东莨菪碱对大鼠供心的保护作用

目的 研究东莨菪碱在心脏移植中延长供体心脏低温保存时间的作用，探讨其可能的机制。方法 将48只SD大鼠随机分为3组（n=16）：对照组（C组，供心保存6h）、东莨菪碱组1（S1组，供心保存6h）和东莨菪碱组2（S2组，供心保存12h）。建立大鼠异位心脏移植模型。S1组和S2组的保存液中添加东莨菪碱（3mg／L），并在循环开放前静脉注射东莨菪碱（3μg／kg）。使用工作心脏模型检测心功能指标，取心肌组织检测NO含量，一氧化氮合酶（iNOS、cNOS）的活性和ICAM-1水平，以及iNOS、cNOS和ICAM-1mRNA表达。结果 东莨菪碱能够改善移植后的心功能；下调再灌注后iNOSmRNA表达，降低iNOS活性，抑制cNOS的活性，总体上降低NO含量；通过下调ICAM-1mRNA水平，降低ICAM-1的表达。结论 东莨菪碱能够减轻心肌缺血再灌注损伤，在心脏移植中延长供心低温缺血保存时间。其机制与调节心肌组织中NO水平、降低ICAM-1表达有关。     

缺血-再灌注心肌诱导型一氧化氮合酶基因表达及其活性的变化和卡托普利的影响

目的探讨心肌诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达及其活性的变化在心肌再灌注损伤中的作用；研究卡托普利对缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法采用Langendorff离体鼠心灌流模型；将18只SD大自鼠随机均分为3组：对照组、缺血一再灌组及卡托普利组；观察心肌iNOS mRNA表达及其活性、丙二醛（MDA）含量、过氧化物歧化酶（SOD）活性、肌酸激酶（CK）含量和冠状静脉流出液一氧化氮（NO）的变化。结果缺血再灌注后心肌iNOS mRNA表达显著上调（P〈0．001），iNOS活性增高（P〈0．001）；卡托普利组再灌注30min，心肌iNOS mRNA表达及其活性、心肌MDA含量均低于缺血-再灌组（P〈0．01，P〈0．05），而心肌SOD活性（P〈0．01）和CK含量（P〈0．05）高于缺血-再灌组，再灌注期间冠状静脉流出液NO含量高于缺血-再灌组（P〈0．01）。结论缺血-再灌注心肌iNOS基因表达上调，心肌iNOS活性增高；影响心肌iNOS mRNA表达、调节心肌iNOS活性可能是卡托普利抗心肌脂质过氧化作用的机制之一。     

注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血 再灌注能量代谢的影响

目的：探讨注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响及机制。方法：50只SD幼鼠,随机分为5组（n=10）,正常对照组：心脏灌流20 min稳定后,再持续灌注150 min;正常+注射用心肌肽组：同正常对照组,但在灌流液中加入注射用心肌肽50 mg/L;模型对照组：心脏灌流20 min稳定后,停搏液停搏（缺血）90 min,再恢复正常灌流（再灌注）60 min,建立心肌缺血再灌注损伤模型,灌流用K-H缓冲液,停搏用ST.Thomas’II停搏液;注射用心肌肽1组(CMP1组)：停搏液加入注射用心肌肽100 mg/L;CMP2组：灌流液加入注射用心肌肽50 mg/L及停搏液加入注射用心肌肽100 mg/L）。监测不同组离体灌流心脏心率(HR）、收缩力(△T)及最大收缩速度(+dT/dtmax)和最大舒张速度(-dT/dtmax)、冠状动脉流量(CF)、复搏时间,透射电镜观察缺血再灌注损伤模型组中幼鼠心肌组织超微结构改变。进一步检测3个缺血再灌注损伤组冠状动脉流出液中肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量的变化,心肌组织能量及氧化抗氧化代谢指标、丙二醛、NO的含量,检测心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性,实时荧光定量PCR相对定量检测心肌组织iNOS,eNOS和Akr1b4 mRNA表达。结果：正常对照组离体心脏长时间灌流后心功能无明显变化,注射用心肌肽对正常心脏心功能无明显影响。与模型对照组比较,两个用药组心搏功能下降轻微,冠状动脉流量较好。电镜观察可见模型对照组心肌肌原纤维断裂,线粒体肿胀,而用药组心肌组织结构较完整,线粒体未见明显肿胀变性。再灌注后,模型对照组CK-MB增加。与模型对照组比较, 两个用药组的CK-MB含量低,Na+-K+ ATP酶、Ca2+-Mg2+ ATP酶、心肌总ATP酶活性相对较高,超氧化物歧化酶活性也增高,丙二醛、NO含量低,心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性下降,iNOS,Akr1b4 mRNA表达下调,其中CMP2组改变更为明显（P＜0.01或P＜0.05）。此外eNOS mRNA表达在CMP2组升高（P＜0.05）,而在CMP1组中变化无统计学意义（P>0.05）。结论： 注射用心肌肽可改善缺血心脏再灌注后的能量代谢,增加冠状动脉流量,提高心功能,对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,灌流液及停搏液均加入注射用心肌肽对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用效果更佳。其作用机制可能与抑制心肌细胞iNOS, Akr1b4 mRNA表达,减少NO生成,抑制醛糖还原酶的活性有关。     

