自体外周血干细胞移植联合干扰素治疗慢性粒细胞白血病

目的：观察自体外周血干细胞移植联合干扰素治疗慢性粒细胞白血病的疗效，评价所用外周血干细胞动员方案的效果、预处理方案的耐受性及移植后造血重建。方法：选择1999-08／2003-12在兰州大学第二医院血液科住院的慢性粒细胞白血病患者7例，年龄3l～57岁，中位年龄36岁，无心、肺、肝、肾等脏器功能损害。动员方案为环磷酰胺＋重组人粒细胞集落刺激因子＋地塞米松，预处理方案为环磷酰胺＋阿糖胞苷＋6-硫甙鸟嘌呤，用CS-3000plus血细胞分离机采集干细胞，-80℃低温冰箱冻存，并作单个核细胞计数及CD34^＋细胞测定，42℃水浴快速解冻，经静脉快速回输。移植后抗白血病治疗用干扰素300万U皮下注射，隔日1次。观察造血重建时间（中性粒细胞恢复至0．5&;#215;10^9L^-1，血小板恢复至20&;#215;10^9L^-1）；预处理后并发症（感染、出血性膀胱炎、肝静脉闭塞病、间质性肺炎等）；细胞遗传学反应及生存情况。 结果：7例患者全部进入结果分析。①7例患者均获造血重建，中性粒细胞恢复至0．5&;#215;10^9L^-1的时间为移植后第9-14天（中位数时间为第10天），血小板恢复至20&;#215;10^9L^-1的时间为移植后第8～15天（中位数时间为第10天）。（2）7例患者出现口腔黏膜溃疡4例，腹泻2例，谷丙转氨酶升高2例，感染发烧6例，无出血性膀胱炎、肝静脉闭塞病及间质性肺炎等严重并发症。无移植相关死亡。③4例获得了部分或完全细胞遗传学反应，4例生存时间大于5年。 结论：自体外周血干细胞移植造血重建快，移植并发症少，移植成功率高，α-干扰素用于自体外周血干细胞移植后，患者可产生一种类移植物抗宿主病反应，预防复发。自体外周血干细胞移植联合干扰素治疗慢性粒细胞白血病可延长患者生存期，对于无造血干细胞供者的患者，可争取在CR1期进行自体外周血干细胞移植。     

全合一静脉营养支持对干细胞移植患者造血功能重建的意义

目的观察全合一静脉营养支持治疗对外周血造血干细胞移植后患者骨髓造血恢复的影响。方法选择2002-12/2005-06厦门大学附属中山医院血液科收治的白血病患者20例。移植病种:急性白血病6例,慢性粒细胞白血病急变4例,慢性粒细胞白血病慢性期3例,霍奇金淋巴瘤5例,溶血性贫血(阵发性睡眠性血红蛋白尿)1例,骨髓增生异常综合征1例。移植种类:自体外周血造血干细胞移植5例;异基因外周血干细胞移植15例。移植后24h即给予静脉营养治疗,营养液组成为:200g/L的中长链脂肪乳剂250mL,乐凡命500～750mL、安达美10mL,水乐维他30mL,维他利匹特10mL,100g/L氯化钾40mL,普通胰岛素12U,100g/L葡萄糖液1000～1500mL。观察患者临床症状的改善、移植前后体质量变化、白蛋白变化、骨髓造血恢复时间。移植后造血恢复时间以不依赖输血和造血刺激因子治疗,白细胞>0.5×109L-1,血小板>20×109L-1为标准。结果20例患者均进入结果分析。①患者造血功能重建结果:移植后患者均获造血功能重建。白细胞最低为(0～0.2)×109L-1,中性粒细胞>0.5×109L-1的时间为9～15d,血小板>20×109L-1的时间为12～17d。②患者移植前后营养状况变化:移植前后体质量变化<2kg,总蛋白较移植前略有下降,但均在正常水平,肌酐移植前后无明显变化。造血恢复时间12～17d。③无明显不良反应发生。结论移植后合理的静脉营养支持治疗可促进造血功能恢复,减少移植并发症。     

