2种光源对体外3T3细胞光毒性试验结果的比较

目的 比较2种光源对体外3T3细胞光毒性试验结果的影响。方法 参照化学品体外3T3中性红摄取光毒性试验指导原则（OECD 432）,采用模拟阳光光源和紫外光源对6种参考物质进行试验。结果 6种参考物质在2种光源照射后其光刺激因子和平均光效应均接近OECD 432中的参考值,各个物质在无光和有光下的IC₅₀值也相近。结论 2种光源对体外3T3细胞光毒性试验结果基本无影响。     

3T3体外替代试验的建立及在化妆品中的安全性评价

目的 通过建立3T3中性红成纤维细胞光毒替代试验，研究运用体外替代方法在化妆品安全性评价中替代动物试验检测化妆品光毒性的可行性。     

组分百日咳疫苗安全性检测体外替代方法的应用和初步评价

目的：用一种组分百日咳疫苗残留毒性的体外替代检测方法，更稳定和客观地评价疫苗成品的生产一致性。方法：验证直接定性法和间接定量法2种中华仓鼠卵巢细胞簇集试验方法，分别对6个国内外厂家的10种组分百日咳疫苗产品毒性进行定量和定性检测，并使用百日咳毒素参考品将体外法与小鼠组胺致敏试验进行桥接和初步评价。结果：体外定量试验的灵敏度为0.0026±0.0003 IU·mL^-1，几何变异系数为13%，体外定性试验的灵敏度为0.0067±0.0016 IU·mL^-1，几何变异系数为24%，组胺致敏试验的灵敏度为3.3 IU·mL^-1；所有样品的体外定性结果均为阴性，小鼠组胺致敏试验结果均合格，体外定量结果与小鼠组胺致敏结果具有良好的相关性（r=0.737，P＜0.05）。结论：本研究在国内首次使用 CHO细胞簇集试验方法检测百日咳疫苗成品，并进行了初步评价。该方法灵敏度高于小鼠组胺致敏试验，可应用于百日咳疫苗毒性及毒性逆转检测。该方法需要更广泛的推广应用和数据积累，以达到完全替代动物实验的目标。     

注射用头孢曲松钠溶血性、局部刺激性和过敏反应一致性评价

目的 采用溶血性、血管刺激性试验、肌肉刺激性试验和全身主动过敏试验（ASA）检测受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品（罗氏芬）局部毒性和过敏性,进行一致性评价。方法 分别采用肉眼观察法和分光光度法进行体外溶血性试验;以受试物或市售对照品临床iv最高浓度（93 mg·mL^-1）连续4 d耳缘静脉推注给药进行新西兰兔血管刺激性试验;以临床im最高浓度（238 mg·mL^-1,给药体积1 mL）连续4 d右后肢股四头肌im给药进行新西兰兔肌肉刺激性试验;采用传统豚鼠ASA进行过敏性试验,致敏剂量分别0.5、1.5 mg·kg^-1,激发剂量分别为1.0、3.0 mg·kg^-1。结果 肉眼观察法和分光光度法均显示受试物及市售对照品无体外溶血和红细胞凝聚作用;临床等效剂量的受试物及市售对照品均无血管刺激性;最大给药浓度的受试物及市售对照品在末次给药后72 h均有重度肌肉刺激性,恢复期结束时受试物组与市售对照品组动物注射部位肌肉均见纤维化等正常修复现象;受试物及市售对照品均可见弱阳性全身致敏作用,结果具有一致性。结论 受试物注射用头孢曲松钠与市售对照品局部毒性反应和过敏反应情况基本一致,可用于临床。     

化妆品中地塞米松检测能力验证研究

目的：设计组织化妆品中地塞米松测定能力验证项目,评价实验室检测化妆品中地塞米松的技术能力和水平,促进各参加实验室对该类测试项目检测能力的提高。方法：通过实施能力验证计划,获得各参加实验室化妆品中地塞米松含量的测定结果,对结果进行稳健统计分析,通过Z比分数评价实验室检测能力。结果：样品通过分析,在P<0.05显著水平,制备的300瓶样品均匀性符合要求且在整个计划周期内保持稳定,满足能力验证计划要求。40家参加能力验证的实验室中39家结果为满意结果,满意率为97.5%。结论：多数参加实验室检测能力评价为满意,表明化妆品中地塞米松检测水平总体良好。实验操作误差是造成个别实验室结果离群的主要原因。     

