BCYRN1 调控miR-503 通过Notch1 信号通路对肺癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨BCYRN1 调控miR-503 通过Notch1 信号通路对肺癌迁移和侵袭的影响机制。方法:qPCR 检测不同肺癌细胞株中BCYRN1 和miR-503 的表达情况;免疫荧光和qPCR 检测慢病毒BCYRN1+siRNA 转染肺癌细胞的转染效率;双荧光素酶报告基因检测BCYRN1 与miR-503 的相互作用;Transwell 侵袭实验和划痕实验检测沉默BCYRN1 后肺癌细胞侵袭和迁移能力的变化;Western blot 检测沉默BCYRN1 后Notch1 信号通路蛋白的表达情况;裸鼠皮下成瘤检测沉默BCYRN1后肺癌细胞裸鼠体内成瘤能力的影响。结果:在肺癌细胞H1299 中BCYRN1 表达水平最高,miR-503 的表达水平相对较高;免疫荧光及mRNA 水平证明BCYRN1+siRNA 慢病毒可以有效转染进入H1299 细胞内;BCYRN19 能与miR-503 的3’-UTR 特异性结合;沉默BCYRN1 可以抑制肺癌H1299 细胞的侵袭和迁移能力;沉默BCYRN1 后Notch1 通路蛋白表达情况相应下调;与NC 组相比,BCYRN1-siRNA 组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小。结论:BCYRN1 可以靶向调节miR 503 通过Notch1 信号通路影响肺癌H1299 细胞的侵袭和迁移能力。     

miR-153靶向PRDM2基因并通过JAK/STAT信号通路影响膀胱癌的侵袭和迁移

目的:研究微小RNA(miR)-153是否靶向正性调控域锌指蛋白2(PRDM2)基因并通过调控JAK/STAT信号通路影响膀胱癌细胞的侵袭和迁移。方法:运用q PCR检测miR-153在膀胱癌组织中的表达;运用免疫组化检测PRDM2在正常组织和膀胱癌组织中的表达;Western blot检测不同膀胱癌细胞株中PRDM2的表达情况;双萤光素酶报告基因系统检测miR-153对PRDM2转录活性的影响;Transwell侵袭实验检测miR-153过表达对膀胱癌细胞RT4侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-153过表达对膀胱癌细胞RT4迁移能力的影响;Western blot实验检测过表达miR-153后JAK/STAT信号通路蛋白的水平。结果:和正常组织比较,PRDM2蛋白在膀胱癌中表达较高(P0.05);miR-153的表达水平在膀胱癌组织中较低(P0.05);双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,miR-153可以调控PRDM2的表达水平;过表达miR-153后,膀胱癌细胞株RT4的侵袭和迁移能力明显降低,p-JAK2和p-STAT3的蛋白水平下调。结论:miR-153靶向PRDM2,并通过JAK/STAT信号通路调控膀胱癌细胞的侵袭和迁移能力。     

缺氧条件下沉默DEC1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞活力、侵袭及迁移的影响

目的:探讨在缺氧条件下沉默人胚胎软骨发育基因1 (differentiated embryonic chondrocyte gene 1,DEC1)的表达对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响及作用机制。方法:分别检测不同培养条件(常氧和缺氧)下MDA-MB-231细胞中DEC1基因的表达情况;设计、合成靶向抑制DEC1基因的小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA),通过脂质体转染入缺氧条件下的MDA-MB-231细胞中,采用RT-qPCR和Western blot法验证细胞转染效率,CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测沉默DEC1基因表达对MDA-MB-231细胞活力、侵袭及迁移能力的影响;此外,采用Western blot法分析转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad3信号通路关键分子的表达。结果:在缺氧条件下人乳腺癌MDA-MB-231细胞中DEC1表达显著增高(P0.05),沉默DEC1表达后,MDA-MB-231细胞的活力、侵袭和迁移能力显著下降(P0.01);Western blot结果显示,缺氧条件下,沉默DEC1后磷酸化Smad3 (phosphorylated Smad3, p-Smad3)蛋白表达显著降低(P0.05)。结论:在缺氧条件下,沉默DEC1基因表达可能通过阻断TGF-β/Smad3信号通路进而抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的活力、侵袭及迁移能力。     