异基因造血干细胞移植后造血和免疫功能重建及并发症的比较

目的：通过比较相关供体与无关供体骨髓移植及外周造血干细胞移植治疗恶性血液病过程中造血、免疫重建及移植物抗宿主病的发生，探讨不同来源供体对移植效果的影响。 方法：选择2001-06／2005-09在南方医科大学南方医院接受异基因造血干细胞移植的116例患者，其中71例接受相关供体造血干细胞移植，45例接受无关供体造血干细胞移植。预处理方案：55例应用以全身放射治疗＋环磷酰胺方案为基础、61例应用改良BuCY（羟基脲、马利兰、阿糖胞苷、环磷酰胺）方案为基础的预处理。流式细胞仪测定移植后1，3，6,9及12个月患者的T细胞重建。统计分析两组患者移植后移植物抗宿主病的发生率及严重程度、复发、患者无病生存及造血、免疫重建情况。 结果：①移植后造血重建：相关和无关供体骨髓移植后白细胞重建、血小板重建及相关和无关供体外周造血干细胞移植后血小板重建存在显著性差异[在相关和无关供体骨髓移植后白细胞〉1.0&;#215;10^9/L^-1的时间分别为移植后（13．25&;#177;2．34）和（16．28&;#177;3．01）d。在相关和无关供体外周造血干细胞移植分别为移植后（13．25&;#177;2．34）和（13．13&;#177;4．09）d；在相关和无关供体骨髓移植后血小板〉20&;#215;10^9L^-1的时间分别为移植后（14．58&;#177;6．42）和（20．21&;#177;7．29）d。在相关和无关供体外周造血干细胞移植分别为移植后（12．17&;#177;4．12）和（15．67&;#177;7．12）d，P值分别为0．004、0．025、0．017]。②移植后免疫重建：相关和无关供体骨髓移植患者移植后1个月CD3^＋％和CD4^＋CD3^＋％、移植后9个月CD45RA^＋CD4^＋％及移植后12个月CD45RA^＋CD8^＋％存在显著性差异俨值分别为0．014、0．027、0．001、0．003）；相关和无关供体外周造血干细胞移植患者移植后3个月CD45RO^＋ CD4^＋％有明显差异（P=0．030）。③移植物抗宿主病发生率：相关和无关供体骨髓移植患者Ⅱ～Ⅳ度急性移植物抗宿主病发生率差异有显著性（P=0．050）。相关和无关供体外周造血干细胞移植患者慢性移植物抗宿主病的发生率差异显著（P=0．040），相关和无关供体骨髓移植、相关和无关供体外周造血干细胞移植患者广泛性慢性移植物抗宿主病发生率差异均有显著性（P值分别为0．029、0．007）。④移植后生存情况：相关和无关供体骨髓移植、相关和无关供体外周造血干细胞移植患者的3年无病生存率、总生存率及移植物抗宿主病致死率差异均无显著性。 结论：尽管无关供体骨髓移植患者的急性移植物抗宿主病发生率较高，且无关供体骨髓及外周造血干细胞移植患者造血及免疫重建比相关供体骨髓及外周造血干细胞移植慢，但相关和无关供体骨髓移植、相关和无关供体外周造血干细胞移植患者的3年无病生存率、总生存率及移植物抗宿主病致死率均无显著性差异。无关供体造血干细胞移植治疗血液系统恶性肿瘤具有和相关供体造血干细胞移植一样的疗效。     

体外诱导骨髓间质干细胞分化为心肌样细胞及其低免疫源性实验

目的：通过体外诱导骨髓间质干细胞向心肌样细胞分化，验证其多能分化特性，检测分化后的细胞进行免疫源性。方法：①实验于2003-03／2004-09在华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科实验室完成。实验选用1月龄Wistar大鼠20只。②贴壁法体外培养骨髓间质干细胞，用化学物质5-氮杂胞苷诱导24h.免疫组化检测诱导后的细胞心肌特异性蛋白的表达，单向混合淋巴细胞反应检测诱导分化后的骨髓间质干细胞的免疫源性。③实验分组如下，对照组1：单独的反应细胞组；对照组2：刺激细胞＋反应细胞。实验组1：不同数量诱导分化后的骨髓间质干细胞1&;#215;10^7，1&;#215;10^8，1&;#215;10^9L^-1＋反应细胞；实验组2：不同数量诱导分化后的骨髓间质干细胞1&;#215;10^7，1&;#215;10^8，1&;#215;10^9L^-1＋刺激细胞＋反应细胞。以抑制率表示诱导分化后的骨髓间质干细胞的免疫调控活性。④多均数比较采用方差分析，进行方差齐检验后，均数间两两比较采用LSD法。两样本均数比较采用t检验。结果：20只大鼠均进入结果分析。①部分诱导后的细胞胞浆结蛋白，心肌特异性肌钙蛋白，连接蛋白—43免疫组化呈阳性反应。②实验组1（加入的骨髓间质干细胞为1&;#215;10^7，1&;#215;10^8，1&;#215;10^9L^-1时）同种异体淋巴细胞的每分钟脉冲值明显低于对照组1（4610．106&;#177;276．16，3704．55&;#177;159．50,2881．317&;#177;114．62，8232．333&;#177;351．71，P〈0．05），各剂量骨髓间质干细胞组间差异明显（P〈0．05）。③实验组2（加入的骨髓间质干细胞为1&;#215;10^7,1&;#215;10^8，1&;#215;10^9L^-1时）对混合淋巴细胞反应的抑制率明显高于对照组1（43．9％，55．1％，65．7％，1．65％，P〈0．05），各剂量骨髓间质干细胞组间差异明显（P〈0．05）。结论2骨髓间质干细胞具有向心肌样细胞分化的潜能，分化后的骨髓间质干细胞能呈剂量依赖性地抑制同种异体淋巴细胞增殖，可以抑制正在进行的混合淋巴细胞反应，具有低免疫源性，可用于同种异体移植。     

