激光扫描共聚焦显微镜在骨科研究领域的应用

激光扫描共聚焦显微镜（ｃｏｎｆｏｃａｌｌａｓｅｒｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ＣＬＳＭ）是普通荧光显微镜与激光扫描装置和计算机图像处理技术的结合。它采用紫外或可见激光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部细微结构的高分辨率荧光图像，并可在亚细胞...     

激光扫描共聚焦显微镜在骨代谢研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜具有“显微ＣＴ”及实时监测细胞内游离（Ｃａ＾２＋）ｉ等诸多独特的生物学功能，可在活体精确观测骨，软骨组织及细胞在骨代谢中形态学到病理，生理学的各种变化，因而被有效地应用于骨代谢的基础研究，并可能随其功能的不断开发应用而将骨代研究引向深入。     

激光扫描共聚焦显微镜在生命科学研究中的应用

随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用，研究人员注意到，荧光显微照片的分辨率较低。传统的荧光显微镜使用场光源，因标本邻近结构(细胞或亚细胞结构)产生的衍射光和散射光的干扰，使标本中细微结构的成像不够清晰。在科学研究工作对更高图像分辨率的追求的前提下，激光扫描共聚焦显微镜应运而生。     

OYX-OP大鼠腺垂体FS细胞中S-100蛋白表达的共聚焦显微镜研究

目的：探讨神经组织蛋白S-100在去卵巢致骨质疏松症大鼠（OVX-0P）腺垂体滤泡星形细胞（FS细胞）中的表达。方法：采用适龄SD大鼠40只,随机均分为卵巢切除（OVX）组和假性手术对照（Sham组）,于术前和术后6周末测量大鼠全身及腰椎骨密度（BMD）。取垂体,应用免疫荧光组织化学法结合激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）分析技术,检测FS细胞中S-100表达。结果：术后6周末OVX组大鼠全身及腰椎BMD均明显低于Sham组值（P＜0.01,P＜0.01)。S-100阳性荧光标记物定位于FS细胞的胞浆中。FS细胞具有典型的细胞突结构、与腺垂体中丰富的血窦直接相邻、结成了腺垂体中发达的活性细胞网络、在结构上与多种腺垂体内分泌细胞密切相连。两组间S-100荧光强度和表达阳性率无显（P＞0.05)。结论：SD大鼠OVX术后6周出现骨质疏松变化,FS细胞在形态结构和定位上的特征及其在数量上的稳定性可能是中枢调节骨代谢因素作用的一个细胞基础。     

激光共聚焦显微镜技术在研究肠上皮细胞内钙超载中的应用

细胞内钙稳态的维持对生命活动至关重要。病理状态下细胞内钙超负荷将造成一系列代谢紊乱，致细胞坏死和凋亡。目前有关肠上皮细胞（IEC）缺血缺氧损伤导致IEC细胞内钙超载是否确切，钙离子阻断剂是否有防治作用，目前尚无这方面的研究报道。     

应用激光共聚焦显微镜研究光敏剂CDHS801亚细胞定位

目的研究新型光敏剂CDHS801在膀胱癌T24细胞内的亚细胞定位。方法将传代培养的膀胱癌T24细胞与CDHS801共同孵育，采用激光共聚焦显微镜为成像工具，应用线粒体荧光探针MitoTracker RED CMXRose和MitoTracker Green FM来进行CDHS801的亚细胞定位分析。结果激光共聚焦显微镜下CDHS801、MitoTracker RED CMXRose和MitoTracker Green FM发出的荧光都位于细胞浆内，在细胞核周围呈点状散在分布。结论CDHS801经膀胱癌T24细胞摄取后，定位于细胞浆内，主要分布线粒体内。     

激光扫描共聚焦显微镜在生命科学研究中的应用

随着免疫荧光技术在生物学研究领域的广泛应用 ,研究人员注意到 ,荧光显微照片的分辨率较低。传统的荧光显微镜使用场光源 ,因标本邻近结构 (细胞或亚细胞结构 )产生的衍射光和散射光的干扰 ,使标本中细微结构的成像不够清晰。在科学研究工作对更高图像分辨率的追求的前提下 ,激光扫描共聚焦显微镜应运而生。 195 7年 ,MarvinMinsky申请了激光共聚焦扫描显微镜的发明专利 ,但直到 1987年该仪器才开始真正商业化生产。与传统光学显微镜相比 ,它解决了生物样品结构相互重叠影响观察的问题 ,并可形成清晰的三维图象。所以它自从问世以来 ,在生…     