长链非编码H19靶向调节miR-107通过Notch通路对肺癌的侵袭迁移的影响

目的：探讨长链非编码H19靶向调节miR-107通过Notch通路对肺癌的侵袭迁移的影响情况。方法：qPCR检测肺癌和癌旁组织、不同肺癌细胞中H19的表达情况;Transwell侵袭实验检测沉默H19后肺癌细胞侵袭能力的变化;划痕实验检测沉默H19后肺癌细胞迁移能力的变化;双荧光素酶报告基因检测H19与miR-107的相互作用;qPCR检测肺癌和癌旁组织、不同肺癌细胞中miR-107的表达情况;Transwell侵袭实验检测沉默H19后miR-107对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测沉默H19后miR-107肺癌细胞迁移能力的影响;裸鼠皮下成瘤检测沉默H19后miR-107对肺癌成瘤大小以及体积的影响。Western blot检测沉默H19后Notch通路蛋白的表达情况。结果：与癌旁组织相比,肺癌组织中H19表达明显增高;肺癌细胞A549中H19表达水平最高;沉默H19可以抑制肺癌细胞侵袭和迁移能力;H19能与miR-107的3′UTR特异性结合;与癌旁组织相比,肺癌组织中miR-107表达明显降低;沉默H19后,抑制miR-107可以促进肺癌细胞侵袭和迁移能力;与H19-siRNA组相比,H19-siRNA+miR-107-inhibitor组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显增大。沉默H19后Notch通路蛋白表达情况相应下调。结论：H19在肺癌发生发展过程中起重要作用,H19可以靶向调节miR-107通过Notch信号通路调控肺癌细胞的侵袭和迁移能力。     

黄芩素通过失活JAK / STAT 信号通路抑制T24 细胞迁移侵袭

目的:研究黄芩素对膀胱癌细胞的细胞迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法:运用Transwell法检测细胞迁移侵袭量;Western blot检测细胞中uPA、MMP-9、TIMP-1、 TIMP-2、p-JAK2和p-STAT的蛋白表达。结果:与NC组相比,黄芩素处理组细胞的迁移量和侵袭量均显著降低(P0.05),细胞迁移侵袭相关蛋白uPA、MMP-9蛋白表达显著降低(P0.05),TIMP-1、 TIMP-2蛋白表达显著升高(P0.05);50μmol/L黄芩素处理组细胞JAK/STAT信号通路相关蛋白p-JAK2、p-STAT表达显著降低(P0.05),且JAK/STAT信号通路的活性与细胞迁移侵袭量成正相关;激活黄芩素处理组细胞的JAK/STAT信号通路可显著增加细胞的迁移侵袭量。结论:黄芩素可抑制膀胱癌细胞的迁移侵袭,其机制可能与失活JAK/STAT信号通路有关,将可为黄芩素治疗膀胱癌的临床应用提供依据。     

长链非编码RNA PVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平最高(P0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P0.05)。结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。     

2’-羟基黄烷酮通过阻断AKT/STAT3信号通路抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭及迁移

目的探讨2’-羟基黄烷酮对膀胱癌细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其机制。方法 MTT法检测2’-羟基黄烷酮对膀胱癌细胞增殖的影响,并计算增殖抑制率;划痕实验检测2’-羟基黄烷酮对膀胱癌细胞迁移能力的影响;TranswellTM实验检测2’-羟基黄烷酮对膀胱癌细胞的体外侵袭能力的影响;Western blot法检测2’-羟基黄烷酮处理后侵袭转移相关蛋白表达的变化。结果 2’-羟基黄烷酮对膀胱癌5637、T24、UMUC-3、253J细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间、浓度依赖关系;经2’-羟基黄烷酮处理后,T24细胞体外迁移及侵袭能力均明显降低(P0.05),并伴随基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、p-AKT、p-STAT3表达的下调。结论 2’-羟基黄烷酮能抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭迁移,其作用机制可能与阻断AKT/STAT3信号通路有关。     

