DNA含量,AgNOR良数在食管癌研究中的应用

用自动化图像分析术及银染技术测定了５０例食管鳞状细胞癌的肿瘤细胞核ＤＮＡ含量及ＡｇＮＯＲ计数，结合临床资料，探讨二者与食管癌的临床病理、预后及相互关系。结果发现，肿瘤分化越差，ＤＮＡ含量和ＡｇＮＯＲ计数越高；淋巴结转移组ＡｇＮＯＲ计数明显高于无淋巴结转移组；肿瘤ＤＮＡ含量与ＡｇＮＯＲ计数越高；淋巴结转移组ＡｇＮＯＲ计数明显高于无淋巴结转移组；肿瘤ＤＮＡ含量与ＡｇＮＯＲ计数呈正相关。此项研究对揭示食     

胆囊粘膜增生、异型增生和癌细胞核的DNA、AgNOR含量测定研究

应用全自动图像分析仪对45例胆囊切除标本的粘膜增生、不典型增生、原位癌及浸润癌各类型进行DNA含量和AgNOR计数定量分析研究。结果表明:DNA含量和AgNOR数量随增生-不典型增生-原位癌-浸润癌的程度变化而增多。二者呈明显相关,随其增生程度增加,二倍体细胞减少直至消失。非整倍体细胞增多是判断增生程度和癌前病变及癌的一种标志。腺瘤样增生与不典型增生Ⅰ级、不典型增生Ⅱ与Ⅲ级DNA含量和倍体变化以及AgNOR计数无明显差异反映了它们之间可能重叠或相近关系。     

肿瘤分化程度对食管癌的预后影响

回顾性分析２１７ 例食管鳞状细胞癌的不同分化程度对放射治疗长期疗效及预后的影响。结果提示：食管鳞癌放射治疗的长期疗效及预后与肿瘤分化程度无明显相关关系，中分化鳞癌疗效好于高、低分化的食管鳞癌。     

肺癌细胞核DNA含量和形态参数图象分析

利用图象分析技术测定了80例4种类型肺癌细胞核DNA 含量和形态参数(核面积、核体积和核周长),并分别与支气管粘膜迈性炎症和正常小淋巴细胞核DNA 含量和形态参数作对比。研究结果表明,肺癌组与非肿瘤组之间DNA 含量和形态参数有明显差异.同样4种肺癌之间亦有一定的差异性,肺癌细胞核DNA 含量与核面积、核体积均呈负相关.     

雌激素受体、癌胚抗原和DNA含量与胃癌预后关系的研究

用ＡＢＣ免疫组化技术测定６５例胃癌标本的雌激素受体（ＥＲ）和癌胚抗原（ＣＥＡ），并对其中３６例标本进行ＤＮＡ图像分析，对影响预后的２７种因素进行Ｃｏｘ模型分析。结果：胃癌ＥＲ、ＣＥＡ阳性率与浸润深度、淋巴结转移呈正相关，与分化程度呈负相关，ＣＥＡ、ＥＲ阴性的胃癌预后优于ＣＥＡ、ＥＲ阳性的胃癌，ＥＲ阳性胃癌对化疗较敏感。二倍体胃癌预后优于异倍体胃癌，晚期、分化差胃癌细胞核ＤＮＡ含量高。影响胃癌预后的６种因子依次为：病理类型、病程、ＤＮＡ含量、化疗、淋巴结转移和ＥＲ含量。     

p15基因缺失分析在食管癌研究中的意义

目的：探讨p15基因在食管癌中的表达以及与食管癌临床病理及预后的关系。方法：应用酚：氯仿法提取46例食管癌患者的肿瘤及癌旁正常组织中高分子量的基因组DNA，并对p15基因外显子1和2进行PCR扩增，以1．5％琼脂糖凝胶电泳及溴化乙烷染色，分析PCR产物中p15基因的纯合性缺失。结果：正常食管粘膜组织中未见p15基因的纯合性缺失。食管癌肿瘤组织中，p15基因的纯合性缺失率为63．04％(29／46)，且与食管癌的临床病理分级及DNA含量有关。结论：p15基因的纯合性缺失在食管癌发生、发展中起重要作用，可作为肿瘤标志物判断食管癌患者的预后。     

食管癌、胃癌组织的低密度脂蛋白受体分析

以１２５Ⅰ－ＬＤＬ为配体对食管癌、胃癌及其相应的正常组织进行了ＬＤＬ受体水平的测定，同时分析了各组织中蛋白质、ＤＮＡ的含量，以探讨食管癌和胃癌发生与ＬＤＬ代谢之间的关系。结果显示，癌组织和正常组织的ＬＤＬ受体亲和性差异无显著性，但癌变组织的蛋白质、ＤＮＡ和ＬＤＬ受体水平均明显高于相应正常组织。癌细胞需要大量的胆固醇满足其有丝分裂，细胞通过受体升高机制使ＬＤＬＲ增多，以增加对ＬＤＬ的摄取和利用。     

