子痫前期患者胎盘组织中尾加压素Ⅱ及一氧化氮的表达及意义

目的研究尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）及一氧化氮在子痫前期患者胎盘组织的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法检测45例子痫前期患者（轻度22例,重度23例）及20例正常晚期妊娠孕妇胎盘组织中UIImRNA的表达情况;同时用硝酸还原酶法检测子痫前期组孕妇与正常组孕妇胎盘组织中NO浓度。结果重度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.85±0.40）明显高于正常妊娠组（0.38±0.30）（P〈0.05）;轻度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.64±0.31）,与正常妊娠组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。轻、重度子痫前期患者胎盘组织NO浓度分别为114.42±6.52 u/mg、79.22±3.31 u/mg,均显著低于正常妊娠组241.36±13.24u/mg（P〈0.05）。结论子痫前期胎盘组织中尾加压素Ⅱ水平升高,NO浓度下降,可能在子痫前期的发病中起一定作用。     

子痫前期患者白细胞介素-8和胎盘生长因子的表达及其意义

目的通过检测子痫前期患者羊水中白细胞介素-8（IL-8）和胎盘组织中胎盘生长因子（PLGF）的水平．以探讨IL-8和PLGF在子痫前期发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附法和免疫组化法分别测定20例轻度子痫前期患者,22例重度子痫前期患者和30例正常妊娠妇女（对照组）的羊水中IL-8和胎盘组织中的PLGF的表达。结果子痫前期轻度组及重度组羊水IL-8均高于对照组,重度组羊水IL-8显著高于轻度组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中PLGF表达量均低于对照组（P〈0．01）,而重度组低于轻度组（P〈0．01）。子痫前期轻、重度组及对照组胎盘组织中PLGF表达量与羊水IL-8水平均呈高度负相关（P〈0．01）。结论子痫前期患者羊水中IL-8增高,而胎盘组织中PLGF表达下降,可能与子痫前期的发生、发展有关。     

Endoglin基因在妊娠期高血压疾病胎盘中的表达及意义

目的探讨妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中Endoglin基因水平的变化及临床意义。方法选择2010年8月至2011年4月在北京军区总医院住院分娩的妊娠期高血压疾病患者共44例（妊娠期高血压疾病组）,其中妊娠期高血压孕妇15例（妊娠期高血压组）,轻度子痫前期孕妇14例（轻度子痫前期组）,重度子痫前期孕妇15例（重度子痫前期组）;以同期正常晚期妊娠孕妇16例为对照组。采用实时定量RT-PCR检测各组孕妇胎盘组织中Endoglin mRNA表达水平。结果妊娠高血压疾病组患者胎盘组织中Endoglin mRNA相对表达量明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;轻度子痫前期组、重度子痫前期组患者胎盘组织中Endoglin mRNA相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论 Endoglin在妊娠期高血压疾病患者尤其是轻度子痫前期及重度子痫前期患者胎盘中高度表达,其表达水平可能与病情的发生发展密切相关。     

子痫前期患者胎盘组织PLGF表达及血清HGF和VEGF测定

目的：探讨子痫前期患者血清肝细胞生长因子（HGF）、胎盘生长因子（PLGF）表达水平和血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化及意义。方法：分别采用放射免疫分析、酶联免疫分析和免疫组化法测定32例子痫前期孕妇（子痫前期组）和35名正常孕妇（对照组）血清VEGF、HGF和PLGF表达水平。结果：子痫前期患者无论轻度子痫前期组和重度组血清HGF含量均显著低于对照组（P均〈0.01）;但轻度和重度组之间水平无显著性差异（P〉0.05）。胎盘中PLGF表达水平也显示轻度和重度两组均显著低于对照组（P均〈0.01）;且重度组又显著低于轻度组（P〈0.01）。血清VEGF水平轻度组显著低于对照组（P〈0.05）;重度组水平较对照组降低更为显著（P〈0.01）,且重度组显著低于轻度组（P〈0.01）。相关分析显示,HGF含量与PLGF具有显著相关性（r=0.6012,P〈0.01）;而与VEGF水平则无明显相关性（r=0.3010,P〉0.05）。结论：测定结果证实,患者血清三项标志物均参与了子痫前期的病理进程,其测定对于了解病情和预后评估有帮助。     

