妊娠早期应用荧光原位杂交技术快速诊断唐氏综合征

目的：评价产前应用２１号染色体特异性探针荧光原位杂交技术快速诊断胎儿唐氏综合征的可行性。方法：应用２１号染色体区域特异性探针对３０例未经培养的早孕期绒毛细胞进行原位杂交，并同时行常规细胞遗传学分析以对比诊断。结果：正常染色体核型标本中，只有约１％（０％￣５％）的间期核呈现３个杂交信号，而在２１，三体型标本中，平均８６％（７８％￣９１％）的细胞核呈现３个杂交信号。结论：应用荧光原位杂交技术在妊娠早期     

唐氏综合征的产前诊断分子技术研究进展

唐氏综合征是人类常见的染色体疾病,经典的细胞遗传学方法是诊断唐氏综合征的金标准,但其局限性不适合大规模的产前诊断.随着分子细胞遗传学技术发展,荧光原位杂交技术(FISH)、定量荧光PCR(QF-PCR)、微阵列-比较基因组杂交(Array CGH)、多重连接探针扩增技术(MLPA)、引物原位标记技术(PRINS)等被用于唐氏综合征快速产前诊断,各种方法各有优劣,改进后会大力推进唐氏综合征的产前诊断速度和准确性.     

荧光原位杂交在产前诊断中的应用及前景

近年来，染色体荧光原位杂交（FISH）逐渐成为解决复杂的临床细胞遗传学问题的一项重要方法。在产科学研究中，它更是成为经典细胞遗传学的重要补充。本文就其在产前遗传咨询，孕期检测胎儿染色异常及胚胎植入前产前诊断三方面的应用及前景进行探讨。     

荧光原位杂交技术在无创性产前诊断中的应用

产前诊断技术的发展趋势为早期、快速、准确、无创伤，能够在胚胎发育的较早期，安全、准确地对出生缺陷作出诊断。通过无创伤性的技术进行产前诊断是临床产前诊断的目标。荧光原位杂交（FISH）技术是一种具有高度灵敏性和特异性的染色体和基因分析技术，随着DNA技术的发展与染色体基因特异性探针的出现，目前广泛用于产前诊断各种染色体异常，尤其是在母血胎儿细胞遗传学诊断和胚胎植人前遗传学诊断中的应用，将无创性产前基因诊断水平提高到新的高度。     

染色体13/21α卫星探针用于产前诊断21三体综合征

目的探讨应用染色体13/21α卫星探针荧光原位杂交（FISH）技术行产前诊断21三体综合征的价值。方法选择10例经产前细胞遗传学检查证实为孕正常胎儿孕妇的羊水细胞（对照组）、3例证实为孕21三体胎儿孕妇的羊水细胞（观察组）,用13/21α卫星探针对未经培养的羊水细胞间期核进行FISH杂交。结果两组总杂交率分别为36.7%和38.6%,差异无显著性（P>0.05）。对照组和观察组含4个杂交信号的核平均百分比分别为36.5%和3.9%,含5个杂交信号的核平均百分比分别为4.0%和36.1%,差异有极显著性（P<0.01）,含5个信号的核百分比＜36.1%可作为21三体综合征的诊断标准。结论 13/21α卫星探针间期FISH 用于未培养的羊水细胞可以快速、准确地在产前诊断21三体综合征。     

