甲醛致V79细胞DNA-蛋白质交联作用及其修复

目的探讨甲醛诱导DNA-蛋白质交联作用及其修复效应。方法采用培养V79细胞株作为实验材料,以不同浓度的液态甲醛(0、50、100、200、400、800、1 600μmol/L)对细胞染毒1 h后检测DPC率,并根据实验结果选取200μmol/L对培养细胞株进行修复实验(修复0、6、12、18、24 h)。采用KCl-SDS沉淀法检测DPC率。结果较高浓度的液态甲醛(≥200μmol/L)可以产生明显的DPC效应(P<0.05);由200μmol/L浓度的液态甲醛诱导V79细胞产生明显的DPC(P<0.05),经过修复可以恢复到空白对照水平(P>0.05)。结论较高浓度的甲醛可以明显诱导DPC形成,甲醛所致的DNA-蛋白质交联可以得到修复。 更多还原     

彗星试验检测甲醛对V79细胞的DNA交联作用

目的研究甲醛对V79细胞DNA的交联作用,探讨甲醛的遗传毒性及机制.方法以紫外线照射作为标准断裂剂,用彗星试验检测不同浓度、不同暴露时间甲醛诱导的V79细胞DNA的交联作用.结果除75 μmol/L组外,在其它4个浓度组、3个染毒时间点,甲醛均可引起显著的DNA交联作用,彗星尾长和彗星细胞率显著低于仅紫外线照射的对照组(P<0.01),且彗星尾长具有明显剂量-反应关系(P<0.01).细胞暴露在甲醛中2、4 h,150、300、600 μmol/L浓度组彗星尾长和彗星细胞率显著低于暴露在1 h的(P<0.01).结论甲醛是一种DNA交联剂,具有诱导V79细胞DNA交联的作用,DNA交联的作用可作为甲醛致机体影响的生物标志物.     

氢醌致V79细胞DNA损伤的体外实验研究

目的研究苯的主要代谢产物氢醌(HQ)对V79细胞DNA的损伤作用。方法分别用0.15,0.30,0.60,1.20,2.40mmol/L的HQ染毒V79细胞2h,用单细胞凝胶电泳方法检测DNA损伤情况。结果在本研究所用剂量范围内,HQ可引起V79细胞DNA的明显损伤,低剂量组(0.15mmol/L)彗星细胞率为69%,彗星尾长(42.20±3.18)μm,高剂量组(2.40mmol/L)彗星细胞率为91%,彗星尾长(49.05±4.31)μm,但无明显的剂量-效应关系。结论HQ可致V79细胞DNA损伤,产生遗传毒性作用。     

甲醛致小鼠肺DNA蛋白质交联和DNA断裂效应的研究

目的 研究甲醛致小鼠肺DNA-蛋白质的交联（DNA-protein crosslinks．DPC）和致DNA的断裂作用。方法以小鼠肺为材料,经体外染毒后．采用KCl-SDS沉淀法和单细胞凝胶电泳法检测液态甲醛染毒后肺部提取细胞中DNA-蛋白质交联物的含量及DNA的断裂效应。结果KCl-SDS沉淀法,低浓度的液态甲醛（5μM,25μM）不能引起DNA-蛋白质的交联（P〉0．05）,较高浓度（125μM．625μM）可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用（125μM,p〈0．05;625μM．P〈0．01）。而单细胞凝胶电泳法显示甲醛在低浓度（5μM,25μM）时可以引起DNA链的断裂（P〈0．01）．在较高浓度（125μM,625μM）时可以引起交联作用（P〈0．01）。结论甲醛在较高浓度时可以导致明显的DNA-蛋白质交联作用．而在〈25μM时以DNA断裂为主。     

高氟茶浸泡液致V79细胞毒性及DNA损伤的研究

[目的]探讨含氟茶浸泡液对中国仓鼠肺成纤维细胞（V79细胞）的毒性及DNA损伤的作用。[方法]用氟离子选择电极法测定绿茶A、绿茶B和对照茶浸泡液中氟化物的含量。3种茶浸泡液分别设立5个茶汤浓度组（0.63、1.25、2.50、5.00、10.00mg/mL）对V79细胞进行4h、24h染毒,采用台盼蓝拒染法检测茶浸泡液对V79细胞的毒性。另将上述3种茶浸泡液分别设0.32、0.63和1.25mg/mL3个浓度组,均对V79细胞染毒4h,采用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测茶浸泡液对V79的细胞DNA损伤作用。同时设立阴性和紫外线对照组。[结果]绿茶A、绿茶B及对照茶浸泡液中氟化物的含量分别为2330、1390、7.53mg/kg。绿茶A、绿茶B的氟含量高于农业行业标准。在台盼蓝拒染实验中,绿茶A和绿茶B浸泡液对V79细胞活性有抑制作用,并具有明显的剂量-效应关系。在作用4h（2.50～10.00mg/mL剂量范围）和24h（0.63～10.00mg/mL）时,绿茶A和绿茶B的细胞存活率明显低于对照茶（P〈0.05）,且绿茶A的细胞存活率低于绿茶B（P〈0.05）。在作用4h时,绿茶A、绿茶B和对照茶对V79细胞的DNA损伤,其中绿茶A的DNA损伤作用较大,可能与它含氟量最高有关,而对照茶对V79细胞无DNA损伤作用。     

