骨疏康冲剂与钙剂联合应用治疗绝经后骨质疏松症的临床研究

目的 观察骨疏康冲剂与钙剂联合应用治疗绝经后骨质疏松症的效果。方法 对年龄为50～75岁、绝经5～30年确诊为骨质疏松症的妇女62例,随机分为骨疏康冲剂加钙剂联合用药组和单用骨疏康冲剂组和单用钙剂组。分别于治疗前、治疗后3个月和6个月观察患者临床症状,用DEXA监测髋部骨密度,测定血清碱性磷酸酶(ALP)、血钙、血磷。结果 骨疏康冲剂加钙剂联合用药组服药后6个月,临床症状改善明显优于单用骨疏康冲剂组(P<0.01),其骨密度也高于单用骨疏康冲剂组(P<0.05),但骨代谢指标各组间无显著差异(P>0.05)。结论 骨疏康冲剂与钙剂联合应用治疗绝经后骨质疏松症较单用骨疏康冲剂有着较好的疗效。     

骨疏康对氢化可的松引起的大鼠骨丢失的影响

目的 通过氢化可的松造成实验性骨质疏松，观察中成药骨疏康对防止骨质丢失的效应。结果 模型组与给药组大鼠骨钙、骨磷和羟脯氨酸含量有显著差异。骨疏康有效量可防止氢化可的松引起的大鼠骨矿物质及有机质的丢失。结论 骨疏康能有效预防皮质类固醇诱导的骨质疏松症。     

早期预防性治疗对绝经后骨质疏松症影响的动物实验研究

目的评价早期预防性抗骨吸收治疗对绝经后骨质疏松症骨量、骨代谢指标和骨组织形态的变化特点,提供早期监测和预防绝经后骨质疏松症的依据.方法以去卵巢大鼠为实验对象、抑制骨吸收的唑来膦酸注射液为赋形药物,建立绝经后骨质疏松症的动物模型.选取44只3个月龄雌性SD大鼠,除假手术组行假手术外,其余各组均行双侧卵巢切除.假手术组(sham)、去势对照组(ovx)以安慰剂处理,其余两组分别在去势后3d、1个月给予唑来膦酸注射液(zoledronic acid,ZOL) 500μg/kg静脉单次注射,分别在实验开始、术后1个月及术后3个月测定大鼠股骨骨密度(BMD),收集血清测定I型前胶原氨基端前肽(PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b (TRACP-5b)的值变化,并光镜下观察大鼠股骨病理学变化,图像分析系统观察骨形态计量学静态指标骨小梁面积百分率(TBV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.sp)的变化.结果应用去卵巢大鼠成功建立绝经后骨质疏松模型.去势对照组在1个月股骨BMD、血清PINP和TRACP-5b、TBV、Tb.Th及Tb.sp等指标变化上和正常对照组存在显著性差异(P＜0.01);去势3d即行ZOL治疗者和假手术对照组的BMD、骨代谢、骨形态学指标比较变化无显著性差异(P＞0.05);1个月后开始ZOL治疗者仅部分恢复骨密度,血清PINP、TRACP5b、骨组织形态指标变化和早期治疗组比较存在非常显著性差异(P＜0.01),且其骨小梁连接有明显的退变.结论骨代谢指标可用于抗骨吸收治疗的疗效监测;去势大鼠早期进行预防性抗骨吸收治疗,能抑制其骨量的丢失,减慢骨小梁退变,恢复骨密度.     

骨疏康对1型糖尿病大鼠体外培养的破骨细胞影响的初步探讨

目的 探讨骨疏康对1型糖尿病大鼠体外培养的破骨细胞影响。方法 用RANKL和M-CSF诱导1型糖尿病大鼠的股骨骨髓进行体外培养生成类破骨细胞样细胞(OLC)。实验分为正常对照组,1型糖尿病组,正常对照+骨疏康组,1型糖尿病+骨疏康组。骨疏康的浓度为20μg/ml。细胞培养7天后,贴壁细胞固定,抗酒石酸盐酸性磷酸酶染色,破骨细胞计数。结果 1型糖尿病大鼠与正常大鼠组的破骨细胞数比较无明显差别(P>0.05);经骨疏康干预后,1型糖尿病大鼠与正常大鼠的破骨细胞数都明显减少(P<0.01)。结论 1型糖尿病早期破骨细胞形成与正常对照组无明显差异。中药骨疏康明显抑制正常大鼠和1型糖尿病大鼠的破骨细胞形成。     

