秦艽多糖通过调控STMN1表达影响肺癌细胞增殖、迁移及侵袭

摘要：目的:探讨秦艽多糖是否可通过调控微管不稳定性蛋白1（STMN1）表达而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法:体外培养肺癌细胞A549,随机分为对照组、秦艽多糖低、中、高浓度组(25,50,100μg·ml-1);采用甲基噻唑基四唑（MTT）与平板克隆形成实验检测细胞增殖能力; Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭; pcDNA 3.1-STMN1转染至A549细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测STMN1、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67（Ki67）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）的表达量。结果:与对照组比较,秦艽多糖中、高浓度组细胞活力、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及STMN1、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著降低（P<0.05）,E-cadherin蛋白水平显著升高（P<0.05）,且秦艽多糖各浓度组间的指标差异均有统计学意义（P<0.05）;与高浓度秦艽多糖+pcDNA 3.1组比较,高浓度秦艽多糖+pcDNA 3.1-STMN1组细胞活力、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及STMN1、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著升高（P<0.05）,E-cadherin蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:秦艽多糖可能通过下调STMN1的表达从而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。     

使君子醇提物下调TPT1-AS1抑制肝癌细胞增殖、侵袭迁移

摘要：目的:考察使君子醇提物是否通过下调长链非编码RNA（lnc RNA） TPT1-AS1来抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。方法:采用噻唑蓝（MTT）法检测使君子醇提物(10,50,100μg·ml-1)作用于肝癌HCC9204细胞的存活率,Transwell评估HCC9204细胞侵袭迁移,实时荧光定量PCR测定HCC9204细胞中TPT1-AS1表达,免疫印迹实验（Western blot）分析细胞核相关抗原Ki-67（Ki-67）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白的表达。在HCC9204细胞中转染TPT1-AS1小干扰RNA si-TPT1-AS1,或转染TPT1-AS1过表达质粒pc DNA-TPT1-AS1并使用100μg·ml-1使君子醇提物处理,评价其对细胞的增殖、侵袭和迁移的影响。结果:50和100μg·ml-1使君子醇提物显著减少HCC9204细胞的存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数、TPT1-AS1表达水平、Ki67、N-cadherin的蛋白表达水平,显著增加E-cadherin的蛋白表达水平（P<0.05）。敲减TPT1-AS1显著降低HCC9204细胞的存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin的蛋白表达水平,显著提高Ecadherin的蛋白表达水平（P<0.05）。TPT1-AS1过表达逆转了使君子醇提物抑制HCC9204细胞存活、侵袭、迁移、Ki67、N-cadherin蛋白表达的作用,并逆转了其促进HCC9204细胞E-cadherin蛋白表达的作用。结论:使君子醇提物通过下调TPT1-AS1的表达,抑制肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。     

罗哌卡因对食管鳞癌细胞FAK/ERK通路及细胞学行为的影响

摘要：目的:观察罗哌卡因对人食管鳞状癌细胞（KYSE150）增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养KYSE150细胞,随机分为对照组、罗哌卡因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(10,20,50μg·ml-1)。采用噻唑蓝（MTT）法检测罗哌卡因对KYSE150细胞的增殖抑制作用;划痕实验检测各组KYSE150细胞迁移能力变化情况; Transwell法检测各组KYSE150细胞的侵袭能力; Annexin V-FITC/PI双染法检测各组KYSE150细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹分析法检测黏着斑激酶（FAK）、磷酸化FAK（p-FAK）、信号调节激酶（ERK）、磷酸化ERK （p-ERK）蛋白表达情况。结果:与对照组相比,罗哌卡因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组KYSE150细胞存活率依次降低（P<0.05）,并呈剂量依赖性（P<0.05）;与对照组相比,罗哌卡因Ⅰ组KYSE150细胞愈合率、侵袭数量、凋亡率、p-FAK和p-ERK蛋白表达量差异均无统计学差异（P>0.05）;与对照组及罗哌卡因Ⅰ组相比,罗哌卡因Ⅱ、Ⅲ组KYSE150细胞愈合率、侵袭数量、p-FAK和p-ERK蛋白表达量依次降低（P<0.05）,KYSE150细胞凋亡率依次升高（P<0.05）;各组KYSE150细胞中FAK和ERK蛋白表达量差异无统计学意义（P>0.05）。结论:罗哌卡因可能通过下调p-FAK/pERK蛋白表达水平从而影响人食管鳞状癌细胞迁移、侵袭和凋亡行为。     

