蛴螬对激光损伤兔血-视网膜屏障后视网膜TekA、p75NTR表达的影响

目的:探讨蛴螬促进激光损伤兔血-视网膜屏障后的修复作用及机理。方法:30只成年健康有色家兔随机分为正常对照组、模型对照组、蛴螬组。采用激光损伤血-视网膜屏障动物模型,在屏障损伤后1周及2周2个时相,观察蛴螬对兔血-视网膜屏障损伤修复情况、血-视网膜屏障组织形态结构及神经营养因子受体TrkA、p75NTR表达及影响。结果:蛴螬能促进损伤的血-视网膜屏障修复,减轻激光导致的视网膜组织及细胞形态学损伤,促进TrkA、p75NTR的表达,抑制视网膜细胞增殖与变性,从而改善视网膜功能。结论:蛴螬可能通过改善视网膜组织能量代谢,清除氧自由基,促进神经营养因子受体的表达,抑制视细胞增殖,从而起到保护血-视网膜屏障组织结构,促进损伤后功能恢复的作用。     

蛴螬对激光损伤兔血-视网膜屏障后视网膜白细胞介素-1表达影响的研究

目的:探讨蛴螬对兔光损伤视网膜变性白细胞介素-1(IL-1)表达的影响。方法:将30只实验性兔随机分成5组,分别为空白组、模型组、蛴螬低剂量组、蛴螬中剂量组、蛴螬高剂量组,每组各6只动物,12只眼。除空白组外,其余4组均建立光损伤视网膜变性模型,在给药7d、14d每组分别处死3只兔子后取材做IL-1免疫组化检测,计算机图像系统分析积分光密度值。结果:与模型组比较,蛴螬中、高剂量组的IL-1积分光密度降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:蛴螬通过降低IL-1的表达,抑制细胞炎症因子来发挥保护视网膜作用,中、高剂量组效果较好。     

当归-川牛膝水煎剂对自发性高血压大鼠血清ET-1、NO表达的影响＊

目的 观察当归-川牛膝水煎剂对自发性高血压大鼠（SHR）血压、血清中内皮素（ET-1）、一氧化氮（NO）表达的变化。方法 6周龄48只雄性SHR随机分为8组，分别是模型对照组、缬沙坦组、当归-川牛膝组和分离组（水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇和90%乙醇），每组6只，并将同周龄的WKY大鼠作为正常对照组，各给药组以灌胃方式给药，模型组和正常对照组给生理盐水，连续治疗4周。Elisa法检测血清中内皮素（ET-1）、一氧化氮（NO）表达水平。结果 模型组ET-1水平明显高于正常对照组，NO水平明显低于正常对照组，差异均具有统计学意义（P < 0.05）；缬沙坦组、当归-川牛膝组、30%醇洗组ET-1水平明显低于模型组，NO水平明显高于模型组，差异均具有统计学意义（P < 0.05）。结论 当归-川牛膝水煎剂及其提取物能有效降低SHR血清中ET-1水平，增加NO浓度，抑制血压升高。     

冰片促灯盏乙素透体外血-视网膜内屏障的作用研究＊

目的 观察不同比例冰片对灯盏乙素在体外血-视网膜内屏障的促透作用。方法 完成高效液相色谱-串联质谱联用（HPLC-MS/MS）检测灯盏乙素药物浓度的方法学开发和验证；体外培养大鼠视网膜血管内皮细胞，并用Transwell建立视网膜内皮细胞屏障模型；在体外血-视网膜内屏障模型的上室中给予含有不同比例冰片的灯盏溶液，分时段提取透屏障后的HBSS液，采用HPLC-MS/MS检测透屏障的下室HBSS液中灯盏乙素浓度。结果 ①自建HPLC-MS/MS检测灯盏乙素的方法特异性好，准确度、灵敏度高，各项方法学验证均符合2015版《中国药典》第四部中《9012生物样品定量分析方法验证指导原则》的要求。②建立体外血-视网膜内屏障模型成功，在体外内皮细胞屏障模型中，上室灯盏乙素浓度为100 μg·mL^-1，在2 h后，上室中未添加冰片的下室灯盏乙素药物透过浓度为8.82 μg·mL^-1，上室添加冰片分别为60 μg·mL^-1、120 μg·mL^-1、240 μg·mL^-1、480 μg·mL^-1的下室中的灯盏乙素药物浓度分别为9.50 μg·mL^-1、9.57 μg·mL^-1、11.30 μg·mL^-1、12 μg·mL^-1。在冰片浓度为480 μg·mL^-1时，下室中灯盏乙素的能达到最大浓度为12 μg·mL^-1。结论 ①灯盏乙素在HBSS中的含量检测方法学验证成功；②冰片可能具备促进灯盏乙素透体外血-视网膜内屏障模型的作用；③在上室的冰片药物浓度达到480 μg·mL^-1时，本研究灯盏乙素透过体外血-视网膜内屏障模型达到最大药物浓度。     