苯酚致V79细胞毒性及DNA损伤效应的研究

目的 了解苯酚(PH)对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79细胞)的细胞毒性以及DNA损伤.方法 采用甲基四唑蓝(MTT)法检测不同浓度(25、50、100、200、400 mg/L)苯酚在不同时间染毒(12、24、48h)后对V79细胞的毒性;采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测不同浓度(5、10、20、40、80 mg/...     

甲醛对V79细胞DNA损伤的实验研究

目的探讨甲醛（FA）的DNA损伤机制。方法应用单细胞凝胶电泳技术研究不同浓度FA对V79细胞（中国仓鼠肺成纤维细胞）的DNA损伤程度,以及剂量依赖关系。结果单细胞凝胶电泳结果显示,在不同浓度FA（100～1 600μmol/L）彗星细胞拖尾率、尾长及头/尾比随着浓度的增加而减少,且差异具有统计学意义（P〈0.01）;特别是在1 600μmol/L时在图片中未见有彗星细胞出现,其显示的DNA损伤类型是DNA-蛋白质交联;但是FA的浓度与拖尾细胞率、尾长及头/尾比之间不存在线性关系。结论该研究结果认为,在体外培养条件下,一定浓度的FA能够引起细胞DNA损伤,主要表现为DNA-蛋白质交联。     

甲醛致淋巴细胞DNA交联作用的体内外实验研究

目的 研究甲醛对小鼠胸腺淋巴细胞DNA的交联作用,探讨甲醛的遗传毒性作用及机制。方法 分别以γ射线及紫外线作为标准断裂剂,用单细胞凝胶电泳技术对不同浓度甲醛诱导的小鼠胸腺淋巴细胞DNA交联作用进行体内及体外实验研究。结果 体内和体外研究均显示,甲醛可以引起小鼠胸腺淋巴细胞DNA的交联作用;体外研究还发现,随着甲醛浓度的增加,交联作用加强,彗星细胞率分别为100％,76％,2％,平均尾长分别为15．32,9．79,5．02μm。结论 甲醛是一种DNA交联剂,具有诱导小鼠胸腺淋巴细胞DNA交联的作用。     

氯化腐殖酸对V79细胞DNA损伤与修复效应的研究

以氯化的商品腐殖酸溶液为实验模型,用单细胞凝胶电泳技术检测了氯化腐殖酸引起的Ｖ７９细胞ＤＮＡ损伤与修复作用。结果显示：氯化腐殖酸溶液在５０μｇ／ｍｌ至８００μｇ／ｍｌ范围内可引起Ｖ７９细胞ＤＮＡ损伤,平均尾长与氯化腐殖酸溶液的浓度存在着剂量反应关系;修复试验显示：孵育３０分钟ＤＮＡ已开始修复,２小时几乎完全修复。该研究说明：以氯化的商品腐殖酸溶液为实验模型,研究饮水氯化消毒副产物的ＤＮＡ损伤与修复效应是简便易行的。     

硒和维生素E对丙烯酰胺致V79细胞毒性的拮抗作用

目的研究不同浓度的维生素E和（或）硒对丙烯酰胺（AA）染毒V79细胞的拮抗作用。方法利用细胞毒性实验（MTT法）计算细胞相对存活率，用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤，并对实验数据进行统计学分析。结果0．5～10．0μmol／L的硒和（或）2．5-40．0mmol／L维生素E与1．5mmol／L的丙烯酰胺作用于体外培养的V79细胞，实验结果表明，低浓度的硒与维生素E均可降低丙烯酰胺所致的细胞毒性和基因毒性，0．75mmol／L的AA已显示明显的细胞毒性，V79细胞的相对存活率（77．36％）明显低于阴性对照组，AA对V79细胞的毒性作用有明显的剂量-反应关系。高浓度的硒则起相反的作用；硒和维生素E共同作用，其拮抗效果明显优于硒、维生素E单独作用。结论在体外细胞培养条件下，一定浓度的维生素E和硒对AA染毒V79细胞的细胞毒性、遗传毒性有拮抗作用，且具有协同效应。     