白花丹素调控LINC01615对喉鳞癌细胞生物学行为的影响

摘要：目的:探讨白花丹素是否通过调控长基因间非编码RNA 01615（LINC01615）进而影响喉鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法:采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法、集落形成实验、Transwell实验检测不同剂量(2,4,8μmol·L-1)白花丹素对喉鳞癌细胞FD-LSC-1存活、克隆形成以及迁移侵袭的影响;实时定量PCR（RT-qPCR）检测LINC01615表达。将FD-LSC-1细胞分为si-NC组、si-LINC01615组、高剂量(8μmol·L-1)药物+pcDNA组、高剂量(8μmol·L-1)药物+pcDNA-LINC01615组,采用上述方法检测细胞存活率、克隆形成以及迁移侵袭能力变化。结果:白花丹素中、高剂量白花丹素处理后FD-LSC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、LINC01615及N-cadherin蛋白表达均显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.05）。与si-NC组比较,si-LINC01615组FD-LSC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、LINC01615及N-cadherin蛋白表达显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.05）。与高剂量药物+pcDNA组比较,高剂量药物+pcDNA-LINC01615组FD-LSC-1细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、LINC01615及N-cadherin蛋白表达显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论:一定剂量的白花丹素通过下调LINC01615能够抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

芒柄花黄素通过circ0020123/miR-145对胰腺癌细胞增殖迁移侵袭的影响

摘要：目的:探讨芒柄花黄素对胰腺癌细胞的影响及分子机制。方法:将胰腺癌细胞SW1990分为对照组、芒柄花黄素低、中、高剂量组(10,30,100μmol·L-1)、si-circ0020123组、si-NC组、芒柄花黄素(100μmol·L-1)+pcDNA-circ0020123组、芒柄花黄素(100μmol·L-1)+pcDNA组;蛋白质印迹（Western blot）法检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测集落形成数;划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell检测侵袭细胞数;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测circ0020123和miR-145的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circ0020123和miR-145的靶向关系。结果:不同剂量芒柄花黄素处理后,胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制率、E-钙黏蛋白（E-cadherin）及miR-145表达水平升高,集落形成数和侵袭细胞数减少,细胞划痕愈合率、N-钙黏蛋白（N-cadherin）及circ0020123表达水平降低（P<0.05）。干扰circ0020123表达后,细胞增殖抑制率、E-cadherin及miR-145表达水平升高,集落形成数和侵袭细胞数减少,细胞划痕愈合率、N-cadherin及circ0020123表达水平降低（P<0.05）。circ0020123过表达可减弱芒柄花黄素对SW1990增殖迁移侵袭的抑制作用。circ0020123靶向调控miR-145。结论:芒柄花黄素通过调控circ0020123/miR-145抑制胰腺癌细胞的增殖与转移。     

钙黏附蛋白E、N在依维莫司抑制胃癌SGC7901细胞迁移中的作用

目的探讨钙黏蛋白E、N(E-,N-cadherin)在依维莫司(RAD001)抑制胃癌SGC7901细胞迁移中的作用机制,及其在判断胃癌患者预后方面的作用。方法用不同终浓度的RAD001干预胃癌SGC7901细胞,用Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力,用免疫细胞化学法检测E-,N-cadherin的表达,用Western Blot检测不同药物浓度E-,N-cadherin的变化。在进一步探讨西罗莫司靶蛋白(mTOR)下游对E-,N-cadherin的作用中,用Western Blot检测mTOR下游对E-,N-cadherin蛋白表达的效果。结果当药物浓度达到1.25 nmol·L^-1及以上时,细胞迁移能力随药物剂量的增加逐渐降低;浓度达到2.5 nmol·L^-1及以上时,细胞中E-cadherin的蛋白表达明显增加。4EBP1-siRNA组的E-cadherin蛋白表达水平下降为0.48±0.08,而N-cadherin蛋白表达水平上升达1.35±0.12,与其余3组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);p70S6K-siRNA转染组的E-,N-cadherin蛋白表达水平分别为0.64±0.06和1.08±0.96,与其余3组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05)。E-cadherin在胃癌患者中低表达,而N-cadherin在胃癌患者中高表达。E-cadherin的低表达和N-cadherin的高表达与胃癌的预后不良相关。结论 RAD001可能是通过抑制mTOR/重组人翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)/cadherin的通路而发挥作用,并且E-cadherin可以作为判断患者预后的潜在指标之一。     

