RNAi抑制NF—κB通路相关基因对喉鳞癌凋亡及转移的影响

目的：用RNA干涉方法探讨NF—κB通路参与喉癌发生、发展的可能机制。方法：RT—PCR、West—ern Blot检测喉鳞癌组织中NF—κB通路中相关基因表达，RNA干涉方法抑制p65，p50表达，流式细胞仪，TUNEL方法检测细胞凋亡，Transwell检测细胞侵袭力。结果：36例喉鳞癌组织中21例p65 mRNA表达上调（58．33％）高于癌旁组织（P=0，012），13例出现p50 mRNA表达上调（36.11％），但与癌旁组织比较无显著差异（P=0．602）。喉鳞癌组织的p65蛋白表达明显较癌旁组织增强（P=0．044），而p50蛋白表达无显著差异。特异siRNA转染Hep2细胞明显抑制p50，p65基因表达，该作用可持续10天。RNAi抑制p65基因表达使Hep2细胞凋亡率增加，在转染后第7天最高达29．89％，与对照组比较升高超过10倍（P=0．020）；同时使Hep2细胞侵袭力明显下降（P=0．003），而干涉p50基因对细胞凋亡及细胞侵袭性影响不明显。结论：RNAi抑制p65表达诱导Hep2细胞凋亡、抑制细胞侵袭力，提示抑制p65表达与常规治疗结合可能成为改善喉癌预后的选择。     

S100A8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究

目的:研究S100A8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用.方法:应用RT-PCR、West-ern Blot、免疫组化检测S100A8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性.结果:36例喉鳞癌组织中17例出现S100A8 mRNA表达上调(47.2%),而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调(28.5%).13例病人喉鳞癌组织中7例S100A8蛋白表达增高.免疫组化分析喉鳞癌组织S100A8蛋白阳性率为54.3%.在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%(P=0.023).RNAi抑制S100A8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bel-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响.结论:S100A8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,S100A8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用.S100A8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中S100A8基因位于p65下游.     

S100A8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究

目的：研究S100A8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用.方法：应用RT-PCR、West-ern Blot、免疫组化检测S100A8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性.结果：36例喉鳞癌组织中17例出现S100A8 mRNA表达上调（47.2%）,而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调（28.5%）.13例病人喉鳞癌组织中7例S100A8蛋白表达增高.免疫组化分析喉鳞癌组织S100A8蛋白阳性率为54.3%.在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%（P=0.023）.RNAi抑制S100A8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bel-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响.结论：S100A8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,S100A8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用.S100A8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中S100A8基因位于p65下游.     

SNORA73B高表达对喉鳞癌干细胞样特征的影响

目的:以小核仁RNA73B(small nucleolar RNA 73B,SNORA73B)在喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)中高表达及其临床意义为切入点,探讨SNORA73B可能通过维持干细胞特征,从而促进LSCC细胞的增殖、迁移和侵袭。方法:qPCR检测LSCC组织和细胞中SNORA73B的表达情况;体外培养细胞,MTS、划痕愈合、Transwell实验分别检测SNORA73B敲低或过表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响;肿瘤细胞球形成实验,检测SNORA73B对LSCC细胞干性样特征的影响。结果:qPCR检测结果显示,SNORA73B在LSCC组织和细胞中表达显著高于相应癌旁组织和细胞对照组(均P<0.05),且与患者病理分级、淋巴结转移和不良预后有关(P<0.05)。过表达SNORA73B的Tu177细胞增殖、划痕愈合、迁移和侵袭能力明显增强(均P<0.05);而干扰SNORA73B后细胞增殖、划痕愈合、迁移和侵袭能力明显降低(均P<0.05)。在诱导LSCC干细胞样特性的喉癌球细胞形成后,肿瘤干细胞...     

