高糖环境中吡格列酮对MC3T3-E1成骨细胞的作用及其机制

目的观察高糖环境下吡格列酮对MC3T3-E1成骨细胞的作用并探讨其可能机制。方法高糖(22.5 mmol·L~(-1))环境培养MC3T3-E1细胞,分为对照组,吡格列酮2.5、5、10μmol·L~(-1)组,干预24、48 h。检测细胞增殖活性、凋亡率、骨钙素和碱性磷酸酶(ALP)分泌水平,以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、成骨因子runt相关基因2(Runx2)和骨形态蛋白2(BMP-2)mRNA的表达水平。并分析PPARγ、Runx2的表达与骨钙素、ALP、BMP-2的相关性。结果在相同干预时限,吡格列酮各组MC3T3-E1成骨细胞增殖活性、骨钙素和ALP的分泌水平、Runx2 mRNA和BMP-2 mRNA的表达均低于对照组,凋亡率和PPARγmRNA的表达高于对照组(P<0.05)。随吡格列酮浓度增加,细胞增殖活性、骨钙素和ALP的分泌、Runx2 mRNA和BMP-2 mRNA的表达均降低,而细胞凋亡率和PPARγmRNA的表达增高(P<0.05)。与干预24 h相比,干预48 h时相同浓度吡格列酮组细胞增殖活性,骨钙素和ALP的分泌水平,PPARγ、Runx2、BMP-2 mRNA的表达或无变化或略增加。结论高糖环境下吡格列酮对成骨细胞有损害作用,促进PPARγ表达、抑制Runx2的表达可能为其作用机制之一。     

初级纤毛对蛇床子素促进成骨细胞成骨性分化的影响

目的 研究初级纤毛对蛇床子素促进成骨细胞成骨性分化的影响。方法 取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,免疫荧光染色观察成骨细表面初级纤毛,RNA干扰法抑制鞭毛运输系统蛋白(IFT88)的表达,从而抑制成骨细胞初级纤毛的产生。以浓度为1×10^-6 mol·L^-1蛇床子素分别作用于RNA干扰成骨细胞,3,6 d后检测胞内碱性磷酸酶(ALP)活性;药物处理24 h后,Real-time PCR检测1型胶原(collagen 1,COL-1)、RUNX-2、ALP mRNA的表达量;Western blot检测COL-1、RUNX-2蛋白表达量。结果 超过70%的成骨细胞表面具有长度约为5 μm的初级纤毛,RNA干扰法显著抑制IFT88基因和蛋白的表达,并抑制了初级纤毛的发生。1×10^-6 mol·L^-1蛇床子素能够显著地促进胞内ALP的活性,成骨性分化相关的因子COL-1、RUNX-2和ALP基因的表达也相应增高,同时COL-1、RUNX-2蛋白表达量显著增加。当成骨细胞初级纤毛干扰后,药物促进ALP活性升高的作用消失,COL-1、Runx-2基因和蛋白的表达量也相应的降低。结论 成骨细胞初级纤毛的去除,能够显著性地抑制蛇床子素促进成骨细胞成骨性分化的能力。     

葡萄糖对成骨样细胞MG63增殖及相关基因表达的影响

目的 探讨葡萄糖对成骨细胞株MG63增殖及细胞相关基因表达的影响.方法 以不同浓度葡萄糖干预细胞株MG63(干预组),设磷酸缓冲盐溶液(PBS)为对照(对照组).应用细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;应用生化分析仪检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的含量;应用RT-PCR检测骨钙素(OCN)、骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)基因的表达.结果 与对照组相比,干预组细胞增殖受抑制(P＜0.01),ALP活性降低(P＜0.05),OCN和OPG表达减弱(P＜0.05),而RANKL的表达增强(P＜0.05).结论 高糖环境可抑制成骨细胞增殖、分化和基质成熟,同时下调OPG、上调RANKL的表达,可能是糖尿病性骨质疏松的重要发病机制之一.     

