CXCL1通过调控JAK2/STAT3信号通路促进宫颈癌细胞增殖和转移

目的 探究CXCL1在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 使用GEPIA在线数据库分析CXCL1在宫颈癌组织和正常组织中的表达水平,分析其与宫颈癌患者总生存期的关系。qRT-PCR检测CXCL1 mRNA在宫颈癌细胞(C-33A和Hela细胞系)和正常宫颈上皮细胞系(HcerEpic细胞系)中的表达。将CXCL1过表达质粒转染进宫颈癌细胞系中,CCK-8法检测CXCL2对宫颈癌细胞增殖的影响,TUNEL实验检测CXCL1对宫颈癌细胞凋亡的影响,Transwell实验检测CXCL1对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响,Western blot实验检测CXCL2对宫颈癌细胞系中p-JAK2和p-STAT3蛋白表达的影响。结果 CXCL1在宫颈癌组织中的表达水平显著高于正常组织,且高表达CXCL1与宫颈癌患者总生存期较低有关。高表达CXCL1可显著促进宫颈癌细胞增殖,迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡;促进p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达。结论 CXCL1通过调控JAK2/STAT3信号通路促进宫颈癌细胞增殖和转移,并抑制细胞凋亡。     

miR-28-3p通过调控Notch表达影响子宫内膜癌细胞的增殖和凋亡

目的:探讨微小RNA-128-3p(miR-128-3p)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:培养人子宫内膜血管内皮细胞hEEC和EC细胞系HEC-1A、Ishikawa和AN3CA,RT-qPCR检测细胞中miR-128-3p和Notch1 mRNA表达水平,Western blot法检测细胞中...     

JAM-A通过调控FAK/ERK信号通路对宫颈癌细胞进展的影响

目的 探讨连接黏附分子A(JAM-A)在宫颈癌细胞进展中的作用及其潜在分子机制。方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测JAM-A在宫颈癌患者癌组织中的表达水平。将Vector、pcDNA-JAM-A、NC-siRNA、JAM-A-siRNA质粒分别转染至宫颈癌细胞中,CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blotting分别检测细胞中JAM-A、PCNA、MMP-2、E-cadherin及FAK/ERK通路蛋白的水平。进行裸鼠皮下成瘤实验,检测JAM-A对宫颈癌细胞体内肿瘤生长的影响。结果 与癌旁组织比较,宫颈癌组织中JAM-A mRNA和蛋白水平均显著上调。过表达JAM-A可显著增强细胞增殖、侵袭和迁移能力,升高JAM-A、PCNA、MMP-2蛋白表达,降低E-cadherin蛋白表达。敲低JAM-A可显著抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力,降低JAM-A、PCNA、MMP-2蛋白表达,升高E-cadherin蛋白表达。pcDNA-JAM-A+PF-562271组细胞中p-ERK2蛋白表达较pcDNA-...     

circHIPK3通过调控miR-124-3p/EZH2促进食管鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为

目的 探讨circHIPK3对食管鳞状细胞癌细胞增殖与迁移的影响及其机制.方法 采用qRT-PCR法检测circHIPK3在42对食管鳞状细胞癌组织和配对癌旁组织以及食管鳞状细胞癌细胞KYSE-410和KYSE-510与人食管上皮细胞HET-1A中的表达;采用shRNA慢病毒干扰circHIPK3表达;采用CCK-8法...     

姜黄素通过miR-206/BDNF通路抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭和迁移

目的 探讨姜黄素对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用及其调控机制。方法 姜黄素分别以50μmol/L处理0、24、36、48、72 h干预宫颈癌HeLa细胞后,采用MTT法观察其对HeLa细胞活力的影响。应用Transwell小室检测姜黄素对HeLa细胞侵袭转移能力的抑制作用,免疫印迹实验检测其对金属基质蛋白酶-2、9(MMP-2和MMP-9)和脑源性神经营养因子（BDNF）表达水平的影响。通过RT-qPCR检测姜黄素对miR-206和BDNF表达的影响及双荧光素酶实验检测miR-206对BDNF的调控关系。结果 姜黄素可抑制HeLa细胞的活力,且呈现时间依赖性;姜黄素可显著降低HeLa细胞的侵袭和迁移能力并能够降低MMP-2和MMP-9的表达水平,同时激活miR-206的表达;双荧光素酶结果显示,miR-206通过靶向降解BDNF来抑制HeLa细胞的侵袭和迁移能力。结论 姜黄素通过激活miR-206/BDNF通路抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭和迁移。     

