Qualitative and quantitative analysis of Chinese herb fructus chaenomelis

ObjectiveTo establish reliable methods for evaluating the quality of Chinese herb fructus chaenomelis.MethodsQualitative analysis by Thin layer chromatography (TLC), reference substances were Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai and oleanolic acid, a mixed solvent of chloroform-methanol (40:1) was employed as the mobile phase, color developing agent was 10% sulfuric acid-ethanol solution. In the system of high performance liquid chromatography (HPLC), a Prontosil Eurobond C¹⁸ column (250 mmx4.0 mm, 5 μm) was used, the mobile phase was composed of acetonitrile-methanol-0.4% ammonium acetate solution (55:25:20), the flow rate was 1.0 ml/min with UV detected at 210 nm, the column temperature was maintained at room temperature.ResultsIn the system of TLC, oleanolic acid was separated successfully. In HPLC, the linear ranges of oleanolic acid and ursolic acid were 5.89±13.73 μg (R=0.9990) and 6.84±15.96 μg (R=0.9990), respectively. The average recoveries of oleanolic acid and ursolic acid were 97.52% (RSD=2.58%), 98.21% (RSD=2.23%), respectively.ConclusionThe established TLC method can easily distinguish Chinese herb fructus chaenomelis from other commonly used crude drugs of the same family. The HPLC method for determining oleanolic acid and ursolic acid is simple, reproducible, accurate and feasible. The methods reported in this paper can be used scientifically and effectively to evaluate the quality of Chinese herb fructus chaenomelis.     

木瓜齐墩果酸和熊果酸等三萜酸类薄层色谱分离鉴别

目的建立木瓜齐墩果酸、熊果酸等三萜酸薄层色谱分离鉴别方法。方法将点于硅胶G板上的样品点浸入1%碘-二氯甲烷溶液中预处理,以环己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸(9∶2∶1∶0.2)为展开剂。结果木瓜中熊果酸、齐墩果酸以及3-O-乙酰熊果酸能够被很好地分离和检识。结论薄层色谱法简便、可靠,使木瓜鉴别更具客观性和专属性。     

高效液相色谱法测定紫珠果中齐墩果酸和熊果酸

目的：建立紫珠果药材中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方法：采用RP-HPLC法,Phenomenex Kromasil ODS-Cl8（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱;流动相为甲醇-水（90∶10）;流速1.0 ml/min;柱温25℃;检测波长为215 nm。结果：齐墩果酸在0.011 5~0.103 5 g/L呈良好的线性关系;熊果酸在0.030 32~0.272 88g/L呈良好的线性关系;齐墩果酸平均回收率为99.70%,RSD为0.32%（n=9）,熊果酸平均回收率为100.06%,RSD为0.87%（n=9）。结论：该方法操作简便快速,结果可靠,重复性好,可为有效控制紫珠果药材及其制剂的质量提供依据。     

车前草中熊果酸、齐墩果酸的HPLC测定

采用ＨＰＬＣ法同时测定车前草中熊果酸、齐墩果酸的含量。选用Ｃ１８ＯＤＳ色谱柱,流动相：甲醇－水（８８：１２）,检测波长：２２０ｎｍ,流速;０．６ｍＬ／ｍｉｎ,柱温：２５℃。熊果酸和齐墩果酸分别在０．４０４２～２．０２０μｇ（４＝０．９９８４）和０．４１０～２。０５０μｇ（ｒ＝０．９９９７）范围内呈线性;熊果酸、齐墩果酸的平均回收率分别为９８．２％（ＲＳＤ＝１．７４％）９７．８％（ＲＳＤ＝／２．２４     

HPLC法测定裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量

目的：建立裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量测定方法,考察海南五指山地区野生裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量。方法：采用高效液相色谱法测定裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量,乙腈-甲醇-3.5%乙酸胺水溶液（69∶10∶21）为流动相;流速为1mL/min,检测波长为215nm。结果：齐墩果酸与熊果酸的线性范围分别为1.63～6.53μg（r=0.9996）与1.20～7.20μg（r=0.9997）,回收率分别为98.11%和101.64%。结论：本法操作简单,测定结果准确,适于裸花紫珠中齐墩果酸与熊果酸的含量测定。     