共聚焦激光显微内镜检查术的护理配合

对300例患者行共聚焦激光显微内镜检查。结果297例顺利完成检查。胃镜检查267例中205例耐受良好,2例不能耐受;16例检查后有咽喉部不适,31例有轻度腹胀感,13例有轻度腹痛。肠镜检查33例中,32例耐受良好,1例不能耐受;12例检查后主诉有不同程度腹胀及腹痛。所有内镜下活检患者未出现消化道出血、穿孔或其他相关并发症。术前做好患者心理护理、饮食指导、准确判断荧光素钠过敏试验结果。术中密切观察生命体征变化,术后加强体位护理、并发症护理等,可保证患者顺利完成共聚焦激光显微内镜检查。     

共聚焦激光显微内镜检查术的护理配合

对300例患者行共聚焦激光显微内镜检查.结果 297例顺利完成检查.胃镜检查267例中205例耐受良好,2例不能耐受;16例检查后有咽喉部不适,31例有轻度腹胀感,13例有轻度腹痛.肠镜检查33例中,32例耐受良好,1例不能耐受;12例检查后主诉有不同程度腹胀及腹痛.所有内镜下活检患者未出现消化道出血、穿孔或其他相关并发症.术前做好患者心理护理、饮食指导、准确判断荧光素钠过敏试验结果,术中密切观察生命体征变化,术后加强体位护理、并发症护理等,可保证患者顺利完成共聚焦激光显微内镜检查.     

家兔阴茎海绵体平滑肌细胞内游离钙检测方法的对比研究

目的　通过对家兔阴茎海绵体平滑肌细胞 (PCSMC)内游离Ca2 检测方法的对比 ,以选择更适宜的方法来研究阴茎海绵体平滑肌的舒张机制。方法　采用新型Ca2 荧光探针Fluo 3/AM标记家兔PCSMC胞浆内游离Ca2 ,应用显微分光光度计 (MSP)、流式细胞仪 (FCM)和激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)分别观察硝苯吡啶 (NIF)对高K 诱发家兔PCSMC内 [Ca2 ]i 变化的影响。结果　MSP和FCM检测发现 ,10 μmol/LNIF能明显减弱高K (4 0mmol/L)诱发细胞内荧光强度的升高 ,抑制率为 (6 5 .5± 4 .4 ) %和 (6 9.3± 5 .2 ) %。LSCM可见细胞胞浆内游离Ca2 分布 ,不同细胞胞浆内的基础荧光强度有差别 ,NIF能明显抑制高K 诱发的细胞内 [Ca2 ]i 升高 ,抑制率为 (71.5±6 .8) %。结论　LSCM能直观地看到单细胞内Ca2 的分布 ,并能动态观察胞浆内 [Ca2 ]i 的变化 ,为研究不同药物对PCSMC的影响提供了良好的实验方法。     

非创伤性检测技术在光老化皮肤治疗中的应用进展

皮肤的老化分为内源性老化和光老化,内源性老化即自然老化,目前大多数研究认为光老化加速了皮肤自然老化的进程。皮肤光老化常发生于习惯暴露的部位,其中面部是最易受累的部位,另外还有手背、前臂、上胸部等光暴露部位。光老化的临床特点为:皮肤质地的改变,如皮肤干燥、松弛、细小皱纹、皮肤粗糙、毛孔扩大等;色素性改变,如色素增加或脱失;血管性改变,如皮肤血管扩张等[1-3]。对光老化皮肤的     

非创伤性检测技术在光老化皮肤治疗中的应用进展

皮肤的老化分为内源性老化和光老化,内源性老化即自然老化,目前大多数研究认为光老化加速了皮肤自然老化的进程。皮肤光老化常发生于习惯暴露的部位,其中面部是最易受累的部位,另外还有手背、前臂、上胸部等光暴露部位。光老化的临床特点为:皮肤质地的改变,如皮肤干燥、松弛、细小皱纹、皮肤粗糙、毛孔扩大等;色素性改变,如色素增加     