异基因造血干细胞移植治疗白血病9例

重庆医科大学附属第一医院血液内科2007-01/2008-04应用异基因造血干细胞移植治疗白血病患者9例,6例急性髓细胞性白血病,3例慢性髓系白血病;供者中6例为HLA完全相合的同胞,2例为HLA9/10相合的无关供者,1例为半相合供者;预处理采用经典的BU/CY方案或GIAC方案;移植物抗宿主病的预防采用环孢菌素A＋吗替麦考酚酯＋甲氨喋呤方案或环孢菌素A＋吗替麦考酚酯＋甲氨喋呤＋抗胸腺细胞球蛋白方案。结果全部患者均获得造血重建,中性粒细胞≥0.5&#215;10^9L^-1、血小板〉20&#215;10^9L^-1的中位时间分别是11,15d;无急性移植物抗宿主病发生,1例发生慢性移植物抗宿主病;随访3-16个月无病生存率为77.8%。死亡2例。     

减低预处理剂量异基因造血干细胞移植后的白血病复发

目的：减低预处理剂量异基因造血干细胞移植预处理方案剂量强度弱于清髓性移植且又强于真正的非清髓移植，期望在降低毒副反应的同时能够减少复发。评价减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植后白血病的复发情况及主要影响因素。 方法：①对象：选取2003—03／2005—06厦门大学附属中山医院血液科收治的23例白血病患者，急性粒细胞白血病6例，急性淋巴细胞白血病7例，慢性粒细胞白血病10例。供者同胞HLA全相合10例，同胞或亲缘供者不全相合12例，非血缘1例。供受者对治疗均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法：23例白血病患者均采用减低预处理剂量方案，马利兰4mg/（kg·d），2-3d；环磷酰胺50mg／（kg·d），2d。其中19例患者在上述方案的基础上加用氟达拉滨30mg／（m^2·d），3-5d；10例患者同时加用阿糖胞苷（1．0～2．0）g／（m^2·d），1～3d。供受者HLA位点不合时用兔抗胸腺细胞球蛋白（3．0～5．0）mg/（kg·d），3-5d。异基因造血干细胞移植前行供者外周血干细胞动员，4-5d后连续采集2次，23例白血病患者输入CD34^＋细胞中位数为4．02×10^6／kg。采用骁悉＋环孢素＋短程甲氨喋呤方案预防移植物抗宿主病。③实验评估：采用STR—PCR方法检测异基因造血干细胞植入证据。 结果：①造血功能重建检测：23例患者均顺利完成造血功能重建，无一例发生预处理相关死亡。经预处理后外周血白细胞最低值为（0．01～0．30）×10^9L^-1，血小板最低值为（5～20）×10^9L^-1；中性粒细胞恢复到0．5×10^9L^-1的中位时间为术后11d，血小板恢复到30×10^9L^-1的中位时间为术后12d。术后30d经STR—PCR检测22例患者为完全供者型，骨髓象均完全缓解，剩余1例复发患者未行STR—PCR检测。②移植物抗宿主病发生情况：23例患者中，9例（39．1     