大肠肿瘤组织印片和切片DNA及AgNOR蛋白定量的对比观察

用Ｆｅｕｌｇｅｎ－ＡｇＮＯＲ结合染色方法对大肠肿瘤组织印片和切片细胞的ＤＮＡ和ＡｇＮＯＲ蛋白进行染色，用图像分析进行同一细胞二者含量同步检测。结果表明，在ＤＮＡ和ＡｇＮＯＲ含量的检测中，印片样品比组织切片样品更能精确、真实地反映ＡｇＮＯＲ与ＤＮＡ含量在大肠癌发生过程中相关性变化。印片样品方法简单、出结果快，并能推广到脱落细胞和穿刺取材细胞的ＤＮＡ和ＡｇＮＯＲ含量的同步测定。     

人肝细胞癌及其癌前病变的DNA、AgNORs定量分析

用图象分析法对２０７例人正常肝、慢性肝炎、肝硬化、肝细胞不典型增生（ＬＣＤ）和肝细胞肝癌（ＨＣＣ）中的细胞ＤＮＡ指数（ＤＩ）、增殖指数（ＰＩ）、核面积（ＮＡ）、二倍体细胞比率（２ＣＲ）和超五倍体细胞百分比（５ＣＥＲ）等项参数进行定量测定；同时进行核仁组织区（ＡｇＮＯＲｓ）计数及其与ＤＮＡ含量相关关系研究。结果显示：人肝癌的发生符合肿瘤发生多阶段理论。癌前病变ＬＣＤ其各项指标均显著增加，其中异倍体ＬＣＤ各项指标与ＨＣＣ＋分接近。因而提出异倍体ＬＣＤ作为病变进入演进期的标志，为肝癌发生的终未阶段，也是癌变的关键。     

食管鳞癌肝细胞生长因子的表达及意义

目的：探讨肝细胞生长因子（HGF）在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌临床病理特征的关系.方法：应用免疫组织化学Max Vision法检测食管鳞癌及食管正常粘膜HGF的表达情况.结果：食管鳞癌组织、食管正常粘膜HGF的表达具有显著差异（P＜0.01）;并且,食管鳞癌组织HGF的表达与淋巴结转移及TNM分期有关（P＜0.05）.结论：HGF在食管鳞癌的发生发展及侵袭中起重要作用,对评估食管鳞癌预后具有重要意义.     

肝细胞肝癌的核仁组成区蛋白

本文对50例肝细胞肝癌和9例正常肝的核仁组成区蛋白嗜银染色(AgNOR)进行比较研究。每一例标本均计数100个细胞的AgNOR数目,结果看到分化差肝癌AgNOR数为8.24±2.44((?)±SD,下同)、最大直径0.78±0.18μm、面积0.41±0.18μm~2;分化中肝癌AgNOR数为6.51±1.45、最大直径1.63±0.37μm、面积1.90±0.18μm~2;分化好肝癌AgNOR数为5.74±1.52、最大直径2.46±0.51μm、面积4.33±1.70μm~2;正常肝AgNOR数为1.15±0.05、最大直径2.27±0.25μm、面积3.90±0.62μm~2。肝细胞肝癌与正常肝细胞之间,在AgNOR数目、最大直径与面积方面的差别均非常显著(P<0.001)。不同分化程度的肝癌之间,最大直径与面积的差别也非常显著(P<0.001)。     

P16和PTEN蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因p16、PTEN蛋白的表达与食管鳞癌的关系,为食管鳞癌预后判断提供依据。方法采用免疫组织化学法检测67例食管鳞癌标本中p16、PTEN蛋白的表达。结果p16蛋白阳性表达率为47.8%,PTEN蛋白阳性表达率为58.2%。p16、PTEN蛋白表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移情况显著相关,且p16与PTEN蛋白的表达具有正相关（r=0.782,P〈0.005）。结论p16、PTEN蛋白联合检测可提高对食管鳞癌预后预测的敏感性。     

