蒲公英多糖体外抑瘤和抗突变作用研究

目的 观察蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制和抗突变作用.方法 采用MTT法测定蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制作用,用微核实验检测抗突变作用.结果 蒲公英多糖随浓度的增加对肝癌细胞的抑制率增加,但不明显;可以显著提高外周血细胞免疫力,拮抗由环磷酰胺诱发的微核突变(P<0.01).结论 蒲公英多糖对肝癌细胞的抑制作用不明显;能有效地拮抗环磷酰胺诱发的微核突变.     

双氢青蒿素抑制肝癌细胞生长机制的初步研究

目的初步探究双氢青蒿素对肝癌细胞Huh7和Huh6生长的影响及可能存在的机制。方法培养肝癌细胞Huh7和Huh6,使用CCK-8法和结晶紫染色检测双氢青蒿素对肝癌细胞Huh7和Huh6生长抑制情况。Western Blot检测药物作用于细胞48 h后,AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比,双氢青蒿素(12. 5μM、25μM、50μM)可以下调AKT/mTOR信号通路p-AKT、p-S6K、p-S6蛋白的表达水平,从而影响肝癌细胞的生长。结论双氢青蒿素通过抑制AKT/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞生长。     

党参抗肿瘤药理作用研究

目的:探讨党参多糖对肝癌细胞的活性。方法:MTT法探索党参多糖对肝癌细胞的抑制作用,利用荧光显微镜检测党参多糖对肝癌细胞的凋亡作用、瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学、病理切片及急性毒性确定党参多糖毒性。结果:党参多糖对肝癌细胞SMMC-7721细胞具有抑制作用,细胞核固缩,有凋亡小体的出现,但是党参多糖对昆明种小鼠的脏器没有明显的毒性。结论:党参多糖具有抑制肝癌细胞SMMC-7721的作用。     

鳖甲煎丸抑制肝癌细胞增殖、黏附及侵袭作用的实验研究

目的 研究鳖甲煎丸对肝癌细胞生长增殖、黏附及侵袭能力的影响,初步探讨鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。方法 运用血清药理学方法,以高、中剂量的鳖甲煎丸含药血清和空白血清分别培养肝癌细胞HepG2,采用MTT 比色法、细胞黏附实验和transwell侵袭实验检测药物对细胞生长、黏附和侵袭作用的影响,以进一步阐明鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。结果 高剂量和中剂量含药血清可显著抑制肝癌细胞生长增殖,对基底膜的黏附及侵袭穿越迁移亦有抑制作用,且该作用与药物浓度有关。结论 鳖甲煎丸能显著抑制肝癌细胞的生长增殖、黏附及转移侵袭。     

红豆杉细胞提取物抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的 研究红豆杉细胞提取物对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用及其机制。方法 运用台盼蓝拒染法测定肿瘤细胞生长曲线，流式细胞仪和Giemsa染色分析肿瘤细胞周期和细胞凋亡。结果 红豆杉细胞二氯甲烷提取物对肝癌细胞SMMC-7721的生长有明显的抑制作用，流式细胞仪分析发现G2／M期肿瘤细胞数量增多，经Giemsa染色发现肿瘤细胞有凋亡发生。结论 红豆杉细胞提取物可以通过诱导细胞发生凋亡而抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长。     

蛇毒复合酶对人肝癌细胞BEL-7402的抑瘤研究

观察蛇毒复合酶对人肝癌细胞 BEL - 74 0 2体外生长的抑制作用。经体外细胞培养 ,采用台盼兰染法、细胞形态观察和流式细胞术 ,检测人肝癌细胞的生长抑制率 ,以及细胞形态和细胞周期的变化。结果 ,蛇毒复合酶对人肝癌细胞有极强的抑瘤作用 ,8h和 12 0 h抑瘤率分别达 79.5%和 94 .5%。镜检及涂片染色发现癌细胞胞膜破裂、胞质外溢。流式细胞术分析显示蛇毒复合酶主要杀伤 G0 / G1期人肝癌细胞 ,同时 ,阻滞 S期细胞进入 G2 / M期。说明 :蛇毒复合酶对人肝癌细胞具有一定体外抑瘤作用 ,其作用机理与破坏细胞胞膜和干扰细胞生长周期有关。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