卡托普利介导缓激肽诱导预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨卡托普利介导缓激肽诱导预适应对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法 将成年大鼠随机分成正常对照组、缺血再灌注（IR）组、卡托普利预处理组、缓激肽B2受体拮抗剂B1650加卡托普利组,麻醉大鼠冠脉结扎30min后,再灌60min,观察各组缺血再灌注实验动物前后心功能及一氧化氮合酶（NOS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量的变化。结果 缺血再灌注组心肌原生型NOS（cNOS）活性（P〈0．01）及总NOS活性（P〈0．01）显著下降,NO产生明显减少（P〈0．05～0．01）,卡托普利预处理组缺血再灌注期间NO水平高于IR组（P〈0．01）,再灌注30min心肌cNOS活性（P〈0．01）及总NOS活性（P〈0．05）显著高于DIR组,心肌损害较IR组为轻。先静滴B1650后再给予卡托普利,则卡托普利对心肌损伤的保护作用明显减弱。结论 NO产生不足是心肌再灌注损伤的主要因素,卡托普利通过调节缓激肽活性,维持正常NO水平对缺血再灌注大鼠心肌损伤可产生药理预适应保护作用,该作用可为或至少部分为缓激肽所介导。     

电针内关穴对大鼠心肌缺血再灌注损伤中一氧化氮及其合酶的影响

目的研究观察电针大鼠内关穴对心肌缺血再灌注损伤 (MIRI)大鼠一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)与同功酶原生型 (cNOS)、诱生型 (iNOS)的变化 ,探讨电针内关穴对心肌细胞的保护作用。方法将大鼠分为 5组即假手术对照组、缺血再灌注模型组、电针内关保护组、电针列缺对照组、电针合谷对照组 ,每组 1 0只动物。检测各组大鼠血清中NO、NOS含量的影响。结果电针心包经内关穴升高心肌NO含量明显强于电针肺经列缺穴 (P <0 .0 5 ) ;电针心包经内关穴可使NOS、cNOS含量升高 ,与模型组比较差异显著 ,且升高心肌NOS及cNOS活性的效应亦明显强于电针列缺、合谷组 (P <0 .0 5 )。各组心肌iNOS变化不明显。结论电针内关穴可以减轻心肌缺血再灌注损伤的程度 ,对心肌细胞有良好的保护作用。     

ATP-MgCl2对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞一氧化氮合成酶的影响

目的寻找心肌缺血再灌注损伤与一氧化氮（NO）的关系，进一步探讨高能磷酸盐制剂ATP—MgCl2对缺血再灌注大鼠心肌保护作用的机制。方法选用健康SD大鼠16只，随机分为两组（n=8），开胸取心，在Langgendorff灌流装置上进行主动脉灌注10min，待心肌收缩稳定后，停止灌流30min，再分别以相应灌注液灌注20min，对照组：使用Krebs—Henseleit（KH）缓冲液；ATP—MgCl2组：使用KH缓冲液＋ATP—MgCl2（0．1mmol／L）。以Knowles方法测定心肌原生型NOS（cNOS）和诱导性NOS（iNOS）活性。结果对照组iNOS活性显著高于ATP—MgCh组，而对照组cNOS活性则显著低于ATP—MgCh组。结论ATP—MgCl2通过减少因iNos所产生的氧自由基浓度而起到心肌保护作用。     