骨疏康治疗骨质疏松性脊椎压缩性骨折64例临床观察

目的 观察中药骨疏康在骨质疏松性脊椎压缩骨折治疗中的作用。方法 对94例临床诊断为骨质疏松性脊椎压缩骨折患者进行随机对照单盲研究。其中治疗组64例,服用骨疏康颗粒和钙制剂加维生素D;对照组30例服用钙制剂和维生素D治疗,持续6个月。治疗结束时进行疗效评价。疗效以腰背痛消失情况和躯体活动是否受限,以及下地活动时间、行走距离为判断指标。结果 治疗组64例中,显效51例(79.7％),有效11例(17.2％),无效2例(3.1％);对照组30例中,显效19例(63.3％),有效10例(33.3％),无效1例(3.3％)。经统计学处理,两组显效率差异显著(P<0.05),治疗组优于对照组。结论骨疏康可以有效治疗骨质疏松性脊椎压缩骨折引起的疼痛,加快骨折愈合。     

糖皮质激素与卵巢摘除后对大鼠骨量及骨代谢影响的对比研究

目的 探讨不同剂量糖皮质激素（GC）对大鼠骨量及骨代谢的影响,以及比较GC诱导骨质疏松模型（GIOP模型）与卵巢摘除骨质疏松模型（OVX模型）对大鼠骨量及骨代谢影响的区别。方法 75只４个月龄雌性SD大鼠。随机分成五组,Ａ组为正常对照组（Sham组,生理盐水灌胃）;Ｂ组为低剂量GC组（泼尼松龙每天 2.5 mg/kg）灌胃;Ｃ组为中剂量GC组（泼尼松龙每天5 mg/kg灌胃）;Ｄ组为高剂量GC组（泼尼松龙每天10 mg/kg灌胃）;Ｅ组为卵巢切除组（OVX组）。每天１次,GC组连续灌胃12周。分别于灌胃/去势后第４、８、12周从每组中各随机抽出５只SD大鼠,处死。取股骨干骺端进行不脱钙骨制片;利用显微CT扫描大鼠腰１段;利用酶联免疫吸附测定法（Elisa）检测静脉血中TRACP、G-ALP、BGP及尿液中DPD。结果 （1）各实验组４周后骨小梁排列渐稀疏,数目开始减少,小梁明显变细,间距加宽。随着给药时间的延长,改变更加明显;（2）骨密度检测：与对照组相比,GC低剂量组骨流失从给药后第８周开始明显（P＜0.05）,而GC中剂量和高剂量组骨流失从给药后４周就开始显现（P＜0.05）。中剂量组与高剂量组各时间段差异均无统计学意义（P＞0.05）;与中等剂量和高等剂量相比,去势组第４周骨量流失差异有统计学意义（P＜0.05）,第８、12周差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）骨代谢生化指标的测定结果：灌胃及摘除卵巢４周后,Ｃ组、Ｄ组、Ｅ组骨形成标记物（G-ALP、BGP）、骨吸收标记物（TRACP、DPD）与正常对照组差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 （1）大鼠骨量的流失可随着糖皮质激素剂量的增加而增加（呈浓度依赖性）。（2）在OVX模型中,骨重建能力上升,而在GIOP模型中,骨重建能力下降。     

自体微小颗粒骨复合碱性成纤维细胞生长因子修复节段性骨缺损的实验研究

目的 探讨自体微小颗粒骨复合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)治疗骨缺损的效果，为其临床应用提供实验依据。方法 将36只新西兰白兔双侧桡骨中上段制成骨缺损模型，分别植入自体微小颗粒骨、bFGF和自体微小颗粒骨与bFGF的复合物，同时设空白对照组，分别手术后第2、4、8周进行大体观察，X检查及组织学检查。术后第8周进行骨密度测定，比较修复骨缺损的疗效。结果 经大体观察、组织学及X线检查发现，术后第8周自体微小颗粒骨复合bFGF能更有效地修复节段性骨缺损，对照组无骨愈合迹象。术后第8周骨密度测定证明自体微小颗粒骨复合bFGF组骨密度值明显高于对照组。结论 自体微小颗粒骨复合bFGF组成骨速度快，成骨量多，修复骨缺损的能力明显强于自体微小颗粒骨组及单纯bFGF组。     