槲皮素抑制TGF-β1诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生EMT的效果研究CSCD

目的旨在研究槲皮素抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生上皮-间质转化(EMT)的效果。方法将肝癌细胞分为对照组(10 ng/ml TGF-β1)、低剂量组(50 nmol/l槲皮素+10 ng/ml TGF-β1)、高剂量组(10 ng/ml TGF-β1+100 nmol/l槲皮素),分别处理6 h,光学显微镜观察肝癌细胞形态学变化。6、12和24 h后,观察肝癌细胞迁移及侵袭能力。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝癌细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA表达。Western blot法测定肝癌细胞E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白。结果经TGF-β1诱导后,肝癌细胞发生明显EMT。划痕实验结果显示,12和24 h时,高剂量组和低剂量组肝癌细胞迁移划痕空隙长度明显低于对照组(P<0.05)。侵袭实验中,与对照组比较,低和高剂量组每视野穿膜肝癌细胞数明显降低,且高剂量组穿膜高于低剂量组(P<0.05)。RT-PCR实验结果显示,对照组E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组和低剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组和低剂量组(P<0.01)。低剂量E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组(P<0.01)。Western blot实验结果显示,对照组E-cadherin蛋白表达明显低于高剂量组和低剂量组(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白明显高于高剂量组和低剂量组(P<0.01)。高剂量组E-cadherin蛋白表达明显高于低剂量组(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.01)。结论槲皮素通过增加E-cadherin蛋白表达表达,降低N-cadherin、Vimentin蛋白表达,使得TGF-β1诱导的肝癌细胞EMT得到明显抑制。     

miR-891a-5p通过CPEB1调控结肠癌细胞生物过程的机制研究

目的 探讨miR-891a-5p通过细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白1(CPEB1)调控结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的机制。方法 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）检测结肠癌组织、癌旁组织、人正常结肠上皮细胞和人结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达;将LOVO细胞分为A组（不做任何处理）、B组（转染anti-miRcon）、C组（转染anti-miR-891a-5p）、D组（共转染anti-miR-891a-5p和si-con）、E组（共转染anti-miR-891a-5p和siCPEB1）、F组（转染miR-con）、G组（转染miR-891a-5p）;CCK-8法检测细胞增殖率、Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹实验检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶-3酶原（Pro-caspase-3）、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）的蛋白表达;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检...     

罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

目的探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养骨肉瘤细胞 MG63,分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、 anti?miR?NC组、 anti?miR?199b?5p组、中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组和中剂量罗哌卡因 +miR?NC组。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、 P21、B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白蛋(Bax)表达水平,实时荧光定量逆转录 PCR(RT?qPCR)检测细胞中 miR?199b?5p表达水平。结果与对照组比较,低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组 MG63细胞增殖能力［(0.88±0.08)、(0.49±0.05)、(0.34±0.03)比(0.92±0.09)］、 Cyclin D1蛋白［(0.85±0.08)、(0.66±0.06)、(0.41±0.04)比(0.95±0.09)］表达降低(P＜0.05),而 P21［(0.18±0.02)、(0.37±0.04)、(0.71±0.07)比(0.14±0.01)］蛋白表达升高(P＜0.05)中剂量罗哌卡因组 Bcl?2蛋白［(0.20±0.02)比(0.76±0.07)］及 miR?199b?5p［(0.13±0.01)比(0.82±0.08)］的表达降低(P＜0.05),而,MG63细胞凋亡率［(23.51±2.42)%比(7.66±0.75)%］和 Bax蛋白［(0.89±0.09)比(0.28±0.03)］表达升高(P＜0.05)。与 anti?miR?NC组比较, anti?miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.64±0.06)比(0.98±0.09)］及 Cyclin D1蛋白［(0.40±0.04)比(0.95±0.09)］和 Bcl?2蛋白［(0.36±0.03)比(0.76±0.07)］的表达降低(P＜0.05),而 MG63细胞凋亡率［(19.56±1.58)%比(7.66±0.75)%］及 P21［(0.53±0.05)比(0.14±0.01)］和 Bax［(0.71±0.07)比(0.28±0.03)］的蛋白表达升高(P＜0.05)。与中剂量罗哌卡因 +miR?NC组比较,中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.58±0.06)比(0.36±0.03)］及 Cyclin D1蛋白［(0.71±0.07)比(0.40±0.04)］和 Bcl?2蛋白［(0.53±0.05)比(0.21±0.02)］的表达升高(P＜0.05),而 MG63细胞凋亡率［(12.68±1.23)%比(23.35±2.34)%］及 P21［(0.37±0.03)比(0.72±0.07)］和 Bax［(0.57±0.06)比(0.88±0.09)］的蛋白表达降低(P＜0.05)。结论罗哌卡因可能通过下调 miR?199b?5p降低了骨肉瘤细胞的增殖,并促进了其凋亡。     