粒细胞集落刺激因子在自体外周血干细胞移植治疗缺血性下肢血管病中的作用

目的：观察缺血性下肢血管病患者进行自体外周血干细胞移植时。应用粒细胞集落刺激因子后细胞成分的变化以及对自身身体状况的近期影响。 方法：选取2004-11／2005—04解放军第四六三医院内分泌科收治的126例接受粒细胞集落刺激因子动员的缺血性下肢血管病患者，全部接受皮下注射粒细胞集落刺激因子5-12μg（kg&;#183;d），连续4-5d。为防止血黏度增加引起心脑血管意外，在干细胞动员的同时应用低分子肝素钙5000u，皮下注射1次／d。连续4～5d。每天监测血细胞计数和凝血3项。同时采用流式细胞仪监测外周血中CD34^＋细胞数。观察并记录动员后及采集过程中、后出现的毒副反应。 结果：按意向处理分析。实验纳入126例缺血性下肢血管病患者。全部进入结果分析。①全部患者动员过程中外周血象的变化：粒细胞集落刺激因子动员前白细胞数量为（5．35&;#177;1．64）&;#215;10^9L^-1，动员第5天为（42．17&;#177;18．56）&;#215;10^9L^-1．第6天为（44．23&;#177;17．47）&;#215;10^9L^-1。动员后比动员前提高5～13倍（P〈0．01）；血红蛋白和血小板动员前后无明显变化。（爹全部患者动员后采集细胞悬液的情况：37例患者于动员第5天进行采集，单个核细胞数值和CD34^＋百分数分别为（432．68&;#177;89．36）&;#215;10^9L^-1和（0．87&;#177;0．38）％；其余89例均于第6天进行采集，单个核细胞数值和CD34^＋百分数分别为（463．71&;#177;58．33）&;#215;10^9L^-1和（0．90&;#177;0.35）％，两者基本相近（P〉0．05）。③性别、年龄和体质量对单个核细胞数值和CD34^＋细胞百分数的影响：男性患者采集的单个核细胞数值高于女性患者（P〈0．05）．而单位体质量的CD34^＋细胞数值男女基本相近；以年龄55岁为界，大于55岁和小于55岁的患者差异显著（P〈0．05）；高体质量患者采集的单个核细胞数值高于低体质量患者（P〈0．05），而单位体质量的CD34^＋细胞数值基本相似。④不良事件和副反应：主要的不良反应有骨痛、周身肌肉酸痛、乏力、头痛、失眠、食欲下降、恶心呕吐、低热。采集过程中可能出现口周、面部或四肢麻木，一般停药2～4d症状即可消失。 结论：缺血性下肢血管病患者进行自体外周血干细胞移植时。粒细胞集落刺激因子作为有效动员剂，可有效动员单个核细胞和CD34^＋细胞。绝大部分患者能够耐受．但廊任用一定剂量的抗凝剂预防不良反席的发毕．     

自体外周血干细胞移植治疗急性髓细胞白血病

目的探讨急性髓细胞白血病（acute myelogenous leukaemia,AML）患者第1次缓解期自体外周血干细胞移植（autologous peripheral blood stem cell transplantation,APBSCT）的可行性和临床效果。方法1例诊断时高白细胞且伴有t（8;21）,-Y异常的AML患者第1次完全缓解期（CR1）,实施预处理方案为BU／CY2的APBSCT治疗,采集干细胞前进行包括大剂量阿糖胞苷在内的强化治疗以利于体内净化。结果移植相关毒性低,造血重建速度快,＋12d血中性粒细胞绝对数（ANC）〉0．5×10^9／L,PLT〉20×10^9／L。患者已无事件存活32个月。结论年轻低中危非早幼粒白血病的AML患者CRl期大剂量阿糖胞苷强化治疗后进行APBSCT是合理的选择。     

造血干细胞移植中CD34^＋细胞最佳分选的应用效果评价

目的：探讨联合化疗加细胞因子动员自体外周血CD34^+细胞的采集及临床级磁性分选仪(CliniMACS)分选的最佳方法，评价分选后CD34^+细胞在造血干细胞移植中的应用效果。方法：2001-03／2002-01在南京市鼓楼医院血液科病房收治自身免疫性疾病患者9例。符合纳入标准患者9例，男3例，女6例。采用环磷酰胺[2～4g／(m^2&;#183;d)]+粒细胞集落刺激因子(G-CSF)[5～10μg／(kg&;#183;d)]作为动员剂，CS-3000Plus血细胞分离机采集外周血单个核样细胞，CliniMACS作CD34^+细胞分选，观察分选前后的细胞计数、纯度、细胞活力，流式细胞术进行细胞表型检测及粒巨细胞集落形成单位(CFU-GM)培养。计算CD34^+细胞的采集得率和分选回收率。观察CD34^+细胞移植后造血功能恢复的情况。结果：经环磷酰胺加G-CSF动员后，采集时机多以一次采集能够获得足够数量的CD34^+细胞(CliniMACS分选和冷冻保存的耗损计算在内)为原则，外周血白细胞总数&;gt;6&;#215;10^9+L^-1或CD34^+细胞&;gt;0．4％时开始采集，其中8例采集1次，1例采集2次。每例患者可获单个核样细胞(MNC)总数(0．924—5．360)&;#215;10^10，MNC(2．6～19．5)&;#215;10^8／k，CD34^+细胞(2．4～37．2)&;#215;10^6／kg，经CliniMACS系统分选后，CD34^+细胞回收率为51％～93％，平均回收率为87%，CUF-GM回收率为35%～62％。CD34^+细胞纯度为94．3％～98．4％，平均96．71％。CD3^+，CD19^+，CD56^+，CD14^+细胞去除2—4个对数级。经冰冻保存后的CD34^+细胞的回收率为78％～99％，CFU-GM回收率为82％～99％，实际回输CD34^+细胞为(2．0～8．3)&;#215;10^6／kg，移植后均获造血重建。结论：掌握最佳动员、采集及分选方法，CD34^+细胞可获较高产率，移植后造血功能恢复较快。     