尾加压素Ⅱ与GPR14 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的研究子痫前期患者胎盘组织尾加压素Ⅱ（UⅡ）及G蛋白偶联受体14（GPR14）mRNA的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法对25例子痫前期（子痫前期组,其中轻度15例,重度10例））患者和20例正常足月孕妇（正常妊娠组）和胎盘组织中UⅡ和GPR14 mRNA表达水平进行检测。结果胎盘组织UⅡmRNA表达水平在轻度子痫前期组,重度子痫前期组均明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。重度子痫前期组孕妇胎盘GPR14mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论子痫前期患者胎盘UⅡ及其受体基因表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。     

子痫前期患者血清HGF及Inhibin A测定

目的：探讨子痫前期患者血清肝细胞生长因子（HGF）和抑制素A（Inhibin A）水平的变化及临床意义。方法：分别采用酶联免疫法和放射免疫分析35例子痫前期孕妇（子痫前期组）和35例正常妊娠孕妇（对照组）血清HGF和Inhibin A水平。结果：结果显示,子痫前期患者与对照组孕妇新生儿出生体重、胎盘重量差异无统计学意义（P均〉0.05）。子痫前期患者不同病情血清HGF和Inhibin A测定结果表明,无论轻度子痫前期组和重度子痫前期组患者血清HGF含量均非常显著地低于对照组（P均〈0.01）;但轻度子痫前期组和重度子痫前期组之间HGF水平无显著差异（P〉0.05）。Inhibin A水平则轻、重两组均非常显著地高于对照组（P均〈0.01）;且轻、重两组之间比较重度组非常显著地高于轻度组（P〈0.01）。相关分析结果显示,血清HGF和Inhibin A水平两组指标数值之间均无显著相关性（r=0.189,P〉0.05）。子痫前期患者胎盘重量与血清HGF和Inhibin A水平之间也无显著的相关性（r=-0.037、0.235,均P〉0.05）。结论：患者血清HGF和In-hibin A水平的变化参与了子痫前期的发病机制,其测定对于子痫前期的病情评估有帮助。     

妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平及其临床意义

目的 观察妊娠期高血压疾病患者Pro BNP水平及临床意义。方法 选择在我院行剖宫产术的妊娠期高血压疾病患者89例为HDCP组,包括妊娠高血压24例,轻度子痫前期21例,重度子痫前期44例;同期在我院行剖宫产术的妊娠晚期健康妇女88例为对照组,采用电化学发光法检测各组Pro BNP并对比。结果 HDCP组Pro BNP为（844.02±788.74）pg/ml,显著高于对照组的（142.90±187.20）pg/ml,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比,轻度子痫前期组和重度子痫前期组Pro BNP均显著增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。与妊娠高血压组相比,轻度子痫前期组和重度子痫前期组Pro BNP显著增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。重度子痫前期组Pro BNP显著高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平高于妊娠晚期健康妇女,检测妊娠期高血压疾病患者血浆Pro BNP水平可及时了解早期心肌细胞损害及心脏功能情况,对了解病情、观察疗效和预后判断具有重要价值。     

解整合素-金属蛋白酶12在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的：探讨子痫前期患者胎盘组织中解整合素-金属蛋白酶12(a disintegrin and metalloproteinase 12,ADAM12)蛋白和mRNA表达水平变化及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测31例子痫前期患者（子痫前期组包括子痫前期重度16例、子痫前期轻度15例）和20例正常足月孕妇（对照组）胎盘组织中ADAM12的蛋白表达水平。采用杂交组化方法检测各组孕妇胎盘组织中ADAM12-S和ADAM12-L的mRNA表达水平。结果：子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12蛋白表达水平为0.56±0.14,对照组的为0.39±0.14,两者相比,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异没有统计学意义（P>0.05）。子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12-S mRNA水平为0.52±0.09,对照组为0.40±0.15,两者相比,差异有统计学意义（P<0.01）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期组孕妇胎盘组织中ADAM12-L mRNA水平为0.51±0.09,对照组为0.42±0.18,两者相比,差异有统计学意义（P<0.05）;子痫前期重度组与轻度组比较,差异没有统计学意义（P>0.05）。结论：ADAM12蛋白和mRNA水平在胎盘组织中的表达增高可能在子痫前期的发病过程中起重要作用。     

