慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型的诱导

目的　诱导慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型。方法　选用 (DBA 2×C57BL 6J)F1小鼠 ,通过尾静脉注射其母鼠DBA 2淋巴细胞诱导模型 ,观察 12周。结果　F1小鼠注射母鼠淋巴细胞后 2周产生自身抗体 ,出现蛋白尿 ,4周血脂、血肌酐、尿素氮轻度升高 ,肾脏病理仅有系膜细胞轻度增生 ,未见间质损害。 8周血生化指标明显改变 ,肾脏病理示肾小球系膜细胞中度增生 ,间质炎细胞浸润和肾小管大量蛋白管型 ,10～ 12周各项观察指标改变明显 ,病理出现局灶或弥漫肾小球硬化 ,免疫荧光示IgG、IgM、C3沿毛细血管壁及系膜区沉积。结论　慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠模型类似人类狼疮性肾炎 ,是良好的狼疮肾炎模型     

慢性移植物抗宿主病狼疮小鼠模型免疫学特征分析

目的:诱导及鉴定慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮小鼠模型,分析其肾病变特点及狼疮相关免疫学特征.方法:选取6～8周龄(C57BL/10×DBA/2)F1雌性小鼠,随机分为两组,模型组12只,对照组7只,分别于第0、3、8天经尾静脉注射DBA/2雌鼠胸腺和脾的淋巴细胞(模型组)或磷酸盐缓冲液(对照组).利用考马斯亮蓝法监测小鼠尿蛋白变化;检测小鼠血清的抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体、抗核小体抗体及抗可提取核抗原(ENA)抗体;利用流式细胞技术分析CD4+CD25+调节T细胞的变化;应用实时定量PCR法测定两组小鼠外周血单个核细胞(PBMC)中Foxp3的表达量;于12周末分别用PAMS染色及直接免疫荧光法检测小鼠的肾病理变化.结果:模型组小鼠的尿蛋白自第6周明显增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).模型组小鼠血清中ANA抗体阳性率于第8、12周时明显高于对照组;随小鼠周龄增加,模型组小鼠抗dsDNA抗体及抗核小体抗体的滴度增高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).12周时模型组外周血CD4+CD25+调节T细胞的比例明显低于对照组(P=0.002),但两组间外周血PBMC Foxp3的表达量差异无统计学意义(P>0.05).模型组小鼠肾病理的PASM染色可见典型狼疮肾炎病理改变,直接免疫荧光检测可见IgG广泛沉积;而对照组小鼠肾无以上表现.结论:GVHD模型鼠不仅出现了类似人类狼疮肾炎的尿蛋白变化,血清中还出现多种自身抗体,CD4+CD25+调节T细胞明显异常,其肾病理呈典型的狼疮肾炎改变.因此,cGVHD模型鼠可作为一种比较好的系统性红斑狼疮相关基础研究及新疗法的动物模型.     

中药与免疫抑制剂防治肾小管间质纤维化的实验研究

探讨中药、免疫抑制剂与强的松在弥漫性增生性肾炎中,对免疫细胞浸润、TGF-β分泌及对肾小管间质纤维化的作用,为治疗肾炎提供实验依据.采用Wester大鼠建立肾炎动物模型,模型建立后分为对照组,饲喂强的松治疗组,强的松+环磷酰胺治疗组,强的松+川芎嗪(ligustrazine)治疗组,强的松+别甲(Carapax Amydae)治疗组,强的松+赤小豆(phaseolus angularis)+仁(Co ix)治疗组,共6组.治疗中每周查24小时尿蛋白,尿β2-MG,治疗8周处死各组动物,取心血测血肌酐、尿素氮,并取肾作病理、免疫、电镜与TGF-β酶组化检查.结果显示:强的松+环磷酰胺(CTX)治疗组,能明显抑制免疫细胞浸润,抑制TGF-β在肾小球与肾小管间质的分泌,尿蛋白与β2-MG产生减少,血肌酐、尿素氮下降.单一强的松组则无上述作用.强的松与中药配伍治疗的各组中,与川芎嗪配伍的疗效优于其它各中药组,但较CXT配伍组差 ,而各治疗组均优于对照组.以上表明:强的松+环磷酰胺治疗弥漫性增生性肾炎有明显疗效.单一强的松组治疗作用较差,但合用上述药物疗效更佳.     

