胰腺缺血再灌注损伤大鼠胰腺腺泡细胞超微结构的观察

目的　探讨胰腺缺血再灌注 (ischemia -reperfusion ,IR)损伤时胰腺腺泡细胞超微结构的改变及可能机制。方法　 2 4只大鼠随机分为 3组 :假手术组、IR 1h组、IR 6h组。测定血淀粉酶、脂肪酶 ,了解胰腺外分泌功能 ;光镜、电镜观察胰腺组织结构改变。结果　各手术组淀粉酶和脂肪酶含量均较假手术组明显增加 ,6h时增加更显著 (P <0 .0 1)。胰腺组织光镜下IR 1h组呈现急性水肿性胰腺炎表现 ,IR 6h组损伤加重 ,出现出血、坏死 ;电镜下IR 1h组内质网、线粒体、高尔基复合体肿胀 ,IR 6h组细胞器损伤进一步加重 ,可见自噬体和自噬空泡显著增多。结论　胰腺IR 1h时表现为急性水肿性胰腺炎 ,再灌注 6h发展为出血坏死性胰腺炎。胰腺IR 1h电镜下主要表现为细胞器肿胀 ,再灌注 6h特征性改变为自噬小体显著增多。     

PPARγ激动剂对大鼠胰腺缺血再灌注损伤作用及机制

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)激动剂吡格列酮在大鼠胰腺缺血再灌注损伤中的作用及机制.方法 建立大鼠胰腺缺血再灌注损伤模型,将40只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注损伤组(IR组)、吡格列酮预处理组(PGZ组)及吡格列酮+GW9662预处理组(PGZ+GW9662组),每组10只.再灌注后,取静脉血检测血淀粉酶、脂肪酶水平,取胰腺组织检测核因子-κB (NF-κB)、Bcl-2蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)表达.结果 与S组相比,其余3组血淀粉酶和脂肪酶水平、胰腺组织NF-κB活性均明显升高,SOD、Bcl-2表达则明显降低(F=21.72～356.76,q=4.37～10.13,P<0.05);与IR组相比,PGZ组血淀粉酶、脂肪酶水平和胰腺组织NF-κB活性均明显降低,SOD、Bcl-2表达明显升高(q=3.45～8.72,P<0.05);而PGZ+GW9662组与IR组相比差异无统计学意义(q=0.16～1.13,P>0.05);与PGZ组相比,PGZ+GW9662 组血淀粉酶、脂肪酶水平和胰腺组织NF-κB活性表达明显增加,SOD、Bcl-2表达明显降低(q=3.77～8.98,P<0.05).结论 PPARγ激动剂吡格列酮可能是通过PPARγ途径上调SOD的活性、Bcl-2表达及下调NF-κB表达,对胰腺缺血再灌注损伤起保护作用.     

七叶皂甙钠治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的　探讨中药提取物七叶皂甙钠对重症急性胰腺炎 (SAP)的作用。方法　雄性SD大鼠分为模型组、七叶皂甙钠治疗组 ,经胆胰管逆行推注牛磺胆酸钠法制模型 ,治疗组大鼠分别在模型制成后 3 0min经股静脉注射七叶皂甙钠 2 0mg/kg,对照组注射等量生理盐水 ,两组在制模后 6h和 1 2h分批抽取下腔静脉血 ,检测肿瘤坏死因子α( (TNFα) ,淀粉酶 ,并行胰腺坏死程度评分。结果　治疗组 6h和 1 2h腹腔渗液淀粉酶、血清淀粉酶及TNFα与对照组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1 ) ,两组胰腺坏死程度评分差异有显著性意义 (P <0 .0 1 )。结论　七叶皂甙钠治疗重症急性胰腺炎 ,可以阻断不良炎性介质的作用 ,对胰腺具有保护作用     

ICAM-1在家兔胰腺部分移植术后的早期表达

目的 研究ICAM-1在家兔部分胰腺移植术后早期胰腺组织的表达及意义.方法 建立家兔原位部分胰腺移植模型,并随机分为对照组及胰腺移植组,用半定量RT-PCR法分析移植术后3 h、6 h移植物组织中ICAM-lmRNA的表达并检测受体血清淀粉酶含量,血清TNF-á浓度,测定移植物组织中髓过氧化物酶(MPO)水平及进行组织病理学观察.结果 胰腺移植组术后3 h血清淀粉酶含量,血清TNF-á浓度,组织中MPO水平较同时点对照组显著上升(P<0.05),同时组织中ICAM-lmRNA表达显著高于对照组(P<0.05);移植术后6 h组血清淀粉酶含量,血清TNF-á浓度,组织中MPO水平显著高于3 h组(P<0.05),同时组织中ICAM-lmRNA表达也显著高于3 h组(P<0.05).结论 家兔部分胰腺移植早期组织中ICAM-lmRNA表达显著上调,促进白细胞与血管内皮粘附并穿过内皮屏障向胰腺组织浸润,加重移植胰腺缺血-再灌注损伤.     