反相高效液相色谱法测定木瓜药材及饮片中齐墩果酸和熊果酸含量

目的建立木瓜药材及饮片中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱方法：Shim-pack CLC-ODS（M）色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温20℃;流动相为甲醇-水-冰乙酸-三乙胺（265∶35∶0.1∶0.05）,流速0.6 ml/min;检测波长210 nm。结果齐墩果酸在0.162－3.310μg范围内（r=0.999 8）,熊果酸在0.195－3.910μg范围内（r=0.999 4）与峰面积线性关系良好;齐墩果酸平均回收率为97.7%,RSD=2.0%（n=9）,熊果酸平均回收率为98.4%,RSD=2.5%（n=9）。木瓜药材及饮片齐墩果酸含量为0.248%－0.454%,熊果酸含量为0.103%－0.508%。结论所建立的齐墩果酸与熊果酸含量测定方法操作简便、准确、重现性好,可用于不同产地木瓜药材及饮片的质量控制。     

夏桑菊泡腾颗粒质量标准研究

目的制定夏桑菊泡腾颗粒的质量标准,对其中的夏枯草、野菊花建立质量控制方法。方法用薄层色谱法对夏枯草中熊果酸进行鉴别;用HPLC法对野菊花中的蒙花苷进行含量测定。色谱柱：Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：甲醇-水-冰醋酸（体积比50∶48∶2）,流速：1.0mL.min-1,检测波长：334 nm。结果夏枯草的薄层鉴别方法快速、灵敏,阴性无干扰;蒙花苷在0.044 8-0.448μg范围内呈良好线性（r=0.999 9,n=5）,平均回收率为99.7%（n=6）,RSD为1.2%。结论建立的质量标准可较好地用于夏桑菊泡腾颗粒的质量控制。     

藏药智托洁白丸中没食子酸的定性与定量检测

目的:建立智托洁白丸处方中没食子酸定性与定量测定方法。方法:定性测定采用薄层色谱法。定量测定采用高效液相色谱法,色谱柱为Sunfire-ODSC18柱(250mm,4.6mm),柱温30℃,以乙腈-含体积分数0.1%三乙胺的体积分数0.1%磷酸溶液(体积比3:97)为流动相;检测波长为273nm,理论板数按没食子酸峰计算不低于3000。结果:薄层色谱图中,供试品、对照药材和对照品在相应位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。定量检测时,没食子酸进样量在0.0157～0.2830μg范围内线性关系良好,标准曲线为Y=4×107X+6532(R2=0.9998);方法的精密度和重现性均良好(RSD分别为0.05%,1.43%),12h内的稳定性良好(RSD=0.65%);平均回收率为98.07%,RSD=0.76%。9批样品中没食子酸平均含量为8.8mg/g。结论:所建立的薄层色谱定性检测方法和高效液相色谱定量检测方法可用于智托洁白丸中没食子酸的定性鉴别和定量控制。     

降脂护肝胶囊质量标准研究

目的：建立降脂护肝胶囊的质量标准。方法：采用薄层色谱法鉴别降脂护肝胶囊中山楂、葛根;高效液相色谱法测定熊果酸的含量。HPLC法采用Symmetry C18（3.9 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-甲醇-0.5%醋酸铵（69∶12∶19）为流动相;流速：0.8 ml/min;检测波长：220 nm。结果：TLC鉴别图谱斑点清晰,阴性无干扰;熊果酸进样量在0.48～14.4μg范围内呈良好线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率及RSD分别为98.43%和0.57%（n=5）。结论：采用TLC法和HPLC法控制降脂护肝胶囊质量的方法简便快速、准确可靠、重复性好,专属性强。     