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。 方法 采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产（正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例）胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组（P<0.05）;重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）;3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组（P<0.05）,中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）。结论 子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

妊娠期高血压疾病患者血清及胎盘组织中Endoglin水平变化的研究

目的研究妊娠期高血压疾病患者血清及胎盘组织中Endoglin水平的变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA）及免疫组化方法检测68例妊娠期高血压疾病患者（妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压23例、轻度子痫前期22例、重度子痫前期23例）及20例正常妊娠妇女（对照组）血清及胎盘组织中Endoglin水平。结果妊娠期高血压疾病组血清可溶性Endoglin水平（29.66±8.52 ng/ml）明显高于对照组（10.42±4.35ng/ml）,（P〈0.01）。妊娠期高血压、轻度子痫前期、重度子痫前期患者血清中可溶性Endoglin水平逐渐升高（分别为13.24±6.17ng/ml,28.28±10.19ng/ml,42.50±13.48ng/ml）,各组间差异有显著性（均P〈0.01）。妊娠期高血压疾病组与对照组比较胎盘组织中Endoglin表达明显升高（P〈0.01）。妊娠期高血压、轻、重度子痫前期胎盘组织中Endoglin表达逐渐增强,各组间差异具有显著性（P〈0.05）。两组血清中可溶性Endoglin水平与胎盘组织Endoglin表达呈正相关（r=0.504,P〈0.05及r=0.532,P〈0.05）。结论 Endoglin水平升高可能与妊娠期高血压疾病的发病及病情发展有关。     

HMGB1、TLR4和NF-B在子痫前期患者胎盘组织及血浆中升高

目的探讨高迁移率族蛋白(HMGB1)、TOLL受体4(TLR4)和NF-B信号通路在子痫前期中的相关作用。方法轻度子痫前期患者10例、重度子痫前期患者20例和同期正常妊娠者30例。免疫组织化学(SP法)检测胎盘中HMGB1、TLR4和NF-κB P65蛋白的表达变化及在组织中的定性、定位;用ELISA法检测血清中HMGB1、TLR4和NF-κB P65蛋白浓度。结果子痫前期患者胎盘中HMGB1、TLR4、和NF-κB P65蛋白表达高于正常对照组(P0.05);轻度和重度子痫前期患者间无差异。子痫前期患者血清中HMGB1、TLR4和NF-κB P65的含量较正常组明显升高(P0.05);且重度子痫前期患者血清中HMGB1、TLR4、和NF-κB P65蛋白表达高于轻度子痫前期患者(P0.05)。结论 HMGB1、TLR4及NF-κB P65蛋白表达水平在子痫前期患者胎盘及血清中显著升高,可能参与了子痫的发病过程。     

Homocysteine,endothelin-1 and nitric oxide in patients with hypertensive disorders complicating pregnancy