基于“玄府-络脉”理论探讨糖尿病视网膜病变血-视网膜屏障损伤

目前,针对恢复血-视网膜屏障（Blood-retina Barrier, BRB）损伤的治疗手段十分有限,而中医从BRB角度认识并以此指导治疗糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy, DR）也很少述及。BRB位于血液与视网膜神经组织间,是物质交换、信息交流的场所。BRB受损是DR的关键病理机制,是导致患者失明的关键原因。玄府与络脉是人体结构中最普遍的微观结构,承担着流通气血津液、津血互渗及运转神机的功能。文章针对BRB与玄府-络脉的形态、结构、功能进行相关性分析,并基于“玄府-络脉”理论提出玄府闭塞、玄府破损与目络瘀阻失荣是BRB受损的重要病机,从而确定“和玄”、通络、补虚的基本治疗原则。文章还总结了虫类药、辛味药等在治疗BRB损伤中的特色治疗作用。     

蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性视网膜厚度的影响

目的:探讨蛴螬提取物对视网膜光损伤的防护作用。方法:将30只实验性兔随机平均分为空白组、模型组、蛴螬低剂量组、蛴螬中剂量组、蛴螬高剂量组。除空白组外,其余4组均建立光损失视网膜变性模型,在给药14…d处死全部兔子后取材观察光镜和电镜下大鼠视网膜病理形态结构改变。结果:模型组视网膜变薄,蛴螬低剂量组与模型组相比,差别无统计学意义(P0.05),蛴螬中、高剂量组视网膜外核层细胞厚度增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中、高剂量蛴螬提取物对光损伤所致视网膜变性有保护作用。     

蛴螬提取物对实验性兔视网膜静脉阻塞HGF、VEGF表达的影响

目的:评价蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞的治疗作用及其机制。方法:将40只兔随机分为空白组、模型组、复方血栓通组、蛴螬提取物组各10只,除空白组外,其余3组均用光化学动力法建立视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)动物模型,于给药后1wk、3wk行HE染色、免疫组化观察HGF、VEGF表达。结果:各造模组HGF与VEGF表达与空白组相比均上调,蛴螬提取物组与复方血栓通组表达最弱,模型组表达最强,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:蛴螬提取物可改善视网膜缺血缺氧的状态,抑制RVO模型中HGF、VEGF的表达。     

蛴螬对实验性视网膜静脉阻塞兔HSP70表达的影响及意义

目的观察蛴螬对实验性视网膜静脉阻塞兔HSP70表达的影响。方法采用激光光凝视网膜中央静脉造模，免疫组化法观察兔HSP70的表达。结果2组均造模成功，蛴螬组HSP70表达的平均光密度值较其他各组高，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论蛴螬对实验性视网膜静脉阻塞有保护作用，其机制可能与HSP70表达增强有关。     