灯盏花素对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨灯盏花素注射液对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 建立胰腺缺血再灌注损伤的大鼠模型,36只SD大鼠随机分为假手术组,胰腺缺血再灌注组(I/R组),灯盏花素保护组3组,每组12只.激光多普勒血流仪观测胰腺微循环血流灌注量变化;采用硫代巴比妥酸法测胰腺组织丙二醛(MDA)含量,分光光度计法测胰腺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,HE染色观察胰腺组织病理学变化.结果 与I/R组比较,灯盏花素保护组胰腺微循环血流灌注量值在再灌注3 h明显增加(P＜0.05),胰腺组织中SOD 活性增高(P＜0.01),MDA 含量降低(P＜0.05).胰腺组织病理学观察显示灯盏花素保护组胰腺损伤较I/R组减轻.结论 灯盏花素注射液能减轻胰腺I/R损伤,减少氧自由基的产生,改善微循环.     

小型猪胰腺移植缺血/再灌注损伤早期腺泡细胞凋亡的发生及意义

目的探讨小型猪单纯胰腺移植缺血/再灌注损伤早期腺泡细胞凋亡的发生及意义.方法共建立20例小型猪单纯胰腺移植模型,于移植手术不同时段分别取胰腺组织行光镜组织病理学、透射电镜超微结构检查,Bcl-2、Bax免疫组化,TUNEL法原位凋亡检测.于再灌注0、30min、1h取外周血测血清淀粉酶和脂肪酶.结果移植胰腺组织离体后、冷缺血2h及再灌注1h与原位灌注前比,凋亡指数明显增加(P< 0.01),组织病理学评分明显升高(P< 0.01),Bcl-2表达明显减低(P< 0.01),Bax表达明显增强(P< 0.01);再灌注30min、1h血清淀粉酶和脂肪酶比再灌注0min明显升高(P< 0.01).结论细胞凋亡是移植胰腺缺血/再灌注损伤早期的主要表现,抗凋亡治疗在防治移植胰腺缺血/再灌注损伤中应该得到重视.     

氯膦酸二钠脂质体对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的影响

目的:探讨氯膦酸二钠脂质体(liposomal clodronate)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺损伤的保护作用.方法:利用薄膜法制备氯膦酸二钠脂质体.采用胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型.SD大鼠48只,随机分为对照组(C组)、空白脂质体组(P组)、氯膦酸二钠脂质体组(T组).P组和T组大鼠制作SAP模型.制模2 h和6 h后取肠系膜上静脉血液,检测各组大鼠血清中淀粉酶、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,观察各组胰腺组织的病理学变化及胰腺病理评分,免疫组化检测胰腺Caspase-3的表达.结果:P组大鼠的血清淀粉酚水平较C组明显升高(P<0.01),T组大鼠的血清淀粉酶水平显著低于P组.P组较C组2、6 h血清IL-6、TNF-α明显升高(P<0.01),T组较P组大鼠的2、6 h血清IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.01).T组大鼠的胰腺病理变化较P组明显减轻,胰腺组织病理学评分明显降低 (P<0.01).胰腺Caspase-3阳性表达增多. 结论:氯膦酸二钠脂质体可选择性清除单核/巨噬细胞,对SAP大鼠胰腺损伤有保护作用.     

通下化瘀方早期干预重症急性胰腺炎胰腺微循环紊乱的临床研究

目的:探讨通下化瘀方早期干预重症急性胰腺炎胰腺微循环紊乱,改善其预后的作用机制。方法:53例重症急性胰腺炎患者随机分为治疗组28例与对照组25例,治疗组在对照组治疗基础上给予通下化瘀方,观察治疗1周;治疗前及治疗第7天作血、尿淀粉酶及血C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、内皮素(endothelin,ET)水平检测。结果:治疗组总有效率98.4%,对照组总有效率80%,两组总有效率相比,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者血、尿淀粉酶、CRP和血浆ET水平相比,差异无统计学意义;治疗后均下降(P<0.01),且治疗组下降幅度大于对照组(P<0.01)。结论:通下化瘀方对重症急性胰腺炎具有良好的疗效,其作用机制可能与通下化瘀方药减少ET释放,抑制ET所诱发的胰腺微循环改变与腺泡细胞损伤等作用有关。     