长链非编码RNA H19通过靶向miR-18b调控Wnt/β-catenin信号通路对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)H19对宫颈癌顺铂耐药性的影响及分子机制。方法 体外培养人宫颈癌细胞株HeLa,采用顺铂梯度暴露法构建宫颈癌顺铂耐药细胞HeLa/DDP;qRT-PCR检测正常宫颈细胞ECT1/E6E7、HeLa细胞和HeLa/DDP细胞中H19、miR-18b的相对表达水平;以HeLa/DDP细胞为研究对象,根据转染载体不同将细胞分为pcDNA-NC组、pcDNA-H19组、si-H19组、si-H19+inhibitor-NC组、si-H19+miR-18binhibitor组;qRT-PCR检测细胞转染后H19和miR-18b表达水平;MTT法检测细胞存活率和顺铂半数抑制浓度（顺铂IC50值）;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证H19与miR-18b的靶向关系;Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白cleavedcaspase-3、Bax、Bcl-2及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平。结果 与HeLa细胞比较,HeLa/DDP细胞中H19表达水平显著升高（P<0.05）,miR-18b表达水平显著降低（P<...     

miR-373调控JAK3/STAT6信号通路抑制肿瘤相关巨噬细胞M2极化对肺癌细胞的影响

目的：探究miR-373调控JAK3/STAT6信号通路抑制肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）M2极化对肺癌细胞的影响。方法：利用佛波酯及IL-4诱导M2-TAMs分化;将miR-NC和miR-373分别转染M0/M2-TAMs并检测M2-TAMs特征性基因mRNA和miR-373水平;将M0/M2-TAMs与A549、H1299细胞共培养;CCK-8、划痕实验、Transwell实验分别检测肺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力;双荧光素酶实验验证miR-373与JAK3的调控关系;RT-qPCR检测细胞JAK3、STAT6 mRNA水平;Western blot检测细胞Ki67、MMP-2/9、p-JAK3/JAK3、p-STAT6/STAT6水平。30只裸鼠尾静脉注射已转染慢病毒的A549细胞悬液;检测裸鼠肺组织病理变化;RT-qPCR检测肺组织JAK3、STAT6 mRNA水平;Western blot检测CD31、VEGFA、M2-TAMs特征性基因及pJAK3/JAK3、p-STAT6/STAT6蛋白水平。结果：成功诱导M2-TAMs中CD206及IL-10、Mrc1、Arg1、Ym1、F...     

STIL基因通过调控IL-6/STAT3通路影响宫颈癌细胞增殖和凋亡

目的：探讨STIL基因对宫颈癌增殖和凋亡的影响并研究其机制。方法：RT-qPCR和Western blot检测STIL mRNA和蛋白在宫颈癌组织、癌旁组织、宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、caski、人正常宫颈上皮细胞HUCEC中的表达。将HeLa细胞分为对照（NC）组、si-NC组、si-STIL组、si-STIL+IL-6组。CCK-8和平板克隆实验检测各组细胞增殖和克隆能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。Western blot检测各组细胞IL-6、IL-6R和p-STAT3蛋白表达。将稳定转染sh-STIL的HeLa细胞注射到裸鼠背部,研究抑制STIL表达对肿瘤形成的影响。结果：宫颈癌组织中STIL mRNA和蛋白表达显著高于癌旁组织（P<0.05）。HeLa、SiHa、caski细胞中STIL mRNA和蛋白表达显著高于HUCEC细胞（P<0.05）。与si-NC组比较,si-STIL组细胞吸光度、克隆数及IL-6、IL-6R和p-STAT3蛋白水平显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）。与si-STIL组比较,si-STIL+IL...     