枸杞丹参对RCS大鼠视网膜组织中Bcl-2、Bid表达的影响＊

目的 观察枸杞加丹参对视网膜色素变性大鼠视网膜Bcl-2、Bid表达的影响。方法 实验对象分五组。空白组：RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠,8只,雌雄均4只,（n = 8）,灌胃生理盐水;将RCS（rdy-/-,p-/-）雌性及雄性大鼠均随机分为4组,分别为：模型组、枸杞组、丹参组和枸杞加丹参组（杞参组）,每组雌雄均4只,每组8只,分别给予灌胃生理盐水、生理盐水、枸杞、丹参、枸杞加丹参。灌胃28天后,免疫组化、Real-time PCR、WB检测各组RCS大鼠视网膜Bcl-2、Bid的相对表达量。结果 ①免疫组化检测显示：RCS（rdy-/-,p-/-）杞参组大鼠视网膜上Bcl-2蛋白阳性表达较RCS（rdy-/-,p-/-）大鼠模型组明显增多;RCS（rdy-/-,p-/-）杞参组大鼠视网膜上Bid蛋白阳性表达较RCS（rdy-/-,p-/-）大鼠模型组明显减少,但较RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠空白组多。②RT-qPCR检测显示：RCS（rdy-/-,p-/-）杞参组Bcl-2 mRNA相对表达量明显高于RCS（rdy-/-,p-/-）模型组,差异有统计学意义（P < 0.05）,且接近RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠空白对照组。RCS（rdy-/-,p-/-）杞参组Bid mRNA相对表达量明显低于RCS（rdy-/-,p-/-）模型组,差异有统计学意义（P < 0.05）,且接近RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠空白对照组。③WB检测显示：RCS（rdy-/-,p-/-）杞参组Bcl-2蛋白相对表达量明显高于RCS（rdy-/-,p-/-）模型组,差异有统计学意义（P < 0.05）,且接近RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠空白对照组。RCS（rdy-/-,p-/-）杞参组Bid蛋白相对表达量明显低于RCS（rdy-/-,p-/-）模型组,差异有统计学意义（P < 0.05）,且接近RCS（rdy+/+,p+/+）大鼠空白对照组。结论 视网膜色素变性经典动物模型RCS(rdy-/-,p-/-）大鼠视网膜组织中Bcl-2表达下降、Bid表达上升;枸杞加丹参灌胃促进RCS(rdy-/-,p-/-）大鼠视网膜抗凋亡因子Bcl-2表达上调,同时,下调促凋亡因子Bid表达,在抗线粒体凋亡途径上减轻视网膜色素变性大鼠的视网膜细胞凋亡,从而保护视功能。     

蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性Bax、Caspase-3表达的影响

目的探讨蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性Bax、Caspase-3表达的影响。方法将30只实验性兔随机分成5组,分别为空白组、模型组、蛴螬低剂量组、蛴螬中剂量组、蛴螬高剂量组,每组都是6只动物,12只眼。除空白组外,其余4组均建立光损伤视网膜变性模型,在给药14 d处死全部兔子后取材做Bax、Caspase-3免疫组化检测,计算机系统图象分析结果并进行统计分析。结果与模型对照组比较,蛴螬中、高剂量治疗组的Bax、Caspase-3积分光密度增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论蛴螬通过增加Bax、Caspase-3的表达,抑制细胞凋亡受体信号通路来发挥保护视网膜作用,中、高剂量组效果较好。     

加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织NGF表达的影响

[目的]观察加减地黄饮子预处理对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响及其可能的神经元保护机制.[方法]采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型(MCAO).120只Wistar大鼠随机分成6组,每组20只.连续灌胃7 d后进行手术操作.苏木一伊红(HE)染色法观察大鼠脑组织病理学改变;免疫组织化学法观察大鼠脑组织NGF的表达.[结果]加减地黄饮子低剂量、高剂量组均能保护梗死区神经细胞,细胞结构较完整;增强梗死区脑组织NGF的表达.[结论]加减地黄饮子预处理可对局灶性脑缺血大鼠脑组织神经元起保护作用,其脑保护作用机制可能与调节大鼠脑组织NGF表达及保护梗死区神经细胞结构有关.     

天然麝香对体外培养大鼠视网膜神经细胞的影响

目的:探讨天然麝香对大鼠视网膜神经细胞存活的影响.方法:将4组不同浓度的天然麝香加入大鼠视网膜神经细胞混悬液中,于第2、4日行MTT比色以评价天然麝香对大鼠视网膜神经细胞存活的影响;在以上4组天然麝香中加入定量的m-NGF同法评价天然麝香 m-NGF对大鼠视网膜神经细胞存活的影响.结果:天然麝香对培养2、4天的大鼠视网膜神经细胞的存活无明显影响;在加入定量m-NGF的条件下,天然麝香在0.075g/L和0.100g/L的浓度下明显促进了培养2、4天的大鼠视网膜神经细胞的存活(P<0.05).结论:天然麝香无直接促进视网膜神经细胞存活的作用,但与NGF对于增进视网膜神经细胞的存活具有协同作用.     

聚焦超声对豚鼠慢性湿疹模型皮肤NGF和SP蛋白表达的影响

目的：观察聚焦超声辐照对神经生长因子（NGF）和P物质（SP）在豚鼠慢性湿疹模型皮肤表达变化的影响.方法：将40只豚鼠随机分成2组,正常组和建模组,每组20只.建模组用2,4-二硝基氯苯制作慢性湿疹动物模型后,自身空白对照,用功率2W聚焦超声辐照一侧,作为辐照组,另一侧空照,作为对照组.超声辐照前,正常组和建模组取皮肤活检,超声辐照后14天,辐照组和对照组取皮肤活检.用SP免疫组化法观察NGF和SP的表达变化.结果：正常组NGF和SP主要表达于表皮中上层,阳性染色浅黄色至棕黄色.建模组,皮损中NGF和SP表达于表皮全层,阳性染色呈棕黄色至棕褐色,明显高于正常组（P〈0.001）.超声辐照后14天,辐照组NGF和SP表皮角质形成细胞阳性染色变淡,而对照组无明显改变（P〈0.001）.NGF和SP二者阳性表达呈正相关（P〈0.05）.结论：在慢性湿疹豚鼠模型中,表皮角质形成细胞NGF和SP表达增强.聚焦超声辐照后表皮角质形成细胞NGF和SP的分泌和表达明显降低.     

