lncRNA BC002811通过调控巨噬细胞表型转换对卵巢癌细胞生物学行为的作用机制北大核心CSCD

目的:探究lncRNA BC002811通过调控巨噬细胞表型转化对卵巢癌细胞生物学行为的作用机制。方法:将SKOV3细胞分为sh-NC组、sh-BC002811组和blank组,RT-PCR检测各组细胞中lncRNA BC002811表达和M0巨噬细胞中CD68表达。分别采用MTT法、Transwell法检测细胞增殖和侵袭能力。建立巨噬细胞和卵巢癌细胞的共培养体系,检测巨噬细胞表面CD86、CD206的表达,检测巨噬细胞上清液中炎症相关因子水平。将细胞分为mi-BC002811组、mi-NC组、SKOV3组,检测过表达lncRNA BC002811的SKOV3细胞对巨噬细胞向M2型分化、增殖及侵袭的影响。结果:与blank组相比,sh-BC002811组细胞中lncRNA BC002811表达显著降低(P<0.05)。sh-BC002811组细胞增殖及侵袭能力均明显低于blank组(P<0.05)。与blank组相比,sh-BC002811组M1型巨噬细胞表面标志物CD86阳性比例升高,IL-6、TNF-α水平显著升高,M2型巨噬细胞表面标志物CD206阳性比例降低,IL-10水平显著降低(P<0.05)。与SKOV3组相比,mi-BC002811组M1型巨噬细胞表面标志物CD86阳性比例减少,IL-6、TNF-α水平显著降低,M2型巨噬细胞表面标志物CD206阳性比例增加,IL-10水平显著升高(P<0.05)。与SKOV3组相比,mi-BC002811组细胞增殖、侵袭能力显著增加(P<0.05)。结论:沉默lncRNA BC002811可通过抑制巨噬细胞向M2型分化,进而抑制卵巢癌细胞增殖分化。     

透明质酸在巨噬细胞吞噬方面的作用机制

透明质酸 (hyaluronan ,HA)是一种主要的细胞外基质成分 ,炎症及肿瘤等病理情况下含量明显增多。HA一方面通过其粘弹性作用在细胞周围形成网状屏障 ,从而限制巨噬细胞的吞噬活动 ;而另一方面当HA与巨噬细胞表面HA结合受体CD4 4和RHAMM结合时 ,可引起巨噬细胞内细胞骨架的重组并激活细胞内一系列信号转导过程 ,从而促进巨噬细胞对凋亡细胞等的吞噬。     

脂多糖持续刺激巨噬细胞的免疫学机制初探

目的:探讨巨噬细胞在脂多糖(LPS)的持续刺激下产生免疫抑制后的表型变化及对T细胞影响的分子机制。方法:蔗糖密度梯度离心法从全血中分离人外周血单个核细胞,结合磁珠细胞分选技术分选出单核细胞,体外诱导单核细胞分化为巨噬细胞,以未处理和IFN-γ处理为对照,对LPS处理48 h的巨噬细胞进行形态学观察、细胞表面分子(HLA-DR、CD14、CCR7、HLA-ABC及CD40)表达的检测和细胞因子(IL-10、IL-12、IL-6及TNF-α)分泌水平的检测。同时将LPS诱导的巨噬细胞与CD3+T细胞进行异体共培养,进一步观察巨噬细胞对T细胞增殖能力的影响。用实时荧光定量PCR验证Toll样受体4(TLR4)信号通路中的非My D88依赖型途径相关分子的表达水平。结果:LPS处理48 h的巨噬细胞,抗原递呈能力(HLA-DR)下降,免疫抑制细胞因子IL-10升高,把LPS诱导的巨噬细胞与异体T细胞共培养6 d,其促进CD8+T细胞增殖的能力较弱。实时荧光定量PCR结果显示LPS持续刺激下巨噬细胞的TRIF、IRF3和CIITA均呈下调状态。结论:持续LPS处理巨噬细胞48 h后,巨噬细胞呈现一种免疫抑制的状态,且其刺激CD8+T细胞增殖的能力减弱,这种状态与非My D88依赖型TLR4信号通路受损有关。     