生长抑素治疗急性胰腺炎对患者胰腺血流及胰腺功能的影响

目的探讨生长抑素对急性胰腺炎患者胰腺血流及胰腺功能的保护作用。方法选取2012年12月至2014年2月于本院进行诊治的76例急性胰腺炎患者为研究对象,所有患者根据随机数字表法分为对照组和观察组各38例,对照组采用常规治疗,观察组则在常规治疗的基础上增加生长抑素治疗,检测并比较两组患者治疗前和治疗后1 d、3 d及7 d的胰腺血流及胰腺内外分泌系统相关指标。结果治疗前两组患者间各项观察指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后1 d、3 d及7 d观察组患者的血清正铜蓝蛋白(CP)及胰岛素(INS)水平均高于对照组(P<0.05),胰高血糖素(GLU)、脂肪酶(LIP)、淀粉酶(AMY)和胰蛋白酶原-2(TPS-2)水平则低于对照组(P<0.05);观察组的血流量(BF)及血容量(BV)均高于对照组(P<0.05),毛细血管表面通透性(PS)则低于对照组(P<0.05)。结论生长抑素对急性胰腺炎患者胰腺血流及胰腺功能的保护作用均较为明显,对患者胰腺综合状态的改善作用较为突出。     

艾塞那肽诱发大鼠胰腺组织病变研究

目的 探讨艾塞那肽对大鼠胰腺组织的损伤作用.方法 30只SD大鼠随机分为艾塞那肽实验组和空白对照组,每组15只,连续10周分别每日两次皮下注射艾塞那肽5μg/kg或等量生理盐水.大鼠处死后取下腔静脉血和胰腺组织标本,ELISA法检测血清淀粉酶、脂肪酶、白介素(IL)-1、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及胰腺组织髓过氧化物酶(MOP)含量,计算胰腺干质量/湿质量比,胰腺组织HE染色并行病理学评分,电子显微镜观察胰腺组织超微结构.结果 两组血清淀粉酶、脂肪酶、IL-1、IL-6和TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05).艾塞那肽实验组胰腺组织MPO含量显著高于空白对照组[(0.24±0.07)U/L和(0.18±0.05)U/L](P<0.05),胰腺干质量/湿质量比显著小于空白对照组(0.183±0.049和0.256±0.064)(P<0.05).HE染色显示,艾塞那肽实验组有5例胰腺组织出现慢性胰腺炎症改变,空白对照组无胰腺炎症性改变.胰腺组织病理学评分显示,除腺体萎缩指标外,两组胰腺组织病变面积、纤维化、炎症和水肿等指标评分差异均有统计学意义(P<0.05).电子显微镜观察显示,艾塞那肽实验组腺泡细胞内可见核固缩改变、胞质内空泡形成增多、细胞间隙增宽并有炎症细胞浸润,空白对照组未见明显异常变化.结论 长期应用艾塞那肽可引起大鼠慢性胰腺炎症反应而损伤胰腺组织.     

胰体尾切除术后胰漏的危险因素分析

目的 分析引起胰漏的可能性因素.方法 前瞻性地研究了2001～2009年所有的入住内蒙古医学院第三附属医院的胰体尾切除患者的临床资料.根据国际研究小组的胰瘘分类将临床胰瘘分为B级和C级.对胰漏可能有影响的因素,包括患者自身情况、肿瘤性质、手术等因素,运用单因素和多因素进行分析.结果 行胰体尾切除术患者共51例(中位年龄60岁,31～75岁),恶性23例,良性或癌前病变28例.发生胰漏17例(33.3%);另外3例胰周局部脓肿无法确诊胰漏.多因素分析说明,对胰腺断面的处理,手工缝合和吻合器的使用相比,前者更容易发生胰瘘(OR:41.2,95%CI:3.36～486;P=0.004).残余胰腺体积较大也是胰漏的危险因素之一(OR:7.28,95%CI:1.14～39.0;P=0.035).结论 胰体尾切除术后有效预防胰瘘的发生仍然是个难题.残留胰腺体积大小和断面缝合技术是胰瘘的危险因素.对胰瘘的预防措施需要不断地进行临床实践和探索.     