局部淋巴结试验与局部封闭斑贴试验应用于化妆品皮肤变态反应评价的比较

目的 通过局部淋巴结试验法和局部封闭斑贴试验应用于化妆品皮肤变态反应的比较，探讨局部淋巴结试验应用于化妆品成品的可行性。方法 采用局部淋巴结试验与体内局部封闭斑贴试验对标准的阳性物以及市面上的2种染发剂进行评价。结果 局部淋巴结试验表明，2种染发剂的SI值<1.8，均为阴性，判断结果与局部封闭斑贴试验结果一致。结论 局部淋巴结试验相对局部封闭斑贴试验具有检验周期短、测试简便、评价客观等优点，是一种较好的用于评价染发类态产品过敏反应的替代方法。     

鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验法用于评价化妆品眼刺激性的可行性研究

目的 研究鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验法（chorioallantoic membrane vascular assay,CAMVA）评价化妆品眼刺激性的可行性,并用改良后的方法对14种市售化妆品进行眼刺激性的评价。方法 通过控制样品的浓度、与鸡胚绒毛膜尿囊膜的接触时间,以及对评价体系的改良,尝试建立一套标准的CAMVA法评价化妆品眼刺激性的方法。结果 护肤类产品无刺激性,用后冲洗类、染发类产品的浓度、与鸡胚绒毛膜尿囊膜的接触时间均与刺激性大小成正比。在3%的浓度下,用后冲洗类产品的最佳接触时间为20 min,体内外试验结果一致性为90%（9/10）;染发类产品为5 min,体内外试验结果一致性为100%（2/2）。结合改良后的评价体系可做到刺激性分级,体内外试验结果一致性为用后冲洗类产品80%（8/10）,染发类产品50%（1/2）。结论 用CAMVA法可以对化妆品的眼刺激性进行评价,但实验条件和判定标准还需进一步优化。     

鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验用于评价化妆品配方眼刺激性质量标准的建立与评价

目的 建立鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验用于评价化妆品配方眼刺激性的标准。方法 通过对鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验原有判定方法的改进,建立针对化妆品配方眼刺激性评价的质量标准,以此对10种不同类型共20批次的化妆品配方进行眼刺激性评价,并将结果与家兔法相比较,验证质量标准的可行性。结果 20批次的化妆品配方鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验结果与家兔法相比一致率为85%（17/20）。结论 所建立的标准可用于化妆品配方眼刺激性评价。     

体外人源细胞激活试验法应用于4种染发剂的皮肤变态反应研究

目的 研究体外人源细胞激活试验h-CLAT法应用在染发剂的皮肤变态反应检测中的可行性,通过和现行化妆品标准中体内皮肤变态反应法的比较,评价体外人源细胞激活试验应用在染发剂皮肤变态反应试验上的优劣。方法 参考OECD指导原则442E的体外人源细胞系激活试验方法,应用流式细胞仪技术在类树突样的人源白血病细胞系THP-1上对4种染发剂进行体外皮肤变态反应检查,并与体内皮肤变态反应法的检测结果相比较。结果 体外h-CLAT试验表明,4种染发剂中#2,#3和#4染发剂的CD54RFI都 < 200且CD86RFI < 150,即体外试验结果为阴性与体内皮肤变态反应试验比较,结果一致;而#1染发剂为体外结果阳性,且有效致敏浓度为315 μg·mL^-1,与体内变态反应阴性结果不同。结论 与体内皮肤变态反应试验相比,体外人源细胞系激活试验在对染发剂的检验上有周期短、测试方法简便、评价结果客观等优点。缺点是无法反映整个过敏反应的过程,存在假阳性的可能。     