Smad1 在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌细胞迁移能力的影响研究

目的:研究Smad1 在胃腺癌组织中的表达及对胃腺癌细胞迁移能力的影响。方法:提取收集的胃腺癌组织 及对应的癌旁组织中的蛋白,Western blot 检测Smad1 的表达水平。以胃腺癌细胞HGC-27 为研究对象,细胞转染过表达 Smad1 的载体(p-EGFP-C1/ Smad1)和Smad1 小干扰RNA(Smad1 siRNA),同时转染p-EGFP-C1 和siRNA control 为对照。细胞 划痕实验检测细胞迁移能力。Western blot 检测细胞中MMP-9、MMP-2、p-Akt、Akt 的表达水平。Akt 信号通路抑制剂 LY294002(20μg/ ml)作用于胃腺癌细胞HGC-27,MTT 检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。Western blot 检 测MMP-9、MMP-2、p-Akt、Akt 蛋白表达水平。结果:胃腺癌组织中Smad1 的水平明显低于癌旁组织(P<0.01)。p鄄EGFP鄄C1/ Smad1 组细胞存活率和迁移率均明显低于p-EGFP-C1 组(P<0.01)。Smad1 siRNA 组细胞存活率和迁移率均明显高于siRNA control 组(P <0.01)。p-EGFP-C1、p-EGFP-C1/ Smad1、siRNA control、Smad1 siRNA 组细胞中Akt 蛋白表达水平没有变化。 p-EGFP-C1/ Smad1 组细胞MMP-9、MMP-2、p-Akt 蛋白表达水平明显低于p-EGFP-C1 组(P<0.01)。Smad1 siRNA 组细胞MMP鄄 9、MMP-2、p-Akt 蛋白表达水平明显高于siRNA control(P<0.01)。胃腺癌细胞与Akt 信号通路抑制剂作用后细胞增殖和迁移 趋势与p-EGFP-C1/ Smad1 组一致。结论:Smad1 在胃腺癌组织中低表达。Smad1 能够抑制胃腺癌细胞增殖和迁移,作用机制 与Akt 信号通路有关。     

MTA1基因调节神经胶质母细胞瘤细胞U-87-MG侵袭与迁移

目的评价沉默MTA1基因对神经胶质瘤细胞U-87-MG侵袭与迁移能力的影响。方法应用慢病毒转染技术沉默MTA1基因的表达,通过Western blot实验与荧光共聚焦实验检测MTA1蛋白与F-actin蛋白的表达;通过Transwell实验评估细胞侵袭与迁移能力;Western blot实验检测E-cadherin,N-cadherin蛋白的表达。结果沉默MTA1基因可下调F-actin蛋白的表达水平,抑制U-87-MG细胞的侵袭与迁移能力,并且上调N-cadherin蛋白,下调E-cadherin蛋白的表达。结论沉默MTA1基因抑制胶质母细胞瘤细胞系U-87-MG的侵袭与迁移能力与影响F-actin的集聚与EMT相关蛋白N-cadherin与E-cadherin表达相关。     

靶向ANGPTL4基因shRNA慢病毒载体抑制SiHa细胞迁移与侵袭

目的探讨慢病毒介导短发夹RNA(shRNA)沉默血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)基因对人宫颈癌细胞系Si Ha细胞迁移与侵袭的影响。方法实验分为3组,即空白对照组、阴性对照组及LV3/ANGPTL4组。用ANGPTL4shRNA慢病毒干扰载体感染Si Ha细胞,Western blot检测Integrinβ1、VEGF及MMP9蛋白表达,划痕实验检测Si Ha细胞迁移能力,Transwell实验检测Si Ha细胞迁移与侵袭能力。结果重组慢病毒载体成功感染Si Ha细胞,与空白对照组及阴性对照组比较,LV3/ANGPTL4组Si Ha细胞Integrinβ1、VEGF及MMP9蛋白表达水平降低(P0.01),细胞迁移与侵袭能力减弱(P0.05)。结论靶向ANGPTL4基因shRNA慢病毒载体可降低Si Ha细胞Integrinβ1、VEGF及MMP9蛋白表达水平,抑制Si Ha细胞迁移与侵袭能力。     