Objective: To investigate the change of level of serum homocysteine (Hcy), endothelin-1 (ET-1) and nitric oxide (NO) and clinical significance in patients with HDCP. Methods: Two hundred and thirty nine patients with HDCP (137 patients with mild preeclampsia, 102 patients with severe preeclampsia) who were hospitalized between June 2012 and June 2015 and 200 normal pregnancy women in outpatient department were enrolled in our study were divided into HDCP group and control group. Serum Hcy concentration was measured by enzymatic cycling assay. ET-1 concentration was measured by enzyme linked immunosorbent assay. And no concentration was measured by nitrate reductase assay. Results: Serum Hcy and ET-1 in HDCP group were significantly higher as compared to control group (P<0.05). Level of serum NO in HDCP group was significantly lower than in the control group (P<0.05). Level of serum Hcy and ET-1 in mild and severe preeclampsia group were significantly higher as compared to control group, respectively (P<0.05). Level of serum NO in mild and severe preeclampsia group were significantly lower than in the control group’ respectively (P<0.05). Level of serum Hcy and ET-1 in severe preeclampsia group were significantly higher as compared to mild preclampsia group (P<0.05). Level of serum NO in severe preeclampsia group were significantly lower than in mild preeclampsia group (P<0.05). Spearman rank correlation analysis showed that level of serum Hcy and ET-1 was positively correlated with severity of diseases (r=0.689, 0.718, P<0.05). Level of serum NO was negatively correlated with severity of diseases (r=-0.702, P<0.05). Conclusion: Serum Hcy, ET-1 and NO were associated with pathogenesis of HDCP. Comprehensively measurement of them could effectively evaluate the incidence and progress of HDCP.     

卡维地洛对氧自由基诱导的内皮细胞内源性一氧化氮合酶抑制物代谢的影响

目的： 观察卡维地洛对氧自由基（OFR）培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）二甲精氨酸-二甲赖氨酸水解酶 (DDAH)活性及表达的影响，以探讨卡维地洛对不对称二甲精氨酸（ADMA）代谢机制的影响。 方法： 采用改良的Jaffe法培养原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs），取生长良好的3-6代HUVECs用于实验，分为①空白对照组：加DMEM培养液；②OFR组:加入OFR（0.01 mmol/L,0.1 mmol/L）；③OFR+卡维地洛组: 同时加入0.1 mmol/L OFR及卡维地洛（10 μmol/L）共孵24 h后, 检测上清液中一氧化氮（NO）、内皮素（ET）、ADMA含量、L-胍氨酸(L-cit)浓度及一氧化氮合酶（NOS）活性。用Western blotting法测定细胞裂解液中二甲基精氨酸-二甲基赖氨酸水解酶 (DDAH)的蛋白表达。 结果： OFR条件培养下,内皮细胞的代谢产物ADMA、ET的量均高于空白对照组,而NO的量及NOS的活性少于空白对照组;反映DDAH酶活性的L-cit浓度显著降低,且有浓度依赖性，而DDAH的表达无明显变化。卡维地洛干预组的ADMA、ET的量均低于OFR组，NOS活性及NO、L-cit浓度明显高于OFR组。 结论： OFR培养下，内皮损伤ADMA的增加与DDAH的活性减弱有关，而与DDAH的表达无关。卡维地洛通过增加DDAH活性促进ADMA代谢，使NOS活性增加，抑制OFR对内皮功能的损伤。     

sEPCR、VEGF、MVD、KDR在早发型子痫前期胎盘中的表达

目的 研究sEPCR、VEGF、MVD、KDR在早发型子痫前期胎盘中的表达情况.方法 选取2016年3月至2017年4月我院收治的早发型子痫前期患者50例为研究对象,以同期入院体检的50例健康产妇为对照组,测定入组对象胎盘组织中可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘微血管密度(MVD)、含有激酶插入区的受体(KDR)及可溶性血管内皮生长因子受体(sFlt-1)水平,同时比较子痫前期病情轻度、中重度患者上述指标,分析PE患者sEPCR、VEGF、MVD、KDR及sFlt-1的相关性,评价上述指标联合诊断PE的效能.结果 早发型组胎盘组织VEGF(30.25 ±1.87)％、MVD(37.11 ±1.54)条低于对照组(P＜0.05),而其sEPCR(156.34±1.25) ng/mL、KDR(70.34±1.38)％、sFlt-1 (80.32±1.67)％较对照组升高(P＜0.05);重度子痫前期患者VEGF(30.18±1.30)％、MVD(36.20±1.31)条与轻度组比较明显降低,而sEPCR(154.22±1.05)％、KDR(71.20±1.66)％、sFlt-1 (81.11±1.56)升高(P＜0.05);sEPCR、VEGF、MVD、KDR联合诊断早发型PE患者灵敏度为98.05％,特异性为93.11％,准确度为96.20％,均高于上述指标单项诊断;相关分析显示子痫前期患者胎盘组织中VEGF、MVD与sFlt-1呈负相关(P＜0.05).结论 sEPCR、VEGF、MVD、KDR在早发型子痫前期胎盘中呈异常表达,随病情加重VEGF、MVD表达降低,sEPCR、KDR表达增多,其中VEGF、MVD表达水平与sFlt-1高表达有关.     