喉咽鳞癌不同治疗方案对喉功能保留及预后的影响

目的：回顾性分析初治的97例喉咽鳞癌患者应用不同治疗方法后的生存率、喉功能保留率和复发与转移情况等,探索更合理的处理方法。方法：采用SPSS10．0统计软件Kaplan—Meier法和PearsonY。检验／Fisher’s确切概率比较单纯放疗组30例,新辅助化疗＋放疗组17例,单纯手术组11例,手术＋术后放疗组33例,姑息化疗组6例的治疗效果。结果：97倒喉咽鳞癌总的3、5年累计生存率分别为46．43％和31．88％,中位生存时间是28个月。单纯放疗组、新辅助化疗＋放疗组、单纯手术组、手术＋术后放疗组5年生存率分则是18．33％、23．53％、36．36％和53．65％,5年复发率分别是70．00％、52．94％、36．36％和27．27％。接受原发灶手术共41例,喉功能部分或全部保留的手术患者与全喉切除术不保留喉功能的患者的5年生存率分别是57．14％、39．16％,P=0．3574;两组的5年局部复发率分剐是21．05％、13．64％,差异均无统计学意义,P=0．4140。结论：喉咽鳞癌患者接受单纯放疗或新辅助化疗＋放疗生存率较低,单纯手术治疗也不能明显提高生存率,手术＋放疗的治疗模式可使患者生存率有明显提高,部分喉咽鳞癌肿瘤局限,可考虑行保留喉功能的喉部分切除术,并不增加复发的风险。     

神经型钙粘素在食管鳞癌组织中的表达及RNAi沉默该基因对EC9706细胞体外侵袭能力的影响

背景与目的：上皮性钙粘附蛋白（E．cadherin）和神经性钙粘附蛋白（N-cadherin）在细胞的迁徙和肿瘤浸润转移方面有着重要的作用。许多研究表明,E-cadherin是作为一种抑癌基因发挥作用的,与之相反,N-cadherin在促进肿瘤的浸润转移方面具有重要作用。本研究探讨N-cadherin在食管鳞癌组织中的表达及其临床病理意义,以及RNA干扰（RNAi）沉默N-cadherin基因表达对人食管癌细胞系EC9706细胞体外侵袭能力的影响。方法：采用免疫组织化学PV法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中E-cadherin、N-cadherin的蛋白表达。通过逆转录病毒介导的RNAi技术沉默EC9706细胞中N—cadhefin的表达．观察该细胞体外侵袭能力的变化。结果：正常食管粘膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中E-cadhenn的阳性率依次降低,分别为95．2％、71．0％、40．3％;N-cadherin的阳性率依次升高,分别为29．0％、61．3％、75．8％。E．cadhefin的阴性率及N．cadhefin的阳性率与食管鳞癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）,二者在食管鳞癌组织中的表达呈负相关关系（r=-0．534,P〈0．05）。稳定干扰后的EC9706细胞中N．cadhefin的mRNA和蛋白表达水平均下调。Transwell小室体外侵袭实验结果显示,正常对照组的穿膜细胞数为123．4±8．2,而干扰载体组的穿膜细胞数则为49．6±618（P〈0．05）。结论：食管鳞癌组织中E．cadhefin的低表达和N．cadhenn的高表达与食管鳞癌的发生、浸润及转移密切相关：RNAi沉默N．cadhefin基因表达可以使EC9706细胞的体外侵袭能力降低。     

白细胞介素-8沉默对喉鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的探讨白细胞介素-8(IL-8)沉默对喉鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法将IL-8小干扰RNA(siRNA)和Lipofectamine 2000转染试剂转染至喉鳞状细胞癌Hep-2细胞作为实验组和NC组仅转染Lipofectamine 2000转染试剂的细胞作为,未做处理的细胞作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测IL-8、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、cleaved caspase 3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(B AX)的相对表达量。结果实验组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中IL-8蛋白的相对表达量明显低于NC组和空白组细胞,OD值明显低于NC组和空白组细胞(P<0.01)。实验组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的凋亡率明显高于空白组和NC组细胞(P<0.01)。实验组Hep-2细胞中p-AKT和抑制凋亡蛋白Bcl-2的相对表达量均低于空白组和NC组细胞,而促凋亡蛋白B AX和cleaved caspase 3的相对表达量均高于空白组和NC组细胞(P<0.05)。3组Hep-2细胞AKT蛋白的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论IL-8可通过对磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/AKT相关信号通路的调控,抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞的增殖能力,并促进其凋亡,为喉鳞状细胞癌的诊断和治疗提供了新的靶点及可能的治疗策略。     