血府逐瘀胶囊联合非洛地平治疗老年冠心病心绞痛的临床研究

目的 观察重楼皂苷I（PPI）对磷酸三钙（TCP）磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤的影响,并探讨其调控机制。方法 通过消化法从SD大鼠颅骨中获得原代成骨细胞,应用碱性磷酸酶（ALP）染色鉴定成骨细胞。TCP磨损颗粒（0.1 mg/mL）与成骨细胞共孵育48 h制备成骨细胞损伤模型,实验随机分为对照组、模型组和PPI（30、100 μg/mL）组。CCK-8和化学比色法分别测定成骨细胞活力和上清液中乳酸脱氢酶（LDH）水平;实时荧光定量PCR法检测成骨细胞中ALP、I型胶原（Collagen I）和Runt相关转录因子2（RUNX2）mRNA水平;Annexin-V/PI染色经流式细胞术定量分析成骨细胞凋亡情况;应用茜素红S染色观察成骨细胞矿化结节形成;Western blotting法检测成骨细胞中Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、Atg5、p62和微管相关蛋白1轻链3（LC-3）蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组成骨细胞活性降低,特征蛋白ALP、Collagen I、RUNX2 mRNA水平及矿化结节形成显著减少,LDH释放量、细胞凋亡和Bax、cleaved Caspase-3、Atg5和LC-3等蛋白表达及LC-3II/LC-3I值明显增加,而Bcl-2和p62蛋白表达显著减少;与模型组比较,PPI各组成骨细胞活性升高,ALP、Collagen I和RUNX2 mRNA水平和矿化结节形成明显增加,LDH释放和细胞凋亡显著减少,Bax、cleaved Caspase-3、Atg5和LC-3蛋白表达及LC-3II/LC-3I值也明显减少,而Bcl-2和p62蛋白表达显著增加。结论 PPI可通过抑制自噬的活化而减轻TCP磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤。     

辛伐他汀对成骨细胞分化和成骨基因的影响

目的 探讨辛伐他汀对成骨细胞分化及成骨基因表达的影响.方法 选取成骨肉瘤细胞株 MG-63,采用不同浓度辛伐他汀（0.0625、0.125、0.25、0.5和 1.0 μmol/L）处理成骨细胞,ALP活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量 RT-PCR和免疫印迹检测细胞成骨基因 mRNA的表达.结果 通过不同浓度辛伐他汀处理成骨细胞后,不同浓度辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞ALP 活性差异均有统计学意义 （ P〈0.05）,其中 0.25 μmol/L 浓度组作用对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最为显著.采用 0.25 μmol/L辛伐他汀处理成骨细胞后,辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞骨钙蛋白、ALP、I型胶原 mRNA表达差异均有统计学意义 （ P〈0.05）.结论 辛伐他汀可能通过上调成骨基因mRNA的表达水平来促进其分化,这为他汀类药物治疗骨质疏松症提供新的干预靶点.     