皂角刺总黄酮对体内外人肝癌细胞株HepG2作用活性的研究

目的:探索皂角刺总黄酮对肝癌细胞体内外抑制作用。方法:采用不同剂量的皂角刺总黄酮对肝癌细胞的体外敏感性;对荷瘤小鼠进行体内实验,观察该提取物对肝癌细胞生长的抑制情况。结果:体外实验2.0-0.75mg/ml浓度下皂角刺总黄酮对其增殖有明显的抑制作用,体内实验50、100和150mg/kg剂量分别对荷瘤小鼠生命延长率分别为50.2%、67.2%和74.6%,抑瘤率分别达到55.3%、55.4%和60.3%。结论:皂刺总黄酮在体内外具有明显抑制肝癌细胞的作用。该实验结果为将来皂刺总黄酮应用于临床提供了理论依据。     

肝癌细胞对艾叶水提物的敏感性

目的研究肝癌细胞对艾叶水提物的敏感性。方法制备艾叶水提物溶液,以17.5,35,70 mg(艾叶)/m l分别处理HepG2细胞,采用倒置显微镜观察肝癌细胞的生长状态,MTT法测定肝癌细胞的活力,集落形成实验测试肝癌细胞的增殖潜力。结果不同浓度的艾叶水提物处理肝癌细胞12 h均使细胞严重皱缩,随作用时间的延长,细胞持续皱缩,甚至死亡,其效果与药物浓度呈正相关;处理肝癌细胞12~48 h,细胞OD值均明显下降,与对照组比较均有差异,差异有统计学意义(P<0.01);计数72 h后各处理组10个以上细胞的集落形成率均为0,对照组为100%。结论肝癌细胞对艾叶水提物极敏感,能导致细胞皱缩,阻止细胞增殖,最终诱导细胞死亡。进一步研究艾叶水提物的活性部位具有重要意义。     

单环刺螠多肽抗肿瘤及对小鼠免疫功能的调节作用

目的：进行单环刺螠多肽体外抑制人肝癌细胞（SMMC-7721）生长的实验，研究其对S180肉瘤的抑瘤作用及对小鼠机体免疫力的影响。方法：通过MTT法测定不同浓度单环刺螠多肽对人肝癌细胞和正常肝细胞的影响;采用灌胃给药的方式，观察该多肽对S180荷瘤小鼠瘤重的影响；采用灌胃的方法研究其对正常昆明种小鼠免疫系统的影响。结果：单环刺螠多肽对人肝癌细胞有抑制作用，且存在剂量依赖性，对正常人肝细胞无明显毒副作用；体内实验发现多肽对小鼠S180肉瘤具有一定的抑制作用，并能剂量依赖性地提高小鼠脾指数和胸腺指数及其他免疫指标。结论：单环剌螠多肽在体外抑制人肝癌细胞生长，并可以增强小鼠免疫力，抑制小鼠S180肉瘤的生长。     

川东獐牙菜苦甙类成分的提取及其体外抗肿瘤作用研究

提取川东獐牙菜中的苦甙成分并观察其体外抗肿瘤作用。利用高效液相色谱分析证明川东獐牙菜中含有獐牙菜苦甙。MTT实验结果说明獐牙菜苦甙对肝癌细胞有明显的抑制作用,苦甙浓度在35~50μg/m l的时候,对肝癌细胞的抑制率可达到50%。     