凝血指标、免疫因子和妊娠高血压综合征病情的关系观察

目的 探讨凝血指标、免疫炎症因子和妊娠高血压综合征病情的关系.方法 收集2015年1月至2016年10月在本院就诊的妊娠高血压综合征孕妇150例,其中轻中度子痫前期50例,重度子痫前期50例,子痫50例;另外选取30例健康非孕妇女和30例正常晚期妊娠妇女作为对照,采用免疫比浊法检测各组受检者的免疫指标、血浆凝血指标,包括C3、C4、IgA、IgG、IgM、D-D水平、凝血酶时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib).结果 ①健康非孕对照组、正常晚期妊娠组、轻中度子痫前期组三组C3、C4、IgA、IgG、IgM无明显差异,P＞0.05.和健康非孕对照组、正常晚期妊娠组对比,重度子痫前期C3、IgG、IgM显著减低,子痫组C3、C4、IgA、IgG、IgM更低,P＜0.05.②和健康非孕组对比,正常妊娠晚期组和妊娠高血压各组PT和APTT值显著减小,Fib和D-D水平显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.05).和正常晚期妊娠组对比,妊娠高血压各组PT和APTT值显著减小,Fib和D-D水平显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.05).妊娠高血压各组内对比,和轻中度子痫前期对比,重度子痫前期组、子痫组PT和APTT值显著减小,Fib和D-D水平显著增高,差异具有统计学意义,P＜0.05.和重度子痫前期组对比,子痫组PT和APTT值显著减小,Fib和D-D水平显著增高,差异具有统计学意义,P＜0.05.结论 凝血指标、免疫炎症因子和妊娠高血压综合征病情的关系密切,对妊娠高血压综合征患者进行C3、C4、IgA、IgG、IgM、D-D水平、凝血指标的检测,有利于尽早发现和监测患者的病情发展情况.     

cGMP对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞膜电压门控钾通道的作用

目的:探讨cGMP对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)膜电压门控钾通道(Kv通道)的作用, 为进一步阐明慢性低氧性肺动脉高压的发病机理提供理论依据。方法: Wistar大鼠, 随机分为对照组和慢性低氧组, 低氧组大鼠每天低氧(氧浓度10%±1%)8 h, 连续4周。单个大鼠PASMC的获得采用急性酶分离法(胶原酶Ⅰ型和木瓜蛋白酶)。采用全细胞膜片钳技术测定两组PASMC的静息膜电位(Em)和电压门控钾通道的钾离子电流(I_KV), 观察并比较cGMP (1 mmol/L) 以及cGMP和蛋白激酶G(PKG)抑制剂H-8 (1 mmol/L) 应用后两组PASMC I_KV的不同变化。结果:慢性低氧大鼠PASMC的静息膜电位和电压门控钾通道电流明显低于正常对照组。cGMP可抑制正常和慢性低氧大鼠PASMC +50 mV刺激时的峰值I_KV[正常组从(118.0±5.0)pA/pF下降到(89.9±16.5) pA/pF, n=6, P<0.05;慢性低氧组则从(81.0±5.0) pA/pF 下降到(56.8±9.1) pA/pF, n=6, P<0.05], 该抑制作用可被PKG的抑制剂H-8阻断[正常组(119.2±10.3) pA/pF vs (117.8±9.1)　pA/pF, n=6, P>0.05;慢性低氧组(96.8±6.2) pA/pF vs (98.0±2.2)　pA/pF, n=6, P>0.05]。结论:慢性低氧抑制肺动脉平滑肌细胞的电压门控钾通道。cGMP可能通过磷酸化作用而抑制正常和慢性低氧肺动脉平滑肌细胞的电压门控钾通道电流。