NF-κB抑制剂对PMMA颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解抑制作用的实验研究

目的研究NF-kappa B抑制剂PDTC及NAC对PMMA骨水泥颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的抑制作用。方法8周龄BABL/C小鼠,颅骨表面均匀散布PMMA颗粒,诱导骨溶解模型,分4组给予不同处理因素,分别为PBS、PDTC、NAC及生理盐水组。颅骨未加颗粒的小鼠和加颗粒后仅给予生理盐水的小鼠分别作为阴性对照和阳性对照。2周后取出颅骨,石蜡包埋、切片后行HE染色、TRAP染色、NF-κB P65免疫组化染色。结果在PMMA颗粒诱导下小鼠颅骨有明显骨溶解作用,PDTC及NAC均有明显的抑制骨溶解作用,在相同剂量情况下,PDTC比NAC的骨溶解抑制作用更强。结论NF-kappa B抑制剂PDTC及NAC对PMMA骨水泥颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解有明显的抑制作用。     

雌激素对骨质疏松性骨折愈合影响的实验研究

目的研究雌激素对大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响。方法选择6月龄雌性SD大鼠60只,随机分为雌激素组、对照组（骨质疏松组）及假手术组,每组20只,前二组建立去卵巢大鼠骨质疏松性骨折模型,假手术组暴露卵巢而不切除,术后3个月行右侧股骨中段骨折内固定术。前二组术后分别皮下注射苯甲酸雌二醇及等量生理盐水,进行骨密度、X线片、组织病理学和生物力学检测,观察骨折愈合的情况。结果雌激素组骨折局部骨密度、生物力学性能明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;雌激素组比同时期的对照组骨痂生成量多。结论雌激素在促进骨质疏松性骨折愈合时能增加骨量,同时能提高骨生物力学特性和抗骨折能力。     

葛根素注射液对骨质疏松性大鼠下颌骨骨折愈合的影响

目的研究葛根素注射液对骨质疏松性大鼠下颌骨骨折愈合的影响。方法建立WIST-AR大鼠骨质疏松模型后再在大鼠右侧下颌骨体部造成颊舌侧贯通的不完全性骨折模型,随机分为假手术+下颌骨骨折组(A),去势+下颌骨骨折+葛根素治疗组(B)和去势+下颌骨骨折+盐水对照组(C),骨折后B、C两组分别于腹腔注射葛根素注射液和盐水。于术后第1周、2周、3周和4周将每组大鼠分别随机抽取5只处死,并取右侧下颌骨,用X线片检查骨折愈合情况并测量骨折愈合处骨密度值和进行组织学观察。结果在第3周后平均骨密度分析显示B组骨折愈合处平均骨密度值均高于C组(P<0.05);差异随着愈合时间的延长而显著;组织学观察结果显示C组骨折愈合明显延迟于B组。A组和B组差别不明显。结论葛根素注射液可加快骨生长,促进骨密度增加和骨质疏松性大鼠下颌骨骨折愈合。     

血清瘦素与骨质疏松关系的研究

目的 通过建立大鼠骨质疏松模型，检测骨密度和血清瘦素，探讨血清瘦素和骨质疏松的关系。方法 120只6月龄雌性SD大鼠，随机分为6组(肥胖去势组、肥胖对照组、肥胖空白组、正常体重去势组、正常体重对照组、正常体重空白组)。通过实验建立骨质疏松模型，分别于术后2、3、4、5、6月每组随机抽出大鼠4只，行骨密度测定及血清瘦素测定。结果 血清瘦素含量肥胖去势组最高；骨密度含量肥胖去势组最低。结论 血清瘦素与骨质疏松在本实验前提下有可能成正相关。     

白细胞介素12早期干预对急性放射病小鼠的治疗作用

目的:研究重组鼠白细胞介素12(rmIL-12)早期干预对γ射线急性放射病小鼠的治疗作用,并与重组鼠血小板生成素(rmTPO)的辐射防护作用进行比较。方法:42只BALB/c小鼠均给予60Coγ射线6.0Gy一次全身照射后随机分为照射对照(对照)、rmIL-12治疗和rmTPO治疗3组。rmIL-12治疗组小鼠于照射后1h及此后每3d一次分别腹腔注射rmIL-12 20μg/(kg.d),共5次;rmTPO治疗组小鼠于照射后0.5和24h分别皮下注射rmTPO 15μg/kg;对照组给予等体积的无菌PBS。2次/d观察小鼠一般情况,3d检测1次外周血细胞数,分别于照射后14d和28d收集骨髓细胞进行集落培养。结果:rmIL-12治疗组小鼠一般情况较对照组改善,外周血中血小板(PLT)下降速度明显慢于对照组,PLT恢复时间较对照组明显提前(11d vs 14d),且PLT最低值明显高于对照组(18.9%vs 8.1%,P<0.05)。rmIL-12治疗组PLT恢复速度稍快于rmTPO治疗组,但差异无统计学意义(P>0.05)。照射后14和28d骨髓有核细胞集落培养结果提示rmIL-12治疗组CFU-Mix明显高于对照组(P<0.01),与rmTPO治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:rmIL-12可明显促进急性放射病小鼠造血功能恢复,对巨核系的恢复作用与rmTPO相当,有望开发成安全有效的新型辐射防治药物。     