复方白花蛇舌草对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨复方白花蛇舌草(HDWF)抑制肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402和SK-Hep-1,用不同浓度的HDWF干预,采用MTT法检测肝癌细胞的活力,计算HDWF对细胞增殖的抑制率。采用倒置显微镜观察肝癌细胞形态,细胞计数仪计算肝癌细胞数,集落形成实验观察肝癌细胞的集落形成能力,Annexin-V/PI染色实验检测肝癌细胞凋亡情况。结果 MTT法检测结果显示HDWF对抑制肝癌细胞增殖有显著抑制作用(P0.01),形态观察和细胞计数显示HDWF可减少肝癌细胞的密度及细胞数量,HDWF可显著抑制肝癌细胞的集落形成及促进肝癌细胞凋亡(P0.05)。结论 HDWF具有抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡的作用。     

正肝方药物血清诱导人肝癌细胞分化的体外实验研究

目的：探讨正肝方对Bel-7402人肝癌细胞分化的诱导作用,及对其端粒酶活性的影响。方法：正肝方水煎液灌喂正常大鼠,采血制备药物血清。以正常鼠血清为阴性对照,维甲酸(RA)为阳性对照,将药血清温育Bel-7402人肝癌细胞。噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖,图像分析系统测定细胞核质比,放射免疫法测定甲胎蛋白(AFP)含量,动态比色法测定γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和碱性磷酸酶(ALP)活性,多聚酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR—ELISA法)检测细胞端粒酶活性。结果：正肝方药物血清可抑制人肝癌细胞的增殖,显著降低细胞核质比,抑制细胞分泌AFP,降低细胞γ-GT活性,升高ALP活性,并有显著抑制人肝癌细胞端粒酶活性的作用。结论：正肝方具有诱导人肝癌细胞分化的作用,其主要机理可能是抑制了Bel-7402细胞端粒酶活性。     

预知子、白花蛇舌草抑制肝癌细胞恶性增殖的研究

目的:在中医药常用治法方药中筛选最具抑制肝癌细胞恶性增殖的药物。方法:采用MTT法和细胞形态学检查,观察中药行气活血方、清热解毒方及其各组成药物乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。结果:清热解毒方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖均具有不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/ml白花蛇舌草对肝癌细胞的增殖抑制作用最强(P<0.05)。行气活血方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖也多具不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/mL预知子的作用尤为突出,强于阳性对照G418 0.6 mg/mL(P<0.01)。2.5mg/mL预知子联合0.3 mg/mL G418用药,其对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用接近0.6 mg/mL G418,提示有减量增效作用。无论是单独用药还是联合G418,预知子对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用均显著于白花蛇舌草(P<0.01)。结论:预知子、白花蛇舌草是抑癌扶正行气活血方中抑制肝癌细胞恶性增殖的主要药物,其中预知子的作用最显著。预知子联合细胞毒抗生素,具有减少细胞毒抗生素用量且增效的作用。     

双灵固本散对肝癌细胞端粒酶及细胞凋亡的研究

目的：观察双灵固本散对肝癌细胞端粒酶的抑制及细胞凋亡的诱导作用。方法：将肝癌细胞接种于培养板及培养皿中，将双灵固本散粉剂稀释成不同的浓度加入，观察细胞增殖情况、其端粒酶的活性情况，通过光镜、扫描电镜和透射电镜观察细胞的凋亡情况。结果：双灵固本散实验组对肝癌细胞增殖有抑制作用，对肝癌细胞有明显的诱导凋亡作用，对肝癌细胞端粒酶活性有明显抑制作用。结论：双灵固本散能明显抑制肝癌细胞端粒酶的活性，抑制其细胞增殖，诱导其细胞凋亡。     