固相萃取-GC-MS/MS测定化妆品中多种苯甲酸酯类和对苯甲酸酯类防腐剂的含量

目的 建立同时测定3种不同基质类型(水剂、乳液类和膏霜类)化妆品中苯甲酸乙酯、苯甲酸异丙酯、苯甲酸丙酯、苯甲酸苯基酯、4-羟基苯甲酸甲酯、4-羟基苯甲酸乙酯、4-羟基苯甲酸丁酯和4-羟基苯甲酸丙酯等8种防腐剂的固相萃取-气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)方法。方法 化妆品样品经甲醇提取,采用HLB固相萃取柱净化后检测,经VF-1301MS毛细管柱分离,采用选择离子监测模式(SIM)进行分析,基质匹配标准曲线外标法定量。结果 8种化合物在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数均>0.995,检出限为0.079~3.15mg·kg^-1,定量限为0.26~10mg·kg^-1,平均回收率为90.9%~104.2%,RSD均<10%,应用该方法对样品进行了检验。结论 本法简单准确,灵敏度高,可用于市售化妆品中8种防腐剂的定量分析。     

3-二甲胺基-3-苯基丙醇的制备

苯甲醛和丙二酸经Knoevenagel缩合、NaBH4-I2体系还原得3-氨基-3-苯基丙醇，再经Eschweiler-Clark反应制得3-二甲胺基-3-苯基丙醇，总收率29％。     

蚯蚓蛋白对NIH3T3细胞的促进增殖作用研究

目的探讨蚯蚓蛋白(EFP)对NIH3T3细胞的促进增殖作用。方法 MTT法测定EFP对大鼠成纤维细胞(NIH3T3)的促进增殖作用;细胞划痕法测定EFP促进NIH3T3细胞划痕创面愈合作用;测定NIH3T3细胞培养液中胶原降解产物羟脯氨酸的含量。结果 EFP具有促进NIH3T3细胞的增殖作用,促进划痕创面愈合作用,增加了NIH3T3细胞培养液中羟脯氨酸的含量。结论 EFP具有促进NIH3T3细胞增殖和划痕创面愈合作用。     

^3H—天麻素和^3H—天麻甙元的制备

本文介绍了一种催化氚法制备^3H-天麻素和^3H-天麻甙元的方法，所得产物放射性比活度为510。6GBq(13.8Ci)/mmol。放化纯度大于95%。     

Synthesis and Activity of the Glutathione Analogue γ-(L-γ-Oxaglutamyl)-L-cysteinyl-glycine

An efficient synthesis of the backbone modified glutathione analogue γ-(L-γ-oxaglutamyl)-L-cysteinyl-glycine ( 7 ), characterized by the presence of an urethane O-CO-NH linkage replacing the γ-glutamylic CH₂CO-NH fragment is described. The new analogue has been fully characterized by ¹H- and ¹³C-NMR, and FAB-MS. Compound 7 was tested for inhibition of γ-glutamyl-transferase activity and was found to be a non-competitive inhibitor of hog kidney γ-glutamyltransferase (EC 2.3.2.2).     

PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响

目的研究PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素0.2、0.4、0.6 mg.d-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比),RT-PCR检测小鼠脾细胞Foxp3mRNA的表达,免疫组织化学SP法染色观察小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的变化,并利用计算机图像分析技术测量各实验组及对照组中p-mTOR蛋白表达的平均光密度。结果 Foxp3 mRNA在实验组(B、C、D)小鼠脾脏中表达的程度分别为(0.4853±0.0574、0.7886±0.1085、0.9639±0.2015),明显高于对照组A(0.1345±0.0271)(P<0.05);实验组(B、C、D)小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的平均光密度分别为(0.2326±0.0431、0.1156±0.0223、0.0556±0.0041),明显低于对照组A(0.4223±0.0534)(P<0.05);两指标经pearson相关分析,小鼠脾脏中Foxp3mRNA的表达与p-mTOR蛋白表达呈负相关。结论抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路会促使Foxp3的表达增强;PI3K-Akt-mTOR信号通路的激活程度与Foxp3的表达程度呈负相关。     

Cyanidin-3-rutinoside increases glucose uptake by activating the PI3K/Akt pathway in 3T3-L1 adipocytes

In this study, the effect of cyanidin-3-rutinoside (C3R) on glucose uptake by 3T3-L1 adipocytes was studied. C3R significantly increased glucose uptake, which was associated with enhanced plasma membrane glucose transporter type 4 (PM-GLUT4) expression in 3T3-L1 adipocytes. The potentiating effect of C3R on glucose uptake and PM-GLUT4 expression was related to enhanced phosphorylation of insulin receptor substrate 1 (IRS-1) and Akt, as well as augmented activation of phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) in the insulin signaling pathway. C3R induced glucose uptake was inhibited only by the PI3K inhibitor, but not by an AMPK inhibitor in 3T3-L1 adipocytes. Therefore, C3R likely up-regulates glucose uptake and PM-GLUT4 expression in 3T3-L1 adipocytes by activating the PI3K/Akt pathways.     

