导孕酮生成作用中对3β-HSD活性的影响。结果显示：（1）0．2mmol／L酪氨酰肼明显抑制大鼠黄体细胞3β-HSD活性。（2）底物浓度较低时，酪氨酰肼对3β-HSD活性具有显著增强作用，随着底物浓度的增加，它的作用渐弱且转为抑制。（3）酪氨酰肼可明显抑制hCG诱导的3β-HSD活性。     

1,25-二羟维生素D_3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D_3(1,25(OH)_2D_3)对棕榈酸(PMA)诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25(OH)_2D_3(10 nmol/L)和/或PMA(250μmol/L)处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25(OH)_2D_3和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹(Western-blot)法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1(p-AMPKα1)水平。结果 1,25(OH)_2D_3(10μmol/L))明显抑制PMA(250μmol/L)作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25(OH)_2D_3显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25(OH)_2D_3抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。     

丙氨酰-谷氨酰胺对重型颅脑损伤患者免疫功能影响的研究

目的:探讨丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)对重型颅脑损伤患者免疫功能的影响,为临床治疗提供理论依据.方法:选取重型颅脑损伤病例75例,随机分为两组.Ala-Gln组(n=36)为Ala-Gln干预治疗,入院抽血后每日静脉滴注Ala-Gln 0.40 g/(kg·d),连续使用15 d;常规组(n=39)不用Ala-Gln.两组均于入院第1天、第3天、第7天、第15天采血检测患者T细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8),免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)水平.结果:Ala-Gln组与常规组相比,CD3、CD4细胞比例,CD4/CD8比值及IgG、IgA明显升高,且改善时间更早.结论:肠外补充Ala-Gln有助于改善重型颅脑损伤患者免疫功能.     

天松Ⅰ号对绝望大鼠模型行为及脑组织血浆5-羟色胺、多巴胺的影响

目的：探讨天松Ⅰ号预防给药对绝望大鼠模型行为及脑组织血浆5－羟色胺（T－HT）、多巴胺（DA）的影响。方法：SD大鼠40只，随机分为正常对照组，模型对照组、百忧解对照组、天松Ⅰ号试验组，观察各组动物游泳不动时间，敞箱得分，蔗糖消耗量，体重变化等，并检测脑组织、血浆的5－HT、DA含量。结果：天松Ⅰ号试验组大鼠体重减轻量，游泳不动时间低于模型对照组；敞箱得分，蔗糖消耗量，延长戊巴比妥钠睡眠时间及脑组织和血浆的5－HT、DA含量均高于模型对照组（P＜0．05或P＜0．01）。结论：天松Ⅰ号可改善绝望大鼠模型的抑郁情绪，延长戊巴比妥钠睡眠时间，提高脑组织和血浆的5－HT、DA的含量。     

海马5-羟色胺受体4及let-7a在双重应激诱发大鼠抑郁中的作用

目的研究双重应激对大鼠行为及其海马内5-羟色胺受体4（HTR4）及microRNAlet-7a水平的影响,探索海马内HTR4及let-7a的基因表达异常是否参与双重应激诱发抑郁的过程,及let-7a是否参与海马内HTR4基因表达的调控。方法将新生sD雄性大鼠,按窝别随机分为双重应激组（DS组,n=6）和正常对照组（C组,n=6）。DS组大鼠于出生后即接受两周母爱剥夺应激处理,至10周龄时再接受3周慢性不可预知性应激处理,C组大鼠不接受任何实验性处理;待大鼠13周龄时,采用旷场试验、强迫游泳及糖水偏爱实验评定两组大鼠的抑郁水平,并采用实时定量RT-PCR法检测大鼠海马内let-7a水平,采用WesternBlot法检测大鼠海马内HTR4的蛋白水平。结果与c组相比,Ds组大鼠在旷场试验中的直立次数较少[分别为（19．00±5．73）次及（7．50±2．35）次]（P〈0．05）,DS组大鼠在强迫游泳实验中的静止漂浮时间较长[分别为（70．33±1．16）S及（110．17±1．72）s]（P〈0．05）,DS组大鼠在糖水偏爱实验中的糖水偏爱率较低[分别为0．80±0．73及0．52±0．26]（P〈0．05）,DS组大鼠海马内HTR4蛋白水平降低[分别为（1．44±0．38）及（0．46±0．29）]（P〈0．01）,let-7a水平较高[分别为（0．04±0．01）及（1．58±0．27）]（P〈0．01）;皮尔逊相关分析显示,大鼠糖水偏爱率与其海马内let-7a表达量呈负相关（r=-0．653,P〈0．05）,与其海马内HTR4蛋白表达量呈正相关（r=0．774,P〈0．01）,大鼠海马内let-7a与HTR4蛋白表达量呈负相关（r=-0．803,P〈0．01）。结论DS可诱发大鼠抑郁样表型,影响大鼠海马内HTR4及let-7a的基因表达;大鼠海马内HTR4及let-7a可能参与调节其快感体验能力;let-7a可能参与海马内HTR4基因表达的调控。     

去卵巢应激大鼠结肠组织5-羟色胺受体3表达及意义的探讨

目的: 研究不同卵巢激素水平对束缚应激刺激大鼠动物模型结肠组织5-羟色胺受体3(5-HT3R)的影响. 方法: 24只成年雌性SD大鼠,随机分为3组:假手术(Sham)组、去卵巢(OVX) 组、去卵巢加雌二醇(E2)和黄体酮(P)(OVX E2 P)组,每组8只. 4 wk后均予以束缚1 h应激刺激,观察大鼠排便和玻璃小球排出情况;并采用RT-PCR方法,检测3组大鼠结肠组织5-HT3R mRNA的表达. 结果: 去卵巢组较假手术组、去卵巢 雌二醇 黄体酮组大鼠排便量增加,玻璃小球排出时间缩短(P<0.01);去卵巢组与假手术组及去卵巢 雌二醇 黄体酮组比较,5-HT3R mRNA的表达明显增加(P<0.01);去卵巢 雌二醇 黄体酮组与假手术组比较,5-HT3R mRNA的表达减少(P<0.01). 结论: 卵巢激素在肠易激综合征(IBS)发病中对5-HT3R的调节方面有重要作用.     

活性炭对葡萄糖注射液中5-羟甲基呋喃甲醛的影响

探讨了活性炭的用量对葡萄糖注射液中5-羟甲基呋喃甲醛的影响。发现活性炭的用量与5-羟甲基呋喃甲醛的吸光度之间呈现负相关性.