定量荧光PCR在唐氏综合征快速产前诊断中的应用研究

目的 :了解中国人 D2 1 S1 1、D2 1 S1 2 70、D2 1 S2 2 6、D2 1 S1 41 1四个短串联重复序列 ( STR)位点的多态性信息含量 ( PIC) ,建立定量荧光 PCR快速产前诊断唐氏综合征的方法。方法 :以染色体2 1 q2 1～ q2 2 .3区段内四个短串联重复序列作为遗传标记 ,采用定量荧光 PCR对 5 0例正常人外周血 DNA进行分析 ,计算中国人该四对 STR位标的多态性信息含量 ( PIC) ,并用该方法对 1 1例正常孕妇羊水 DNA进行分析 ,及对唐氏综合征血清生化指标筛查阳性孕妇羊水标本进行产前诊断。结果 :D2 1 S1 1、D2 1 S1 2 70、D2 1 S2 2 6、D2 1 S1 41 1的多态性信息含量分别是 0 .90 2、0 .889、0 .5 2 1、0 .775 ,建立了定量荧光 PCR产前诊断唐氏综合征的方法。应用该技术产前诊断出 3例唐氏综合征患儿 ,并经染色体核型分析所证实。结论 :以上四对 STR在中国人中均具有较高多态性信息含量 ,可应用于唐氏综合征的定量荧光 PCR产前诊断技术中     

荧光原位杂交技术的妇产科应用进展

荧光原位杂交（FISH）技术是一门新兴的分子细胞学遗传技术,具有快速、安全、简便、高灵敏度、高特异性及多色等优点,已经广泛应用于分子细胞遗传学检测、间期细胞遗传学分析以及DNA片段的染色体定位等研究中。推动了临床细胞遗传学的发展。随着细胞遗传学研究技术的不断深入,在FISH技术上建立了比较基因组杂交技术（CGH）、微阵列比较基因组杂交技术（arrayCGH）。目前FISH技术在产前诊断、植入前遗传学诊断、妇科肿瘤相关基因诊断和分析中展现出更加广阔的应用前景。从FISH技术探针的类型、标记方法及在妇产科领域的应用做简要综述。     

荧光原位杂交技术在产科相关领域的应用

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,其是分子生物学、细胞遗传学及免疫学技术相结合的产物。该技术已广泛应用于分子生物学、医学、细胞遗传学等诸多领域,在产科已用于胚胎植入前遗传学诊断、产前诊断、自然流产和胎儿先天性心脏病的研究。综述FISH技术在产科相关领域的应用。     

实时荧光定量聚合酶链反应技术在产前诊断唐氏综合征中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR技术用于产前诊断唐氏综合征的可行性。方法采用实时荧光定量PCR法,分别检测85例唐氏综合征高风险的中期妊娠妇女的羊水和7例智残儿外周血标本中,21号染色体上特异区域基因片段(DSCR3)和管家基因片段(GAPDH),并计算两者的比值。同时采用细胞遗传学方法分析其染色体核型。结果80例羊水细胞DNA检测DSCR3／GAPDH比值在0．46—1．30之间,染色体核型全部正常;而另5例羊水细胞和7例智残儿外周血DSCR,／GAPDH比值明显升高,达1．64～1．98,染色体核型均为21三体。5例中有3例核型为47,XY, 21;1例核型为47,XX, 21;另1例为易位型[46,XY,-15, t(15;21)]。7例智残儿中4例为47,XY 21;3例为47,XX 21。结论实时荧光定量PCR技术可作为产前快速准确诊断唐氏综合征的有效方法。     

唐氏综合征产前筛查、诊断预防体系的研究

目的 建立唐氏综合征产前筛查、诊断的预防体系，用于快速、准确诊断唐氏综合征和其他先天畸形，降低出生缺陷。方法 对1110例中孕孕妇外周血血清采用酶联免疫方法检测甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）和β—HCG浓度，结合孕妇的年龄、孕周、体重等因素，利用计算机软件计算危险系数，对唐氏综合征高危孕妇做羊水细胞染色体检查，对神经管缺损高危孕妇行B超检查。结果 在1110例孕妇中筛出高危孕妇91例，占筛查总数的8．2％，有36例愿意做进一步产前诊断，发现染色体异常5例，占产前诊断总数的13．9％，其中有1例唐氏综合征（47，XX，＋21），均终止妊娠，检查胎儿染色体核型与产前诊断一致。其中2例神经管缺损高危经B超检查未见异常。结论 建立唐氏综合征产前筛查、诊断综合预防体系对减少先天畸形缺陷儿的出生具有重要意义。