葛根素基于内质网蛋白核心 /信号分子 /C/EBP同源蛋白通路对脂多糖诱导成骨细胞骨保护素及核因子 -κB受体 mRNA表达的影响

目的 探讨基于内质网蛋白核心/信号分子/C/EBP同源蛋白(GRP78/PERK/CHOP)通路研究葛根素对脂多糖(LPS)诱导成骨细胞骨保护素(OPG)和核因子-κB受体(RANKL)mRNA表达的影响.方法 体外培养小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,采用随机数字表法分为对照组、模型组、4-苯基丁酸钠盐(内质网应激抑制剂,4-PBA)组、葛根素组、葛根素+4-PBA组,除对照组,其余各组以LPS处理MC3T3-E1细胞建立成骨细胞炎症模型,以茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别检测各组细胞矿化结节相对比例、ALP活性,判定细胞成骨分化情况;以酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测各组细胞培养基上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;以实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组细胞成骨相关基因(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)mRNA水平及OPG、RANKL mRNA水平;以免疫印迹检测细胞GRP78、PERK、CHOP蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例[(8.23±1.18)％比(100.00±0.00)％]、ALP活性[(0.49±0.12)U/mgprot比(1.57±0.35)U/mgprot]、细胞Runx2[(0.41±0.05)比(1.01±0.13)]、OPN[(0.39±0.04)比(1.02±0.15)]、OCN[(0.40±0.03)比(0.99±0.14)]及OPG mRNA[(0.41±0.11)比(1.03±0.17)]水平明显降低(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α[(602.43±20.01)pg/mL比(381.86±18.16)pg/mL]及IL-6水平[(483.63±16.61)pg/mL比(280.15±11.18)pg/mL]、细胞RANKL mRNA[(3.03±0.62)比(0.99±0.13)]水平及GRP78[(1.31±0.24)比(0.19±0.05)]、PERK[(1.23±0.27)比(0.33±0.08)]、CHOP蛋白[(1.21±0.28)比(0.31±0.07)]表达明显升高(P<0.05).与模型组相比,4-PBA组、葛根素组、葛根素+4-PBA组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例、ALP活性、细胞Runx2、OPN、OCN及OPG mRNA水平均升高(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α及IL-6水平、细胞RANKL mRNA水平及GRP78、PERK、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05).与4-PBA组、葛根素组分别相比,葛根素+4-PBA组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例、ALP活性、细胞Runx2、OPN、OCN及OPG mRNA水平均升高(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α及IL-6水平、细胞RANKL mRNA水平及GRP78、PERK、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05),4-PBA组与葛根素组上述各项指标比较均差异无统计学意义(P>0.05).结论 葛根素可上调OPG mRNA水平,下调RANKL mRNA水平,降低LPS诱导的成骨细胞炎症反应,拮抗LPS对成骨细胞成骨分化的抑制作用,可能是通过下调GRP78/PERK/CHOP通路实现的.     

葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响

目的观察葛根素对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化及TRPM3 mRNA表达的影响。方法分别采用CCK-8法、碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色测定葛根素对MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化、矿化作用的影响。流式细胞术检测葛根素对MC3T3-E1细胞周期及细胞内钙离子浓度的影响。RT-PCR检测葛根素对TRPM3基因m RNA表达的影响。结果 0.1、1、10μmol·L~(-1)葛根素能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,使G1期细胞比例减少,G_2+S期细胞比例增加,其中0.1μmol·L~(-1)浓度效果最为明显;与正常对照组相比较,0.1μmol·L~(-1)葛根素组细胞的ALP活性和矿化结节面积均明显提高;0.1μmol·L~(-1)葛根素组细胞的TRPM3 m RNA表达水平和细胞内钙离子浓度明显降低。结论葛根素可促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化,可降低TRPM3 mRNA表达水平和细胞内钙离子浓度。     

罗汉果苷V通过Wnt/β-catenin信号通路对糖尿病状态成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探索罗汉果苷V(mogroside V,MV)对糖尿病状态下成骨细胞增殖分化的影响及其可能的作用机制。方法:构建糖尿病大鼠模型,分离培养正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞。CCK8法检测不同质量浓度MV对糖尿病大鼠成骨细胞的毒性和增殖活性,并筛选出适宜的MV浓度用于后续实验;取正常大鼠和糖尿病大鼠下颌骨成骨细胞,分别设立正常对照组、高糖组及MV+高糖组,茜素红染色及定量分析检测成骨分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关因子ALP、OCN及Wnt/β-catenin信号通路相关因子Runx2,β-catenin,Axin2,Lef1及Osterix的mRNA表达。结果:0~0.4 g·L^-1质量浓度范围内MV对糖尿病状态成骨细胞均未表现出毒性,且浓度为6.25×10^-3g·L^-1时促进细胞增殖活性最强;与高糖组相比,MV+高糖组(含质量浓度为6.25×10^-3g·L^-1 MV)成骨分化能力增强,ALP、OCN、Runx2、β-catenin、Lef1、Osterix的表达显著升高,Axin2的表达显著降低。 结论:罗汉果苷V可促进糖尿病状态成骨细胞增殖与分化,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