槲皮素抑制TGF-β1诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生EMT的效果研究

目的旨在研究槲皮素抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导SMMC-7721人肝癌细胞发生上皮-间质转化(EMT)的效果。方法将肝癌细胞分为对照组(10 ng/ml TGF-β1)、低剂量组(50 nmol/l槲皮素+10 ng/ml TGF-β1)、高剂量组(10 ng/ml TGF-β1+100 nmol/l槲皮素),分别处理6 h,光学显微镜观察肝癌细胞形态学变化。6、12和24 h后,观察肝癌细胞迁移及侵袭能力。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝癌细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA表达。Western blot法测定肝癌细胞E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白。结果经TGF-β1诱导后,肝癌细胞发生明显EMT。划痕实验结果显示,12和24 h时,高剂量组和低剂量组肝癌细胞迁移划痕空隙长度明显低于对照组(P0.05)。侵袭实验中,与对照组比较,低和高剂量组每视野穿膜肝癌细胞数明显降低,且高剂量组穿膜高于低剂量组(P0.05)。RT-PCR实验结果显示,对照组E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组和低剂量组(P0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组和低剂量组(P0.01)。低剂量E-cadherin mRNA表达明显低于高剂量组(P0.01),N-cadherin和Vimentin mRNA表达明显高于高剂量组(P0.01)。Western blot实验结果显示,对照组E-cadherin蛋白表达明显低于高剂量组和低剂量组(P0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白明显高于高剂量组和低剂量组(P0.01)。高剂量组E-cadherin蛋白表达明显高于低剂量组(P0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显低于低剂量组(P0.01)。结论槲皮素通过增加E-cadherin蛋白表达表达,降低N-cadherin、Vimentin蛋白表达,使得TGF-β1诱导的肝癌细胞EMT得到明显抑制。     

干扰circ＿0007142抑制甲状腺癌细胞生物行为

摘要：目的:探索环状RNA（Circular RNA,circRNA）circ0007142对甲状腺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法:应用实时定量PCR（qRT-PCR）测定甲状腺癌组织中circ0007142和miR-874表达。按si-NC组、小干扰RNA（Small interference RNA,siRNA） circ0007142（si-circ0007142）组、miR-NC组、miR-874组、si-circ0007142+anti-miR-NC组、si-circ0007142+anti-miR-874组的分组在甲状腺癌TPC-1细胞中转染si-NC、si-circ0007142、miR-NC、miR-874 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-874。分别采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）、集落形成实验、划痕试验、流式细胞术和免疫印迹实验（Western blot）检测细胞活力、集落形成数、迁移、细胞凋亡、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）和神经型钙黏蛋白（N-cadherin）表达。荧光素酶活性实验分析circ0007142和miR-874靶向关系。结果:甲状腺癌组织中circ0007142表达量显著高于癌旁组织,miR-874表达量显著低于癌旁组织（P<0.05）。si-circ0007142组TPC-1细胞中miR-874表达量、凋亡率、E-cadherin蛋白表达量高于si-NC组,且si-circ0007142组细胞活力、集落形成数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量低于si-NC组（P<0.05或P<0.01）。miR-874组TPC-1细胞的活力、集落形成数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量均比miR-NC组低,凋亡率、E-cadherin蛋白表达量比miR-NC组高（P<0.05或P<0.01）。circ0007142可以靶向调控miR-874的表达。si-circ0007142+anti-miR-874组TPC-1细胞的miR-874表达量、凋亡率、E-cadherin蛋白表达量低于si-circ0007142+anti-miR-NC组,细胞活力、集落形成数、划痕愈合率、N-cadherin蛋白表达量高于si-circ0007142+anti-miR-NC组（P<0.05或P<0.01）。结论:干扰circ0007142通过靶向miR-874,抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移,以及促进凋亡。     