膜型-Ⅰ型基质金属蛋白酶mRNA在人喉鳞癌组织中的表达

目的:为研究人喉鳞状细胞癌在其浸润转移中的的生物学行为,探讨能导致肿瘤浸润转移的膜型-Ⅰ型基质金属蛋白酶mRNA在人喉鳞癌组织不同部位的定位及表达情况.方法:采用原位杂交方法对人喉鳞癌组织的原发灶50例、癌旁组织34例、淋巴结22例、正常粘膜20例进行膜型-Ⅰ型基质金属蛋白酶mRNA的进行检测,图像分析做定量分析.结果:原发灶中MT1-MMP mRNA主要在肿瘤细胞的胞浆中呈强阳性表达,进展期肿瘤癌巢周边的基质细胞中呈弱阳性表达.在癌旁、转移淋巴结的肿瘤细胞胞浆中有阳性表达.原发灶中MT1-MMP mRNA表达与癌旁、正常粘膜组织均有显著差异(P＝0.000);与淋巴结之间存在显著差异(P=0.004);正常粘膜与淋巴结之间也存在显著差异(P=0.000);癌旁与淋巴结之间无显著差异(P=0.900);癌旁与正常组织之间亦无显著差异(P=0.260).结论:MT1-MMP mRNA在原发灶、癌旁(淋巴结)、正常组织中的表达呈递减趋势.提示其在喉癌浸润转移的生物学行为中有重要作用.     

RNAi抑制CAR基因对人肺鳞癌细胞系NCI-H520裸鼠皮下移植瘤生长的影响

  目的  建立RNAi抑制柯萨奇病毒腺病毒受体（coxsackievirus and adenovirus receptor, CAR）基因表达的肺鳞状细胞癌NCI-H520稳定表达细胞系, 将CAR基因沉默的NCI-H520细胞移植于裸鼠体内构建移植瘤模型, 观察裸鼠体内成瘤率及对瘤体生长等方面的影响。  方法  将针对CAR mRNA序列设计的小干扰RNA重组质粒分别以脂质体转染至NCI-H520细胞, 并经G418抗性筛选得到稳定细胞系; 用平板克隆形成实验观察RNAi抑制CAR基因表达对NCI-H520细胞增殖的影响; 通过动态观察瘤体的生长, 进一步验证CAR对肺癌的增殖是否有促进作用。  结果  筛选出抑制CAR基因表达效果最佳的一组shRNA, 并建立了能稳定而有效抑制CAR基因表达的肺鳞癌NCI-H520细胞系。平板克隆形成实验显示, shRNA-2抑制CAR基因表达后NCI-H520细胞的增殖能力有所下降, 但其差异无统计学意义（P>0.05）; 且在肿瘤形成实验中, 实验组瘤重显著低于对照组（P < 0.01）。  结论  裸鼠肺癌移植瘤模型构建成功, 为今后肺癌的研究奠定基础。利用RNAi有效抑制了CAR基因的表达, 并抑制NCI-H520细胞在裸鼠体内瘤体的生长, CAR有望成为肺癌基因治疗的靶点之一。      