薄层色谱法测定夏枯草中熊果酸的含量

目的 :测定夏枯草中熊果酸的含量。方法 :采用双波长薄层扫描法。以环己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶冰醋酸 ( 2 0∶5∶8∶0 .5)为展开剂 ,选择λS=530nm ,λR=70 0nm作为熊果酸含量测定的扫描波长 ,对夏枯草中熊果酸的含量进行了测定 ,并对方法学进行了考察。结果 :加样回收测定熊果酸的平均回收率为 10 0 .32 % (RDS =2 .14 % )。结论 :此法重现性、回收率良好 ,专属性较强 ,是中药制剂中夏枯草质量控制较为理想的指标。     

九节菖蒲总皂苷、齐墩果酸及腺苷的含量测定

目的:建立九节菖蒲药材中总皂苷、齐墩果酸及腺苷的含量测定方法。方法:以齐墩果酸为对照品,采用紫外分光光度法于208nm波长处对九节菖蒲中的总皂苷含量进行测定;采用HPLC法对九节菖蒲中齐墩果酸的含量进行测定,迪马公司Diamonsil(钻石)C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温为室温(25℃),流动相为乙腈:水(92:8),流速为1mL.min-1,检测波长为208nm。采用HPLC法对九节菖蒲中腺苷的含量进行测定,迪马公司Diamonsil(钻石)C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温为室温(25℃),流动相为乙腈:水(8:92),流速为1mL.min-1,检测波长为260nm。结果:总皂苷在0.016~0.08mg.mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9993),平均回收率为100.94%,其RSD为1.5%;腺苷在0.00425~0.02125mg.mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9999),平均回收率为97.65%,其RSD为1.35%;齐墩果酸在0.0045~0.045mg.mL-1范围内线性关系良好(R2=0.9999),平均回收率为98.67%,RSD为1.23%。结论:本研究建立的含量测定方法,简便、准确、灵敏,重复性好,适用于九节菖蒲中总皂苷、腺苷及齐墩果酸的含量测定。     

解毒利肺口服液质量控制方法研究

目的：建立解毒利肺口服液质量控制方法．方法：采用薄层色谱法对金银花、黄芩和连翘有效成分进行鉴别、采用大孔树脂柱分离沉淀法分离绿原酸,用HPLC法测定含量。结果：TLC鉴别的方法专属性较好,大孔树脂柱分离沉淀法可有效去除杂质,加样回收率96．68％,精密度RSD1．94％。     

反相高效液相色谱法测定不同加工方法枸骨叶中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的考察不同加工方法对枸骨叶中熊果酸和齐墩果酸含量的影响。方法采用反相高效液相色谱法,梯度洗脱,对不同加工方法的枸骨叶甲醇提取物进行高效液相色谱分析。结果熊果酸在55~550μg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9;齐墩果酸在35~350μg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9。晒干和阴干的样品中熊果酸和齐墩果酸含量较高,分别为1.45%,0.31%和1.43%,0.30%。结论该方法简便、重复性好、准确度高,为枸骨叶的合理加工提供了参考依据。     

HPLC法测定散结止痛巴布剂中熊果酸的含量

目的:建立散结止痛巴布剂中熊果酸的含量测定方法。方法:色谱柱为Kromsasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇:0.1%醋酸(88∶12);流速1 ml/min;柱温:30℃;检测波长:210 nm。结果:熊果酸在0.0303～0.505 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.9992),方法学考察符合要求。结论:该方法准确、灵敏、重现性好,可用于散结止痛巴布剂中熊果酸的质量控制。     

HPLC-DAD-ELSD法同时测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的含量

目的建立以蒸发光散射检测器（ELSD）和二极管阵列检测器（DAD）测定威灵仙药材中齐墩果酸和常春藤皂苷元的高效液相色谱分析方法。方法色谱柱：Merck Lichrocart C18柱（4.0 mm×250 mm,5μm）;流动相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（体积比87∶13∶0.04∶0.02）;流速：1.0 mL.min-1;柱温：30℃;DAD检测波长为210 nm;ELSD蒸发管温度为80℃,气体压力为172.375 kPa。结果常春藤皂苷元、齐墩果酸线性范围分别为1.43-14.3μg和2.1-21.0μg;常春藤皂苷元和齐墩果酸在以DAD检测时的加样回收率分别为98.02%、98.94%,RSD分别为2.61%、2.34%;在以ELSD检测时的加样回收率分别为98.72%、100.03%,RSD分别为2.51%、2.22%。结论本方法简便、重现性好、专属性强,为完善威灵仙药材质量控制标准提供了科学依据。     