猪苓多糖/卡介苗诱导的热休克蛋白对巨噬细胞表面分子的影响

目的:观察猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的细胞外热休克蛋白对J774A.1巨噬细胞TLR、共刺激分子、粘附分子、活化分子表达的影响,探讨猪苓多糖/卡介苗灌注治疗膀胱癌的天然免疫启动机制.方法:(1)ELISA检测猪苓多糖/卡介苗与T24膀胱癌细胞共培养上清中HSP90、HSP70、HSP60、HSP27的表达.(2)流式细胞术检测含HSP共培养上清(eHSP)对小鼠J774A.1巨噬细胞表面分子CD14、TLR2/4、MHCⅠ/Ⅱ;活化分子CD25;共刺激分子CD80、CD86、CD40;粘附分子CD44、CD62L、CD11b、CD18表达的影响.(3)用流式细胞术检测TLR4/MD2抗体复合物阻断J774A.1巨噬细胞表面TLR4后,eHSP对其表面分子MHCⅠ/Ⅱ、CD25、CD80、CD86、CD40、CD44、CD62L、CD11b、CD18的表达.结果:(1)猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的热休克蛋白呈剂量和时间依赖性,猪苓多糖(2 mg/ml)和卡介苗(250 μg/ml)作用48小时时HSP的表达至峰值,其中HSP70呈优势表达;(2)含HSP的共培养上清可上调J774A.1巨噬细胞TLR4、MHCⅠ、CD86、CD40、CD25分子的表达,增强粘附分子CD44、CD62L荧光强度;(3)含HSP的共培养上清作用于用TLR4/MD2阻断后的巨噬细胞,其表面分子CD86、MHCⅠ、CD40、CD25的表达降低.结论:猪苓多糖/卡介苗可诱导T24膀胱癌细胞产生危险信号热休克蛋白,并且热休克蛋白可通过激活小鼠J774A.1巨噬细胞TLR4信号通路,上调其表面分子的表达,启动抗膀胱癌天然免疫应答.     

鉴定干细胞及描述已分化细胞类型特征时的常用标志（三）

骨髓与血液系统烟酸己可碱染料 (hoechstdye)HSC缺乏 　　可与DNA结合的一种荧光染料 ,HSC排斥该染料 ,染色时比其他类型细胞着色浅。白细胞共同抗原 (leukocytecommonantigen ,CD4 5 ) WBCWBC前体细胞的细胞表面蛋白。谱系表面抗原 (lineagesurfaceantigen ,Lin)HSC、MSC、已分化RBC、WBC谱系　　 13～ 14种不同的细胞表面蛋白 ,它们是成熟血细胞谱系的标志分子 ,检测Lin阴性细胞有助于纯化HSC和造血祖细胞。Mac 1WBC成熟粒细胞和巨噬细胞 (WBC亚型 )的特异性细胞表面蛋白。Muc 18(CD14 6 ) 骨髓成纤维细胞、内皮　　在…     

系统性红斑狼疮患者巨噬细胞表型和功能初步研究

为了比较健康者与SLE患者巨噬细胞表型和吞噬功能的不同,收集性别、年龄匹配的健康对照者及SLE患者外周血,密度梯度离心法分离单个核细胞,磁珠分选CD14+单核细胞,巨噬细胞集落刺激因子诱导7d,分化为成熟巨噬细胞。FACS检测巨噬细胞表面CD163表达。取健康人CD4+T细胞标记CFSE,在抗CD3、CD28抗体刺激下,以5∶1比例分别与SLE和HC巨噬细胞共培养4d,FACS检测CD4+T细胞增殖比例。紫外辐照Jurkat T细胞株诱导人来源凋亡细胞,将pHrodo Green标记的凋亡细胞(5∶1)与SLE和HC巨噬细胞共培养2h,FACS检测pHrodo+CD14+巨噬细胞的百分率。结果显示,与HC相比,SLE巨噬细胞CD163表达量显著下降;SLE巨噬细胞对CD4+T细胞增殖抑制能力显著降低;SLE巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬功能显著下降。这些结果提示SLE患者巨噬细胞表型、免疫调节能力和吞噬功能存在异常,可能参与其发病。     