STAT3基因RNAi诱导肝癌细胞凋亡及对STAT3信号转导相关基因表达的影响

背景与目的:探讨STAT3基因RNAi对人肝癌细胞SMMC7721凋亡的影响,及对STAT3信号转导相关基因表达的影响,为STAT3信号通路的肿瘤靶向治疗提供理论依据.材料与方法:采用RNAi技术特异性沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,通过Westem blot技术检测经RNAi作用后SMMC7721细胞STAT3蛋白表达水平的变化.采用透射电镜和流式细胞术检测经RNAi沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达后,对细胞凋亡的影响.通过半定量RT-PCR法检测细胞凋亡相关因子bcl-2和survivin基因表达的变化. 结果:STAT3基因RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达(P<0.05).STAT3的表达被RNAi沉默后,SMMC7721细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.01).且SMMC7721细胞bel-2和survivin mRNA的表达水平均受到明显抑制,与对照组间的差异均具有统计学意义(P<0.01). 结论:STAT3基因RNAi可有效沉默SMMC7721细胞中STAT3的表达,诱导SMMC7721细胞凋亡,下调SMMC7721细胞bcl-2、survivin mRNA的表达.     

沉默FANCD2对人头颈鳞癌SIHN-005A细胞化疗敏感度的影响及其机制北大核心CSCD

目的研究FANCD2 sh RNA干扰对人头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)细胞SIHN-005A化疗敏感度的影响,并初步探讨其可能机制。方法应用前期实验获得的FANCD2基因沉默效应稳定的人HNSCC SIHN-005A细胞,以嘌呤霉素持续筛选;Western blot检测沉默效应;CCK-8法检测顺铂作用后细胞增殖抑制率;Hoechst法检测细胞凋亡;Western blot检测Cyclin D1、Bax/Bcl-2、HIF-1α蛋白的表达。结果实验组细胞FANCD2蛋白表达明显下降,FANCD2蛋白沉默效率达60.5%。实验组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组和空白对照组,且具有浓度及时间依赖性,实验组细胞对CDDP的IC50值明显低于阴性对照组和空白对照组。FANCD2基因沉默后实验组细胞凋亡率明显增高。加用CDDP后,Cyclin D1、Bcl-2、HIF-1α蛋白表达水平较加用CDDP前明显下调,Bax蛋白明显增强。结论沉默FANCD2可增加SIHN-005A细胞对化疗药物CDDP的敏感度,其机制可能与FANCD2 sh RNA干扰引起Bax/bcl-2、Cyclin D1、HIF-1α的表达变化有关。     

RNAi抑制Survivin基因表达对宫颈癌SiHa细胞放射敏感性的影响

目的通过RNA干扰技术抑制宫颈癌SiHa细胞中Survivin基因的表达,观察其对X线敏感性的变化.方法构建Survivin短发卡RNA表达质粒pSurvivin-shRNA并转染入宫颈癌SiHa细胞,RT-PCR及Western印迹法分别检测Survivin mRNA及蛋白的表达情况,激酶活性检测法测定caspase-3活性变化,流式细胞仪法检测细胞凋亡率,克隆形成实验检测转染细胞放射敏感性的变化.结果与未转染细胞和转染阴性质粒细胞(SiHa/pNeg-shRNA细胞)相比,转染pSurvivin-shRNA质粒的SiHa细胞(SiHa/pSurvivin-shRNA细胞)中Survivin mRNA和蛋白表达明显下降;caspase-3活性明显增强,D405达1.34±0.05(P＜0.05);8 Gy的X线照射24 h和48 h后,SiHa/pSurvivin-shRNA细胞的凋亡率分别为(5.13±0.81)%和(11.27±1.89)%,明显高于SiHa/pNeg-shRNA细胞和未转染细胞(P＜0.05);克隆形成实验结果显示SiHa/pSurvivin-shRNA细胞的成克隆能力明显下降,对X线的敏感性明显增加.结论短发卡状RNA干扰技术阻抑宫颈癌SiHa细胞中Survivin基因的表达,增强caspase-3活性,可诱导细胞凋亡并促进SiHa细胞对X线的敏感性.     

NDRG 1基因与宫颈鳞癌发生发展及转移的关系

目的：探讨N-myc下游调节基因（N-mycdownstream reglated genel，NDRG1）与宫颈鳞癌发生发展及转移的关系。方法：采用免疫组织化学ABC法检测42例宫颈鳞癌组织、30例宫颈高级别上皮内瘤变组织、28例宫颈低级别上皮内瘤变组织及20例正常宫颈上皮组织中NDRGl蛋白的表达。RT-PCR检测10例新鲜宫颈鳞癌组织与10例正常宫颈上皮组织中NDRGlmRNA的表达。结果：宫颈鳞癌组织中NDRGlmRNA和蛋白的表达较正常宫颈上皮组织明显降低（P〈0．01）。从正常宫颈上皮到低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变、再到宫颈鳞癌的发生发展过程中NDRGl蛋白的表达水平逐渐降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。有转移的宫颈鳞癌组织中NDRGlmRNA与蛋白的表达较无转移组明显降低（P〈0．05）。结论：NDRGlmRNA与蛋白在宫颈鳞癌组织中的下调表达提示NDRGl基因可能与宫颈鳞癌的发生发展及转移有关。     

RNAi介导PEG10基因沉默对肝癌HepG2细胞Wnt/β-catenin信号通路及增殖的影响

目的 探讨PEG10基因对Wnt/β-catenin信号通路的影响在人肝癌发病机制中的作用,为肝癌的基因治疗提供新思路.方法 应用脂质体转染技术将靶向PEG10的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)转染HepG2细胞,利用半定量RT-PCR分别检测PEG10、β-catenin和Wnt1基因...     

口腔鳞癌中VCAM-1 mRNA表达对肿瘤相关巨噬细胞浸润、聚集的意义

目的: 分析口腔鳞状细胞癌组织中血管细胞黏附分子1 mRNA（vascular cell adhesion molecule1 mRNA,VCAM-1 mRNA）的表达与肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages, TAMs)计数的关系,探讨VCAM-1 mRNA在口腔鳞癌巨噬细胞浸润、聚集中的作用及意义。〖HT5W〗方法: 〖HT5"SS〗收集1999～2005年贵阳医学院附属医院口腔颌面外科手术切除的48例口腔鳞癌和10例正常口腔黏膜标本,应用分子原位杂交和免疫组化二步法分别检测口腔鳞癌组织中VCAM〖STBX〗1〖STBZ〗 mRNA的表达和TAMs的浸润情况,光镜下进行VCAM-1 mRNA表达的分级和TAMs计数,分析VCAM-1 mRNA表达和TAMs计数与临床病理指标的相关性。〖HT5W〗结果: 〖HT5"SS〗口腔鳞癌中VCAM-1 mRNA的表达率（70.83%）和TAMs计数（81.04±12.00）显著高于正常口腔黏膜组织（0,3980±7.84;P均<0.01）;口腔鳞癌中VCAM〖STBX〗1〖STBZ〗 mRNA 的表达与巨噬细胞计数呈正相关（P<0.05）,并与口腔鳞癌的浸润和淋巴结转移相关（P<0.05）。结论:TAMs在口腔鳞癌中的浸润、聚集可能受到VCAM〖STBX〗1的调节,并参与肿瘤的浸润和淋巴结转移。     

RNAi抑制Akt2基因表达对卵巢癌细胞系A2780放射敏感性的影响

背景与目的:许多研究已经表明蛋白激酶B(P13K/Akt)在肿瘤细胞恶性增殖及肿瘤对放化疗的拮抗中起着重要作用,Akt2是Akt家族成员之一.本研究应用RNAi(RNA interference,RNAi)技术抑制Akt2基因的表达,观察其对肿瘤细胞生长和放射敏感性的影响.方法:构建Akt2基因的短发卡状RNA质粒转染人卵巢癌细胞A2780,同时以转染空载体和未转染组作为对照,3组细胞命名为pAkt2-shRNA/A2780,pEGFP/A2780和A2780)运用RT-PCR、蛋白质免疫印迹方法比较转染前后Akt2表达的差异;四甲基偶氮唑蓝实验绘制细胞生长曲线;克隆形成实验观察细胞的放射敏感性变化,以克隆形成率表示;6 MV X线10 Gy照射后48 h收集细胞,流式细胞仪(FACS)分析细胞凋亡情况.结果:与对照相比,shRNA可抑制Akt2 mRNA转录和蛋白的表达,差异显著(P＜0.05);pAkt2-shRNA/A2780细胞生长明显慢于pEGFP/A2780和A2780细胞;pAkt2-shRNA/A2780细胞克隆形成率明显低于pEGFP/A2780细胞和A2780细胞(P＜0.05);pAkt2-shRNA/A2780,pEGFP/A2780和A2780细胞凋亡率分别为(78.3±2.2)%、(41.2±1.8)%和(40.4±2.0)%,差异有显著性(P＜0.05).结论:转染针对Akt2基因shRNA真核表达载体,抑制卵巢癌细胞中Akt2基因表达,能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,增强其对放射治疗的敏感性.     

NK/T细胞浸润对肺鳞癌患者生存与预后的影响

背景与目的:机体组织中自然杀伤细胞和细胞毒T淋巴细胞是构成机体细胞免疫的主导成分,对肿瘤组织必然有影响.本研究探讨NK/T细胞在肺鳞癌组织中的浸润程度及对患者生存与预后的影响.方法:将CD8作为细胞毒T淋巴细胞(CTL)的标记物,CD56作为自然杀伤细胞(NK)的特异性标记物,应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中NK/T细胞的分布和浸润情况.结果:68例肺癌中,CTL无/轻度浸润的者39例,5年生存率为18%;显著浸润者29例,5年生存率为42%;NK细胞无/轻度浸润者46例,5年生存率为14%,显著浸润者22例,5年生存率为45%;NK/T无轻度浸润者48例,5年生存率为33%,均显著浸润的20例,5年生存率为54%.经Log-rank检验,NK/T显著浸润组5年生存率显著高于无/轻度浸润组,差异有显著性(X2=18.62,P=0.00).结论:肺鳞癌组织中NK/T细胞显著浸润组的预后和生存时间明显优于轻度浸润组.其机制与机体细胞免疫有关.     

RNA干扰抑制Snail表达对A549细胞上皮-间充质转分化及体外侵袭的影响

目的:研究用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制转录因子Snail表达后,对人肺腺癌A549细胞上皮-间充质转分化表型和体外侵袭能力的影响.方法:构建能表达针对Snail的小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)的RNA干扰载体(Snail siRNA vector)和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNA干扰载体(control siRNA vector),分别转染A549细胞,新霉素抗性筛选得到Snail表达受抑制的A549-siSnail细胞和Snail表达未受影响的A549-siControl细胞.针对非转染(A549-nontransfection)、A549-siSnail、A549-siControl三组细胞,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测Snail、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘素表达,用Boyden chamber模型检测细胞侵袭能力.结果: A549-nontransfection组:Snail和α-SMA表达强阳性,E-钙粘素表达弱阳性；A549-siSnail组:和A549-nontransfection组相比,Snail和α-SMA表达显著减弱(P<0.01),E-钙粘素表达显著增强(P<0.01),Boyden chamber穿膜细胞数显著减少(P<0.01)；A549-siControl组:Snail、α-SMA和E-钙粘素表达,及Boyden chamber穿膜细胞数和A549-nontransfection组无显著差异(P>0.05).结论: 通过RNA干扰阻滞Snail表达能有效地抑制A549细胞上皮-间充质转分化及体外侵袭能力.Snail可能在肺腺癌上皮-间充质转分化及侵袭过程中扮演重要角色,抑制Snail表达可能成肺腺癌治疗的可行策略.