罗格列酮对高糖诱导的β细胞胰岛素分泌功能的影响

目的 探讨罗格列酮对高糖诱导的β细胞胰岛素分泌功能及胰腺十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)mRNA表达的影响.方法 应用正常浓度葡萄糖、正常浓度葡萄糖 罗格列酮、高浓度葡萄糖、高浓度葡萄糖 罗格列酮培养RIN-m细胞(大鼠胰岛细胞瘤细胞系).采用放射免疫的方法检测胰岛素水平,RT-PCR方法检测PDX-1及胰岛素mRNA表达水平.结果 (1)长期高糖培养引起RIN-m细胞胰岛素分泌水平降低(P<0.01).长期高糖作用使RIN-m细胞PDX-1及胰岛素mRNA的表达水平显著下降(P<0.01).(2)罗格列酮早期干预可以增加高糖环境下RIN-m细胞胰岛索分泌水平(P<0.01).罗格列酮早期干预可以显著上调高糖环境下RIN-m细胞PDX-1及胰岛素mRNA的表达水平(P<0.01).结论 罗格列酮可以通过上调PDX-1和胰岛素基因表达,延缓高糖环境下的β细胞胰岛素合成和分泌功能的下降.     

啤酒花经抗氧化途径减轻Aβ损伤成骨细胞作用研究

目的 探讨啤酒花改善β-淀粉样蛋白（Aβ）损伤成骨细胞的骨形成作用及其机制。方法 以新生24 h Wistar大鼠所分离的成骨细胞为研究对象,用Aβ_1-42寡聚体对成骨细胞进行损伤,并用啤酒花提取物进行药物干预。分别采用MTT法、碱性磷酸酶（ALP）活性检测以及茜素红染色法评价成骨细胞的增殖、分化及骨矿化水平,流式细胞仪检测成骨细胞凋亡。采用蛋白质印迹法检测骨形成相关蛋白及氧化应激Nrf2、FoxO1通路蛋白的表达水平,并用免疫荧光检测FoxO1蛋白的入核表达。结果 啤酒花提取物可显著促进Aβ损伤成骨细胞的增殖,提高ALP活性及骨矿化结节水平,抑制细胞凋亡率,并促进骨形成相关蛋白I型胶原酶（COL-I）及骨桥蛋白（OPN）的表达。此外,啤酒花提取物可显著激活Aβ损伤成骨细胞的Nrf2和FoxO1信号通路,促进该氧化应激信号通路相关蛋白的表达,通过抗氧化维持骨代谢平衡。结论 本研究表明啤酒花具有减轻Aβ损伤成骨细胞的作用,初步阐明其作用机制与抗氧化有关,为抗骨质疏松作用机制及药物研发提供了新思路。     

金属钴、铬离子对成骨细胞ALP活性及I型胶原表达的影响

目的：观察钴、铬离子对小鼠成骨细胞（MC3T3E1）的碱性磷酸酶（ALP）活性及I型胶原蛋白合成的影响,探讨钴、铬离子对成骨细胞的生物学作用。方法试验分为对照组（成骨细胞培养液无金属离子）和实验组（钴、铬离子与小鼠成骨细胞体外共培养）,检测培养上清液ALP活性及I型胶原蛋白含量、收集细胞检测成骨细胞I型胶原蛋白mRNA的表达。结果与对照组相比,钴、铬离子能明显抑制成骨细胞的ALP活性;离子组干预24h后,成骨细胞I型胶原蛋白及mRNA分别下降45.3%、26.8%（P〈0.05）,48h后分别下降49.2%、32.6%（P〈0.05）。结论钴、铬离子明显抑制成骨细胞ALP活性及降低I型胶原蛋白的分泌及其mRNA的表达。     