骨髓间充质干细胞成纤维样集落的培养方法及多向分化潜能

目的：建立原代小鼠骨髓间充质干细胞成纤维样集落的培养方法，了解问充质干细胞的培养特性及其多向分化潜能。 方法：实验于2004-10／2005-10在郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所完成。①间充质干细胞的分离：选取SPF级2月龄昆明种小鼠30只，无菌条件下抽取双侧股骨、胫骨骨髓，制成骨髓单细胞悬液，计数有核细胞的密度。②血清浓度对成纤维样集落的影响：调整有核细胞密度为5&;#215;10^8L^-1，分别接种于体积分数为0．02，0．05，0．1，0．15，0．2，0、25的胎牛血清-DMEM培养基中，每种血清浓度各4孔，1mL／孔，24h后换液。随后每72h换液，连续观察2周。③有核细胞密度对成纤维样集落的影响：分别调整有核细胞至10^6L^-1，10^7L^-1，2．5&;#215;10^8L^-1，5&;#215;10^8L^-1，10^9L^-1，分别接种于12孔板中，每种密度4孔，24h后换液。随后每72h换液，连续观察2周，瑞氏吉姆萨染色后计数成纤维样集落的个数。④成骨与成脂肪诱导：调整有核细胞密度在5&;#215;10^8L^-1，接种于预包被鼠尾胶的12孔板中培养。24h换液，去除未贴壁的细胞，以后每48h换液1次，换液后加入成骨诱导液、成脂肪诱导液。观察各血清浓度下细胞生长情况，消化培养板中的成纤维样集落流式细胞仪检测CD34，CD133，CD90，CD105。VonKossa和油红O法染色鉴定间充质干细胞成骨与成脂肪诱导情况。 结果：①不同血清浓度对成纤维样集落形成的影响：胎牛血清-DMEM培养液体积分数为0．02，0．05时，细胞可保持成纤维样，但增殖较慢；体积分数为0．15，0．2，0．25时，细胞增殖较快，但细胞易分化；体积分数为0．1时，细胞可基本保持成纤维样，且增殖速度适中。②有核细胞不同接种密度对成纤维样集落形成的影响：有核细胞接种密度为10^6L^-1，10^7L^-1时，每孔成纤维样集落数为0～1个。接种密度高于10^9L^-1时，每孔成纤维样集落之间出现交叉或融合。接种密度分别为2．5&;#215;10^8L^-1，5&;#215;10^8L^-1，10^9L^-1时，10d左右可见典型的成纤维样集落。成纤维样集落个数与所接种有核细胞密度呈正相关。③成纤维样集落中的问充质干细胞表面标记流式检测结果：成纤维样集落中的问充质干细胞呈CD34^-，CD133^-．CD90^＋，CD105^＋，分别各占2．5％，3．1％，67％和78％。④间充质干细胞成骨与成脂肪诱导情况：成脂肪诱导2周后成纤维样集落中（80&;#177;7）％的间充质干细胞出现脂滴，成骨诱导2周后成纤维样集落出现矿物结节。分别以油红0和Von Kossa’s矿化结节特异性染色后，成脂肪诱导中成纤维样集落（85&;#177;6）％的细胞胞浆呈红色，成骨诱导中大多数的成纤维样集落中心位置出现钙结节。 结论：全骨髓接种合适密度的有核细胞可形成典型的成纤维样集落，且成纤维样集落具有成骨、成脂肪等多向分化潜能。     

人骨髓间充质干细胞的优化培养

目的：骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells MSCs)培养大多集中在动物，探讨人MSCs的优化培养方法，为组织工程临床应用奠定基础。方法：手术切取患者骨松质3mm&;#215;3mm&;#215;3mm，在含血清培养基内用剪刀将其剪为1mm&;#215;1mm&;#215;1mm大小，然后用注射器冲洗；抽取患者骨髓5mL。分别用贴壁法和密度梯度离心法原代培养。比较不同培养方法MSCs的生长情况。对各组传代细胞用化学药物进行成骨诱导培养，并检测成骨细胞表型。结果：手术切取患者骨松质和抽取患者骨髓均能培养出骨髓间充质干细胞，切取骨松质获取的细胞数量大，5mL骨髓培养细胞数平均可达2．43&;#215;10^8，3mm&;#215;3mm&;#215;3mm骨松质可以获取MSCs的平均细胞数可达9．57&;#215;10^8；全骨髓法细胞贴壁时间早两三天，密度梯度离心法细胞均一性好，利于纯化。结论：临床组织工程中可以根据情况和需要采用不同方法获取MSCs。     