选择性COX-2抑制剂塞来昔布预防胃癌前病变发生及其机制的研究

背景与目的:前期的动物实验表明,选择性环氧合酶(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布可显著降低化学致癌剂N-甲基-NV-硝基-亚硝基胍(N-methyl-N5-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的大鼠胃肿瘤发生率,但其对胃癌发生的重要中间阶段——胃癌前病变作用的研究甚少。本研究旨在探讨塞来昔布对胃癌前病变发生率的影响及其可能的机制。方法:94只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为A、B、C、D、E5组。A组不作特殊处理;B组仅灌喂塞来昔布10mg/kg,每日1次;C组饮用含MNNG100!g/ml的蒸馏水;D组和E组除饮用含MNNG100!g/ml的蒸馏水外,D组灌喂塞来昔布10mg/kg每日1次,E组灌喂消炎痛3mg/kg,每日1次。实验前6周,每周一次用10%饱和氯化钠溶液1ml灌胃。16周时A、B、C、D、E组分别处死大鼠6只、8只、10只、10只、10只,其余大鼠在实验终点24周时处死。比较各组大鼠胃癌前病变发生率的差异,荧光定量PCR及免疫组化法检测胃粘膜COX-1、COX-2mRNA及蛋白水平,ELISA法测定胃粘膜PGE2水平。结果:93只大鼠完成实验,16周和24周时C、D、E组萎缩性胃炎的发生率均无显著性差异(P>0.05)。16周时各组均未见有异型增生改变;24周时C、D、E组异型增生发生率分别为75%(9/12)、25%(3/12)和46%(5/11)。与C组相比,D组异型增生发生率明显下降(P=0.039),而E组下降不显著(P=0.214)。16周、24周时各组胃粘膜COX-1表达水平均无显著性差异,C组COX-2表达水平(3.29±1.50、3.41±0.94)明显高于其他4组(P<0.001),而C组PGE2水平与D、E组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:塞来昔布能有效降低化学致癌剂MNNG诱导的大鼠胃粘膜异型增生的发生率,而对胃粘膜组织PGE2表达水平无影响,提示这种效应可能通过非COX-2依赖途径实现。     

唑来膦酸预防芳香化酶抑制剂引起骨丢失的临床研究*

目的:探讨唑来膦酸预防绝经后乳腺癌患者芳香化酶抑制剂内分泌治疗引起骨丢失的效果。方法:选取2005年6 月至2007年6 月天津医科大学附属肿瘤医院63例绝经后激素受体阳性乳腺癌患者,随机分为治疗组（唑来膦酸与芳香化酶抑制剂连用）和对照组（单用芳香化酶抑制剂）。 随访24个月,观察不同时期两组患者腰椎（L2～L4）前后位骨密度,骨量减少和骨质疏松发生率的变化。结果:治疗6 个月,唑来膦酸组腰椎的骨密度与单用芳香化酶抑制剂组相比有增高趋势,但差异无统计学意义（P=0.099）。 两组骨丢失事件的发生没有统计学差异（骨量减少:P=0.124,骨质疏松:P=0.573）。 12个月时,治疗组腰椎骨密度较对照组明显升高（P=0.008）,治疗组骨量减少和骨质疏松的发生率低于对照组（骨量减少:P=0.048,骨质疏松:P=0.042）。 24个月时,治疗组的腰椎骨密度明显高于对照组（P=0.000）。 治疗组骨量减少和骨质疏松的发生率明显低于对照组（骨量减少:P=0.027,骨质疏松:P=0.011）。 治疗期间,除治疗组骨痛发生率与对照组相比较高外（P=0.039）,两组的不良事件的发生率相似（P>0.05）。结论:唑来膦酸对芳香化酶抑制剂内分泌治疗引起的骨丢失有明显的预防作用,且不良反应轻微,安全有效,耐受性好。      

Induction of intestinal metaplasia in rats by N-ethyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine but not by sodium hydroxide

