低频超声辐射微泡造影剂对人乳腺癌细胞的生物学效应研究

目的观察微泡造影剂不同浓度、不同声学参数对体外培养人乳腺癌细胞的生物学效应。方法人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,受不同剂量,频率为300kHz的超声波辐照破坏微泡声学造影剂,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率。结果在微泡浓度为5%时,0.25W/cm2×10s与0.5W/cm2×5s组细胞存活率未见明显改变,而0.5W/cm2×10s、0.5W/cm2×20s、0.5W/cm2×40s、1.0W/cm2×10s、2.0W/cm2×10s各组与对照组比较,细胞存活率明显下降。辐照强度为0.5W/cm2、照射时间10s时,随着微泡浓度增加,超声对细胞的杀伤效应越强,与对照组相比,5%微泡浓度组P<0.05,其余各组P<0.01。结论超声破坏微泡声学造影剂对人乳腺癌细胞的杀伤程度与超声辐照时间、声强及微泡浓度有关。     

超声辐照联合造影微泡和盐酸阿霉素对不同卵巢癌细胞的凋亡效果评价

目的观察超声辐照联合造影微泡（SonoVue）和盐酸阿霉素（DOX）对不同卵巢癌细胞的凋亡效果,并比较同一超声波辐照剂量、超声微泡和DOX浓度杀伤两株卵巢癌细胞之间的差异。方法 MTT法检测DOX对卵巢癌A2780s细胞的毒性作用,并计算出24 h的50%抑制浓度（IC50）值。将A2780s和SKOV3两株卵巢癌细胞均分为对照组（C组）、单纯DOX组（D组）、超声＋DOX组（U＋D组）、超声＋微泡＋DOX组（U＋M＋D组）。用相同参数（超声辐照声强为0.5 W/cm2、照射时间为30 s、超声脉冲波频率为1.0 MHz）的超声波辐照,并加入相同剂量的DOX（终浓度为1.0μg/ml）及微泡（W/V为10%）,以MTT法检测两株卵巢癌细胞的各组细胞存活率;倒置显微镜观察两株卵巢癌细胞的形态学变化;并用Hoechst染色法观察A2780s卵巢癌细胞中各组细胞的凋亡情况。结果 DOX对卵巢癌A2780s细胞的IC50值约为1.0μg/ml。MTT检测发现,各处理组A2780s细胞的存活率分别为（58.2±2.5）%、（54.4±3.2）%、（52.4±1.0）%,SKOV3细胞的存活率分别为（71.4±5.9）%、（60.1±3.6）%、（58.0±4.6）%,各处理组A2780s与SKOV3细胞与各自对照组相比均有明显的增殖抑制（对照组细胞存活率均假设为100%）,但同一细胞株的各处理组间细胞存活率比较,差异无统计学意义;各处理组A2780s细胞存活率略低于对应组SKOV3细胞存活率,但差异无统计学意义;倒置显微镜观察发现各处理组A2780s与SKOV3卵巢癌细胞均出现形态学变化;Hoechst染色法进一步发现各处理组A2780s细胞核存在凋亡现象,凋亡的细胞核数量有如下趋势：对照组〈D组〈U＋D组〈U＋M＋D组,但差异无统计学意义。结论 DOX（终浓度为1.0μg/ml）体外能诱导卵巢癌细胞凋亡,但超声辐照（辐照声强为0.5 W/cm2、辐照时间为30 s、脉冲频率为1.0 MHz）与10%微泡（W/V）联合DOX并未导致该凋亡率显著增加,同时两株不同的卵巢癌     

低频超声联合微泡促进多发性大动脉炎血管平滑肌细胞凋亡的生物学效应

目的:探讨超声联合微泡技术影响多发性大动脉炎(Takayasu arteritis, TA)血管平滑肌细胞的变化,为该类疾病的预防和治疗提供依据。方法:通过手术获取TA增生进展期、炎症硬化期及经皮血管腔内成形术(percutaneous transluminal angioplasty, PTA)后再狭窄期血管平滑肌细胞进行体外培养,建立偶联抗体的靶向超声微泡剂,采用20 kHz低频超声辐照150 s后培育24 h进行研究观察。结果:通过超声微泡处理后3组细胞存活率有明显差异(P0.01);相较其他两组,PTA后再狭窄期血管平滑肌细胞反应更敏感(P0.05),其培养基活性氧(ROS)明显上升(P0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)活性明显降低(P0.01),细胞凋亡水平明显增加(P0.01)。结论:超声微泡联合处理可能对PTA后再狭窄期的治疗更有效果,超声微泡对TA血管平滑肌细胞具有明显的抑制与促凋亡的生物学效应。     