Integrin β1表达与肝癌组织硬化程度及病理特征相关研究

目的 检测整合素β1在肝癌组织中不同部位的表达,探讨整合素β1与肝癌发生、浸润、转移和复发的关系.方法 应用RT-PCR和激光扫描共聚焦显微镜免疫荧光染色方法分别检测71例肝癌病人的肝癌、癌旁和肝癌远处肝组织中整合素β1mRNA及蛋白的表达水平和分布情况,分析整合素β1基因的表达与肝癌临床、病理参数的关系.结果 (1)癌旁、肝癌远处肝组织中整合素β1mRNA及蛋白的表达与肝纤维化硬化程度呈正相关;(2)整合素β1mRNA及蛋白的表达与肝癌病理分级.包膜侵犯,远处转移,HBsAg感染呈正相关.结论 整合素β1可能参与肝纤维化-肝硬化-肝癌这一动态的病理过程改变,与肝癌的发生、侵袭和转移有关.     

川芎嗪对家兔阴茎海绵体平滑肌细胞游离钙浓度的影响

目的 :研究中药川芎嗪 (TMP)对体外培养家兔阴茎海绵体平滑肌细胞 (PCSMC)胞质内游离钙浓度([Ca2 + ] i)的影响。　方法 :用新型Ca2 + 荧光染色剂Fluo 3/AM负载家兔PCSMC ,细胞分为氯化钾 (KCl)作用组和去甲肾上腺素 (NE)作用组 ,应用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)实时测定胞质内 [Ca2 + ] i的变化 ,分别观察不同浓度的TMP对高钾和NE诱导胞质内 [Ca2 + ] i升高的影响 ,并与经典钙拮抗剂维拉帕米 (Ver)的作用相对比。　结果 :静息状态下 ,TMP对家兔PCSMC胞质内 [Ca2 + ] i无明显影响。 1、1 0、1 0 0 μmol/LTMP能显著抑制高钾诱发的细胞内 [Ca2 + ] i升高 ,抑制率分别为 (38.6± 3 .0 ) %、(44.1± 2 .4) %和 (53 .7± 4 .1 ) % ;也能抑制 1 μmol/LNE诱发钙库释放所致的细胞内 [Ca2 + ] i升高 ,抑制率分别为 (1 3 .9± 2 .7) %、(2 1 .2± 1 .9) %和 (2 9.5± 3 .6) %。　结论 :TMP通过对家兔PCSMC电压依赖性钙通道和细胞内钙库释放的双重抑制作用 ,降低PCSMC胞质内 [Ca2 + ] i水平 ,其作用效果与Ver相似 ,这是TMP治疗阴茎勃起功能障碍的重要机制。     

小汗腺自发荧光现象的观察

目的:观察小汗腺是否具有自发荧光现象及其随汗腺细胞生长、衰老的变化,推测其发光基团,探讨研究小汗腺的新方法.方法:取整形美容患者弃用的皮肤组织,苏木素染色,奥林巴斯倒置相差显微镜观察小汗腺组织的自发荧光现象.从皮肤中提取单个汗腺细胞进行体外培养,于汗腺细胞贴壁后7、14、21、28 d在奥林巴斯倒置相差显微镜分别以紫外光、绿光、蓝光3种不同激发光照射,观察小汗腺自发荧光的变化情况;利用激光扫描共聚焦显微镜γ扫描测量小汗腺自发荧光的强度.结果:苏木素染色后的小汗腺组织自发荧光表现为似有小孔的网状结构,小汗腺边界清晰,其自发荧光在蓝色激发光下表现为绿色自发荧光,绿色激发光下表现出红色自发荧光:单独的小汗腺细胞在荧光显微镜下表现出更多颜色的自发荧光,紫外光的激发下显示出蓝色的自发荧光,蓝色的激发光下显示出绿色自发荧光,绿色的激发光下显示出红色的自发荧光,随小汗腺的生长,荧光强度没有明显变化;用激光扫描共聚焦显微镜γ分层扫描方法测定小汗腺自发荧光强度,分别在近530 nm和590 nm处发现两个自发荧光峰值,与黄素和脂褐素的自发荧光峰值相近.结论:通过观察苏木素染色后小汗腺组织的自发荧光可以简单、快速地帮助判断小汗腺结构.单个汗腺细胞的自发荧光强度随汗腺生长没有明显减弱.根据小汗腺自发荧光的峰值测定初步判定小汗腺自发荧光的发光基团是黄素和脂褐素.     