Synthesis and activity of the glutathione analogue γ-(L-γ-azaglutamyl)-L-cysteinyl-glycine

The backbone-modified glutathione analogue γ-(L-γ-azaglutamyl)-L-cysteinyl-glycine 7, characterized by the presence of a NHCONH urea linkage deriving from the replacement of the native Glu γ-CH₂ with the aza (NH) group, was synthesized and fully characterized by FAB-MS, ¹H- and ¹³C-NMR. Potential of 7 and its oxidized form 6 as γ-glutamyltransferase inhibitors was investigated. Both compounds 7 and 6 were found to be competitive inhibitors of hog kidney y-glutamyltransferase (EC 2.3.2.2.) by binding at the donor site: the reduced analogue is a more efficient inhibitor than glutathione of the γ-glutamyl transfer reaction. Inhibition at the acceptor site, which is also present, appears to be more complex. In particular, un-competitive inhibition is observed for compound 7. The results indicate that γ-azapeptides of type 7 may represent interesting targets in the search for stable inhibitors of γ-glutamyltransferases. © Munksgaard 1995.     

3-（3-羟基-1-甲基丙氧基）-1-丁醇和3-（3-羟基丁氧基）-1-丁醇的合成及其工艺改进

目的合成3-（3-羟基-1-甲基丙氧基）-1．丁醇（Ⅰ）和3-（3-羟基丁氧基）-1-丁醇（Ⅰ），并改进工艺提高产品纯度。方法以1，3-丁二醇为起始原料，通过硫酸催化双分子缩合、三苯甲基选择性保护、分离提纯、脱保护基4步反应得到目标化合物。结果与结论化合物Ⅰ的结构经。H．NMR13C-NMR谱确证，其含量经C-C测定，大于99．5％。化合物Ⅰ的纯度为90．0％，与文献相比纯度都有相应提高。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对Reh细胞增殖及RUNX3基因甲基化状态的影响

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对白血病细胞系Reh细胞增殖抑制作用及对RUNX3基因启动子区甲基化状态及表达的影响,探讨Reh细胞RUNX3基因的失活机制及EGCG对RUNX3基因表达的调控。方法:体外培养Reh细胞,用5、10、15和20μg/mL EGCG与Reh细胞孵育,采用MTT法检测EGCG对Reh细胞增殖活性的影响;采用流式细胞术检测EGCG对Reh细胞凋亡的影响;采用甲基化特异性PCR(MSP)检测RUNX3基因启动子区域的甲基化情况;采用RT-PCR、Western blot法分别检测RUNX3 mRNA、蛋白的表达。结果:EGCG对Reh细胞生长有明显的抑制作用,并有时间及剂量依赖性;EGCG可促进Reh细胞发生凋亡,随着EGCG浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;MSP法结果显示EGCG处理后RUNX3基因启动子高甲基化的区域发生去甲基化,EGCG能够诱导Reh细胞RUNX3基因mRNA和蛋白的重新表达,具剂量依赖性。结论:EGCG可明显抑制Reh细胞的增殖,并诱导Reh细胞中异常甲基化的RUNX3基因去甲基化,使RUNX3基因恢复表达,这可能是其抗肿瘤的重要机制。     

3-脱氧葡萄糖醛酮代谢酶研究进展

3-脱氧葡糖醛酮（3-Deoxyglucosone,3-DG）是一种高反应性的毒性2-羰基醛化合物,在3-DG还原酶作用下可脱毒生成3-脱氧果糖,在羰基醛脱氢酶作用下脱毒生成3-脱氧葡萄糖醛酸。3-DG代谢酶系统作为一种自身防御系统,可能通过调节3-DG而减少美拉德反应的进行和晚期糖基化终末产物（Advanced glycation end products,AGEs）过量生成,并使3-DG处于相对正常水平,这对防止老化病、糖尿病、尿毒症等方面均有积极意义。本文对3-DG代谢酶的来源、分布情况,酶的种类、部分酶学性质及其与临床疾病的关系等研究进展做简要综述。