通窍活血汤对血管性痴呆大鼠海马组织miR-9、miR-124表达水平的影响

目的:探讨通窍活血汤对血管性痴呆大鼠海马组织miR-9、miR-124的影响。方法:取健康SD大鼠为实验对象，采用缺血再灌注配合永久性结扎双侧CCA法制备模型，将其分为假手术组、模型组、中药组和安慰剂组，每组12只。中药组大鼠予通窍活血汤灌胃，安慰剂组大鼠予同体积0.9%氯化钠溶液灌胃，分别持续灌胃4周，1次/d;假手术组及模型组大鼠不予干预。于造模后第1天及干预28 d测定大鼠卒中指数评分、神经病学症状评分及行为学检测，用RT-qPCR法检测大鼠海马组织miR-9、miR-124含量，苏木素-伊红染色法观察大鼠海马病理学结构情况。结果:通过HE染色可知，假手术组大鼠海马组织神经元结构完整，细胞核染色均匀；模型组及安慰剂组大鼠海马组织神经元结构残缺，神经元丢失，细胞核染色不均匀，形态固缩；中药组大鼠海马组织神经元结构相对完整，神经元有少量丢失，细胞核染色程度减低，细胞核固缩形态相对减少；通窍活血汤治疗血管性痴呆大鼠可降低其卒中指数及神经病学症状评分(P<0.05),缩短其逃避潜伏期耗时，增加穿越平台次数(P<0.05),其海马组织miR-9、miR-124表达水平下降(P&...     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马的保护作用

目的：观察补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马的保护作用。方法：选取健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、补肾活血组,制备大鼠血管性痴呆模型。补肾活血组以补肾活血方按临床成人剂量的7倍给药,即0.5 g/kg,按照大鼠体质量以0.01 mL/g的剂量灌胃给药;假手术组和模型组同时予以蒸馏水灌胃,按照大鼠体质量以0.01 mL/g的剂量灌胃。各组大鼠造模结束第2天开始给药,1次/d,连续处理4周。结果：补肾活血组大鼠海马CA1区锥体细胞排列介于模型组与假手术组之间;补肾活血组大鼠的海马CA1区细胞数与假手术组相比没有显著性差异,但是明显高于模型组大鼠的海马CA1区细胞数。结论：补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马CA1区锥体细胞有明显保护作用。     

通窍活血汤对大脑中动脉栓塞模型大鼠神经功能及HPA轴功能影响

目的:探讨研究通窍活血汤对大脑中动脉栓塞模型大鼠神经功能及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(Hypothalamus-pituitary-adrenal cortex, HPA)功能的影响。方法:选取无特定病原体级SD雄性大鼠48只为研究对象,随机分为通窍活血汤高、中、低剂量组、对照组、假手术组和模型组,每组8只,造模成功后,高、中、低剂量组按照12.04、6.02和3.01g/kg标准分别灌胃通窍活血汤,其余组灌胃等量生理盐水,检测大鼠的大便、精神、尾色等,在手术后3h、6h、1d、6d和7d对大鼠神经功能进行测评,使用放免法检测大鼠血清促肾上腺皮质激素(Adreno-cortico-tropic-hormone, ACTH)、皮质酮(Corticosterone, CORT)和血浆促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin releasing hormone, CRH)水平。结果:模型组大鼠手术后3h、6h、1d、6d和7d神经功能评分均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),通窍活血汤高、中剂量组大鼠手术后6d和7d神经功能评分均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),通窍活血汤低剂量组大鼠手术后7d神经功能评分低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);模型组大鼠血清ACTH和血浆CRH水平均低于对照组,血清CORT水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),通窍活血汤中、高剂量组血清ACTH和血浆CRH水平均高于模型组,血清CORT水平低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),高剂量组血清ACTH和血浆CRH水平均高于低剂量组,血清CORT水平低于低剂量组,差异有统计学意义(P0.05),假手术组与对照组大鼠血清CORT、ACTH和血浆CRH水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:通窍活血汤可改善大脑中动脉栓塞模型大鼠神经功能,调节HPA轴功能。     

血府逐瘀汤干预Nrf2-ARE通路对缓解蛛网膜下腔出血大鼠脑血管痉挛及神经保护作用的实验研究

目的 观察血府逐瘀汤对蛛网膜下腔出血(Spontaneous subarachnoid hemorrhage, SAH)大鼠缓解脑血管痉挛(Cerebrovascular spasm, CVS)及其对NQO-1、GSH、Nrf2蛋白表达的影响。方法 将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、血府逐瘀汤组。采用枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型,分别在1、3、5、7 d 4个时间点对其进行中药灌胃干预,假手术组及模型组等量生理盐水灌胃,评估SAH大鼠神经功能评分,取SAH大鼠基底动脉行HE染色,通过图片分析软件测定基底动脉直径,免疫组织化学法分别测定NQO-1、GSH、Nrf2蛋白表达。结果 术后3、5、7 d血府逐瘀汤组基底动脉直径大于假手术组、模型组(P<0.05),以5、7 d最明显(P<0.01);术后3、5、7 d血府逐瘀汤组NQO-1、GSH、Nrf2蛋白表达均高于其他组(P<0.05),以3、5 d蛋白表达最明显(P<0.01);术后5、7 d血府逐瘀汤组SAH大鼠Bederson评分较模型组改善明显(P<0.01),与假手术组神经功能比较差异...     