miR-223通过作用CDK2及ERK信号通路参与Lewis肺癌细胞周期调控

目的研究miR-223对Lewis肺癌细胞（LLC）周期调控作用及其分子机制。方法将miR-223真核表达载体转染至LLC细胞中,应用流式细胞仪检测其细胞周期分布变化,实时定量PCR、western blot检测对CDK2表达和ERK信号通路的影响。结果流式细胞周期检测显示miR-223过表达导致G0/G1细胞由53.8%减少到45.3%,G2细胞由4.29%增加到13.2%;实时定量PCR及western blot显示,miR-223过表达抑制CDK2 mRNA及蛋白表达,并下调ERK信号通路。结论 miR-223通过作用CDK2及ERK通路参与Lewis肺癌细胞周期调控。     

miR-153靶向PRDM2基因并通过JAK/STAT信号通路影响膀胱癌的侵袭和迁移

目的:研究微小RNA(miR)-153是否靶向正性调控域锌指蛋白2(PRDM2)基因并通过调控JAK/STAT信号通路影响膀胱癌细胞的侵袭和迁移。方法:运用q PCR检测miR-153在膀胱癌组织中的表达;运用免疫组化检测PRDM2在正常组织和膀胱癌组织中的表达;Western blot检测不同膀胱癌细胞株中PRDM2的表达情况;双萤光素酶报告基因系统检测miR-153对PRDM2转录活性的影响;Transwell侵袭实验检测miR-153过表达对膀胱癌细胞RT4侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-153过表达对膀胱癌细胞RT4迁移能力的影响;Western blot实验检测过表达miR-153后JAK/STAT信号通路蛋白的水平。结果:和正常组织比较,PRDM2蛋白在膀胱癌中表达较高(P0.05);miR-153的表达水平在膀胱癌组织中较低(P0.05);双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-153可以调控PRDM2的表达水平;过表达miR-153后,膀胱癌细胞株RT4的侵袭和迁移能力明显降低,p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平下调。结论:miR-153靶向PRDM2,并通过JAK/STAT信号通路调控膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。     

SHIP1调控STAT3信号通路对白血病Jurkat细胞活力和凋亡的影响

目的:探讨含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶1(SHIP1)通过调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对人白血病细胞活力和凋亡的影响。方法:以白血病Jurkat细胞为研究对象,将转染空载体和SHIP1过表达载体的细胞分别记为阴性对照(NC)组和SHIP1组,同时以不作处理的细胞为空白对照(control)组,用real-time PCR和Western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化的caspase-3(cleaved caspase-3)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白水平。同时,用STAT3信号通路抑制剂AG490作用于control组和SHIP1组细胞,分别记为control+AG490组和SHIP1+AG490组,再观测上述指标的变化。结果:分别与control组和NC组比较,SHIP1组SHIP1的mRNA表达水平和蛋白水平均显著升高(P0.05);细胞存活率显著降低(P0.05);细胞凋亡率显著升高(P0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P0.05)。分别与control组和control+AG490组比较,SHIP1+AG490组的细胞存活率显著降低(P0.05);cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P0.05);p-STAT3蛋白水平显著降低(P0.05);细胞凋亡率显著升高(P0.05)。结论:SHIP1能够通过抑制STAT3信号通路抑制人白血病细胞生长,促进白血病细胞凋亡。     

TLR4通过NF-κB信号途径对宫颈癌细胞增殖的影响

目的:研究Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)小干扰RNA(siRNA)是否通过NF-κB信号途径下调Bcl-2而抑制宫颈癌细胞的增殖。方法:设计并合成针对TLR4基因的3条特异性siRNA)及阴性siRNA,并同时设立空白对照,然后用脂质体LipofectamineTM2000转染细胞。通过半定量RT-PCR和Western印迹法分别检测转染前后He La细胞中TLR4 mRNA和蛋白表达水平,Western印迹法检测p65及Bcl-2蛋白表达水平,MTT法和平板克隆检测细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期。结果:3条针对TLR4基因的siRNA均能抑制TLR4的mRNA和蛋白表达,其中TLR4-siRNA-003的沉默效率最高。转染TLR4-siRNA-003 48 h后细胞中TLR4的mRNA和蛋白表达水平分别下调62%和89%,p65及Bcl-2蛋白水平明显下调,同时细胞增殖明显受到抑制,细胞凋亡率显著升高,细胞周期被阻滞于G1期。结论:TLR4特异性siRNA能够有效沉默TLR4基因表达,并通过NF-κB信号通路下调Bcl-2而显著抑制宫颈癌He La细胞的增殖。TLR4可能成为治疗宫颈癌的一个新靶点。     