LINC00691负调控miR-512-5p对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 探讨LINC00691对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞恶性生物学行为的影响。方法 RT-qPCR检测30例NSCLC患者癌组织和对应癌旁组织中LINC00691和miR-512-5p的表达。双荧光素酶报告基因实验验证LINC00691和miR-512-5p的靶向关系。将A549细胞分为si-NC组、si-LINC00691组、miR-NC组、miR-512-5p组、si-LINC00691+anti-miR-NC组和si-LINC00691+anti-miR- 512-5p组,MTT和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术、Transwell检测细胞凋亡、迁移和侵袭,Western blotting检测细胞中Ki67、Cleaved-caspase3、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。结果 LINC00691在NSCLC癌组织中表达水平上升（P<0.05）,而miR-512-5p表达水平下降（P<0.05）。LINC00691在A549细胞中负调控miR-512-5p。沉默LINC00691表达或过表达miR-512-5p可降低A549细胞的存活率、克隆形成数、迁移和侵袭数以及Ki67、N-cadherin蛋白表达水平,提高其凋亡率,上调Cleaved-caspase3、E-cadherin蛋白表达水平（P<0.05）。沉默miR-512-5p表达逆转了沉默LINC00691表达对A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及凋亡促进作用。结论 沉默LINC00691可能通过靶向上调miR-512-5p表达来抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡。     

石见穿多糖通过调控DSCAM-AS1/miR-129-5p轴抑制oxLDL诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移和侵袭

摘要：目的:探讨石见穿多糖对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人主动脉血管平滑肌细胞（HASMCs）增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:体外培养HASMCs,不同剂量(0.25,0.5,1 g·L-1)的石见穿多糖干预oxLDL诱导的HASMCs、或oxLDL诱导转染DSCAM-AS1小干扰RNA的HASMCs、或1 g·L-1的石见穿多糖干预oxLDL诱导的转染DSCAM-AS1过表达载体的HASMCs后,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭,Western Blot检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR法检测DSCAM-AS1和miR-129-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证DSCAM-AS1和miR-129-5p调控关系。结果:石见穿多糖可降低oxLDL诱导的HASMCs的OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）,而促进E-cadherin蛋白表达（P<0.05）,且呈剂量依赖性。石见穿多糖可降低oxLDL诱导的HASMCs中DSCAM-AS1表达（P<0.05）,而促进miR-129-5p表达（P<0.05）,DSCAM-AS1靶向结合并负调控miR-129-5p表达。沉默DSCAM-AS1可降低oxLDL诱导的HASMCs的OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）,而促进E-cadherin蛋白表达（P<0.05）。过表达DSCAM-AS1逆转石见穿多糖对oxLDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:石见穿多糖可抑制oxLDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与调控DSCAM-AS1/miR-129-5p轴有关。     