肺腺癌细胞源性外泌体活化的人THP-1巨噬细胞促进肺癌细胞的侵袭

目的研究肺腺癌细胞来源的外泌体对巨噬细胞极化的作用及受外泌体作用后的巨噬细胞对肺癌细胞生物学行为的影响。方法提取A549和H1299肺腺癌细胞外泌体, Western blot法检测其表面标志物CD9、 CD63进行鉴定。100 ng/mL佛波酯(PMA)处理人THP-1细胞48 h,实时定量PCR检测细胞CD68的mRNA水平。200μg/mL外泌体处理贴壁巨噬细胞24 h后,实时定量PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、 CD163的mRNA水平, IMMULITE 1000化学发光免疫分析仪检测白细胞介素6(IL-6)、 IL-8、 IL-10的蛋白水平;将外泌体处理后的巨噬细胞分别与A549细胞和H1299细胞共培养,通过Transwell~(TM)实验检测肺腺癌细胞侵袭能力,实时定量PCR检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、 MMP9的mRNA水平。结果 CD9、 CD63在外泌体高表达, PMA诱导后的巨噬细胞高表达CD68,外泌体处理后的巨噬细胞iNOS表达降低, CD163、 TNF-α、 IL-6、 IL-8、 IL-10表达水平均增加;外泌体处理后的巨噬细胞与肺腺癌细胞共培养,可增强肺腺癌细胞的侵袭能力并促进MMP2、 MMP9的表达。结论肺腺癌细胞来源的外泌体可以诱导巨噬细胞极化,表现为M1/M2的混合表型,进而增强肺癌细胞的自身侵袭能力。     

野生型p53基因导入对U937细胞分化和清道夫受体CD36表达的影响

目的 :单核细胞粘附血管内膜 ,向内膜下迁移、分化成为巨噬细胞 ,巨噬细胞吞噬大量氧化型低密度脂蛋白 (ox -LDL)形成泡沫细胞是动脉粥样硬化斑块形成和发展的重要步骤。CD36属于B族清道夫受体 (classBscavengerreceptor) ,是一种功能多样的细胞表面受体 ,ox -LDL孵育单核细胞系U937细胞形成泡沫化细胞过程中有CD36和p5 3基因表达增高 ,巨噬细胞对ox -LDL的吞噬有 4 0 %是由CD36介导。研究单核细胞向巨噬细胞分化和CD36的表达调控机制 ,对于防止动脉粥样硬化的发生与发展具有重要意义。方法 :①U937细胞培养及同步化处理 :人髓系白…     

M2型肿瘤相关巨噬细胞通过p53途径下调肝癌化疗敏感性的机制研究

目的 通过研究M2肿瘤相关巨噬细胞调控p53表达来下调肝癌化疗敏感性的机制,以此拓宽建立抗肿瘤耐药的措施.方法 构建小鼠肝癌模型及分离肝癌组织,研磨组织提取巨噬细胞,通过RT-PCR方法检测巨噬细胞表面CD206及CD163分子表达情况.培养人单核巨噬细胞(THP-1),PMA (100ng/mL)和IL-4 (100ng/mL)作用诱导分化成肿瘤相关巨噬细胞后,与肝癌细胞(HepG2、SMMC7721,Hep 3B)共培养,加入奥沙利铂(20μ g/mL)作用24小时,通过Western blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase 3、抗凋亡蛋白Bcl-2及p53的表达,通过MTT方法检测化疗对肝癌细胞增殖情况.结果 成功构建了肝癌模型,分离出了肝癌组织巨噬细胞,RT-PCR检测CD206和CD163的表达显著升高;人单核细胞(THP-1)经加入PMA(100ng/mL)和IL-4 (100ng/mL)分化诱导48h后其细胞的表面CD206和CD163的表达明显高于THP1分化诱导的细胞表面表达量;肝癌细胞SMMC7721和HepG2与M2型肿瘤相关巨噬细胞共培养24h,经奥沙利铂作用后,肿瘤细胞Bcl-2表达明显升高,Caspase 3和p53的表达显著降低;肿瘤细胞的增殖抑制率明显降低,而Hep 3B细胞的凋亡则明显降低.结论 M2型肿瘤相关巨噬细胞调控肝癌细胞中p53的表达,进而抑制了肝癌化疗的敏感性.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对巨噬细胞泡沫化的影响

目的 研究CD4~+ CD25~+调节性T细胞(Tr)对巨噬细胞泡沫化过程的影响及机制.方法 磁性细胞分离器(MACS)分离CD4~+ CD25~+ T细胞及CD4~+ CD25~- T细胞,在氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)作用下,将巨噬细胞分别与CD4~+ CD25~+ T细胞、CD4~+ CD25~- T细胞共培养48 h.采用油红O染色和细胞内脂质测定的方法观察CD4~+ CD25~+ T细胞对巨噬细胞泡沫化的影响;采用RT-PCR、real-time PCR、Western blot的方法测定泡沫细胞清道夫受体(CD36和SRA)的表达.结果 与对照组比较,CD4~+ CD25~+ T细胞可显著抑制巨噬细胞脂质聚集及清道夫受体的表达.结论 CD4~+CD25~+ T细胞可显著抑制巨噬细胞泡沫化,其作用机制可能为下调清道夫受体的表达.     