肾脑复元汤对脑缺血大鼠BDNF及bFGF表达的影响

目的探究肾脑复元汤的脑保护作用及其机制。方法 72只大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉梗死模型组(MCAO)、肾脑复元汤组(MCAO+肾脑复元汤灌胃),各组再根据处死时间随机分为7、14、21 d三个时相组;观察各组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、缺血海马区坏死细胞数、神经营养因子BDNF及b FGF表达。结果与模型组相比,肾脑复元汤组大鼠神经功能缺损评分明显降低(P0.01),脑梗死体积明显缩小(P0.01),坏死细胞数明显减少(P0.01),BDNF(第7、14天)及b FGF(第7天)表达明显增加(P0.01)。结论肾脑复元汤可以明显改善脑缺血再灌注大鼠神经功能,并促进脑梗死组织修复,其机制可能是通过促进内源性神经营养因子BDNF及b FGF的表达。     

枳术汤对急性脑梗死大鼠神经功能及海马组织Nogo-A及LPA 蛋白表达的影响

目的：探讨枳术汤对急性脑梗死（ACI）大鼠神经功能及海马组织神经轴突生长抑制因子-A (Nogo-A)及溶血磷脂酸（LPA）蛋白表达的影响。方法：采用线栓法制备急性脑梗死大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分成模型组、枳术汤低（6.9 g/kg）、中（13.8 g/kg）、高（27.6 g/kg）剂量组,每组14只。取14只大鼠（只分离血管,不阻塞血流）作为假手术组,枳术汤低、中、高剂量组分别灌胃6.9 g/kg、13.8 g/kg和27.6 g/kg的枳术汤,假手术组和模型组灌胃给予等体积0.9%氯化钠溶液。连续给药14 d后,测定大鼠神经功能缺损评分、血清乳酸脱氢酶（LDH）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的含量、脑梗死体积比例、脑含水量和海马组织中Nogo-A和LPA蛋白水平。结果：与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积比例、血清LDH、海马组织Nogo-A和LPA蛋白水平显著增加,血清GSH-Px含量显著降低（P<0.05）;与模型组相比,枳术汤低、中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积比例、血清LDH、海马组织Nogo-A和LPA...     

柴胡细辛汤加减对颅脑损伤模型大鼠海马CA1区BDNF、SYN1表达与超微结构的影响

目的观察柴胡细辛汤加减对颅脑损伤模型大鼠认知功能和神经功能缺损的作用及其可能机制。方法将89只SD大鼠随机分为假手术组16只,模型组、阳性对照组和中药低剂量组各18只,中药高剂量组19只,除假手术组外其余各组建立控制性皮层冲击损伤模型。造模次日阳性对照组予安理申片0.45 g/(kg·d),中药低、高剂量组分别给予柴胡细辛汤加减方6.5、13 g生药/(kg·d),假手术组、模型组予等体积双蒸水,各组灌胃4周。比较各组大鼠认知功能(水迷宫测试)、神经功能缺损评分(m NSS)、脑组织病理与海马CA1区超微结构,并检测CA1区脑源性神经生长因子(BDNF)、突触素1(SYN1)蛋白表达。结果各组在造模后0、3、7天时m NSS评分较假手术组均明显升高(P0.01),中药高剂量组在第7、28天时m NSS评分较模型组降低,中药低剂量组在28天时亦低于模型组(P0.05或P0.01)。水迷宫测试中,各给药组逃避潜伏期时间较模型组减少(P0.05或P0.01)。各给药组损伤海马区病理形态学显示优于模型组,中药高、低剂量组能够改善海马CA1区受损的神经元、线粒体和突触的超微结构。中药高剂量组BDNF表达明显高于模型组和阳性对照组,中药高剂量组SYN1表达高于模型组(P0.01)。结论柴胡细辛汤加减能够改善颅脑损伤模型大鼠认知功能及其神经功能缺损,其机制可能是提高海马CA1区BDNF、SYN1的表达以促进损伤的神经元修复与突触重塑,改善海马CA1区超微结构。     