APA-BCCs微胶囊移植对晚期癌症患者的镇痛效果评价

目的：评价海藻酸钠一聚赖氨酸一海藻酸钠(APA)微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(BCC)移植于患者蛛网膜下腔后的镇痛效果。方法：分4个剂量组：微胶囊0．5&;#215;10^7，1．0&;#215;10^7，1．25&;#215;10^7，1．5&;#215;10^7／(次&;#183;例)。采用腰椎穿刺术，将生理盐水稀释后的微胶囊注入20例中、重度癌痛患者L3-4。或L4-5蛛网膜下腔内。结果：移植后第1～5天开始起效，移植前疼痛强度(数字分级法)为7．8&;#177;1．5，移植后降至2．5&;#177;2．3(P&;lt;0．05)。镇痛总有效率在0．5&;#215;10^7，1．0&;#215;10^7，1．25&;#215;10^7，1．5&;#215;10^7／(次&;#183;例)剂量组分别为：66％，100％。80％，66％。镇痛持续中位时间24d，最长持续时间&;gt;120d。移植后患者生活质量评分较移植前升高10分(P&;gt;0．05)。结论：APA-BCCs微胶囊蛛网膜下腔移植治疗中、重度癌痛具有起效较快、长效镇痛的特点。     

脊髓内移植神经干细胞对臂丛神经根性撕脱伤后前角运动神经元生存和修复的影响

目的：观察臂丛根性撕脱伤后脊髓内移植神经干细胞的存活、分化、迁移情况以及对原有前角运动神经元的影响。方法：实验于2004-01／12在福建医科大学分子生物学中心以及福建省骨科研究所完成。将雄性SD大鼠60只随机分为3组，每组20只。①单纯组：将C5-7神经根经后路撕脱制作大鼠臂丛根性撕脱伤模型，不进行细胞移植。②对照组：模型制作后即刻移植灭活神经干细胞（5&;#215;10^8L^-1）4μL于C6脊髓前角。③实验组：模型制作后即刻把体外培养的5-溴尿嘧啶标记的神经干细胞（5&;#215;10^8L^-1）4μL移植于C6脊髓前角。各组于术后1，2，4．8，12周5个时间点取脊髓标本制备切片，每个时间点4只，分别计算损伤侧脊髓前角运动神经元的存活率。观察移植神经干细胞存活、迁移、分化情况采用免疫组织化学染色方法。结果：60只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠臂丛根性撕脱伤后不同时间前角运动神经元存活率：实验组2，4，8，12周时间点均高于对照组和单纯组[实验组：（79.3&;#177;2．9）％，（66.2&;#177;3.8）％，（57.0&;#177;5.4）％，（47．6&;#177;4.8）％；对照组：（69．4&;#177;3．1）％，（45．4&;#177;3．7）％，（33.4&;#177;6．5）％，（29．2&;#177;2.3）％；单纯组：（71.0&;#177;3．0）％，（45．9&;#177;29）％，（355&;#177;5.4）％，（27.9&;#177;1．9）％，t=3．8730-85009，P〈0.01]。（2）神经干细胞移植入脊髓后不仅能存活，迁移达一个脊髓节段，并可以进一步分化为神经元以及星型胶质细胞。结论：①臂丛神经根性撕脱伤后脊髓前角内可以提供神经干细胞分化成星型胶质细胞和神经元的适宜微环境，而随时间不同表现出不同的分化趋向。②移植神经干细胞大鼠前角运动神经元存活率增高，说明神经干细胞移植除能分化为神经元而发挥神经元替代作用外，对神经根撕脱引起脊髓运动神经元死亡也具有保护作用，能明显减少神经根撕脱后运动神经元的继发性变性死亡。     