M-CSF和IL-10对人单核细胞表面分子表达的影响

本文采用流式细胞术检测人外周血单核细胞表面CD14、CD2 3、CD6 4、CD11b、CD18、CD2 9表达 ,研究巨噬细胞集落刺激因子 (M CSF )和白细胞介素 (IL ) 10对单核细胞炎症效应和免疫效应功能的影响。结果显示 ,(1)M CSF诱导单核细胞表面CD14及CD2 3分子的表达 (P <0 0 5 )。IL 10抑制CD2 3的表达 ,促进CD6 4的表达 ,并协同M CSF诱导单核细胞CD14的表达 ,拮抗M CSF对CD2 3的诱导作用。M CSF能协同IL 10对单核细胞CD6 4的诱导作用 ;(2 )M CSF能诱导单核细胞表面CD11b及CD18的表达 (P <0 0 5 )。结论 :M CSF通过促进单核细胞表面CD11b、CD18、CD14、CD2 3的表达及协同促进CD6 4的表达而促进单核细胞粘附、炎性渗出、IgG及IgE依赖的细胞杀伤和吞噬功能 ,促进单核 巨噬细胞在炎症反应、体液免疫应答效应阶段发挥效应细胞功能。IL 10通过促进CD6 4的表达 ,增强体液免疫应答效应阶段单核 巨噬细胞的免疫效应功能 ,但通过抑制CD2 3的表达 ,下调IgE介导的体液免疫效应。     

鼠腹水肿瘤细胞表面糖蛋白中唾液酸成分的变化

细胞表面唾液酸的功能各种各样;可延长红细胞、血小板及淋巴细胞的寿命;是粘病毒和副粘病毒的细胞受体部位;是红细胞血型抗元M、N的基本成分;其羟化的三碳节段又可结合细胞表面的Ca~(2+)。现提出,其带负电的羧基还可改变哺乳动物细胞的聚集能力。唾液酸对恶性变并无普遍作用。因为不同肿瘤细胞唾液酸浓度很不相同,某些正常细胞的唾液酸比转化细胞高。很多肿瘤细胞除去唾液酸后异体移植能力下降,但TA_3-Ha乳腺癌细胞除去唾液酸     

炙甘草多糖对小鼠巨噬细胞再极化的影响

目的:建立探讨炙甘草中等分子量多糖(MPRR)诱导巨噬细胞极化的情况,阐明肿瘤微环境中极化后巨噬细胞对小鼠4T1乳腺癌细胞生长的影响。方法:培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,采用IL-4诱导并建立M2型极化模型,将培养细胞分为未诱导细胞(M0)组、M2极化(IL-4诱导)组、MPRR诱导组和Rp组(IL-4诱导12 h后MPRR再极化诱导组),流式细胞术分析巨噬细胞极化标志(CD86和CD206)的表达。免疫印迹技术分析转录因子STAT-6表达和磷酸化。收集不同条件下巨噬细胞培养上清液,ELISA法检测其IFN-γ和TGF-β浓度。结果:与对照组比较,IL-4诱导后细胞发生M2极化,可检测到RAW264.7细胞表面CD86表达下降(P0.05),CD206表达增加(P0.05)。而MPRR促进细胞向M1极化,可观察到其促进CD86表达而降低CD206表达(P0.05)。M2极化后STAT-6磷酸化增加,IFN-γ分泌减少而TGF-β分泌增加(P0.05);经MPRR处理减弱STAT-6磷酸化和TGF-β的分泌,促进IFN-γ分泌(P0.05)。结论:炙甘草水溶性多糖促进巨噬细胞的M1极化,可拮抗IL-4诱导其M2极化效应,炙甘草多糖可调节小鼠巨噬细胞再极化。     