lncRNA MALAT1靶向调控miR-146b-5p影响膀胱癌细胞侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)靶向微小RNA-146b-5p(miR-146b-5p)影响膀胱癌细胞侵袭和迁移的机制。方法:在膀胱癌BIU-87细胞中转染MALAT1 siRNA,以real-time PCR方法测定转染效果,Transwell法测定侵袭及迁移能力,Western blot法检测细胞中上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白波形蛋白(vimentin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达的变化。生物信息学软件预测MALAT1与miR-146b-5p有靶向互补位点,利用双萤光素酶报告系统鉴定靶向关系。用real-time PCR方法检测下调MALAT1后BIU-87细胞中miR-146b-5p表达的变化。将MALAT1 siRNA和miR-146b-5p inhibitor共转染至BIU-87细胞中,用上述方法分析细胞侵袭、迁移及vimentin、E-cadherin和MMP-2蛋白表达的变化。结果:转染MALAT1 siRNA可明显下调BIU-87细胞中MALAT1的表达水平(P<0.05)。敲减MALAT1表达后,BIU-87细胞的侵袭和迁移能力下降,细胞中vimentin和MMP-2蛋白水平降低,E-cadherin蛋白水平升高。MALAT1靶向调控miR-146b-5p的表达,敲减MALAT1的表达可以提高BIU-87细胞中miR-146b-5p的水平。miR-146b-5p inhibitor可以明显逆转敲减MALAT1的表达对BIU-87细胞侵袭、迁移能力和vimentin、E-cadherin、MMP-2蛋白表达的影响。结论:下调MALAT1可靶向促进miR-146b-5p表达,抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移能力和EMT。     

Expression of TGFβ3 and its effects on migratory and invasive behavior of prostate cancer cells: involvement of PI3-kinase/AKT signaling pathway

Transforming growth factor-β (TGFβ) is a secreted cytokine implicated as a factor in cancer cell migration and invasion. Previous studies have indicated that TGFβ isoforms may exert differential effects on cancer cells during different stages of the disease, however very little is known about the expression patterns and activity of the three isoforms in prostate cancer. Non-traditional signaling pathways including the PI3-Kinase have been associated with TGFβ-mediated effects on cancer cell invasion. In the present study, we have carried out expression analysis of TGFβ isoforms and signaling components in cell line models representing different stages of prostate cancer and studied the differential effects of specific isoforms on migratory and invasive behavior and induction of the PI3-kinase pathway. TGFβ1 and TGFβ3 were expressed in all cell lines, with TGFβ3 expression increasing in metastatic cell lines. Both TGFβ1 and TGFβ3 induced motility and invasive behavior in PC3 cells, however, TGFβ3 was significantly more potent than TGFβ1. TGFβRI and Smad3 inhibitors blocked TGFβ1 and TGFβ3 induced motility and invasion. TGFβ3 caused a significant increase in pAKT^ser473 in PC3 cells and PI3-kinase inhibitor LY294002 blocked TGFβ3 induced migration, invasion and phosphorylation of AKT. Both TGFβRI and Smad3 inhibitors blocked TGFβ3 induced pAKT^ser473. Based on these results, we conclude that TGFβ3 is expressed in metastatic prostate cancer cell lines and is involved in induction of invasive behavior in these cells. Furthermore, these effects of TGFβ3 are TGFβRI and Smad3 dependent and mediated via the PI3-kinase pathway.     