天灸对肺癌小鼠骨髓有核细胞和外周白细胞的影响及其抗肿瘤作用

目的：观察天灸籍药物穴位敷贴及药物本身的治疗作用对顺铂化疗Lewis肺癌小鼠骨髓有核细胞的影响，以及肿瘤生长的抑制。 方法：实验于2005-02在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室进行。将40只C57BL／6J近交系小鼠随机分为4组：正常组、模型组、化疗组、天灸＋化疗组，各10只。正常组：不做肺癌移植肿瘤模型造模，不处理；模型组：只造模，不处理；化疗组：造模4d后，腹腔注射顺铂，0．2mL／只，含顺铂0．05mg，连用5d。天灸＋化疗组：在造模化疗的同时，贴天灸膏（药物组成为麝香、淫羊藿、三七、黄芪、辣椒，按1：20：20：20：40比例调配），8h／次，1次／d，共治疗11次。天灸治疗结束后次日，即第14d统一处死取材。观察天灸后各组小鼠净体质量变化、瘤质量、抑瘤率，以及天灸对化疗小鼠骨髓有核细胞、外周血白细胞的影响。 结果：40只小鼠均进入结果分析。①化疗组和天灸＋化疗组净体质量与模型组相比，明显降低，而天灸有减轻小鼠体质量下降的趋势[（21.57&;#177;0.56） g, （15.75&;#177;0.40） g,（15.03&;#177;0.63） g, t=8．35，6．78，P〈0．001]。②化疗组和天灸＋化疗组瘤质量与模型组相比，均明显降低，但天灸＋化疗组减轻的程度较大[ （2.35&;#177;0.27） g, （2.2&;#177;0.13） g, （3.44&;#177;0.28） g; t=3.56, 4.65, P 〈 0.01]；在抑瘤率方面，天灸＋化疗组亦比化疗组高（36．0％，31．7％）。③天灸＋化疗组外周白细胞数目与模型组相比明显上升[（8.32&;#177;0.55）&;#215;10^9 L^-1, （10.88&;#177;0.84）&;#215;10^9 L^-1; t=2.76, P 〈 0.05]，而化疗组外周白细胞数目较正常组明显下降[（7.38&;#177;0.56）&;#215;10^9 L^-1, （9.85&;#177;0.93）&;#215;10^9 L^-1, t=2.51, P 〈 0.05]，且天灸＋化疗组与化疗组之间有显著性差异（t=3．86，P〈0．01）。④化疗组骨髓有核细胞数目与模型组相比明显减少[（3.36&;#177;0.72）&;#215;10^6 L^-1, （1.77&;#177;0.33）&;#215;10^6 L^-1, t=2,96, P 〈 0.05]，而天灸＋化疗组的骨髓有核细胞数目，比化疗组明显升高[（3.37&;#177;0.48）&;#215;10^6 L^-1, t=2.43, P 〈 0.05]。 结论：天灸膏有增强化疗抗肿瘤的作用，减轻化疗的毒副作用。这种辅助治疗效果可能与显著提高化疗处理中肺癌模型小鼠骨髓有核细胞数目，以及提高化疗过程中肺癌小鼠血液白细胞数目有关。     

外周血造血细胞移植,仅仅是输血?

外周血造血细胞移植已报道了大约300例,几乎全部为白血病、淋巴瘤、骨髓瘤或实体瘤患者的自体移植,其中半数以上是1988年以来报道的。外周造血细胞移植确能加速造血恢复、重建持久的造血吗?它比自体骨髓移植输回瘤细胞的危险性小吗?造血干细胞可以从脐带血获得吗?造血恢复在给予大剂量骨髓毒性药物或全身照射之后,外周血造血细胞移植加速了造血恢复。最显著的作用是对粒系造血;粒细胞初次出现在外周血中及其达到0.5～1.0×10~9/L 所需时间均缩短。     

1例单倍体相合造血干细胞移植联合间充质干细胞输注治疗异染性脑白质营养不良的护理

目的探讨单倍体相合造血干细胞移植联合间充质干细胞输注治疗异染性脑白质营养不良的护理方法。方法对1例异质性脑白质营养不良患儿,根据临床表现针对性的进行治疗和护理。结果患儿移植过程顺利,造血重建迅速,＋13d中性粒细胞〉0．5×10^9／L及血小板〉20×10^9／L,＋30d植入证据检测证实为完全供者造血,1个月后神经系统症状逐渐恢复。结论通过医疗方案设计和精心的护理,单倍体相合造血干细胞移植联合间充质干细胞输注这种新型疗法可能是治疗异染性脑白质营养不良疾病患者的选择。     

琼玉膏干预实验肺癌小鼠骨髓抑制的效应

背景：骨髓抑制是应用抗肿瘤药物治疗的主要副反应。目的：观察传统中药方琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗导致的骨髓抑制的干预效应。设计：随机对照试验。单位：暨南大学医学院。材料：实验于2001—03／10在暨南大学医学院中心试验室完成。选用48只健康的6～8周龄C57／BL小鼠。方法：使用癌细胞接种的方法制造小鼠肺癌模型，造模后随机均分3组，每组16只。①对照组，接种后次日用生理盐水0．2mL灌胃，同时以5μL／g体质量腹腔注射生理盐水，1次／d。②化疗组，顺氨氯铂20mg，用生理盐水稀释成0．2g／L，以5μL／g体质量腹腔注射，1次／d；同时以生理盐水0．2mL灌胃，1次／d。③联合组，除按化疗组用顺氨氯铂外，同时用琼玉膏0．2mL灌胃，1次／d。于用药后21d，检测外周血红细胞、白细胞、血小板数及骨髓有核细胞计数。主要观察指标：各组小鼠外周血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及骨髓有核细胞计数。结果：对照组有3只，化疗组有4只，联合组有4只未成瘤，被排除。在实验过程中对照组、化疗组各有2只死亡，联合组也有1只死亡，进入结果分析数对照组为11只、化疗组为10只、联合组为11只。①联合组及对照组的外周血红细胞、白细胞及血小板皆明显高于化疗组[红细胞：（8．54&;#177;0．81），（8．65&;#177;0．77），（4．56&;#177;1．00）]&;#215;10^12L^-1；白细胞：[（9．04&;#177;0．60），（9．14&;#177;0．71），（3．31&;#177;0．96）]&;#215;10^9L^-1；血小板：[（949．09&;#177;111．31），（955．54&;#177;87．13），（399．30&;#177;131．36）1&;#215;10^9L^-1，P〈0．01]。②化疗组骨髓有核细胞数明显低于联合组与对照组[（5．30&;#177;1．12），（10．51&;#177;1．15），（14．36&;#177;1．02）]&;#215;10^6，P〈0．01）。而联合组与对照组相比，对照组又高于联合组（P〈0．05）。结论：琼玉膏能提高肺癌小鼠化疗后外周血红细胞、白细胞、血小板及骨髓有核细胞计数，改善化疗所致的骨髓抑制状况，但尚不能完全拮抗化疗的骨髓抑制。     