雌二醇心脏停搏液对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的：研究17β-雌二醇（E2）心脏停搏液对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响，并探讨其机制。方法：采用Langendorff离体心脏灌注模型，将30只雌性卵巢切除(OVX)大鼠随机分为缺血再灌注组（I-R组）|二甲基亚砜组（D组）和E2组（E组）。检测一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）以及心功能的变化。在冷晶体停搏液中加入E2，观察其对MIRI的影响。结果：再灌注30min，E组冠脉流量（CF）增加，心功能改善，CPK、LDH和MDA明显降低，而NOS活性及NO含量明显高于I-R组和D组。结论：E2通过提高心肌总NOS活性，促进NO的产生，防止MIRI。     

缺血后处理对大鼠肺再灌注期间肺组织NOS及NO的影响

目的：观察缺血后处理（IPO）对肺缺血再灌注期间肺组织NOS活性和NO含量的影响,探讨IPO对肺缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法：24只健康SD大鼠,雌雄不拘,随机分成3组（n=8）;假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）。采用开胸夹闭和开放左肺门建立大鼠缺血再灌注损伤模型,S组不缺血持续灌注150min;I/R组缺血40min,再灌注105min;IPO组缺血40min后,短暂再灌注30s,缺血30s,反复3次,然后再恢复灌注102min。分别检测各组肺组织NOS活性、NO含量及iNOS表达,测定动脉血氧分压（PaO2）、肺组织湿／干重比（W／D）,观察肺组织病理变化。结果：与S组比较,UR组和IPO组NOS活性、NO2含量显著增加（均P〈0.01）,iNOS表达明显升高;PaO2降低,肺组织W／D显著升高,病理损伤明显。与UR组比较,IPO组NOS活性和NO含量升高（P〈0．05）,但iNOS表达无差异（P〉0．05）;PaO2显著拜高,肺组织W／D明显降低,病理损伤明照减轻。结论：激活eNOS,增加内源性NO含量可能是早期缺血后处理减轻肺缺血再灌注损伤的可能机制。     

气体信号分子硫化氢和一氧化氮在代谢综合征大鼠心脏保护中的相互作用

目的 研究硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系和一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)体系在代谢综合征(MS)大鼠心脏功能损伤中的作用及相互关系.方法 41只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、模型+H2S供体组、模型+CSE抑制剂组、模型+NOS抑制剂组、模型+NO供体组.对照组普通饲料喂养16周,其余5组高脂饲料喂养16周复制MS动物模型,随后4周对照组和模型组注射生理盐水、其余4组分别注射硫氢化钠(56μmol/kg)、炔丙基甘氨酸(37.5mg/kg)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(18mg/kg)、L-精氨酸(500mg/kg)进行干预后,测定肥胖指标、血糖、血脂;采用生物信号采集系统检测心功能;比色法检测血浆、心肌H2S及NO含量,心肌CSE、结构型NOS(cNOS)及诱导型NOS(iNOS)活性;RT-PCR方法检测心肌CSE及内皮型NOS(eNOS)表达的变化.结果 与对照组相比,模型组各时间点血糖、血脂及肥胖指数升高,心功能降低(P<0.05);血浆和心肌H2S、NO含量,心肌CSE、cNOS活性,CSE、eNOS表达降低,心肌iNOS活性升高(P<0.05).与模型组相比,模型+CSE抑制剂组血浆、心肌NO含量,心肌cNOS、iNOS活性增加,eNOS表达增强(P<0.05);模型+H2S供体组心肌cNOS、iNOS活性和eNOS表达均降低(P<0.01),心功能改善(P<0.05);模型+NOS抑制剂组血浆、心肌H2S含量,心肌CSE表达均升高(P<0.05);模型+NO供体组心肌CSE活性、CSE表达降低(P<0.05),心功能改善(P<0.05).结论 H2S/CSE和NO/NOS体系在MS大鼠心脏中呈相互负性调节作用.外源性补充H2S和NO对MS大鼠心脏功能有一定保护作用.     