守宫木致CHL及V79细胞染色体畸变作用

目的 观察守宫木对体外培养细胞的遗传学毒性。方法 以守宫木提取液为受试物,不同浓度条件下染毒培养中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)及中国仓鼠肺细胞(V79)2株细胞系,观察中期分裂相细胞的染色体畸变率。结果 守宫木对CHL细胞的染色体致畸率很高(P<0.01),在50%浓度下,其直接致染色体畸变能力明显高于经S9代谢活化组,对CHL细胞的染色单体型畸变明显高于染色体型畸变。守宫木对V79细胞在50%浓度下,其直接的致染色体畸变效应不明显,经S9代谢活化,致突变效应与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),染色单体型畸变仍高于染色体型畸变。结论 守宫木具有一定的诱发染色体畸变的遗传毒性。     

甲醛吸入染毒对小鼠DNA损伤的影响

目的探讨甲醛吸入染毒对小鼠脾、肝、肺和肾组织细胞DNA的损伤作用。方法将40只健康昆明种小鼠随机分为5组,混合物静式吸入染毒,用不同剂量(0.0、0.75、1.5、3.0、6.0mg/m3)的甲醛染毒小鼠2周,第15天处理动物后,取脾、肝、肺、肾组织制成细胞悬液,用单细胞凝胶电泳实验观察其细胞DNA损伤水平。结果染毒后小鼠脾、肝、肺、肾组织细胞DNA出现损伤,且损伤程度与染毒剂量具有一定相关性。与空白对照组比较,3种组织细胞各剂量组细胞DNA拖尾率和彗星尾长均显著增加;随着甲醛染毒浓度的升高,脾、肝、肺和肾细胞拖尾率和彗星尾长增加。结论甲醛可引起小鼠的脾、肝、肺、肾组织细胞DNA损伤。     

甲醛致大鼠离体骨髓细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的检测经不同浓度甲醛染毒后所致大鼠骨髓细胞的DNA-蛋白质交联程度。方法采用KCl-SDS沉淀法检测液态甲醛所致DNA-蛋白质交联（DPC）效应。结果低浓度的甲醛（10μmol／L和50μmol／L）能引起DNA-蛋白质的交联;较高浓度的甲醛（250μmol／L和1250μmol／L）可以产生明显的DNA-蛋白质交联作用（P〈0．01）。结论甲醛可造成骨髓细胞DNA-蛋白质交联,而DPC可以对细胞产生严重的遗传毒性,这可能是甲醛导致白血病的分子机制之一。     

基于单细胞凝胶电泳技术快速检测食品添加剂对V79细胞DNA损伤作用的研究

目的快速检测啤酒花浸膏、溴酸钾和焦磷酸钠等3种食品添加剂对V79细胞DNA的损伤作用。方法采用V79细胞培养和单细胞凝胶电泳技术,借鉴单细胞凝胶电泳技术（SCGE）图像分析系统IM11．0对彗星图像进行分析,观察指标有尾长、尾重心、olive尾矩、尾惯量、尾分布矩、尾长／头长比、尾DNA含量（％）等7个计量指标。结果实验结果表明,溴酸钾和焦磷酸钠的剂量分别在75～300ug／ml和25．100umol／ml范围内,均对V79细胞DNA有明显的损伤作用,存在剂量-反应关系;啤酒花浸膏的剂量在25～100ug／ml范围内,不引起V79细胞DNA的损伤作用。结论本研究方法与传统的彗星实验相比,具有分析指标多,操作方便等优点,可应用于快速检测食品添加剂诱变性的筛选试验。     

某厂放射作业人员外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

目的 应用单细胞微量凝胶电泳法（ＳＣＧＥ）,俗称慧星试验,探讨小剂量Ｘ射线接触者外周血淋巴细胞ＤＮＡ损伤的情况。方法 选择３２例射线作业保同为接触组和３３例非接触人员为对照组,通过ＳＣＧＥ法测定他们淋巴细胞ＤＮＡ的损伤。结果 射线组工人淋巴细胞ＤＮＡ损伤率明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）,ＤＮＡ链的断裂损伤程度和作业人员的工作时间有显著相关。结论 射线工作者长期受职业性小剂量照射可引起外周血淋巴细胞     

亚急性甲醛吸入对小鼠肝细胞DNA损伤作用

目的检测亚急性甲醛吸入对小鼠肝细胞的损伤作用,并探讨用归一化处理方法解决单细胞凝胶电泳重复性差的可行性.方法将小鼠分别暴露于不同浓度的气态甲醛（0.5,1.0和3.0 mg/m^3）中染毒14d,每天6 h,用单细胞凝胶电泳技术检测肝细胞DNA的损伤程度.结果0.5和1.0 mg/m^3的甲醛可造成DNA的严重断裂（P＜0.001）,而3.0mg/m^3的甲醛则引起显著的交联作用,归一化的结果与之相符,并表明不同浓度的甲醛导致不同程度和类型的DNA损伤.结论甲醛可造成机体内肝细胞DNA的断裂和交联,该损伤可能是甲醛致癌机制之一;归一化可以弥补单细胞凝胶电泳实验重复性不佳的缺陷.