低频超声联合微泡造影剂诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡的实验研究

目的探讨低频超声联合微泡造影剂对人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡的影响。 方法将培养的人胆囊癌GBC-SD细胞分为4组,每组设5个复孔。其中空白对照组不进行任何处理;微泡组加200 μl的微泡造影剂混匀,使微泡浓度为20%,不进行超声辐照;低频超声组以超声辐照声强为0.45 W/cm²、超声脉冲波频率为1 MHz的低频超声连续波辐照,连续辐照30 s,不加造影剂;联合组加入200 μl的微泡造影剂,混匀后以1 MHz低频超声,连续波辐照30 s。各组以CCK-8法检测细胞增殖活性,并用流式细胞仪测定各组细胞的凋亡情况。 结果空白对照组、微泡组、低频超声组、联合组GBC-SD细胞增殖活性分别为0.9272±0.1173、1.0088±0.0628、0.2116±0.0101、0.1470±0.0029。联合组细胞增殖活性低于空白对照组、微泡组、低频超声组,差异均有统计学意义（t=14.846、30.637、13.661,P均<0.05）。各处理组间细胞凋亡率差异有统计学差异（F=2390.900,P<0.05）,联合组细胞凋亡率为0.682±0.022,显著高于空白对照组的0.073±0.005、微泡组的0.031±0.003、低频超声组的0.259±0.012,差异均有统计学意义（P均<0.05）。 结论低频超声联合微泡造影剂能降低体外培养的人胆囊癌GBC-SD细胞增殖活性,明显诱导人胆囊癌GBC-SD细胞凋亡。     

低频超声对大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的作用

目的观察低频超声波对体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞（VSMCs）凋亡的影响。方法42.6kHz超声辐照大鼠主动脉平滑肌细胞,台盼蓝染色分析辐照后即刻细胞存活率,流式细胞仪观察24小时后细胞凋亡。结果低频超声辐照可以诱导培养的VSMCs凋亡,该作用在50秒内随辐照时间的增加有增加的趋势。结论低频超声在无明显杀伤细胞的情况下可在短时间内诱导培养的VSMCs凋亡,提示低频超声是一种潜在的治疗PCI术后再狭窄的手段。     

拟水平均匀设计法优化超声联合微泡促人骨髓间充质干细胞分泌SDF-1的研究

目的 采用拟水平均匀实验设计，探讨超声联合微泡促人骨髓间充质干细胞分泌SDF-1的最优参数组合。方法 选定超声辐照强度、超声辐照时间、微泡浓度三个因素，又分别按超声辐照强度 0 (对照)、0.2、0.4、0.6、0.8 W/cm2，辐照时间 0 (对照)、20、30、40、60 s，微泡浓度 0 (对照)、102、104、106、108 N/ml，每因素五个水平设计均匀设计表，根据均匀设计表U15(155) 进行超声辐照，辐照后细胞继续培养24 h，然后检测细胞存活率及细胞培养上清液中的SDF-1浓度。以较高的SDF-1浓度和较低的细胞死亡率为目标，应用多元线性回归和逐步回归分析确定最佳参数配比，并对统计分析后的优化参数再进行实验验证。结果 综合考虑各因素间关系及回归分析结果后，确定超声联合微泡促人骨髓间充质干细胞分泌SDF-1的最优参数组合为辐照强度 0.6 W/cm2，辐照时间 30 s，微泡浓度 106/ml，验证实验显示在此条件下超声辐照后 SDF-1分泌量达 551.67±40.88 pg/ml，细胞存活率达 88.51±4.03%。结论 应用拟水平均匀设计可有效优化参数条件，使超声辐照后间充质干细胞的SDF-1分泌量和细胞存活率达到相对匹配的数值。     