肿瘤坏死因子α和一氧化氮合酶在脓毒症大鼠心功能中的作用初探

目的初步探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）和一氧化氮合酶（NOS）在脓毒症大鼠心功能中的作用。方法制作脓毒症大鼠模型,监测血流动力学,测定大鼠心肌组织中TNF-α和一氧化氮（NO）浓度,检测各型NOS的活性。结果大鼠心肌组织中TNF-α含量2h时达高峰,心肌组织NO 6h时达高峰,与心功能改变时间一致。给予脂多糖（LPS）6h后心脏中cNOS的表达减少;iNOS表达量明显增加。结论脓毒症时,TNF-α和NO发挥重要作用,并且心肌细胞上iNOS表达升高、cNOS表达减少可能在心功能降低中发挥作用。     

心肌再灌注损伤中一氧化氮合酶及其基因异常表达的研究

目的用鼠的离体工作心脏研究心肌再灌注损伤中一氧化氮（ＮＯ）、ＮＯ合酶（ＮＯＳ）同功酶及其ｍＲＮＡ表达的变化。方法逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）定量检测心肌组织ＮＯＳ同功酶ｍＲＮＡ表达,测定心肌组织中的丙二醛（ＭＤＡ）、ＮＯＳ及冠脉流出液的ＮＯ、肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）的量,同时检测心脏缺血再灌注前后的心功能变化。并分别于冷停跳液中加用地塞米松（Ｄｅｘ）和缓激肽（ＢＫ）,观察其对心肌再灌注损伤的影响。结果心肌缺血再灌注后,结构型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达下调,诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达上调;ｃＮＯＳ活性下降,ｉＮＯＳ活性升高,ＮＯ量减少。使用Ｄｅｘ后,与缺血再灌注的对照组相比,ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达下调,ｉＮＯＳ活力下降,ＮＯ分泌减少,并且心功能恢复好转,ＭＤＡ、ＣＰＫ下降;使用ＢＫ后,ＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达无变化,ｃＮＯＳ活力升高,ＮＯ分泌增多,心功能恢复有好转,ＭＤＡ、ＣＰＫ亦下降。结论ＮＯＳ同功酶表达的变化可能是心肌再灌注损伤的重要机制之一,激活ｃＮＯＳ或下调ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达具有心肌保护作用     

预处置对缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶的影响

目的观察冠状动脉结扎预处置(CAIP)和股动脉阻断预处置(FIP)对缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨NOS在预处置心脏自身保护中的作用。方法复制心肌缺血/再灌注模型;观察缺血/再灌注期间心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+LVdp/dtmax)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-LVdp/dtmax);采用化学比色法观察大鼠心肌组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性。结果I/R组缺血60 min及再灌注30 min 2个时段(dp/dtmax均低于sham组(P<0.01);CAIP+I/R及FIP+I/R组均高于I/R组(P<0.01)。I/R组心肌cNOS低于sham、CAIP、CAIP+I/R及FIP+I/R组(P<0.01)。I/R组iNOS高于sham、CAIP、CAIP+I/R组(P<0.01),与FIP+I/R组差异无统计学意义。结论冠状动脉结扎预处置及股动脉阻断预处置方法均可拮抗心肌缺血及再灌注造成的心功能障碍;心肌缺血预处置拮抗缺血再灌注致心功能损伤的作用可能与其促进cNOS表达和抑制iNOS的激活有关;股动脉阻断预处置可能通过促进cNOS表达而起到延迟保护心脏作用。     

核黄素对心肌缺血再灌注损伤时一氧化氮及其合酶的影响

目的　探讨核黄素(riboflavin)对再灌注损伤心肌保护作用的机制。方法　通过结扎左冠状动脉前降支复制在体心肌缺血再灌注损伤动物模型。将家兔随机分为4组,即假手术组(SC组)、缺血再灌注组(IRI组)、缺血预处理组(IPC组)和核黄素干预组(RBF组) ,检测不同时间点血清中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的含量以及缺血区心肌组织匀浆中一氧化氮合酶(NOS)的活性。结果　与IRI组相比,RBF组在缺血后各时点血清中NO含量升高明显(P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,心肌组织匀浆中各型NOS检测结果示:RBF组cNOS的活性较高,与IRI组相比有显著性意义(P <0 .0 1)。结论　核黄素对再灌注损伤干预作用的部分机制是通过保护冠脉血管内皮,维持cNOS活性,增加NO的释放,从而对再灌注损伤的心肌有保护作用。     