miR-490-3p通过抑制TGFβR1基因表达进而抑制结肠癌细胞的转移和侵袭

目的：研究miR-490-3p在结肠癌细胞(colorectal cancer cell,CRC)转移中的表现和生物功能,及其调控作用机制。方法：通过荧光定量PCR测定miR-490-3p在CRC细胞系的表达水平。细胞转染miR-490-3p以及shmiR-490-3p,观察miR-490-3p的过表达或基因沉默对结肠癌细胞的转移能力是否有影响。miR-490-3p的分子靶标由双荧光素酶报告基因分析和免疫印迹技术进行实验认定。通过划痕实验,Transwell小室基质渗透实验对细胞迁移和侵袭能力进行鉴定。结果：miR-490-3p在CRC细胞系中显著低表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001,n>3)。过表达miR-490-3p显著降低CRC细胞株的细胞迁移和侵袭能力(P<0.01,n>3)。miR-490-3p的基因沉默显著增加CRC细胞株的细胞迁移和侵袭能力(P<0.01,n>3)。结肠癌细胞细胞系中过表达miR-490-3p显著降低TGFβR1的基因表达(P<0.001,n>3),miR-490-3p基因沉默显著上调TGFβR1的基因表达(P<0.001,n>3)。过表达miR-490-3p抑制TGFβR1的萤光素酶活性(P<0.001,n>3),miR-490-3p基因沉默促进TGFβR1的萤光素酶活性(P<0.001,n>3)。TGFβR1基因沉默减弱shmiR-490介导的细胞迁移和侵袭促进效应(P<0.01, n>3)。结论：miR-490-3p通过抑制TGFβR1的基因表达从而抑制CRC细胞的转移。     

西罗莫司对膀胱癌BIU-87细胞增殖及侵袭能力的影响

目的探讨西罗莫司对膀胱癌BIU-87细胞增殖和侵袭能力的作用。方法将BIU-87细胞贴壁培养于10%胎牛血清、100 U/ml青霉素、100μg/ml链霉素的RPMI-1640培养液中,37℃、5%CO饱和湿度培养箱中2培养。取对数生长的BIU-87细胞,处理组加入西罗莫司的浓度范围是(10-1000)nmol/L;对照组不加药物,每天紧更换1640培养液。MTT法分析各浓度组的生长抑制率并制作抑制曲线,Transwell法通过使用matrigel基质胶检测BIU-87细胞在体外的侵袭能力。结果西罗莫司对BIU-87细胞有明显抑制作用,呈时间和量效依赖关系。Transwell法发现不同浓度的西罗莫司可以减弱BIU-87细胞的体外侵袭能力,呈量效依赖性。结论西罗莫司可以抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖活性及侵袭能力。     

抗人膀胱癌/抗VEGF双功能基因抗体导入治疗荷瘤鼠膀胱癌的研究

目的：探讨抗人膀胱癌，抗VEGF双功能基因抗体对膀胱癌生长的抑制作用。方法：应用双功能抗体作用荷瘤鼠模型，观察抑瘤作用；应用免疫组化技术检测体内生长肿瘤中微血管密度。结果：双功能抗体对体内生长的肿瘤有明显的抑制作用，经双功能抗体治疗的瘤体中微血管密度明显低于对照组。结论：双功能抗体可以抑制肿瘤血管生成，有望为膀胱癌的治疗提供新的方法。     

Identification of Hypermethylation in Hepatocyte Cell Adhesion Molecule Gene Promoter Region in Bladder Carcinoma