Pi3-k/Akt信号通路在狼疮样小鼠肾组织中的激活及霉酚酸酯的调控作用

目的:研究Pi3-k/Akt信号通路在狼疮样小鼠肾组织中的激活及霉酚酸酯(MMF)的调控作用。方法:建立cGVHD狼疮样小鼠模型。随机分为3组,每组6只小鼠,将模型动物分两组即模型组和MMF治疗组,另设对照组。检测各组血肌酐、尿素氮及尿蛋白变化,观察肾组织纤维化程度,检测各组小鼠肾组织中P-Akt及Akt蛋白表达情况。结果:12周模型组的小鼠肾小球系膜节段、弥漫性增生,且血肌酐、尿素氮及尿蛋白较对照组均明显增加。Western blotting结果证实模型组肾组织中Akt及P-Akt蛋白表达与正常组相比均明显增加(P<0.01),而MMF治疗组与模型组相比其Akt及P-Akt的蛋白表达均降低,且血肌酐、尿素氮及尿蛋白水平也受到抑制。结论:Pi3-k/Akt信号通路参与了狼疮肾炎的发病,MMF抑制Akt的磷酸化可能是其在狼疮肾炎中发挥治疗作用的机制之一。     

JNK在cGVHD狼疮样小鼠肾组织表达及在肾纤维化中作用研究

目的:观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)在慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠肾组织中的表达情况,初步探讨其在狼疮肾炎肾脏纤维化中所起的作用.方法:建立cGVHD狼疮样小鼠模型.将小鼠分为12周正常对照组、16周正常对照组、12周模型组及16周模型组4组,每组6只,于12周末处死12周正常对照组和12周模型组小鼠,16周末处死16周正常对照组和16周模型组小鼠,采用双缩脲比色法观察各组小鼠24 h尿蛋白排泄量,HE和Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组织化学法定位检测JNK、p-JNK在肾组织的表达,RT-PCR法检测各组JNK mRNA表达及Western blotting技术半定量检测JNK、p-JNK蛋白表达水平.结果:12周模型组小鼠24 h尿蛋白排泄量,JNK、p-JNK蛋白及mRNA的表达与正常对照组相比均明显增加(P<0.01),16周模型组更甚(P<0.01).结论:JNK、p-JNK蛋白及mRNA表达在cGVHD狼疮样小鼠肾组织中明显上调,其可能在狼疮肾炎肾纤维化进程中起着重要作用.     

小鼠抗GBM肾炎模型的复制与鉴定

目的 为研究人类新月体性肾炎的发病机制,建立小鼠抗肾小球基底膜（GBM）肾炎的动物模型.方法 60只健康昆明小鼠随机分为肾炎模型组和正常对照组.肾炎模型组小鼠一次性尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清（16 ml/kg）,正常对照组注射等量正常兔血清.肾炎模型组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清前1周,背部皮内注射正常兔血清进行预免疫.于兔抗小鼠GBM血清注射后第7、14、21、28天取尿液、血清、肾组织标本,检测尿蛋白、血肌酐、血尿素氮含量,观察肾组织病理变化.结果 肾炎模型组小鼠注射兔抗小鼠GBM血清后,第2天蛋白尿、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高,于第14天尿蛋白浓度达到高峰,而血肌酐和血尿素氮含量仍持续上升.肾炎模型组肾组织病理表现为：第7天大量炎症细胞浸润;第21天 GBM增宽增厚,足突融合,大量免疫复合物沉积,内皮细胞及系膜细胞显著增生,新月体形成.结论 成功建立了小鼠抗GBM肾炎模型.     