巴戟天对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 观察巴戟天(radix morindae officinalis,RMO)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其可能机制.方法 雄性大鼠40只,完全随机等分为假手术(sham operation,sham)组,心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia/reperfusion,I/R)模型组,RMO分为高剂量组3.0g/(kg·d)、低剂量组1.2g/(kg·d),每组10只灌胃.Sham组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,Sham组穿线不结扎,其余三组均穿线结扎冠状动脉左前降支(LAD)起始部30min,再灌注60min.观察心肌梗死面积、心肌组织中CK、NO、iNOS含量与Ca2+-Mg2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性的变化.结果 与模型组相比,RMO各剂量组均可明显缩小心肌梗死面积(P＜0.05),且心肌组织中Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、NO、iNOS活性升高,而CK含量降低(P＜0.05).结论 RMO有预防MIRI作用,其机制主要与防止钙超载及氧自由基有关.     

NITRIC OXIDE SYNTHESIS IN MYOCARDIUM FOLLOWING BURN INJURY IN RATS

The nitric oxide and cyclic GMP production in myocardium early after burn injury in tats were investigated. Nitric oxide synthase activity was measured in cytosols from the left ventricular wall of burned rats.Cytosols from the control group animals were shown to contain mainly Ca^2 dependent nitric oxide synthase (cNOS) with small amount of Ca^2 independent nitric oxide synthase (iNOS). Following burn injury,there was a marked increase in iNOS activity with a peak at 8h post-butyl, however, myocardial cNOS activity was found to decline obviously. Parallel to iNOS induction there was a significant increase in myocardial nitric oxide and cyelic GMP production. All these chenges were alleviated by treatment of the rats with dexamethasone. Since increases in cyclic GMP levels in the heart were associated with reduced myocardial contractility, it is possible that enhanced production of nitric oxide by a Ca^2 independent NO synthase accounts, at least in part, for the depression of myocardial contractility seen in burn animals and patients.     

Dynamic changes of myocardial nitric oxide formation and cGMP content in the early stage after radiation, burn and combined radiation-burn injuries in rats

Nitricchide(NO)ispresentinmanyhssuesandactSasap~crineautocoidandintracellularchemicalmessenger.NOiss}vithesizedfromL--argininebynitricoxidesynthase(NOS).TwOmaintYPesofNOShavebeenidentified:aconstitutiveCab -calmedulindependentNOS(cNOS)andaCab independentNOS(iNOS)whichareexpressedafterthestimulationofendotoxinandceTtaincytoki...[IJ.RecentstudiesdemonstratedthatNOalightplayaroleinthemaculationofmyocdriialcontractility.TheactivityofbathcNOSandiNOSisidentifiedinisolatedeardialmyocy…     

硝酸甘油对离体大鼠心脏心肌缺血-再灌注损伤的作用研究

目的：探讨硝酸甘油（NTG）对离体大鼠心脏缺血期补充一氧化氮（NO）供体对缺血-再灌注损伤的影响。方法：取36只大鼠建立Langendorff离体心脏灌流模型,离体大鼠心脏缺血30min,再灌注60min,分为用药组（18只）及对照组（18只）。用药组于缺血期给予4.4×10-3mmol/L硝酸甘油,碳酸氢盐缓冲液灌注。对照组仅给予碳酸氢盐缓冲液灌注。全部心脏均测定NO释放量、肌酸激酶漏出量及（或）心脏功能。结果：用药组大鼠心脏使用NTG后表现为两种效应。其中,非心室颤动组10只,NTG增加肌酸激酶漏出量,减弱再灌注期心脏功能的恢复,伴随缺血期NO释放量的增加;心室颤动组8只,NTG减少肌酸激酶的释放,但心脏于再灌注期持续心室颤动,缺血期NO释放量无明显增加。结论：缺血期给予同一剂量NTG对心肌缺血-再灌注损伤产生双重效应,既可增加心肌损伤,又可减轻心肌损伤。