Al2O3微粒对成人成骨细胞的影响

目的 研究特定粒径与浓度的氧化铝(aluminium oxide,Al2O3)陶瓷磨损微粒对成人成骨细胞的增殖、分化、成骨能力及相关细胞因子表达的影响.方法 取成人成骨细胞原代培养,扩增,并行表型鉴定.将Al2O3陶瓷微粒按粒径不同分为3组,每组制成3种不同浓度的混悬液,消除内毒素后,加入成骨细胞培养体系,37℃,5%CO2条件下孵育.分别四氮唑盐(MTT)比色法,碱性磷酸酶(ALP)活性测定,茜素红染色钙结节计数以及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨细胞的增殖、分化、成骨能力及RANKL、OPG、OCN基因表达的差异.结果 中等粒径(1～10 μm)中浓度组(微粒∶细胞=100∶1)的Al2O3陶瓷微粒在增殖分化及OPG、OCN基因表达方面的活性低于空白对照组(P＜0.01).结论 Al2O3陶瓷磨损微粒可直接作用于成骨细胞,抑制成人成骨细胞的增殖与ALP活性,其细胞反应与微粒的粒径与浓度存在关联.     

α-玉米赤霉醇对成骨细胞增殖、分化以及OPG和RANKL mRNA表达的影响

目的:探讨α-玉米赤霉醇(α-zearalanol,α-ZAL)对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1增殖、分化及护骨素(osteoprotegerin,OPG)和NF-кB受体活化配体(receptor activator of nuclear factor-кB ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:传代培养小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1,采用不同浓度的α-ZAL作用于细胞72 h后,MTT法检测细胞增殖活性,PNPP法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,RT-PCR法检测ALP,OPG及RANKL mRNA的表达水平。结果:10-6～10-12mol·L-1的α-ZAL可显著抑制成骨细胞的增殖(P<0.05);显著增加ALP活性(P<0.05),但不同剂量间存在作用时间差异;并且可显著上调成骨细胞内OPG/RANKL mRNA的比值(P<0.05)。结论:α-ZAL可抑制成骨细胞的增殖、促进其分化,并可通过上调OPG/RANKL mRNA表达比值抑制破骨细胞的形成,有望作为骨质疏松症的治疗药物。     

银杏内酯B调控PAX6基因表达对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力的影响

摘要：目的:探讨银杏内酯B（GB）对人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）增殖和成骨分化的影响及可能机制。方法:不同浓度(10,20,40 mg·L-1)的GB作用hBMSCs细胞后,四甲基噻唑蓝染色法（MTT）检测细胞增殖,实时定量聚合酶链式反应PCR（RT-qPCR）检测细胞中配对盒基因6（PAX6）的mRNA表达,蛋白印迹（Western Blot）法检测细胞中PAX6蛋白表达。不同浓度(10,20,40 mg·L-1)的GB作用成骨诱导的hBMSCs细胞14 d后,RT-qPCR检测细胞中碱性磷酸酶（AKP）、骨钙素（OCN）和骨桥蛋白（OPN）的mRNA表达,Western Blot法检测细胞中AKP、OCN和OPN的蛋白表达。转染PAX6过表达载体至hBMSCs,上述相同方法观察过表达PAX6对hBMSCs增殖及AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达的影响。结果:GB作用hBMSCs后,细胞活性显著升高（P<0.05）,PAX6的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。GB作用成骨诱导的hBMSCs细胞14 d后,细胞中AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。过表达PAX6后,hBMSCs活性显著升高（P<0.05）,成骨诱导的细胞中AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。抑制PAX6表达且同时使用GB作用时（GB+si-PAX6）,hBMSCs活性及成骨诱导后细胞中AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达水平均显著低于只使用GB作用（GB+si-NC）（P<0.05）。结论:GB可促进hBMSCs增殖和成骨分化,其作用机制与上调PAX6表达有关。     

异槲皮苷对MC3T3-E1成骨细胞增殖与分化的影响作用

目的研究异槲皮苷对体外培养MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化的影响作用。方法以细胞矿化结节染色鉴定MC3T3-E1成骨细胞株骨矿化功能,以MTT法测定成骨细胞的增殖率,以试剂盒法测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果在终浓度为1.08×10-6mol·L-1、1.08×10-7mol·L-1、1.08×10-8mol·L-1时,异槲皮苷能极显著促进MC3T3-E1成骨细胞增殖(P<0.01);终浓度为1.08×10-6mol·L-1时,异槲皮苷作用96h后能极显著提高细胞内ALP的活性(P<0.01)。结论一定浓度的异槲皮苷能够显著促进MC3T3-E1成骨细胞增殖和分化。     