不同活血化瘀方剂对重型颅脑损伤急性期大鼠的应用风险

目的探讨不同活血化瘀方剂对重型颅脑损伤(s TBI)急性期大鼠的影响。方法 306只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、脑蛋白水解物组、桃红四物汤、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组、补阳还五汤组7组。除正常组外其余各组采用改良的Feeney'自由落体方法制备s TBI大鼠模型。造模成功后脑蛋白水解物组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、通窍活血汤组、补阳还五汤组分别给予相应药物1. 11 mg/200 g、2. 04 g/200 g、3. 12 g/200 g、1. 92 g/200 g、5. 74 g/200 g灌胃,正常组和模型组给予生理盐水3 ml/200 g灌胃,各组每日均灌胃1次,连续7天。灌胃后随时统计大鼠死亡率,在第1、3、7天分别观察大鼠脑组织病理评分,检测血清微管相关蛋白Tau、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)含量。结果实验期间正常组与脑蛋白水解物组大鼠无死亡,其余各组大鼠死亡主要集中在前4天,前4天与正常组比较,模型组、桃红四物汤组、血府逐瘀汤组大鼠死亡率都显著升高(P 0. 01);与模型组比较,桃红四物汤组、血府逐瘀汤组大鼠死亡率也明显升高(P 0. 01),而通窍活血汤组、补阳还五汤组差异无统计学意义(P 0. 05)。与正常组同时间相比较,各给药组大鼠脑组织病理评分及血清Tau、GFAP水平在3个时间段均明显升高(P 0. 05)。与模型组同时间比较,第1天血府逐瘀汤组、通窍活血汤组和补阳还五汤组大鼠病理评分升高,桃红四物汤组、血府逐瘀汤组、补阳还五汤血清GFAP蛋白水平升高(P 0. 05);而在第3天除桃红四物汤组外,其余各给药组病理评分较模型组降低;脑蛋白水解物组、通窍活血汤组、补阳还五汤血清Tau、GFAP水平降低(P 0. 05);第7天各给药组病理评分及血清Tau、GFAP水平均降低(P 0. 05)。结论 s TBI急性期使用桃红四物汤及血府逐瘀汤会加重病情,增加死亡风险。用活血化瘀药来治疗s TBI急性期的最佳时间段可能在发生损伤第4天后,并且以通窍活血汤和补阳还五汤效果最好。     

通窍活血汤对缺血性卒中后抑郁大鼠海马行为学及海马齿状回BDNF的影响

目的探讨通窍活血汤对缺血性卒中后抑郁大鼠行为学及海马齿状回BDNF表达的影响。方法 30只健康雄性Wistar实验大鼠随机分为假手术组(Sham组)、卒中后抑郁模型组(PSD组)、通窍活血汤组高、中、低剂量组,采用复合造模法制备PSD大鼠模型,7、14天后对大鼠进行行为学检测,并采用免疫印迹法检测各组大鼠海马齿状回BDNF的表达情况。结果治疗后第7天、14天,通窍活血汤组能改善PSD大鼠行为学评分,部分分组特别是中药高剂量组与模型组比较具有统计学差异(P0.05),海马齿状回的脑源性神经营养因子(BDNF)计数较模型组升高(P0.05)。结论通窍活血汤可影响缺血性卒中后抑郁大鼠行为学,对海马齿状回BDNF的表达的影响可能是其改善PSD大鼠行为学的因素之一。     

益气通窍活血方对颅脑损伤模型大鼠认知功能和神经功能缺损的作用及机制探讨

目的探讨益气通窍活血方对颅脑损伤大鼠认知功能和神经功能的影响及作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、益气通窍活血低剂量组、益气通窍活血中剂量组、益气通窍活血高剂量组。除空白组、假手术组外,其余组均建立颅脑损伤模型。造模成功后,益气通窍活血低、中、高剂量组分别给予益气通窍活血方2.5 mg/kg、5 mg/kg、7.5 mg/kg灌胃,空白组、假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,均1次/d,连续7 d。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)法于造模后24 h、72 h、168 h评估大鼠神经功能;采用Morris水迷宫试验评估大鼠空间学习能力、记忆能力;采用放射免疫法检测血清S100B蛋白(S100B)、神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)水平;HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;Envision法免疫组化检测脑组织中Bcl-2及Bax蛋白表达情况。结果与空白组比较,模型组术后各时间点的mNSS评分及血清S100B水平均明显升高,血清NGF、BDNF水平均明显降低,水迷宫试验逃避潜伏期明显延长、穿越平台次数明显减少,脑组织中Bcl-2、Bax阳性细胞表达数均明显增多,差异均有统计学意义(P均0.05);与模型组比较,益气通窍活血各剂量组大鼠术后各时间点的mNSS评分及血清S100B水平均明显降低,血清NGF、BDNF水平均明显升高,水迷宫试验逃避潜伏期明显缩短、穿越平台次数明显增多,脑组织中Bcl-2阳性细胞表达数均明显增多,Bax阳性细胞表达数均明显减少,差异均有统计学意义(P均0.05);与益气通窍活血低剂量组比较,益气通窍活血高剂量组各指标改善更明显(P均0.05)。结论益气通窍活血方能有效保护损伤神经元,缓解神经功能缺损,改善颅脑损伤大鼠的认知功能,机制可能与提升NGF、BDNF水平,抑制Bax蛋白表达,减少神经细胞凋亡有关。