Intestinal metaplasia (IM) in the glandular stomach of male Wistar rats induced by oral administration of N-ethyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (ENNG) and/or intubation of 0.1N sodium hydroxide (NaOH) was studied as follows. Experiment I, sequential study: Rats in group I were given 100 micrograms/ml ENNG in drinking water for 12 weeks. Rats in group II were given 5 ml of 0.1N NaOH by gastric intubation once a week for 12 weeks. Group III control rats were given tap water. Rats were killed from week 1 until week 69 sequentially. IM was first found at week 26 in group I and at week 58 in groups II and III, its incidence being significantly higher in group I than in the other two groups (P less than 0.01), but without any difference between group II and group III. Experiment II, two-stage carcinogenesis: Rats in groups I and II were treated in the same way as in experiment I, while rats in group III were given 100 micrograms/ml ENNG for 12 weeks, followed by 0.1N NaOH once a week for 12 weeks intragastrically. All rats were killed at week 56. The numbers of metaplastic glands in groups I and III were higher than in group II. Gastric carcinomas were induced in all groups of rats treated with ENNG. The results of these two experiments show that IM is effectively induced by a carcinogen but is not enhanced by regeneration induced by alkaline treatment.     

阿托伐他汀对糖皮质激素性股骨头坏死骨组织MMP/TIMP系统的影响

目的：观察阿托伐他汀对长期应用皮质激素大鼠骨组织中基质金属蛋白酶-2（matrixmetallo-proteinase-2,MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（ matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及其特异性抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（ tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-1,TIMP-1）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（ tissue inhibitor of matrix metalloproteinases-2,TIMP-2） mRNA表达的影响,探讨阿托伐他汀预防激素性股骨头坏死的效果及其作用机制。方法健康SD大鼠30只,采用数字随机法,分为激素组、阿托伐他汀组和对照组3个组,每组10只。激素组和阿托伐他汀组给予肌内注射醋酸泼尼松龙12.5 mg/kg,每周2次;阿托伐他汀组同时给予阿托伐他汀1 mg/kg灌胃,每日1次（按每千克体重最大用量给药,每天最大用量是60 mg,实验动物给药量为60 mg/60 kg体重）;对照组只给予相同体积生理盐水肌注。给药后4周取左侧股骨头骨组织石蜡包埋,HE 染色,鉴定骨质疏松和股骨头坏死情况;取右侧股骨头骨组织提取总 RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达水平。结果激素组与阿托伐他汀组各有1只动物死亡。对照组股骨头骨组织切片HE染色可见骨小梁由板层骨构成,绝大多数小梁骨陷窝内可见骨细胞,小梁间为血管和骨髓。激素组表现为骨小梁稀疏和大量不连续的骨碎片及骨髓坏死,碎片骨陷窝内骨细胞大部分消失,周围有大量炎性肉芽组织,阿托伐他汀组介于两者之间,轻度炎性细胞浸润,骨小梁略纤细,多数小梁骨陷窝内可见骨细胞,小梁间为血管和骨髓。MMP-2在激素组、阿托伐他汀组、对照组中的表达分别为0.15±0.04、0.10±0.09、0.09±0.03;MMP-9在3组中的表达分别为0.13±0.03,0.11±0.05和0.08±0.02;TIMP-1在3组中的表达分别为0.07±0.02,0.15±0.05和0.18±0     

黄曲霉毒素诱导大鼠肝细胞癌变中JNK1的变化

目的 观察黄曲霉毒素诱导大鼠肝细胞癌变过程中JNK的变化,进一步了解JNK1信号转导通路在肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）发生发展过程中的作用。方法 取雄性4周龄SD大鼠77只为研究对象,随机分为实验组66只,空白对照组11只。实验组应用黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）诱发大鼠肝细胞癌,空白对照组大鼠,按正常饲养方法饲养,两组大鼠分别于实验第12、20、36、46周进行肝组织活检,58周时处死取肝。所有标本均进行常规病理组织学检测,并应用RT-PCR、Western blot分别检测癌组织及肝组织JNK1 mRNA及JNK1活性蛋白质水平。结果 实验组大鼠46周时发现首例肝癌,存活至实验结束并发生肝癌的大鼠共24只,6只无任何肿瘤发生,空白对照组大鼠11例均未发生肿瘤。实验组及空白对照组大鼠均可检出不同程度的JNK1 mRNA表达,其中肝癌组织较癌旁组织及正常肝组织明显增强（P<0.05）。Western blot结果显示,实验组中无癌大鼠20周、出癌大鼠36周始即有不同程度p-JNK1活性表达,并随着AFB1作用时间延长阳性率明显增加,且无癌大鼠p-JNK1检出的时间较出癌大鼠早;半定量分析表明无癌大鼠肝组织p-JNK1活性较同期出癌大鼠肝组织及肝癌组织增强,在实验第46周及58周时尤其明显（P<0.01）。结论 在AFB1诱导肝细胞癌的过程中JNK信号通路处于激活状态,JNK信号通路的激活可能起到抑制HCC的作用,如JNK信号通路激活时间较早、强度较大可阻止HCC的发生。