不同给药途径时抗核抗体独特型多肽对狼疮样肾炎小鼠作用的探讨

目的应用抗核抗体独特型多肽免疫治疗狼疮肾炎小鼠,观察其对狼疮肾炎模型小鼠肾脏的保护作用。方法将35只雌性GVHD狼疮样肾炎小鼠(C57BL/10×DBA/2)F1分为3组,肾炎模型对照组(10只),口服多肽实验组(10只),皮下注射多肽实验组(15只)。3组小鼠均于24周龄处死,观察3组小鼠体质量、尿蛋白、肾脏组织学及血清IL-6水平的变化。结果在给予多肽12周时,皮下注射组和口服多肽组小鼠肾脏损害较对照组明显减轻;血清IL-6水平也较对照组明显降低。在给予多肽10周时,皮下注射组小鼠体质量明显高于对照组小鼠,12周时口服组体质量也明显高于对照组。给予多肽4周时,皮下注射组小鼠尿蛋白明显少于对照组,8周时口服组尿蛋白也明显少于对照组。结论口服独特型多肽对GVHD狼疮样肾炎小鼠肾脏同样有保护作用。     

ILK在cGVHD狼疮样小鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的观察整合素连接激酶(ILK)在慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠肾脏中的表达,探讨其在狼疮肾炎肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法建立cGVHD狼疮样小鼠模型,将小鼠分成正常对照组(A组)、12周模型组(B组)和16周模型组(C组),每组6只。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、western blot、免疫组织化学法分别检测ILK、E-钙粘蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白在肾组织中的表达。结果RT-PCR和west-ern blot方法分别检测到B、C两组小鼠肾组织ILK、α-SMA mRNA和蛋白表达较A组升高(P均<0.01),E-钙粘蛋白表达降低(P均<0.01)。ILK蛋白和mRNA表达与α-SMA表达呈正相关(r分别为0.83,0.86,P均<0.01),与E-钙粘蛋白表达呈负相关(r分别为-0.84,-0.89,P均<0.01)。免疫组化结果表明,与A组相比,B、C两组小鼠肾小管及间质均可见ILK、α-SMA蛋白显著表达,而E-钙粘蛋白的表达显著减少。结论cGVHD狼疮样小鼠肾组织中ILK蛋白及mRNA表达明显上调,可能通过介导肾小管上皮-间充质细胞转分化而参与了狼疮肾炎肾间质纤维化的进程。     

紫金狼疮解毒丸GVHR狼疮样小鼠作用的实验研究

目的观察紫金狼疮解毒丸对系统性红斑狼疮动物模型的效果并探讨其作用机理。方法采用同种异体淋巴细胞复制诱导型移植物抗宿主反应（GVHR）狼疮样小鼠模型，研究紫金狼疮解毒丸对GVHR狼疮样小鼠模型的作用。结果显示同种异体淋巴细胞的输入能诱导出dsDNA和抗组蛋白抗体的持续升高。尿蛋白异常并发生免疫复合物介导的肾小球肾炎等SLE样病变；用紫金狼疮解毒丸能显著地控制模型小鼠血清中抗dsDNA和组蛋白抗体的升高（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．001）降低尿蛋白的阳转率（P〈0．05）；非常显著地减轻肾小球病理改变。结论紫金狼疮解毒丸能控制SLE样小鼠相关病变的发展。     

同种异体淋巴细胞致狼疮肾炎小鼠模型的研究

目的　制备狼疮肾炎小鼠模型。方法　采用昆明小鼠同种异体脾淋巴细胞经Lectin刺激后输入小鼠腹腔皮下的方法。结果　成功地制备了系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型 ,通过光镜、免疫荧光、电镜观察其病理形态、并检测了血清抗ds -DNA抗体、补体以及尿蛋白 ,证实了该模型的可靠性。结论　制备的系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型有实用价值     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。