Effects of Pulsed Electromagnetic Fields on Rat Osteoblasts

目的:研究脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞的作用.方法:取新生SD大鼠头盖骨,通过骨组织块培养法分离、培养成骨细胞.取传代第3代细胞分为5组,1-70组、2-70组、3-70组、4-70组、对照组,其中前4组为作用组,接受频率为70 Hz,峰值磁场分别为1、2、3、4mT的PEMFs作用,对照组不接受PEMFs作用.按照分组剂量进行离体PEMFs作用(0.5 h/d,连续作用4 d),作用结束后,对各组分别进行细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,核结合因子α1 (cbfα1)表达,体外成骨能力指标一骨结节形成能力检测.结果:经PEMFs作用后,与对照组相比,成骨细胞ALP活性降低,cbfα1表达增多,骨结节数量显著增多.结论:PEMFs作用成骨细胞可促进成骨细胞功能分化,增强成骨细胞的细胞外基质矿化.     

人甲状旁腺素(1-34)对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性影响

目的：研究外源性hPTH(1-34)对原代培养成骨细胞ALP活性影响。方法：新生大鼠头盖骨中取成骨细胞,改良Gomori氏钙钴法染色鉴定,磷酸苯二钠法测定ALP活性,RT-PCR检测ALP mRNA表达。结果：10^-8 mol.L^-1 hPTH(1-34)以48 h为一循环,在每一循环的前12 h作用于细胞时,可使成骨细胞ALP活性较对照组增加最明显,hPTH(1-34) 48 h作用组,与对照相比细胞ALP活性无显著差异。hPTH(1-34) 12 h作用组,成骨细胞ALP mRNA表达最高。结论：hPTH(1-34)刺激成骨细胞内ALP活性升高与给药方式及药物浓度有关,间歇性给药成骨细胞内ALP活性升高。     

脉冲电磁场对大鼠成骨细胞作用的研究

目的:研究脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠成骨细胞的作用。方法:取新生SD大鼠头盖骨,通过骨组织块培养法分离、培养成骨细胞。取传代第3代细胞分为5组,1-70组、2-70组、3-70组、4-70组、对照组,其中前4组为作用组,接受频率为70Hz,峰值磁场分别为1、2、3、4mT的PEMFs作用,对照组不接受PEMFs作用。按照分组剂量进行离体PEMFs作用(0.5h/d,连续作用4d),作用结束后,对各组分别进行细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,核结合因子α1(cbfα1)表达,体外成骨能力指标—骨结节形成能力检测。结果:经PEMFs作用后,与对照组相比,成骨细胞ALP活性降低,cbfα1表达增多,骨结节数量显著增多。结论:PEMFs作用成骨细胞可促进成骨细胞功能分化,增强成骨细胞的细胞外基质矿化。     

rhPTH(1-34)防治糖皮质激素骨质疏松症的机制研究

目的:建立糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠模型及其提取BMSCs,检测甲状旁腺激素相关肽(1-34)(rhPTH(1-34))干预下对成骨及Wnt/β-catenin相关蛋白的影响。方法:SPF级雄性大鼠随机均分为正常对照组、甲强龙组(模型组)、甲强龙+生理盐水组(空白对照组)和甲强龙+rhPTH(1-34)组(试验组)。提取模型BMSCs,以BMP-2诱导为对照并经rhPTH(1-34)干预后,测定成骨分化相关基因ALP、Runx~2、OCN表达、测定Wnt3a、β-catenin蛋白表达及β-catenin/TCF转录水平。结果:rhPTH(1-34)干预后:(1)成骨指标ALP、Runx~2、OCN显著增加(P0.05);(2)β-catenin/TCF转录活性、Wnt3a、β-catenin蛋白表达显著增加(P0.05)。结论:rhPTH(1-34)能够调控Wnt/β-catenin信号通路促进成骨进而防治GIOP。