食管鳞状细胞癌中SDF-1的表达及DC抗肿瘤活性的影响

的探讨食管鳞癌中基质细胞衍生因子-1的表达与树突状细胞密度的相互关系及它们与患者临床病理特征的关系。方法运用免疫组化和原位杂交方法检测49例食管鳞癌组织中基质细胞衍生因子-1蛋白和mRNA、S-100蛋白标记的树突状细胞的表达,根据染色面积和染色强弱判断它们表达的水平。结果（1）肿瘤细胞分化和浸润深度与基质细胞衍生因子-1的表达呈正相关（rs分别为0．498、0．313,P〈0．05）;而与S-100蛋白阳性树突状细胞的密度呈负相关（rs分别为-0．501、-0．466,P〈0．05）。（2）基质细胞衍生因子-1与树突状细胞密度间存在负相关性（FS=-0．619,P〈0．05）。结论（1）基质细胞衍生因子-1蛋白的表达与食管鳞癌的临床病理特征存在明显相关性。（2）食管鳞癌中基质细胞衍生因子-1的表达可影响鳞癌组织中树突状细胞的密度,可能影响宿主的抗肿瘤能力及肿瘤的浸润转移。     

皮肤T细胞淋巴瘤的核仁组成区蛋白

本文应用嗜银染色(AgNOR)计数对52例皮肤T细胞淋巴瘤(CTGL)及9例皮肤假性淋巴瘤(CPL)进行鉴别诊断。每例均在高倍油镜下随机计数200个细胞的AgNOR,并求得其平均数,标准差及均数标准误,结果如下:22例蕈样肉芽肿前期(MFI)为1.17±0.09SEM=0.01;24例蕈样肉芽肿浸润期(MFⅡ)为1.17±0.11 SEM 0.01;4例蕈样肉芽肿肿瘤期(MFⅢ)为3.55±0.87 SEM=0.43;2例非向表皮性皮肤T细胞淋巴瘤(NECTCL)为4.5±0.28 SEM=0.19;9例CPL为1.17±0.1 SEM=0.03。结果说明在CTCL(MFⅢ+NECTCL)与CPL之间(t=7.13;P<0.001)和MFⅠ与MFⅡ之间(t=4.75;P<0.001)AgNOR计数的差别是极为显著的。因此,AgNOR在鉴别诊断上是有价值的。     

喉鳞癌增殖细胞核抗原免疫组化研究

应用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）单克隆抗体Ｐｃ１０免疫组化ＡＢＣ法对８２例喉鳞癌的细胞增殖活性进行检测。结果表明，组织学恶性度高的肿瘤ＰＣＮＡ阳性细胞数明显多于恶性度低的肿瘤（Ｐ＜０．０１）。５年生存组的患者ＰＣＮＡ标记数明显低于５年内死亡组（Ｐ＜０．０１）。提示ＰＣＮＡ免疫组化标记可作为判断喉鳞癌恶性度及估计患者预后的指标。     

子宫颈鳞癌 Rb 基因与 HPV16 E7 基因的相关性研究

用多聚酶链反应—单链构象多态性分析（Ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）以及地高辛标记探针斑点杂交技术对３０例子宫颈鳞癌组织中Ｒｂ抑癌基因及ＨＰＶ１６Ｅ７癌基因进行分析。结果３０例子宫颈鳞癌组织中未检出Ｒｂ基因突变或缺失；２０例癌组织中检出ＨＰＶ１６Ｅ７ＤＮＡ，阳性率为６７％。提示ＨＰＶ１６Ｅ７癌基因与子宫颈鳞癌密切相关。子宫颈鳞癌中Ｒｂ基因结构异常并不常见，而且与ＨＰＶ１６Ｅ７基因的存在状况无明显相关性。     

食管癌组织中环氧化酶-2的表达与微卫星不稳定的关系及意义

目的:观察环氧化酶-2(COX-2)在食管癌组织中的表达,探讨其与微卫星不稳定(MSI)的关系及临床意义。方法:采用蛋白质印迹法和PCR技术,检测45例食管鳞状细胞癌及相应癌旁正常组织COX-2蛋白表达及2个位点的MSI状态。结果:45例食管鳞状细胞癌组织中微卫星稳定(MSS)31例,MSI 14例。14例MSI中COX-2低表达者为8例(57.1%),与MSS组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:食管鳞状细胞癌发生过程中至少存在COX-2表达增加和MSI两条途径,MSI食管鳞状细胞癌可能伴有COX-2低表达。     

DAPK和P53在食管鳞癌中的表达和相关性

目的：探讨食管鳞癌死亡相关蛋白激酶（DAPK）、P53蛋白表达的变化及其与食管鳞癌临床病理因素的关系。方法：应用组织芯片免疫组化法检测104例食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜DAPK和P53蛋白的表达。结果：食管鳞癌DAPK的阳性表达率明显低于癌旁正常黏膜,P53的阳性表达率明显高于癌旁正常黏膜（P＜0.05）;食管鳞癌DAPK表达与浸润深度和淋巴结转移有关,P53表达与分化程度和淋巴结转移有关（P＜0.05）;食管鳞癌DAPK和P53的表达呈负相关（r=-0.349,P＜0.05）。结论：食管鳞癌DAPK和P53蛋白表达呈负相关可能与食管鳞癌的发生发展密切相关。