miR-24-3p靶向KLF6基因调控IL-6/STAT3信号通路影响食管癌细胞的活力和凋亡

目的:探讨微小RNA-24-3p(miR-24-3p)对食管癌细胞活力和凋亡的影响及机制。方法:以人正常食管上皮细胞HEEC为对照,采用RT-qPCR检测食管癌细胞TE11、Eca109和EC9706中miR-24-3p和KLF6 mRNA的表达,Western blot检测KLF6蛋白的表达。用anti-miR-24-3p和KLF6 siRNA转染EC9706细胞,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测检测细胞中与增殖、凋亡相关的蛋白以及IL-6/STAT3信号通路相关蛋白的表达,ELISA法检测IL-6的表达。双萤光素酶报告基因实验验证miR-24-3p与KLF6靶向调控的关系。结果:食管癌癌细胞TE11、Eca109和EC9706中miR-24-3p表达上调(P<0.05),KLF6的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。敲减EC9706细胞miR-24-3p表达可抑制其细胞活力,诱导其凋亡,并抑制细胞CDK4、cyclin D1、CDC25A、p-STAT3、IL-6及Bcl-2的表达,促进caspase-3和Bax的表达。结论...     

CXCR4 siRNA通过抑制STAT3信号通路抑制肺癌细胞活力

目的:初步探索CXC趋化因子受体4(CXCR4)与人肺癌NCI-H292细胞活力和凋亡的关系及其作用机制。方法:采用RNA干扰技术沉默肺癌细胞中CXCR4基因的表达,将CXCR4小干扰RNA(siRNA-CXCR4)转染至NCI-H292细胞中,分为空白对照组(未转染的细胞)、阴性对照组(转染无关序列RNA)和siRNA-CXCR4组(转染siRNA-CXCR4),使用信号转导子及转录激活子3(STAT3)抑制剂NSC 74859作用于已转染肺癌细胞48 h,观察细胞的活力、凋亡及磷酸化STAT3(p-STAT3)水平的变化,用CCK-8实验检测干扰CXCR4基因表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞的凋亡率,采用Western blot检测CXCR4、STAT3、p-STAT3、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cleaved caspase-3和多聚ADP-核糖聚合酶1(PARP-1)的蛋白水平。结果:Western blot检测结果显示siRNACXCR4组细胞中CXCR4蛋白的表达量显著低于对照组(P0.05)。干扰CXCR4表达显著抑制细胞的活力(P0.05),促进其凋亡(P0.05),显著增加cleaved caspase-3和PARP1的蛋白水平。siRNA-CXCR4组细胞中STAT3、p-STAT3和cyclin D1的蛋白水平显著降低(P0.05);加入STAT3抑制剂后细胞中p-STAT3蛋白水平和细胞活力显著低于siRNA-CXCR4组(P0.05),凋亡率显著增加(P0.05)。结论:CXCR4通过调控STAT3信号通路介导下游靶基因的表达,参与肺癌细胞的生长、凋亡。这一结果为肺癌的治疗提供了新的治疗靶点。     

Anticancer effect of salidroside on colon cancer through inhibiting JAK2/STAT3 signaling pathway

Salidroside is considered to have anti-tumor properties. We investigate its effects on colon carcinoma SW1116 cells. Cell viability was assessed by CCK-8. Propidium iodide (PI) staining was used to determine the cell cycle by flow cytometry. The migration and invasion were detected by Transwell. Western blot was used to detect the expression of STAT3 signal related proteins. As the result, high concentrations of salidroside (10, 20. 50 μg/ml) significantly inhibited proliferation of SW1116 cells in a parallelly, cell cycle arrest was increased at the G0/G1 phase after salidroside treatment. Furthermore, salidroside inhibited migration and invasion of SW1116 cells. Salidroside treatment decreased proteins expression of phosphorylation levels in JAK2/STAT3 signaling, while MMP-2 and MMP-9 proteins levels were decreased and protein expression of VEGF and VEGFR-2 were down-regulated. In Conclusion, salidroside inhibited proliferation, decreased the migration and invasion of SW1116 cells in JAK2/STAT3-dependent pathway, the specific mechanisms need further study.     