HPLC法测定补肾调降丸中齐墩果酸的含量

目的用HPLC法测齐墩果酸的含量。方法以齐墩果酸对照品作对照，采用HPLC法测定补肾调降丸中的齐墩果酸含量。色谱柱：ODS HYPERSIL C18 5μ（4.6mm．I．D．×200mm）；检测波长：215nm；流动相：甲醇-水（84：16）；柱温：25℃；进样量：10μl，采用外标法。结果在优化色谱条件下，补肾调降丸中的齐墩果酸线性范围在1．0-40μg。回归方程为：Y=359．8524132X－2．148982，r=0．9999。含量测定的回收率为：97．72％，RSD=0．89％。结论所建立的方法专属性强，操作简便，结果准确，重现性好，适用于对补肾调降丸中的齐墩果酸含量的测定。     

江西地方药材野山楂叶质量标准研究

目的：建立江西地方药材野山楂叶的质量标准.方法：建立药材的性状、显微特征和熊果酸TLC鉴别方法;采用HPLC方法测定熊果酸含量,色谱柱为Thermo BDS HYPERSIL C18（250 mm×4.6mm,5μm）,以甲醇-0.05％磷酸（87∶ 13）为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为210nm.结果：山楂叶的显微特征性强;熊果酸TLC色谱斑点清晰;熊果酸在0.01984～0.1984mg范围内呈良好线性关系,r=0.9991,回收率为98.71％,RSD为0.64％（n=3）.结论：方法简便,准确,重复性好,适用于江西地方药材野山楂叶的质量控制.     

陆英的质量研究Ⅰ

目的研究陆英中熊果酸的含量,为制订陆英药材标准提供依据。方法采用高效液相色谱法测定陆英中熊果酸与齐墩果酸含量。结果陆英全草熊果酸含量高于齐墩果酸,两者总量不低于0.1%;不同部位间熊果酸与齐墩果酸总量由多到少依次为:花、叶、果、茎、根茎。结论本研究结果可为制订陆英药材标准提供参考。     

SPE-RP-HPLC法测定女贞子药材中齐墩果酸、熊果酸的含量

目的为女贞子药材的质量评价提供科学依据。方法以固相萃取(SPE)进行样品供试液的前处理,采用RP-HPLC法,分别测定齐墩果酸与熊果酸的含量,色谱柱:Kromasil KR100-5 C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:[乙腈-甲醇(体积比1∶1)-水(体积比90∶10)];流速:0.8 mL/min;检测波长:210 nm;柱温25℃;进样量:2μL。结果样品中齐墩果酸与熊果酸得到较好的分离;齐墩果酸在0.108~3.24μg的范围内、熊果酸在0.060~1.800μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.50%、98.05%;11批次样品中齐墩果酸的含量为0.639~1.340 mg/g,熊果酸的含量为0.168~0.377 mg/g。结论采用SPE进行供试品溶液前处理,能够有效消除女贞子药材中杂质成分对末段吸收波长的干扰,所建立的方法具有简便、稳定、可重复的特点,可用于女贞子药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定海南香茅中绿原酸的含量

目的:建立海南香茅中绿原酸的高效液相色谱含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,phe-nomenox luna C1 8色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水-冰醋酸(12∶88∶1)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为327nm。结果:绿原酸在0.166 4～1.664 0μg范围内,峰面积与绿原酸的进样质量呈良好线性关系,线性方程为Y=1 334 267.8 X-2 392.2(r=0.999 9),平均回收率为101.58%,RSD为1.84%。结论:建立的高效液相色谱测定法简便、快速,重复性好,准确度高,可作为香茅药材的质量控制方法。