超声联合微泡增加内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶和一氧化氮生成的体外实验

目的 评估诊断性超声联合微泡对内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及一氧化氮(nitric oxide,NO)生成的增强效应.方法 将正常培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分为空白对照组(A组)、纯微泡组(B组)、单纯超声组(C组)和超声联合微泡组(D组).其中,D组按条件不同又分为:辐照时间不同组(1 min、5 min、10 min)、机械指数不同组(0.09、0.4、1.0)、微泡浓度不同组(5×10~8/ml、2.5×10~8/ml、1.25×10~8/ml).干预后即刻和干预后24 h分别在光镜下观察细胞形态结构,RT-PCR测细胞eNOS相对表达量,NO试剂盒测培养液中NO水平,并用统计学方法对上述指标进行组间比较.结果 D组中eNOS及NO含量明显较其他三组高;当参数选择为机械指数1.0、微泡浓度2.5×10~8/ml、辐照时间10 min时,D组中eNOS和NO的增加程度最明显;并且干预后即刻和干预后24 h各组细胞及细胞膜形态结构在光镜下均无显著变化.结论 超声联合微泡辐照能增加内皮细胞中eNOS和NO生成;给予的超声及微泡条件不同,其增强效果也不同.     

超声联合微泡诱导血管平滑肌细胞凋亡的机制研究

目的 探讨低频超声联合脂质微泡诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的可能机制.方法 以低频连续波超声(频率1 MHz、声强0.3 W/cm2)联合脂质微泡(1 μl/ml)辐照VSMCs 120 s.分别用流式细胞仪Annexin V/PI染色、免疫细胞化学技术、荧光探针Fura-4/Am负载后激光共聚焦法检测细胞凋亡、凋亡相关蛋白表达和细胞内游离Ca2 浓度的变化情况.结果 与对照组和血小板衍生生长因子-BB刺激组(PDGF)比较,两组超声辐照联合微泡[(US MB)组和(PDGF US MB)组]的VSMCs凋亡率显著增加、Bax蛋白表达明显上调、而Bcl-2蛋白表达则显著减少(P<0.01);而且PDGF US MB组的细胞凋亡率明显高于US MB组,Bax蛋白表达上调和Bcl-2蛋白表达下调的程度较US MB组更为显著(P<0.01).各实验干预组VSMCs内Ca2 浓度均较对照组显著增高(P<0.01);PDGF US MB组和US MB组细胞内Ca2 浓度均明显低于PDGF组(P<0.01).结论 超声联合微泡诱导VSMCs凋亡的机制可能与细胞内游离Ca2 浓度增加、Bax蛋白表达增加和Bcl-2蛋白表达降低有关.     

低频超声联合微泡影响前列腺癌DU145细胞血管内皮细胞生长因子表达的实验研究

目的探讨低频超声联合微泡对前列腺癌DUl45细胞血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。方法体外培养前列腺癌DUl45细胞,细胞呈对数生长时分为4组进行实验：对照组（细胞悬液1ml）、单纯微泡组（800μl细胞悬液加入200μl微泡剂SonoVue）、单纯低频超声组（1ml细胞悬液以频率80kHz、声强0．45W／cm2超声辐照30S）、低频超声联合微泡组（800μl细胞悬液加入200μl微泡剂SonoVue后立即以频率80kHz、声强0．45W／cm2超声辐照30s）。MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡率,Western印迹法检测细胞VEGF蛋白的表达。采用单因素方差分析比较对照组、单纯微泡组、单纯低频超声组、低频超声联合微泡组细胞存活率、凋亡率、VEGF蛋白表达量差异,进一步组间两两比较采用SNK-q检验。结果对照组、单纯微泡组、单纯低频超声组、低频超声联合微泡组细胞存活率分别为100％、（96．50±12．49）％、（93．20±5.31）％、（81．30±9．32）％;凋亡率分别为（1．10±0．26）％、（1．78±0．63）％、（5．85±0．45）％、（9．36±0．90）％;VEGF蛋白表达量分别为0．81±0．05、0．79±0．06、0．58±0．04、0．38±0．05。单纯微泡组、单纯低频超声组细胞存活率与对照组比较差异均无统计学意义,低频超声联合微泡组细胞存活率较对照组降低,且差异有统计学意义（q=5．88,P〈0．05）。单纯微泡组细胞凋亡率、VEGF蛋白表达量与对照组比较差异均无统计学意义;单纯低频超声组、低频超声联合微泡组细胞凋亡率均高于对照组,VEGF蛋白表达量均低于对照组,且差异均有统计学意义（q=14．09、24．51、8．06、14．89,P均〈0．05）。低频超声联合微泡组细胞凋亡率高于而VEGF蛋白表达量低于单纯低频超声组,且差异亦均有统计学意义（q=10．42、6．83,P均〈0．05）。结论微泡能增强低频超声抑制前列腺癌DUl45细胞增殖及促进凋亡,其机制可能与其下调前列腺癌DUl45细胞VEGF表达有关。     