KAIl／CD82、E-钙黏蛋白与β-连接蛋白在子宫内膜癌组织的表达及意义

目的 研究KAI1/CD82、E-钙黏蛋白（cadherin）与β-连接蛋白（catenin）在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义. 方法 采用免疫组织化学EnVision二步法检测76例子宫内膜癌、15例非典型增生子宫内膜、20例正常增生期子宫内膜组织中KAI1/CD82、E-cadherin和β-catenin的表达并加以分析. 结果 与非典型增生内膜及正常增生期子宫内膜比较,KAI1/CD82在子宫内膜癌的阳性表达降低（P＜0.01）,E-cadherin与β-catenin在子宫内膜癌的异常表达增高（均P＜0.01）.KAI1/CD82在子宫内膜癌的表达与组织学分级、肌层浸润程度呈负相关（P＜0.05）;E-cadherin在子宫内膜癌的表达与组织学分级及组织学类型有关（P＜0.01,P＜0.05）;β-catenin在子宫内膜癌的异常表达与组织学分级和手术-病理分期呈正相关（P＜0.01,P＜0.05）.KAI1/CD82与E-cadherin、β-catenin的表达有明显的相关性（P＜0.01,P＜0.05）. 结论 KAI1/CD82、E-cadherin和β-catenin表达改变与子宫内膜癌的进展有关;KAI1/CD82的表达下调与E-cadherin和β-catenin的异常表达增高有关.     

安罗替尼通过调控NF-κB信号通路对脑胶质瘤细胞恶性表型的影响

目的 探究安罗替尼通过调控核因子κB(NF-κB)信号通路对脑胶质瘤细胞恶性表型的影响。方法 体外培养人脑胶质瘤T98G细胞,以5-氟尿嘧啶为阳性对照药物,考察不同浓度（5、10、20μmol/L）安罗替尼对该细胞增殖、黏附、迁移、侵袭能力和上皮间质转化（EMT）相关蛋白[上皮钙黏着蛋白（E-cadherin）、神经钙黏着蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、纤维连接蛋白（FN）]表达的影响,并通过加入NF-κB信号通路抑制剂（BAY 11-7082）和激活剂（prostratin）来验证安罗替尼上述作用的可能机制。结果 5、10、20μmol/L的安罗替尼均可显著降低细胞的增殖活力（5μmol/L安罗替尼组除外）和迁移率,显著减少黏附细胞数和侵袭细胞数,显著上调E-cadherin蛋白的表达并下调N-cadherin、vimentin、FN蛋白的表达（P<0.05）,且20μmol/L安罗替尼的作用与阳性对照药物相当（P>0.05）;与10μmol/L安罗替尼比较,通路抑制剂可使细胞增殖、黏附、迁移、侵袭能力以及N-cadherin、vimentin...     

NGF/TrkA轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨神经生长因子（NGF）/原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 体外培养正常宫颈上皮细胞HUCEC和宫颈癌细胞SiHa,将SiHa细胞分为对照组（正常培养）、L-NGF组（50μg/L重组人NGF蛋白）、H-NGF组（100μg/L重组人NGF蛋白）、H-NGF+L-K252a组（100μg/L重组人NGF蛋白+50μg/L K252a）、H-NGF+H-K252a组（100μg/L重组人NGF蛋白+100μg/L K252a）。Western blot检测NGF、TrkA、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达;CCK-8法检测SiHa细胞增殖情况;流式细胞术检测SiHa细胞凋亡;划痕愈合实验测定细胞迁移;Transwell试验测定细胞侵袭。结果 SiHa细胞较HUCEC细胞NGF、TrkA水平升高（P<0.01）。与对照组相比,L-NGF组、H-NGF组NGF、TrkA水平,增殖活力,迁移率,侵袭细胞数量以及N-cadherin、Vimentin蛋白水平...     