结直肠癌患者肿瘤组织浸润巨噬细胞PD-L1 表达及其临床意义

目的:通过检测结直肠癌患者肿瘤组织中巨噬细胞及其程序性细胞死亡蛋白配体1(PD-L1)表达,探讨肠道巨噬细胞PD-L1在结直肠癌中的作用。方法:收集26例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织,应用机械联合胶原酶消化法制备单细胞悬液,流式细胞仪检测巨噬细胞比例及其PD-L1表达;采用Transwell共培养体系,巨噬细胞、人结肠癌细胞系SW480和人外周血单个核细胞共培养,流式细胞仪检测巨噬细胞PD-L1和淋巴细胞程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)表达,共培养体系加入抗PD-1抗体检测淋巴细胞增殖的变化。结果:与癌旁组织相比,癌组织中巨噬细胞比例上升、CD8~+/CD3~+T细胞比例显著下降,癌组织浸润巨噬细胞PD-L1、CD206和CD163阳性细胞比例显著上升,差异均有统计学意义(P0.05);与空白对照组相比,与SW480细胞共培养的巨噬细胞表面PD-L1、CD206和CD163表达水平显著上升,淋巴细胞表面PD-1表达水平显著上升,淋巴细胞增殖率显著下降,共培养体系中加入抗-PD-1抗体可显著升高淋巴细胞增殖率,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:结直肠癌组织中存在高比例的巨噬细胞,并向M2极化,高表达PD-L1,抑制淋巴细胞增殖。因此,通过调节巨噬细胞极化状态或抑制其PD-L1表达可能是结直肠癌肿瘤免疫治疗的新途径。     

CD14是脂多糖与脂多糖结合蛋白复合体的受体

脂多糖和脂多糖结合蛋白复合体(LPS-LBP)与巨噬细胞相互作用不仅起粘附作用而且诱导巨噬细胞释放TNF-α。CD14是单核、巨噬细胞表面标志之一,为55kD糖蛋白。它通过磷酯酰肌醇聚糖链与单核,巨噬细胞相结合,人和小鼠的CD14分子基因均已被克隆。其基因定位于人第5号染色体上,     

气道上皮细胞对巨噬细胞表型和吞噬功能的影响及HIF-1α的作用

目的:探讨气道上皮细胞对巨噬细胞表型和吞噬活性的影响及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的作用。方法:将不同浓度(0、100、200、400和800μmol/L)氯化钴(CoCl_2)处理或转染HIF-1αsi RNA的人支气管上皮(HBE)细胞与12-肉豆蔻酸13-乙酸佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系THP-1分化的巨噬细胞共培养,RT-qPCR检测HBE细胞HIF-1α的m RNA表达,流式细胞术检测巨噬细胞表面标志物的表达及对大肠杆菌的吞噬率。结果:CoCl_2浓度依赖性增加HBE细胞HIF-1α的m RNA表达,8 h为峰值,同时CoCl_2处理的HBE细胞也增加共培养的巨噬细胞CCL3、CD163、CD206和CCL18荧光强度比率,800μmol/L处理的HBE细胞作用最强;共培养8 h和12 h的巨噬细胞CCL3荧光强度比率增加最明显,而共培养24 h的巨噬细胞CD163、CD206和CCL18荧光强度比率上升更明显。转染HIF-1α-Homo-488 si RNA的HBE细胞对巨噬细胞CCL3、CD163、CD206和CCL18的刺激作用明显减弱。与不同浓度CoCl_2处理的HBE细胞共培养24 h的巨噬细胞对大肠杆菌的吞噬率最初(60 min以前)均呈不同的上升趋势,其后吞噬率均降低。相对于正常HBE细胞共培养组,400和800μmol/L刺激组在各时点的吞噬率均降低,其中800μmol/L刺激组降低最明显。结论:低氧环境下气道上皮细胞早期增强巨噬细胞向M1优势转化,而长期低氧作用的气道上皮细胞抑制巨噬细胞吞噬作用并向M2优势转化,HIF-1α可能是这些过程的重要介质。     

CD4+CD25+调节性T细胞对氧化型低密度脂蛋白活化的巨噬细胞功能的影响

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)激活的巨噬细胞功能的影响及其机制.方法 磁性细胞分离器(MACS)分离CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25-T细胞,在oxLDL作用下,将巨噬细胞分别与CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25-T细胞共培养48 h.采用流式细胞术检测巨噬细胞HLA-DR、CD86的表达;ELISA检测上清液MCP-1、MMP-9、TNF-α、TGF-β和IL-10细胞因子的表达;采用Griess反应测定NO生成量,RT-PCR测定iNOS表达.结果 与对照组比较,CD4+CD25+T细胞可显著抑制oxLDL激活的巨噬细胞HLA-DR及CD86的表达、减少NO生成、抑制iNOS mRNA表达和促炎细胞因子生成.结论 调节性T细胞可促使oxLDL激活的巨噬细胞由具有促炎表型的M1型向具有抗炎表型的M2型转化.     