低频超声联合微泡辐照诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

低频超声(low-frequency ultrasound,LFUS)联合微泡(microbubbles,Mbs)辐照诱导肿瘤细胞凋亡是近年来超声医学研究的热点之一,其机制主要是微泡使低频超声空化效应明显增强,该效应从多个方面对肿瘤细胞产生影响而导致其凋亡[1]。本文对低频超声联合微泡辐照诱导肿瘤细胞凋亡的基础、机制和研究进展作一综述。一、肿瘤细胞凋亡凋亡是细胞最基本的生物学现象,在生物体的进化、     

Diosgenin modulates vascular smooth muscle cell function by regulating cell viability, migration, and calcium homeostasis

In this study, we compared the potencies of diosgenin, a plant-derived sapogenin structurally similar to estrogen and progesterone, on vascular smooth muscle functions ranging from contraction and migration to apoptosis. The effects of diosgenin on vascular smooth muscle cell viability and migration were measured using a primary mouse aortic smooth muscle cell culture. The effects of diosgenin on smooth muscle cell contraction and calcium signaling were investigated in the isolated mouse aorta using wire myography and confocal microscopy, respectively. Here, we report that in cultured cells diosgenin (≥ 25 μM) induces apoptosis as measured by the number of annexin V-positive cells and caspase-3 cleavage, while decreasing cell viability as indicated by protein kinase B/Akt phosphorylation. In addition, diosgenin blocks smooth muscle cell migration in a transwell Boyden chamber in response to serum treatment and response to injury in a cell culture system. Diosgenin (≥ 25 μM) also significantly blocks receptor-mediated calcium signals and smooth muscle contraction in the isolated aorta. There is no difference in the inhibitory effects of diosgenin on vascular smooth muscle contraction between the endothelium-intact and endothelium-denuded aortic segments, indicating that they are caused by altered smooth muscle activity. Our findings suggest that over the concentration range of 10 to 15 μM diosgenin may provide overall beneficial effects on diseased vascular smooth muscle cells by blocking migration and contraction without any significant cytopathic effects, implying a potential therapeutic value for diosgenin in vascular disorders.     

血液动力学因素对血管平滑肌细胞的作用与机制

血液动力学因素直接影响血管平滑肌细胞的形态、迁移、增殖和凋亡,也通过调节内皮细胞来控制血管平滑肌细胞的行为,进而影响血管壁的结构和功能。通过综述血液动力学对平滑肌细胞的作用及机制,认为今后重点在于采用多种体外实验模型,模拟多种力、复杂流动对血管平滑肌细胞的影响,研究力学因素作用下血管平滑肌细胞结构和功能改变的分子生物学机理。     

三氧化二砷诱导犬髂动脉平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的；研究三氧化二砷诱导犬髂动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth musclecell，VSMC）凋亡的作用。方法：采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后VSMC的变化。结果：VSMC细胞与三氧化二砷共孵育后出现细胞数目减少，脂肪颗粒增多；电镜等观察到核膜皱缩、核染色质凝结、边集等细胞凋亡现象，并且在一定的范围内此现象随药物浓度的增加而明显。结论：一定浓度的三氧化二砷能抑制VSMC细胞的生长，导致细胞变性，并诱导细胞凋亡。提示三氧化二砷作为涂层支架的药物可以抑制的平滑肌细胞生长，促进平滑肌细胞凋亡。     