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 2B反义 RNA1靶向微小 RNA-339-5p对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的探讨长链非编码 RNA细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 2B反义 RNA1(lncRNA CDKN2B-AS1)对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及分子机制。方法收集南阳市中心医院 2017年 1月 2019年 1月收治的 37例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织。将 MDA-MB-453细胞分为 CDKN2B-AS1阴性对照( si-NC组)、 CDKN2B-AS1小分子干扰 RNA(si-CDKN2B-AS1组)、 CDKN2B-AS1小分子干扰 RNA+miR-339-5p阴性对照( si-CDKN2B-AS1+anti-miR-NC组)以及 CDKN2B-AS1小分子干扰 RNA+ miR-339-5p特异性寡核苷酸抑制剂( si-CDKN2B-AS1+anti-miR-339-5p组)。采用 RT-qPCR法对 CDKN2B-AS1及微小 RNA-339-5p(miR-339-5p)表达水平进行检测;细胞周期及增殖活性检测分别采用流式细胞术及 MTT实验;采用 Transwell小室技术对细胞迁移和侵袭进行检测;采用 Western blotting法对增殖标记蛋白细胞增殖核抗原 -67(Ki67)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子 1A(P21)、上皮型钙黏蛋白( E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达进行检测;荧光素酶报告实验检测 CDKN2B-AS1对 miR-339-5p的靶向调控。结果在乳腺癌组织中 CDKN2B-AS1表达水平上调［( 2.23±0.08)比( 1.00±0.06)］(P<0.05)。抑制 CDKN2B-AS1可增加 G0期细胞比例［(43.29±3.76)%比( 30.25±3.01)%］、 P21表达水平升高, S期细胞比例［(21.91±3.10)%比( 34.19±3.32)%］、细胞存活率［( 53.02±5.38)%比( 100.00±7.12)%］、迁移、侵袭数以及 Ki67、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平降低( P<0.05)。 CDKN2B-AS1靶向调控 miR-339-5p,抑制 miR-339-5p逆转抑制 CDKN2B-AS1对 MDA-MB-453细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结论抑制 CDKN2B-AS可抑制乳腺癌 MDA-MB-453细胞增殖、迁移、侵袭,且靶向调控 miR-339-5p表达。关键词:乳腺肿瘤;细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 2B反义 RNA1;微小 RNA-339-5p(miR-339-5p);增殖;迁移;侵袭     

夏枯草水提液对甲状腺功能减退大鼠认知功能及PGC-1α/FNDC5/BDNF通路的影响

摘要：目的:探讨血府逐瘀胶囊对滋养层细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并分析可能的作用机制。方法:体外分离、培养、鉴定输卵管绒毛滋养细胞,分为空白对照组、血府逐瘀胶囊低、中、高(10,30,100μg·ml-1)剂量组、甲氨蝶呤组(0.08 ng·L-1)。采用MTT法检测细胞增殖能力;划痕实验、Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力;蛋白质印迹法检测侵袭、迁移相关蛋白基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、N-钙黏附蛋白（N-Cadherin）及Notch通路相关蛋白Notch1、Jagged1、Hey1表达情况。结果:与空白对照组同时间点比较,24和48 h时血府逐瘀胶囊低、中、高剂量组绒毛滋养细胞增殖抑制率均显著升高（P<0.05）;与同组不同时间点比较,随着培养时间的延长,血府逐瘀胶囊低、中、高剂量组绒毛滋养细胞增殖抑制率均显著升高（P<0.05）。与空白对照组比较,血府逐瘀胶囊低、中、高剂量组绒毛滋养细胞迁移率、侵袭细胞数、MMP-9、N-Cadherin、Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达均显著降低（P<0.05）,E-cadherin蛋白表达显著升高（P<0.05）,均呈剂量依赖性（P<0.05）。结论:血府逐瘀胶囊能抑制绒毛滋养细胞增殖、侵袭及迁移,进而治疗异位妊娠,机制可能与抑制Notch信号通路活化有关。     

虫草素通过调控miR-524-5p表达抑制口腔鳞癌HSC3细胞的增殖、迁移及侵袭

摘要：目的:探讨虫草素通过调控微小RNA-524-5p（miR-524-5p）表达对口腔鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法:体外培养口腔鳞癌细胞HSC3,分别使用不同浓度(10,20,40μmol·L-1)的虫草素处理;采用甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞增殖; Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-524-5p的表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白1（Cyclin D1）、p21、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）的表达量;分别将miR-524-5p mimics或anti-miR-524-5p转染至HSC3细胞后,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭。结果:与对照组比较,虫草素各浓度组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,迁移细胞数及侵袭细胞数显著减少（P<0.05）,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低（P<0.05）,p21、E-cadherin蛋白水平及miR-524-5p的表达水平显著升高（P<0.05）,且虫草素浓度组间的上述指标比较差异均有统计学意义（P<0.05）; miR-524-5p过表达可抑制HSC3细胞增殖、迁移及侵袭,而抑制miR-524-5p表达可减弱虫草素对HSC3细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:虫草素可能通过上调miR-524-5p的表达从而抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭。