血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂对大鼠血浆纤溶活性的作用

目的　评价血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂 (芦沙坦 )对大鼠血浆t PA和PAI 1活性水平的影响。方法　给大鼠应用两种剂量芦沙坦 ,观察其对大鼠血浆t PA和PAI 1活性的作用。结果　小、大剂量芦沙坦组和对照组大鼠血浆PAI 1 t PA活性比值分别为 9 11± 2 5 5、11 5 7± 4 36和 11 90± 1 70 ,小剂量芦沙坦组血浆纤溶活性显著高于大剂量芦沙坦组和对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。大剂量芦沙坦组血浆PAI 1 t PA活性比值和对照组相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　芦沙坦能增强大鼠纤溶系统的活性     

重型流行性出血热22例血浆组织型纤溶酶原激活物及抑制物活性变化的临床意义

本文报道22例重型流行性出血热(EHF)血浆组织型纤溶酶原激活物(t—PA),其抑制物(PAL)活性、血浆纤溶酶(PL)活性在病程中的活动变化。结果EHF患者在发热期、少尿期七一PA与PL活性显著上升(P<0.01),PAL活性低于正常,t-PA/PAL比值显著升高(P<0.01)多尿期与恢复期t—PA与PAL的活性有所下降,PAL活性增强,t—PA与PAL比值低于发热期和少尿期(P<0.01),由此可见,EHF患者出血症状可能与t—PA活性增强,PAL活性下降,纤溶系统功能亢进有关。     

活血潜阳颗粒对自发性高血压大鼠血液流变学及纤溶系统活性的影响

目的探讨活血潜阳颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)血液流变学、纤溶系统活性的影响。方法SHR 72只,随机分为活血潜阳颗粒大、中、小剂量组及卡托普利组、松龄血脉康组、双蒸水组,并以正常血压Wistar(WKY)大鼠为对照组,给药10周后检测各组大鼠血液流变学指标、血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI)。结果与正常WKY大鼠比较,SHR全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数均明显升高,而经活血潜阳颗粒治疗后上述各项指标较SHR组有不同程度改善(P<0.05或P<0.01)。SHR PAI升高、t-PA降低,经活血潜阳颗粒灌服后PAI降低、t-PA升高(P<0.05或P<0.01)。结论活血潜阳颗粒对自发性高血压大鼠血液流变学、纤溶系统活性具有调节作用。     

克纤胶囊对急性肝损伤影响的实验研究

目的:观察克纤胶囊对四氯化碳及D-半乳糖胺(D-Gal)所致的实验鼠急性肝损伤肝功能指标的影响。方法:将大白鼠、小白鼠各60只,分别随机分为正常对照组、模型组、克纤胶囊高剂量组、克纤胶囊低剂量组、大黄虫胶囊对照组及联苯双酯阳性对照组。末次给药后1h,分别用四氯化碳、D-半乳糖胺造成实验小鼠/大鼠急性肝损伤模型,测定肝功能指标。结果:与模型组比较,克纤胶囊能显著降低ALT、AST值(P<0.05,P<0.01),与阳性对照组比较差别不显著(P>0.05)。结论:克纤胶囊具有保肝降酶作用。     

健胃喜食宝片促进消化功能动物试验研究

目的研究健胃喜食宝片促进动物消化功能的效果。方法将昆明种雄性小鼠随机分为空白组、模型对照组和3个剂量(0.53、1.06、1.60g/kgBW)的给药组。各剂量组分别连续经口给予受试样品15d,空白组和模型对照组给予实验用水。用复方地芬诺酯制造小鼠便秘模型,进行小鼠小肠运动试验,测定小鼠的墨汁推进率。将SD雄性大鼠随机分为空白组和3个剂量(0.265、0.53、1.06g/kgBW)的给药组。各剂量组分别连续经口给药30d,观察大鼠体重、体重增重、摄食量和食物利用率,测定大鼠的胃蛋白酶活性和排出量。结果健胃喜食宝片(1.06、1.60g/kgBW)能显著增加小鼠小肠墨汁推进率(P<0.01),能显著增加大鼠体重增重和摄食量,对食物利用率增加不明显。健胃喜食宝片(0.53、1.06g/kgBW)能显著增加大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量(P<0.01)。结论健胃喜食宝片具有促进消化功能,即能增进动物食欲和进食量,增加胃液和胃酶分泌量,增加动物体重,增进小肠蠕动;此外还具有润肠通便的功能。     

木棉花总黄酮对CCl_4致肝纤维大鼠ColⅠ表达的影响

目的研究木棉花总黄酮(TFG)对CCl4致肝纤维大鼠Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)mRNA和ColⅠ蛋白表达的影响。方法采用50%CCl4花生油溶液灌胃诱导Wistar大鼠肝纤维化造模,将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为模型对照组(模型组),秋水仙碱阳性对照组(阳性组),木棉花总黄酮高、中、低剂量组,另外设空白组,空白组和模型组给予等剂量的生理盐水,每日灌胃给药1次,连续4周。末次给药24 h后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中ColⅠmRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织ColⅠ蛋白质的表达,运用实时荧光定量PCR方法对肝组织ColⅠmRNA表达进行相对定量。结果 RT-PCR和实时荧光定量PCR结果均表明TFG能显著下调ColⅠmRNA的表达(P0.05,P0.01)。免疫组化结果显示,TFG能显著降低肝组织ColⅠ蛋白质的表达(P0.05,P0.01),且表现一定的剂量依赖性。结论 TFG对CCl4诱导的肝纤维大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其下调ColⅠmRNA及蛋白表达有关。     

心力衰竭与纤溶活性的相关性及药物干预效果的评价

目的 了解冠心病心力衰竭患者纤溶活性的变化并观察血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和利尿剂、洋地黄类对心衰患者纤溶活性的影响。方法测定80例老年冠心病心力衰竭患者和50例健康老年人(正常对照组)血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)活性、D-二聚体(D-D)和纤维蛋白原(Fg),并将80例心力衰竭患者随机分为常规治疗组和ACEI加常规治疗组。治疗14d复查上述指标。结果与正常对照组比较,心力衰竭组PAI-1活性、D-D、Fg升高,t-PA活性下降(P<0.01)。常规治疗组D-D、Fg、t-PA、PAI-1无显著变化,ACEI组D-D、Fg、PAI-1活性下降,t-PA活性升高(P<0.01)。两组治疗前后变化值比较差异显著(P<0.01)。结论老年冠心病心力衰竭患者D-D、Fg、PAI-1活性升高,t-PA活性下降;ACEI能改善冠心病心力衰竭患者的纤溶活性。     

硫酸皮肤素对大鼠血管纤溶酶原活化素释放的影响

用大鼠下肢血管床灌流模型,观察肝素样药物对纤维蛋白溶解系统的作用。结果表明,硫酸皮肤素(DS)能诱导大鼠肢体血管壁释放纤溶酶原活化素(PA)。DS浓度0.1～0.8mg/ml时,给药后1～2min内PA活性增高达最大值。DS在0.1～0.4mg/ml范围内时PA释放与DS浓度成正比,DS0.4mg/ml可诱导最大的PA释放反应。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和纤维蛋白自显影分析证实,DS诱导的是组织类型纤溶酶原活化素(t-PA),其分子量为67000。     

重组人尿激酶原与尿激酶对急性心肌梗死患者纤溶系统影响的比较

目的　对比观察注射用重组人尿激酶原(Pro- UK)对全身纤溶系统的影响。方法　将114 例符合溶栓标准的急性心肌梗死患者随机给予不同剂量的Pro UK或尿激酶(UK)进行溶栓。其中Pro -UK 30 mg及40 mg组26 例,50 mg组29例,60 mg组28例;UK组31例。观察溶栓前和溶栓开始后2、24、48 h血浆纤溶酶原(PLG)、D 二聚体(D D)、组织型纤溶酶原激活物(t PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)、纤维蛋白原(Fib)的变化以及出血并发症,并于溶栓开始后90 min进行冠状动脉造影,比较Pro UK和UK组溶栓后的血管开通率。结果　各用药组溶栓开始后2 h的PLG及PAI活性较溶栓前显著降低(P<0.01),而D D和t PA活性较溶栓前显著升高(P<0.01);UK组溶栓开始后2 h Fib较溶栓前显著降低(P<0.01),而Pro UK各剂量组Fib降低不明显;以上所有变化在溶栓开始后24 h基本恢复;溶栓开始后2 h Pro UK各剂量组的Fib明显高于UK组(P<0.01),其他时间点各用药组之间的所有观测指标均无显著差异;各用药组之间梗死相关血管开通率和出血并发症均无显著差异;溶栓开始后2 h梗死相关血管开通组的PAI显著低于未开通组(P<0.01),其他指标无显著差异。结论　UK溶栓后对全身纤溶系统激活较明显,与UK比较Pro -UK对全身纤溶系统无明显激活作用。     

组织型纤溶酶原激活剂及其抑制物的变化与冠心病的关系

目的：观察冠心病患者纤溶活性的变化及其在冠心病发病中的作用，探讨其临床意义。方法：用酶联免疫双抗夹心(ELISA)法测定58例冠心病患者血浆中组织型纤溶酶原激活剂(t—PA)及纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)抗原含量，反映纤溶-抗纤溶活性的变化，并对冠心病患者组与对照组纤溶指标进行不同性别间的比较。结果：急性心肌梗死、不稳定心绞痛患者PM-1的含量、PAI-1／t—PA比值明显高于对照组，且急性心肌梗死患者PM-1的含量较不稳定心绞痛患者显著为高。但t—PA在急性心肌梗死、不稳定心绞痛患者均无显著降低。患者组及对照组不同性别间纤溶及抗纤溶水平均未见有显著差异。结论：血栓性疾病与纤溶系统的异常有密切关系。纤溶系统活性的变化及纤溶-抗纤溶的平衡失调在缺血性心脏病的发生、发展中起着重要作用。     

云芝多糖对氧化修饰LDL抑制巨噬细胞一氧化氮产生的保护作用

通过测定巨噬细胞培养上清液中亚硝酸盐的含量和观察细胞内一氧化氮合酶（NOS）mRNA含量的变化，研究了云芝多糖（PSK）对氧化修饰LDL（Ox－LDL）抑制脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞NO产生的保护作用。结果显示，Ox－LDL可抑制LPS诱导的巨噬细胞NO产生，而正常（N－LDL）和乙酰化LDL（AC－LDL）则没有抑制作用。非特异性免疫调节剂PSK处理小鼠对Ox－LDL引起的巨噬细胞NO产生量下降具有保护作用。狭缝杂交结果显示，Ox－LDL可使LPS诱导的巨噬细胞NOSmRNA含量下降，PSK可保护巨噬细胞免受Ox－LDL引起的NOSmRNA含量下降。     

老化对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素3及其mRNA表达的影响

本实验测定老化对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素3(Interleukin 3,IL-3)和其基因表达的影响。结果5月龄与37月龄小鼠相比较,后者IL-3活性下降79.3％,IL-3mRNA水平下降74％,二者IL-3mRNA水平高峰均位于Con A刺激培养后20h。Northern印迹分析证明,4月龄与27月龄小鼠IL-3mRNA的位置均无移动。用ConA刺激4组不同年龄小鼠的脾淋巴细胞,比较其IL-2和IL-3活性及其mRNA水平,证明二淋巴因子随着年龄增加而逐渐下降的水平具有平行性。     

短暂性脑缺血发作患者纤溶功能研究

目的研究短暂性脑缺血发作(TIA)患者血浆纤溶功能的变化.方法对22例颈内动脉系统TIA患者血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其快速抑制物(PAI)的活性、D-二聚体(D-D)及纤维蛋白原(FbG)含量进行检测,并与对照组进行比较.结果 TIA组血浆t-PA活性明显低于对照组(P<0.05),而PAI活性和D-D及FbG含量则明显高于对照组(P<0.05).结论 TIA患者存在血浆纤溶功能异常,可能为TIA反复发作的一个重要因素.     

木棉花总黄酮对CCl4致肝纤维大鼠ColI表达的影响

目的研究木棉花总黄酮（TFG）对CCl。致肝纤维大鼠I型胶原蛋白（ColI）mRNA和ColI蛋白表达的影响。方法采用50％CCl4花生油溶液灌胃诱导Wistar大鼠肝纤维化造模,将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为模型对照组（模型组）,秋水仙碱阳性对照组（阳性组）,木棉花总黄酮高、中、低剂量组,另外设空白组,空白组和模型组给予等剂量的生理盐水,每日灌胃给药1次,连续4周。末次给药24h后处死大鼠,RT—PCR检测肝组织中ColImRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织ColI蛋白质的表达,运用实时荧光定量PCR方法对肝组织ColImRNA表达进行相对定量。结果RT—PCR和实时荧光定量PCR结果均表明TFG能显著下调ColImRNA的表达（P〈0．05,P〈0．01）。免疫组化结果显示,TFG能显著降低肝组织ColI蛋白质的表达（P〈0．05,P〈0．01）,且表现一定的剂量依赖性。结论TFG对ccl4诱导的肝纤维大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其下调ColImRNA及蛋白表达有关。     

云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞NO释放及抗氧化酶活性的影响

为探讨云芝多糖（PSK）预防动脉粥样硬化及防止氧化修饰低密度脂蛋白（O－LDL）对巨噬细胞的过氧化损伤的作用机理，考察了腹腔注射PSK对小鼠腹腔巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶（SOD）活性及一氧化氮（NO）释放的作用，及脂多糖（LPS）对这一作用的影响。结果显示腹腔注射PSK可以使小鼠腹腔巨噬细胞SeGSHPx酶活性、non－SeGSHPx及SOD活性升高；在LPS作用下可进一步升高上述酶活性，使NO释放量有较大增加。     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性的影响

为观察灵芝多糖（ＧＬＢ７）体外对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性的影响,采用反相离子对高效液相色谱法测定ＭΦ中ＲＫＡ活力。结果表明ＧＬＢ７（４０ｍｇ／Ｌ）能引起小鼠腹腔ＭΦ中ＰＫＡ活性明显升高,１０ｍｉｎ达峰值,３０ｍｉｎ恢复到基础水平。提示灵芝多糖的免疫增强作用与其增强ＭΦ中ＰＫＡ活性有关。     

射频消融对纤溶系统的影响及缬沙坦的干预作用

目的：探讨射频消融（RECA）对纤溶系统的影响及缬沙坦对RFCA术后患者纤溶系统的作用。方法：接受RFCA治疗的患者14例,在插管前,完成电生理标测放电前,放电后,术后48h及术后1周,对血浆组织型纤溶酶原激活物（t-PA)和激活抑制物（PAI－1）的活性和抗原含量进行系列检测。7例术后口服缬沙坦80mg/d,连服7天,其他患者作为对照组。结果：各纤溶指标插管前后比较均有显著差异（P＜0．05）,放电消融前后比较,t-PA活性和含量明显降低,PAI－1活性和含量均增高（P＜0．05）,术后48h与放电前后比较,各指标均恢复（P＜0．05）,术后1周,各指标均恢复到插管前水平（P＞0．05）,RFCA术后1周,加用缬沙坦组和对照组比较,t-PA活性提高明显（P＜0．05）,PAI－1活性和含量显著降低（P＜0．05）,而t-PA含量变化无差异（P＞0．05）,结论：RFCA可造成纤溶系统的破坏,使用缬沙坦有利于RFCA后纤溶系统的恢复。     

嗜酸性乳酸杆菌抗肿瘤作用的实验研究

接种肉瘤180,艾氏腹水癌和路易氏肺癌的小鼠,喂饲嗜酸性乳酸杆菌(Shahani 株)发酵乳后,小鼠肉瘤180和艾氏腹水癌生长受抑制。与对照组比较.差异明显(P<0.05).但它对路易氏肺癌自发性肺转移无影响。此外,发现 C_(57)BL/6小鼠喂饲该细菌发酵乳后,脾细胞和胸腺细胞对 ConA 刺激的增殖反应,腹腔巨噬细胞 C_(3b)受体活性以及脾细胞和腹腔渗出细胞所介导的对 L_979纤维母细胞瘤细胞的毒性作用都比对照组明显增强。     

不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层多孔支架的影响

目的: 探讨不同交联剂处理对脱细胞小肠黏膜下层(decellularized small intestinal submucosa, SIS)多孔支架理化性能及生物相容性的影响。方法: (1) 将新鲜SIS塑形为三维多孔支架并采用戊二醛(glutaraldehyde, GA)、碳二亚胺[1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide, EDC]和原花青素(procyanidine, PA)3种交联剂进行交联, 获得3组交联后支架, 分别为GA组、EDC组和PA组。(2)理化性能评价: 对3组多孔支架进行宏观形貌观察, 使用场发射环境扫描电镜进行微观形貌观察并测定孔径及孔隙率, 使用茚三酮法测定交联度, 使用酶促降解法评价抗降解性能, 使用万能力学测试机测定应力应变曲线及压缩强度。(3)生物相容性评价: 使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)法检测交联处理对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells, hBMSCs)增殖的影响, 使用Calcein-AM/PI活死细胞染色法评价交联处理后支架的细胞毒性。结果: 宏观形貌观察可见交联修饰未破坏支架三维结构; 微观形貌观察可见各组多孔支架具有大小均匀、相互连通的孔隙结构。EDC组孔径最大, 与另两组差异具有统计学意义(P < 0.05);PA组孔隙率最低, 与另两组比较差异有统计学意义(P < 0.05)。PA组交联度最高而溶胀率最低, EDC组溶胀率最高。EDC组和GA组的体外降解速率均高于PA组, 其中GA组降解速度最快, PA组抗降解能力最佳, 降解至第15天时3组质量丧失率间的差异有统计学意义(P < 0.05)。EDC组和GA组压缩强度近似, PA组压缩强度最高, 与另两组比较差异有统计学意义(P < 0.05)。GA组支架的细胞毒性最大, hBMSCs在EDC组和PA组支架上具有更好的增殖能力, 在GA组增殖较慢。结论: 3种交联剂处理均可达到较高的交联度, 经EDC和PA交联处理的SIS多孔支架在拥有较好理化性能的同时具有良好的生物相容性, 相比于GA是更有应用前景的交联处理方法。     

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血浆肾素活性(PRA)的方法学建立和临床应用评估

 目的    建立高血压患者血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)的检测方法,用于早期筛查高血压患者中的原发性醛固酮增多症(primary aldosteronism,PA)。方法    arginine 13C 15N作为内标,采用Phenomenex Kinetex C18柱(2.6 μm,100 mm×3.0 mm)进行分离,柱温55 ℃。流动相为0.2%甲醇水溶液和0.2%甲酸甲醇溶液,流速为0.5 mL/min,梯度洗脱。考察该方法的特异性、基质效应、携带污染、重复性、定量下限(lower limit of measuring interval,LLMI)、线性、不精密度、回收率、稀释一致性和血浆标本稳定性。采用LC-MS/MS方法测定296名表面健康人群(男性153名,女性143名,平均年龄48岁)及360名高血压患者(平均年龄52岁,确诊为PA 27例)的血浆样本PRA,并与放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)进行比较。结果    该方法通过了特异性、基质效应、携带污染、重复性的性能评价。PRA的检测线性范围为0.084 4～30.000 0 ng/mL;PRA的LLMI为0.084 4 ngmL-1h-1;日间和批内的不精密度变异系数(coefficient of variation,CV)均＜15%;准确度偏差均<15%,回收率为92.28%～102.62%;建立的生物参考区间为0.25～5.12 ngmL-1h-1 (立位);与RIA比较,结果相关性较好(r2=0.81,P＜0.05),但存在-18.5%的偏倚;LC-MS/MS所得PRA的醛固酮/肾素活性比值(aldosterone to renin ratio,ARR)对PA的诊断特异性与灵敏度分别为96.3%与91.0%,诊断性能更佳(AUC:0.983 vs.0.894)。结论    我们建立了准确检测PRA的LC-MS/MS方法,适合于临床早期快速筛查PA。