MiRNA-146a对血管平滑肌细胞凋亡的抑制作用

目的观察miRNA-146a对血管平滑肌细胞凋亡的作用并研究其机制。方法原代培养大鼠血管平滑肌细胞，分成inhibitor组、control组和normal组，采用脂质体2000分别转染miRNA-146ainhibitors（50μM）、错义链（50μM）、PBS，realtimePCR测定转染后miRNA-146a水平，流式细胞仪检测转染后血管平滑肌细胞凋亡，western blot检测转染后Bax蛋白水平。结果转染48h后，inhibitor组血管平滑肌细胞的miRNA-146a水平明显低于normal和control组（P〈O．01），inhibitor组血管平滑肌细胞的凋亡显著高于normal、control组（P〈0．05），且Bax蛋白表达水平增加（P〈O．05）。结论miRNA-146a可以抑制血管平滑肌细胞的凋亡，其机制与抑制Bax表达相关。     

Apoptosis of human vascular smooth muscle cells derived from normal vessels and coronary atherosclerotic plaques.

We studied death of human vascular smooth muscle cells derived from coronary plaques and normal coronary arteries and aorta. Cells from normal arteries underwent death only upon removal of serum growth factors. In contrast, plaque-derived cells died even in high serum conditions, and death increased after serum withdrawal. Death was characteristically by apoptosis in both normal and plaque-derived cells, as determined by time-lapse videomicroscopy, electron microscopy, and DNA fragmentation patterns. IGF-1 and PDGF were identified as potent survival factors in serum, whereas EGF and basic fibroblast growth factor had little effect. Stable expression of bcl-2, a protooncogene that regulates apoptosis in other cell lines, protected smooth muscle cells from apoptosis, although there was no detectable difference in endogenous bcl-2 expression between cells from plaques or normal vessels. We conclude that apoptosis of human vascular smooth muscle cells is regulated by both specific gene products and local cytokines acting as survival factors. Apoptosis may therefore regulate cell mass in the normal arterial wall and the higher rates of apoptosis seen in plaque smooth muscle cells may ultimately contribute to plaque rupture and breakdown and thus to the clinical sequelae of atherosclerosis.     

成人外周血平滑肌祖细胞与成熟血管平滑肌细胞生物学特性的比较

背景:血管平滑肌细胞是构成血管壁组织结构及维持血管张力的主要细胞成分.研究表明从外周血获得的平滑肌祖细胞可分化为血管平滑肌细胞.目的:课题特点在于选择成人外周血来源的平滑肌祖细胞,并与成熟血管平滑肌细胞进行细胞形态、增殖潜能等方面异同点的比较.设计、时间及地点:以细胞为培养对象,观察性实验,于2008-10/2009-04在江西省分子医学重点实验室完成.材料:采取6名健康志愿者外周血20mL,6名下肢大隐静脉曲张患者大隐静脉.方法:分离成人外周血单个核细胞,用纤粘连蛋白、血小板衍生生长因子BB和EGM培养基诱导培养;同期用胶原酶消化大隐静脉获得平滑肌细胞,用高糖DMEM培养基培养.主要观察指标:观察细胞形态,用细胞免疫荧光法和反转录-聚合酶链反应法检测α-SMA和calponin1的表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖能力.结果:成人外周血中平滑肌祖细胞具有血管平滑肌细胞的生物学特性,表达α-SMA和calponin1,平滑肌祖细胞增殖能力明显强于血管平滑肌细胞的增殖能力.结论:成人外周血中单核细胞在血小板衍生生长因子BB的刺激下可以分化为平滑肌祖细胞,且平滑肌祖细胞较平滑肌细胞增殖旺盛,长时间培养不易老化,具有发展为一种理想的血管组织工程种子细胞来源的可能性.     

支架涂层材料对血管平滑肌的影响

[目的]探讨支架涂层材料对血管平滑肌的影响.[方法]以SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞为载体,采用MTT试验检测苯乙烯丁烯共聚物及多聚乳酸涂层材料对血管平滑肌细胞的增殖能力的影响,流式细胞仪检测细胞周期.[结果]随着培养天数增加,苯乙烯丁烯共聚物组和多聚乳酸组平滑肌细胞数量都呈递增趋势;相同时间内苯乙烯丁烯共聚物组和多聚乳酸组细胞数量显著低于对照组(P<0.05),但苯乙烯丁烯共聚物组与多聚乳酸组差异无显著性(P>0.05);与对照组相比,苯乙烯丁烯共聚物及多聚乳酸组细胞周期均有不同程度变化,主要表现为G0/G1期细胞数显著高于对照组,S期、G2/M期细胞数显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),苯乙烯丁烯共聚物组与多聚乳酸组比较差异无统计学意义(P>0.05).[结论]苯乙烯丁烯共聚物及多聚乳酸可能通过抑制细胞周期中的第1个调控点(G1→S限制点)抑制主动脉血管平滑肌细胞增殖,两种涂层材料之间无明显差异.     