Background: Epigenetic regulation such as aberrant hypermethylation of CpG islands in promoter plays a key role in tumorigenesis. 5-Aza-2''-deoxycytidine (5-aza-CdR) which is a potent inhibitor of DNA methylation can reverse the abnormal hypermethylation of the silenced tumor suppressor genes (TSGs). It has been reported that hepatocyte cell adhesion molecule (hepaCAM) acts as a tumor suppressor gene and expression of its mRNA and protein were down-regulated in bladder cancer. Over-expression of hepaCAM can inhibit cancer growth and arrest renal cancer cells at G0/G1 phase. In this study, we investigated the methylation status of hepaCAM gene, as well as the influence of 5-aza-CdR on expression of hepaCAM gene in bladder cancer cells. Methods: CpG islands in hepaCAM promoter and methprimers were predicted and designed using bioinformatics program. Methylation status of hepaCAM promoter was evaluated in bladder cancer tissues and two cell lines (T24 and BIU-87) by Methylation-specific PCR; Western blot and Immunofluorescence were used to detect expression of hepaCAM protein after 5-aza-CdR treatment; Flow cytometry assay was performed to determine effectiveness of 5-aza-CdR on cell cycle profile. Results: CpG island in promoter of hepaCAM gene was hyper-methylated both in bladder carcinoma tissues and cell lines (T24 and BIU-87). Otherwise, aberrant methylation of its promoter was associated with its decreased expression. Hypermethylation of hepaCAM gene was reversed and expression of its mRNA and protein were re-activated in two cell lines by DNA methyltransferases inhibitor 5-aza-CdR. Flow cytometry assay demonstrated that 5-aza-CdR can inhibit growth of cancer cells by arresting cancer cells at G0/G1 phase. Conclusion: Abnormal hypermethylation in CpG island of hepaCAM promoter is involved in absence of hepaCAM gene expression when bladder cancer occurs. Re-activation of hepaCAM gene by 5-aza-CdR can inhibit growth of cancer cells and arrest cells at G0/G1 phase.     

长链非编码MALAT-1 调控miR-205 的表达影响非小细胞肺癌细胞的生长和迁移

目的:探讨在非小细胞肺癌中,LncRNA MALAT-1 与miR-205 的相互关系,以及影响肺癌细胞生物学行为的机制。方法:qPCR 检测不同非小细胞肺癌中LncRNA MALAT-1 的表达情况;双荧光素酶报告基因检测MALAT-1 与miR-205的相互作用;Transwell 侵袭实验和划痕实验检测抑制MALAT-1 后肺癌细胞侵袭能力的变化,以及抑制miR-205 的表达后肺癌细胞迁移和侵袭能力的恢复情况;裸鼠皮下成瘤检测抑制LncRNA MALAT-1 后肺癌细胞体外成瘤体积和质量变化。结果:与其他肺癌细胞株相比,A549 细胞中MALAT-1 表达最高,miR-205 的表达水平最低;双荧光素酶实验证实MALAT-1 能与miR-205 的3忆UTR 特异性结合,可以调控miR-205 的表达与活性;抑制MALAT-1 的表达后可以降低肺癌细胞的迁移和侵袭能力;抑制miR-205 的表达水平过后,肺癌细胞的迁移和侵袭能力相对增强;抑制MALAT-1 的表达后,荷瘤小鼠的肿瘤体积和重量都明显减小。结论:MALAT-1 可以调控miR-205 的表达影响肺癌细胞A549 的侵袭和迁移能力。     

Rab5 GTPase对膀胱癌细胞自噬及增殖的调控

目的探讨Rab5 GTPase对膀胱癌细胞自噬及增殖的影响。方法采用实时定量PCR检测60例膀胱癌组织以及相应正常膀胱组织中Rab5 mRNA的表达水平,并检测Rab5 mRNA在膀胱癌细胞系及正常膀胱细胞系中的表达情况。通过pcDNA3.1-Rab5转染膀胱癌细胞系BIU-87、RT4过表达Rab5;免疫荧光、Western blot检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、LC3斑点数目变化情况以及自噬相关蛋白Vps34的表达变化;采用CCK-8检测膀胱癌细胞的增殖改变情况。结果Rab5 mRNA在膀胱癌组织中的表达高于正常膀胱组织,Rab5 mRNA在膀胱癌细胞中的表达高于正常膀胱细胞系,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光显示过表达Rab5后LC3荧光斑点明显增多,且过表达Rab5促进膀胱癌细胞中Vps34的表达增加及LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化;过表达Rab5能促进膀胱癌细胞增殖(P<0.05)。结论膀胱癌组织中Rab5 mRNA的表达高于正常膀胱组织,Rab5提高膀胱癌细胞自噬水平并促进膀胱癌细胞增殖,且与自噬相关蛋白Vps34相关。