电针对面神经损伤后再生室中神经生长因子的影响

目的 :了解电针对面神经损伤后再生微环境中神经营养因子 (NGF)的影响。方法 :采用同龄成年健康的新西兰兔 50只 ,随机分为针刺组和对照组 ,均在 3 %的戊巴比妥钠静脉麻醉下 ,分离暴露面神经上颊支 ,在手术放大镜下切断神经 ,用硅胶管将两断端嵌入并缝合固定 ,形成再生室。针刺组于术后当天完全醒后开始接受电针治疗 ,每天 1次 ,对照组不作任何处理。术后3天、5天、7天、1 0天、1 4天分别处死 1 0只动物 ,针刺组与对照组各 5只。抽取再生室内液体 ,两组对照。结果 :在伤后 3～ 7天 ,针刺组和对照比较再生室内NGF浓度差别无显著性 (P >0 .0 5) ,接受电针治疗 1 0天和 1 4天 ,针刺组再生室内NGF浓度比对照组高 (P <0 .0 1 ) ,伤后第 7天 ,针刺组和对照组再生室内NGF浓度均达到峰值 ,但对照组在伤后 2周开始降低 ,针刺组仍保持在较高的水平。结论 :电针对面神经损伤后再生微环境中神经生长因子 (NGF)的浓度有提高其水平和维持平稳水平的作用 ,这可能是电针刺激促进周围神经再生机理的一方面     

藏荆芥提取物对脑出血大鼠AQP-4及NGF表达的影响

目的:研究藏荆芥提取物治疗脑出血模型大鼠脑水肿和脑血肿的作用,并探讨其可能的机制。方法:采用胶原酶注射尾状核法建立脑出血大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、藏荆芥高、中、低剂量(6.4,3.2,1.6 g·kg~(-1))组、尼莫地平组。各组大鼠自给药开始计时,7 d后观察大鼠行为,通过Longa评分法对各组大鼠进行神经行为学评分;之后处死大鼠,取大鼠出血侧大脑半球测定湿重,烘干后测定干重,通过多田公式计算大鼠脑含水量;取大鼠脑组织并制作成切片,观察切片测定大鼠的脑血肿体积;并采用免疫荧光法检测大鼠脑部的水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达情况。结果:藏荆芥提取物可以明显减轻脑出血大鼠的神经行为学评分(P0.05,P0.01),藏荆芥大剂量组可以明显减轻脑水肿(P0.05,P0.01),但对血肿的清除并无明显作用。与模型组比较,藏荆芥使大鼠脑部AQP-4的表达显著降低以及NGF的表达明显增加(P0.05)。结论:藏荆芥提取物能改善脑出血模型大鼠的神经行为,有减轻脑出血模型大鼠脑水肿的作用,藏荆芥通过抑制大鼠脑部AQP-4的表达,促进NGF的表达,从而治疗大鼠的脑出血。     

青蒿琥酯对糖尿病大鼠视网膜MMP-9表达的影响

目的检测大鼠视网膜基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制因子基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达量的变化,探讨青蒿琥酯在糖尿病视网膜病变过程中的作用。方法将24只大鼠随机分为对照组(n=6)、模型组(n=9)和青蒿琥酯组(n=9),采用链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,3个月后,给予青蒿琥酯ip 10 d后,摘除眼球,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测视网膜MMP-9及TIMP-1 mRNA相对表达量,免疫组化法检测MMP-9蛋白在视网膜组织中的表达情况。结果青蒿琥酯组大鼠视网膜MMP-9 mRNA的相对表达量明显低于模型组,而TIMP-1的相对表达量高于模型组,差异显著(P0.05),免疫组化检测发现,青蒿琥酯组大鼠视网膜MMP-9的阳性表达率低于模型组(P0.05)。结论青蒿琥酯具有抑制糖尿病视网膜病变MMP-9表达的作用。     