中药柴胡对肝癌细胞的抑制作用

目的:探讨中药柴胡提取物柴胡皂苷(SSd)对肝癌细胞HepG-2的抑制作用方法:通过提取中药柴胡的主要成分柴胡皂苷,以肝癌细胞HepG-2作为实验对象,分为空白对照组,不同浓度梯度的SSd组,然后对细胞进行MTT试验测定细胞活力,细胞凋亡形态学检测,流式细胞仪细胞凋亡检测。结果:与空白对照组相比较,含有0.5mM SSd的培养基HepG-2组受到活力抑制最为明显,并且流失细胞仪测出在此浓度时凋亡率最高,高内涵筛选系统观察出在此浓度时线粒体膜电位明显变化最不明显。结论:中药柴胡提取物柴胡皂苷对肝癌细胞生长抑制明显。     

三七总皂苷对肝癌高转移细胞HCCLM3的抑制作用研究

目的:研究三七总皂苷对肝癌高转移细胞HC-CLM3增殖的影响。方法:以人高转移肝细胞癌细胞系HC-CLM3为研究对象,MTT法检测不同浓度三七总皂苷对肝癌细胞生长的影响,用倒置显微镜观察三七总皂苷对肝癌细胞形态的影响。结果:三七总皂苷处理组较对照组细胞存活率降低,并且这种作用随时间和药物浓度增加更加明显。倒置显微镜观察发现三七总皂苷作用后细胞密度降低。结论:三七总皂苷对HCCLM3细胞生长具有抑制作用。     

益气法对SMMC-7721和Hepa1-6肝癌细胞体外抑瘤作用和细胞周期影响的实验研究

目的:观察中医益气法对SMMC-7721和Hepa1-6肝癌细胞的体外抗癌作用;从细胞周期揭示扶正抗癌的作用机制;为采用中西结合治疗肝癌提供理论与实验依据,为肝癌的防治开辟新的研究领域。方法:运用细胞培养技术,采用现代药理学方法,MTT法从细胞水平评价益气法对肝癌细胞增殖的抑制作用。并采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化,从细胞周期角度观察中医扶正治法对肝癌细胞周期的影响。结果:体外研究提示益气法对肝癌细胞具有不同程度的抑制作用,且这种抑制作用在一定范围内呈浓度依赖性,与空白组比较在50mg/mL浓度以上有统计学意义(P<0.05),益气各浓度组对两种不同的肝癌细胞有不同程度的G2/M期阻滞作用。结论:益气法在体外对肝癌细胞有抑制作用,益气法有G2/M阻滞作用。     

川东獐牙菜提取物抑制体外人肝癌细胞的生长

目的:观察濒危药用植物川东獐牙菜主要提取物芒果苷与苦苷协同对HepG2人肝癌细胞的作用。方法:在体外培养的人肝癌细胞中依次加入50μg/ml川东獐牙菜水提物和乙醇不同萃取部位,在镜下观察HepG2人肝癌细胞生存状态。以芒果苷和苦苷标准品为对照,用MTT法研究正丁醇部位提取物的OD值。结果:发现正丁醇部位提取的芒果苷和苦苷的含量最高,正丁醇部位提取物作用HepG2人肝癌细胞24小时后,胞质出现空泡,细胞漂浮死亡。MTT检测其OD值呈线性递增关系,即芒果苷与苦苷混合物对肝癌细胞的杀灭作用最明显,并呈浓度依赖性。结论:濒危药用植物川东獐牙菜正丁醇部位提取物芒果苷与苦苷对体外人肝癌细胞有明显抑制和杀灭作用,其协同作用优于芒果苷或苦苷分别作用。     

白藜芦醇对肝癌细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的:观察白藜芦醇对HepG2细胞血管内皮生长因子表达的影响,初步探讨Res抑制肝癌细胞侵袭转移的机制。方法:RT-PCR、WesternBlot实验检测Res对HepG2细胞VEGF mRNA和蛋白表达的影响。结果:不同浓度的Res作用于HepG2细胞后能明显下调VEGF mRNA及蛋白的表达。结论:Res能下调HepG2细胞VEGF的表达,可能具有抑制肝癌细胞侵袭转移的作用。