有机阴离子转运蛋白1在人血管平滑肌细胞表达的意义

[目的]检测有机阴离子转运蛋白1(OAT1) mRNA和蛋白质在人血管平滑肌细胞的表达以及尿酸刺激对其表达的影响.[方法]分离培养人脐动脉血管平滑肌细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR方法扩增特异性OAT1 cDNA片断,制备探针,用Northern blot方法检测OAT1 mRNA的表达,提取细胞膜蛋白和总蛋白,用Western blot方法检测OAT1的蛋白表达;用800 μmol/L的尿酸刺激细胞,观察OAT1的表达变化.[结果]从人血管平滑肌细胞检测到OAT1 mRNA和蛋白的表达.尿酸可以明显增强OAT1的表达.[结论]人血管平滑肌细胞有明确的OAT1表达,OAT1可能部分介导了血管平滑肌细胞对尿酸的摄取过程.     

miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用及机制

目的探究miRNA-146a调控血管平滑肌细胞增殖、凋亡的作用及相关机制。方法取SDP级健康雄性SD大鼠作为实验对象,取血管平滑肌细胞(VSMC)消化离心后,转染50nmol/L miRNA-146a反义寡核苷酸、错义链和同等剂量磷酸盐缓冲液(PBS),进行对照比较。结果实验组细胞在转染后48h内VSMC的数目和吸光度值均低于其他两组,细胞凋亡率明显高于其他两组,核因子κBp65、PCNA的表达水平低于其他两组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论miRNA-146a可促进VSMC的增殖,抑制细胞凋亡的进行,这一作用机制与核因子κBp65、PCNA表达水平增高有关。     

Platelet-derived exosomes of septic individuals possess proapoptotic NAD(P)H oxidase activity: A novel vascular redox pathway

OBJECTIVE: Vascular dysfunction in sepsis may involve apoptosis of vascular cells through redox signaling mechanisms, which are still poorly investigated. Platelets have been shown to produce reactive oxygen species and to release microparticles, related to thrombotic and inflammatory processes. The present study was undertaken to investigate whether, in severe sepsis, platelet-derived microparticles could produce reactive oxygen species through a phagocyte-type nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase and if such particles may induce vascular cell apoptosis through a reactive oxygen species-dependent mechanism. DESIGN: Experimental study. SETTING: Molecular and cell biology laboratories related to tertiary hospitals. SUBJECTS: Microparticles obtained from septic patients and from healthy individuals were investigated concerning their biochemical properties and their effects on vascular endothelial and smooth muscle cells in culture. INTERVENTIONS: Microparticle surface antigens were studied by flow cytometry and the presence of NADPH oxidase subunits by Western blot analysis. Microparticle reactive oxygen species generation was investigated through superoxide dismutase-inhibitable cytochrome c reduction and 5 microM lucigenin chemiluminescence. The effects of microparticles on vascular cell apoptosis rates were analyzed by immunofluorescence microscopy based on annexin V-fluorescein 5(6)-isothiocyanate assay. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Flow cytometry analysis of microparticles obtained from septic patients and healthy individuals showed a surface antigenic pattern similar to exosomes and strongly suggestive of platelet origin. Those microparticles also displayed the p22 and gp91 subunits of phagocyte-simile NADPH oxidase and exhibited intrinsic reactive oxygen species production. Incubation of endothelial and vascular smooth muscle cells with microparticles enhanced apoptosis rates. Reactive oxygen species generation and apoptosis-inducing activity were markedly greater with exosomes from septic individuals than with exosomes from healthy subjects. These effects were diminished by the addition of superoxide dismutase or the NADPH oxidase inhibitors diphenylene iodonium and phenilarsine oxide. CONCLUSIONS: Platelet-derived exosome NADPH oxidase activity seems to contribute to vascular cell apoptosis and may represent a new vascular redox-signaling pathway involved in the pathophysiology of sepsis.