精准胰腺外科在胰腺肿瘤切除中的应用

目的:探讨精准胰腺外科理论和操作技术在胰腺肿瘤性疾病切除中的应用及其价值。方法:回顾分析我院2011年1月至2013年6月期间行精准胰腺肿瘤切除术的病例资料,包括胰十二指肠切除术56例,胰体尾切除术32例。术前根据CT、MRI/MRCP、CTA(CT血管造影)等影像学资料制定周密的手术计划,术中根据精准外科原则切除肿瘤,规范化淋巴结清扫,在彻底清除病灶的同时,最大程度保留正常器官功能,术后给予个体化精细的处理。结果:全部88例病人手术顺利,术中失血平均210 mL,术后仅1例死于肺部感染、呼吸衰竭,死亡率仅1.14%,术后胰瘘发生11例,根据国际胰瘘小组定义及标准,其中A级9例,未给予任何干预自愈,B级胰瘘2例,均通过B超引导下穿刺引流治愈,无C级致命性胰瘘。平均住院时间9.7 d。结论:精准外科理论及技术在胰腺肿瘤性疾病根治术中优势明显,在最大程度保留器官功能的同时,可以带来很低的围手术期并发症发生率,住院时间也较短,是现代胰腺外科的发展方向和必然趋势。     

胰腺手术中残存胰体尾的保留

目的 探讨胰腺手术中如何保留残存的胰体尾.方法 7例行胰腺手术中,3例胰肠吻合口裂开,4例胰颈体部良性肿瘤切除,术中用主胰管导管桥式内引流将胰液引至临近的空肠袢内,均成功保留了残存的胰体尾.结果 术后经支持治疗,持续腹腔冲洗,抑制胰酶分泌,术后内分泌功能基本正常,顺利出院.结论 主胰管导管桥式内引流术,在保留残存胰体尾组织方面具有方法简单、快捷,可有效地保存胰腺的内、外分泌功能,改善患者术后的生活质量.     

胰腺癌血清学标记物在胰腺癌初期诊断中的研究进展

胰腺癌是目前最难诊断和治疗的恶性肿瘤之一,研究开发方便实用的血清标记物筛查早期胰腺癌有重要的临床意义。目前,胰腺癌血清学标记物的研究主要包括胰腺癌特异表达的分子、基因突变、异常甲基化DNA、micro RNA和循环肿瘤细胞。联合多种血清学标记物有助于其早期诊断,未来的研究应侧重于筛选胰腺癌高危人群,形成高度敏感性和特异性的标记物,提高胰腺癌早期诊断水平。     

胰腺手术后胰瘘与铜绿假单胞菌感染相关性分析

目的 探讨胰腺手术后胰瘘与发生铜绿假单胞菌感染的相关性。方法 收集本科自2012年1月至2016年1月行胰腺手术的112例患者,根据术后出现胰瘘情况,分为观察组和对照组,比较两组中铜绿假单胞菌感染的发生率,并根据胰瘘分级,比较A级与B级胰瘘患者中铜绿假单胞菌感染的发生率。结果 观察组(胰瘘)30例患者中,PA感染发生率60.0%,对照组(无胰瘘)82例患者中,PA感染发生率17.07%,两组PA感染发生率差异具统计学意义。在观察组患者中,A级胰瘘与B级胰瘘患者的PA感染发生率分别为54.55%和 75.00%,差异无统计学意义。结论 胰腺手术后胰瘘患者易发生铜绿假单胞菌感染,不同分级的胰瘘患者PA感染发生率无差异。     

Activated pancreatic stellate cells can impair pancreatic islet function in mice

Background

Pancreatic or islet fibrosis is often associated with activated pancreatic stellate cells (PSCs). PSCs are considered not only to promote fibrosis, but also to be associated with glucose intolerance in some diseases. We therefore evaluated morphological and functional relationships between islets and PSCs in the normal mouse pancreas and transplanted islets.

Methods

Immunohistochemistry was used to map the presence of PSCs in the normal mouse pancreas and islets implanted under the renal capsule. We isolated and cultured mouse PSCs and characterized them morphologically by immunofluorescence staining. Furthermore, we measured their cytokine production and determined their effects on insulin release from simultaneously cultured islets.

Results

PSCs were scattered throughout the pancreas, with occasional cells within the islets, particularly in the islet capsule. In islet transplants they were found mainly in the graft periphery. Cultured PSCs became functionally activated and produced several cytokines. Throughout the culture period they linearly increased their production of interleukin-6 and mammalian keratinocyte-derived chemokine. PSC cytokine production was not affected by acute hyperglycemia. Syngeneic islets co-cultured with PSCs for 24–48 h increased their insulin release and lowered their insulin content. However, short-term insulin release in batch-type incubations was unaffected after 48 h of co-culture. Increased islet cell caspase-3 activation and a decreased islet cell replication were consistently observed after co-culture for 2 or 7 days.

Conclusion

Activated PSCs may contribute to impaired islet endocrine function seen in exocrine pancreatitis and in islet fibrosis associated with some cases of type 2 diabetes.