猪苓及猪苓多糖协同卡介苗对膀胱癌大鼠模型腹腔巨噬细胞功能的影响

目的:观察猪苓及猪苓多糖(PPS)协同卡介苗(BCG)对BBN诱导的大鼠膀胱癌腹腔巨噬细胞表面分子的表达及体外NO释放的影响。方法:流式细胞术检测BBN诱导膀胱癌大鼠腹腔巨噬细胞的表面分子CD14、TLR4;共刺激分子CD86、CD40的表达。Griess试剂盒检测并分析猪苓及PPS协同BCG对腹腔巨噬细胞体外NO释放的影响。结果:PPS协同BCG组巨噬细胞表面CD86、CD40的表达与模型组比较均显著升高(P<0.05)。猪苓协同BCG组CD86、CD40的表达介于模型组与空白对照组之间,与两者均无显著性差异(P>0.05)。BCG组腹腔巨噬细胞TLR4/CD14的表达显著升高(P<0.05)。PPS协同BCG组TLR4/CD14的表达显著低于单独BCG组。PPS协同BCG组及猪苓协同BCG组与模型组比较NO释放的比值均显著降低(P<0.05)。结论:猪苓及PPS能协同BCG调节膀胱癌大鼠腹腔巨噬细胞表面分子的表达,降低腹腔巨噬细胞NO的释放,从而调节膀胱癌大鼠腹腔巨噬细胞的功能,降低NO过度释放对机体组织的损伤作用。     

CD36/Src/ERK通路参与单核细胞向巨噬细胞的分化

目的:探讨脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)在单核细胞向巨噬细胞分化中的作用。方法:采用不同浓度(0、100和200μg/L)佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导人源单核细胞THP-1向巨噬细胞分化;用CD36小片段干扰RNA(CD36 small interfering RNA,siCD36)干扰THP-1细胞CD36的表达;又用CD36 cDNA的重组慢病毒转染THP-1细胞,构建CD36过表达细胞系。显微镜下观察细胞形态;结晶紫染色法检测细胞黏附能力;流式细胞术和Western blot检测细胞分化过程中CD36的蛋白表达,real-time PCR检测CD36、CD11b和CD80的mRNA水平。Western blot检测THP-1细胞向巨噬细胞分化过程中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和Src酪氨酸激酶的表达。结果:THP-1细胞向巨噬细胞分化的过程中,CD36表达增加(P0. 01)。与正常细胞相比,siCD36干扰细胞的表面积减小,黏附能力降低(P0. 01),细胞中CD11b和CD80的mRNA水平下降(P0. 01);而CD36过表达细胞的表面积明显增大,黏附能力增强(P0. 05),且细胞中CD11b和CD80的mRNA水平升高(P0. 01)。THP-1细胞向巨噬细胞分化过程中,ERK的磷酸化明显增加,而siCD36干扰的THP-1细胞分化过程中ERK的磷酸化和Src的磷酸化则明显减少(P0. 05)。结论:CD36通过增强Src磷酸化从而促进ERK的磷酸化及活化,最终促进THP-1细胞向巨噬细胞分化。     

哮喘患儿外周血巨噬细胞M1 / M2 极化状态研究

目的:体外培养哮喘患儿外周血巨噬细胞,并从细胞的表型和功能方面观察巨噬细胞M1/ M2 极化状态的变化,从而探讨巨噬细胞在哮喘发病中的作用。方法:选取50 例健康对照者与50 例哮喘患儿,收集哮喘患儿及健康对照组的血液,分离纯化得到巨噬细胞,体外给予10 ng/ ml GM-CSF 的血清培养液培养,并在第7 天,收集细胞及上清,运用流式细胞技术检测巨噬细胞表型表达,ELISA 方法检测细胞上清IL-10、IL-12 含量变化,检测巨噬细胞吞噬外来性抗原及刺激淋巴细胞分化的能力。结果:与健康对照组相比,哮喘患儿外周血巨噬细胞表面表达的共刺激分子CD64、CD11c、CD40 明显降低,CD206、CD14 及CD23 明显升高(P 均<0.05);患儿巨噬细胞分泌的IL-10 明显降低(P<0.05),IL鄄12 与对照组相比无显著变化(P>0.05);外周血巨噬细胞吞噬能力明显降低(P<0.05);将患儿巨噬细胞与T 淋巴细胞共培养,IL-4 含量明显升高,IFN含量明显降低(P 均<0.05)。结论:相比于健康对照组,哮喘患儿外周血巨噬细胞呈现M2 型,提示巨噬细胞与哮喘疾病具有很大的相关性。