骨髓联合外周血单倍体相合造血干细胞移植治疗白血病

本研究探讨（G—CSF）动员骨髓加外周血联合进行单倍体相合造血干细胞移植（hiBM＋PBSCT）治疗白血病的可行性及疗效。125例白血病患者接受了单倍体相合未去T细胞的造血干细胞移植。所有供者应用G—CSF5μg/（kg·d）,皮下注射,连用7天。实验组（A组）29例患者在供者动员的第7、8天分别接受1次hiBMT＋PBSCT移植;对照组（B组）96例仅接受1次单倍体相合骨髓造血干细胞移植（hiBMT）。对两组患者应用相同的免疫抑制剂预防急性GVHD,观察临床的移植效果。结果表明：除hiBMT组有1例慢性髓系白血病合并骨髓纤维化患者移植失败外,其余全部患者移植后经检测证实为完全供者造血,hiBM＋PBSCT组和hiBMT组中性粒细胞数〉0．5×10^9／L的中位时间分别为15（10-23）天和19（11—26）天;血小板数〉20×10^9／L时间分别为18（9—33）天和23（13—35）天。hiBM＋PBSCT组和hiBMT组急性Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的累计发生率分别是31．03％和12．5％,二者差异有显著性意义（P〈0．05）,但急性Ⅲ-Ⅳ度aGVHD的发生率分别是13．79％和10．41％（P〉0．05）、aGVHD相关死亡率分别为3．45％和5．21％（P〉0．05）,差异均无显著性意义。骨髓联合外周血移植组和单纯骨髓移植组慢性GVHD的累计发生率分别是48．2％和35．4％（P〉0．05）,二者差异无显著性意义。广泛型慢性GVHD发生率两组分别为23．3％和15．6％（P〉0．05）,差异无显著性意义。骨髓联合外周血移植组和单纯骨髓移植组疾病复发率分别是6．8％（2／29）和18．7％（18／96）（P〈0．05）,二者差异有显著性意义。结论：G—CSF动员骨髓联合外周血单倍体相合造血干细胞移植后造血重建更快,急性Ⅲ-Ⅳ度GVHD发生率和死亡率无明显增加,高危白血病的复发率下降,可以有效安全应用于临床。     

化疗致Ⅳ度骨髓抑制1例的抢救与护理

骨髓抑制是化疗药物最常见的剂量限制性毒性，临床分为四度。其中最严重的是第Ⅳ度，指血常规检查显示白细胞低于1．0&;#215;10^9／L，粒细胞绝对计数低于0．5&;#215;10^9／L并继发感染，2004年7月，我院收治一名Ⅳ度骨髓抑制并发感觉性休克的患者，经积极抢救康复出院。现将护理体会报告如下。     

inv(9)血液病患者造血干细胞移植后骨髓造血恢复特征研究

目的探讨9号染色体倒位[inv(9)]患者在接受造血干细胞移植后中性粒细胞计数(ANC)和血小板计数(PLT)等骨髓造血恢复特征。方法选取2010年1月至2015年10月本院确诊的39 589例血液病患者作为研究对象,采用R显带技术、聚合酶链反应(PCR)技术和流式细胞仪检测技术进行染色体核型检查、融合基因检测和骨髓造血恢复相关指标检测。结果 inv(9)血液病患者检出PML-RARα、BCR-ABL1、AML-ETO、EVI1、CBFβ-MYH11、MLL-AF6、AML-AF4、SET-NUM214、SILTALI、IgH重排、TCR重排和BCL1-IgH等多种融合基因。inv(9)患者在接受造血干细胞移植后恢复情况:ANC在移植后12d恢复至大于0.5×10~9/L水平,PLT在移植后16d恢复至大于20×10~9/L水平。非inv(9)患者在接受造血干细胞移植后恢复情况:ANC在移植后12d恢复至大于0.5×10~9/L水平,PLT在移植后13d恢复至大于20×10~9/L水平。结论 inv(9)血液病患者和非inv(9)血液病患者造血干细胞移植后ANC恢复至大于0.5×10~9/L水平所需的时间几乎相等,而inv(9)血液病患者PLT恢复所需的时间比非inv(9)血液病患者所需时间稍长。