miR-145过表达对宫颈癌细胞辐射敏感性的影响

目的:探讨微小RNA(miR)-145过表达增强宫颈癌细胞放疗敏感性的分子机制。方法:运用Lipofectamine 2000将miR-145-mimic转染4株宫颈癌细胞系He La、Ca Ski、C33A和Si Ha,以NC-mimic为阴性对照,并以real-time PCR检测子宫内膜基质细胞(ESC)和4株宫颈癌细胞中miR-145的表达水平;转染的细胞经电离辐射照射后于不同时点运用MTT法和Annexin V-FITC/PI染色法联合流式细胞术分别测定细胞活力和细胞凋亡率;运用免疫荧光检测组蛋白γH2AX的表达水平;Western blot检测细胞中螺旋酶样转录因子(HLTF)的蛋白表达水平。结果:miR-145在ESC中高表达,而在4株宫颈癌细胞中均呈低表达,转染miR-145-mimic后4株宫项癌细胞中miR-145的表达水平显著高于NC-mimic组细胞(P0.05)。相同条件下,辐照后miR-145过表达的宫颈癌细胞的活力显著低于NC-mimic组细胞,72 h的细胞凋亡率明显增加(P0.05)。免疫荧光观察结果显示miR-145过表达显著促进电离辐射诱导的γH2AX激活;Western blot结果显示,miR-145过表达显著抑制HLTF的表达,与NC-mimic比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:miR-145在正常子宫内膜上皮细胞中高表达,而在宫颈癌细胞系中低表达;miR-145过表达可显著抑制宫颈癌细胞的活力,促进电离辐射诱导的细胞凋亡。miR-145过表达增强宫颈癌细胞的辐射敏感性,其机制可能与下调HLTF表达、抑制DNA损伤修复、促进细胞凋亡有关。     

JAK/STAT3信号通路调控肿瘤及其相关生物功能的研究进展

JAK/STAT3信号通路是细胞信号通路中重要的信号传导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,对细胞凋亡和增殖起着关键的作用,并且还诱导胚胎发育、肝脏再生、糖酵解和炎性反应、上皮间质转化和血管再生等一系列生物发生过程,与人类肿瘤的发生发展密切相关。     

miR-103b通过靶向FLOT2调节肾癌细胞生物学行为的作用机制

目的 探究微小RNA(microRNA,miR)-103b靶向Flotillin-2(FLOT2)调节肾癌细胞生物学行为的作用机制。方法 通过双荧光素酶报告验证miR-130b与FLOT2的靶向关系。人肾癌细胞分为4组：对照组、miR-103b组、FLOT2组和miR-103b+FLOT2组。通过转染miR-103b类似物和/或FLOT2质粒来提高miR-103b和/或FLOT2的水平。检测各组FLOT2蛋白表达水平,以及细胞增殖、迁移和侵袭。结果 miR-103b与FLOT2在肾癌细胞中靶向结合（P<0.05）;miR-103b组的FLOT2蛋白、增殖、迁移和侵袭水平显著低于对照组（P<0.05）;FLOT2组的FLOT2蛋白、增殖、迁移和侵袭水平显著高于对照组（P<0.05）;miR-103b+FLOT2组的FLOT2蛋白、增殖、迁移和侵袭水平显著高于miR-103b组且显著低于FLOT2组（P<0.05）。结论 miR-103b可能通过靶向FLOT2抑制肾癌的进展。     

帕瑞昔布钠对宫颈癌细胞COX-2/PGE2通路及细胞学行为的影响

目的:探究帕瑞昔布钠对宫颈癌HeLa细胞环氧化合酶-2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)通路及其上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响.方法:磺酰罗丹明B(SRB)法检测帕瑞昔布钠在不同浓度和时间点对HeLa细胞存活率的影响,筛选出合适的浓度和时间点.将Hela细胞分为帕瑞昔布钠0μmol/L、25μmol/L...