电针对糖尿病周围神经病变模型大鼠外周血流灌注量及其坐骨神经NGF受体表达的影响

目的:通过腹腔注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)建立痛性糖尿病周围神经病变(Painful Diabetic Neuropathy,PDN)模型,探讨电针对PDN的治疗作用机制。方法:采用PDN组大鼠腹腔注射STZ建立糖尿病模型,观察各组大鼠的行为反应,各大鼠的一般情况、血糖、痛阈,处死前检测大鼠周围血流灌注量,于处死后采用免疫组化法检测大鼠坐骨神经神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF)受体的表达,进而初步探讨电针治疗PDN大鼠的部分机制。结果:与空白组比较,模型组大鼠周围血流灌注量、NGF受体的表达明显降低,电针组大鼠血流灌注量、NGF受体的表达增加,并且电针2组较电针1组血流灌注量、NGF受体的表达增加较多。结论:电针可以提高PDN模型大鼠的痛阈,增加大鼠周围血流灌注量,电针可以增加PDN模型大鼠坐骨神经NGF受体的表达,从而对损伤的坐骨神经起到修复的作用,电针能够改善PDN模型大鼠坐骨神经的病理形态和超微结构,对神经具有保护作用。     

虎杖苷对ADMA作用的正常兔主动脉血管条内皮功能的影响

目的 研究虎杖苷(PD)与非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对正常兔主动脉血管条内皮功能的影响及PD与ADMA之间的相互作用。方法 通过绘制主动脉条在ADMA与PD分别作用和共同作用时对苯肾上腺素(PE)的收缩量一效曲线，计算并比较Emax和Kd值。结果正常主动脉条对ADMA无反应，PD或ADMA预处理后亦不影响其对PE的收缩反应。但PD使受ADMA预处理的主动脉条对PE的收缩反应呈剂量依赖性减弱,并引起Kd值增大、Emax减小。结论 ADMA或PD单独作用并不影响正常主动脉条的收缩功能及PE对α-受体的亲和力和Emax；但在ADMA存在时,PD能非竞争性拮抗主动脉条对PE的收缩反应。     

四君子汤及其纳米制剂对脱污染小鼠肠屏障的影响

目的:研究四君子汤及其纳米制剂对抗生素脱污染小鼠肠屏障的影响。方法 :应用林可霉素灌胃制备小鼠肠屏障损伤模型,然后应用常态四君子汤(水提液,15g/kg)及纳米四君子汤(3g/kg)进行治疗,同时设正常、阳性对照丽珠肠乐及自然恢复组,于给药7天后处死小鼠,进行肠道菌群定量分析、同时检测肠粘膜sIgA及肠组织DAO含量。结果:林可霉素灌胃3天后,小鼠肠道菌群失调,肠粘膜sIgA和肠组织DAO含量均较正常对照组减少(P<0.01),持续7天治疗后,和自然恢复组比较肠道双歧杆菌和乳酸杆菌菌量明显上升,肠粘膜sIgA及肠组织DAO的含量明显升高。各治疗组间比较纳米四君子汤的效果要好于常态四君子汤和丽珠肠乐。结论 :四君子汤纳米化后能扶植肠道正常菌群生长,修复损伤的肠粘膜,增强肠粘膜免疫功能,且效果优于常态中药。     

针刺对慢性高眼压兔视网膜Bcl-xl、BDNF表达的影响

目的:探讨针刺对青光眼视神经的保护作用及作用机制。方法:以大耳白兔为实验动物,通过前房内注射复方卡波姆溶液造成实验性青光眼模型。28d后,通过滤过性手术使眼压恢复正常。20只(40只眼)大耳白兔分层随机分为模型组、针刺组、神经营养剂组,并设正常对照组,每组5只,眼数为10只。针刺组穴取双侧"球后""风池""行间",每日早、晚各针1次;神经营养剂组给予维生素B1100mg、维生素B12500μg肌肉注射,每日1次;其他组不做治疗处理。治疗4周后,观察各组兔视网膜组织凋亡抑制基因(Bcl-xl)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化。结果:实验结束时,与模型组相比,针刺组视网膜组织Bcl-xl、BDNF表达分别为(31.20±5.97)个/mm2、(6.3±1.89)个/mm2,显著高于模型组的(26.70±4.32)个/mm2、(4.0±1.89)个/mm2,两组相比,差异有统计学意义(均P0.05)。结论:针刺能上调青光眼模型兔视网膜Bcl-xl和BDNF的表达,从而保护高眼压损害的视神经。