皮肤磨削术在皮肤科的应用进展

皮肤磨削术是一种不需手术刀的可操控性技术,可以直接去除表皮或真皮浅层皮损,又称擦皮术。近年来已广泛用于多种疾病的治疗以及去除瘢痕、色素和除皱等美容治疗中。皮肤磨削术可以满足多种治疗需要以及美容需求,值得推广应用。与磨削原理类似的技术包括激光换肤和化学剥脱等,各有优势,应用于相同疾病效果不同,这些技术均可广泛应用于各类皮肤疾病治疗中,效果显著。本文就皮肤磨削术在皮肤科的应用进展作一综述。     

小鼠胆囊酪氨酸激酶受体的表达及其意义

目的研究酪氨酸激酶受体（c-kit）在CD1小鼠胆囊的表达及其意义。方法采用免疫组化方法，应用激光扫描共聚焦显微镜检测CD1小鼠胆囊组织切片和急性分离单细胞的c-kit免疫反应阳性细胞的表达；RT-PCR法检测胆囊c-kit mRNA的表达；Western blot检测胆囊c-kit蛋白的表达。结果免疫荧光激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示CD1小鼠胆囊从黏膜层到肌层均有c-kit免疫反应阳性细胞存在，其呈类似网络状分布和点和（或）丝状分布。急性分离胆囊单细胞检测结果显示c-kit免疫反应阳性细胞大致可区分为两种类型，一种为分支状，大多数细胞呈现该形态；一种为类梭形，少见分支，类似平滑肌细胞，部分细胞呈现此形态。而典型呈梭形的平滑肌细胞则无荧光显现，呈c-kit免疫反应阴性。RT-PCR法检测结果表明胆囊c-kit mRNA表达阳性。Western印迹显示c-kit蛋白表达阳性。结论c-kit在CD1小鼠胆囊表达阳性，即CD1小鼠胆囊存在Cajal间质细胞（ICC）。ICC可能与胆囊运动有关，有可能为胆囊起搏细胞。     

吗啡处理后原代培养的海马神经元CREB1蛋白的改变

目的研究急、慢性吗啡处理后原代培养的海马神经元cAMP反应元件结合蛋白（CREBa蛋白）的改变。方法取原代培养7d的成熟海马神经元,随机分为吗啡急性作用组、纳洛酮急性戒断组、吗啡慢性作用组、纳洛酮慢性戒断组和空白对照组,每组6皿细胞。采用细胞免疫荧光染色法检测CREB1蛋白相对含量。结果吗啡急性作用组和纳洛酮急性戒断组原代培养的海马神经元内CREB1蛋白表达没有影响,而吗啡慢性作用组海马神经元内CREB1蛋白表达明显增强（P〈0．01）,且纳洛酮慢性戒断组免疫荧光强度进一步增加（P〈0．01）,但与吗啡慢性作用组比较差异无统计学意义。吗啡慢性作用组海马神经元内CREB1蛋白较吗啡急性作用组表达明显增强（P〈0．01）,纳洛酮慢性戒断组较急性戒断组CREB1蛋白表达差异有统计学意义（P〈0．01）。结论慢性、多次使用成瘾药物才引起CREB1蛋白表达增加,其机制可能是多次使用吗啡通过反复对细胞内信号转导途径的影响引起神经元细胞核CREB1蛋白的改变。     

微聚焦超声治疗技术在面部抗衰的应用效果

分析微聚焦超声技术在面部抗衰中的应用效果。方法 选取2021年12月-2023年8月我门诊 部收治的轻中度面部皮肤松弛患者104例,随机分为对照组和观察组,每组52例。对照组采取常规射 频治疗,观察组采用微聚焦超声治疗,比较两组临床疗效、并发症发生情况、皮肤情况及治疗满意 度。结果 观察组治疗总有效率为92.31%,高于对照组的76.92%（P ＜0.05）;观察组并发症发生率为 1.92%,低于对照组的9.62%（P ＜0.05）;观察组治疗后面部皱纹评分、面部瘙痒程度评分、VISIA评分低 于对照组（P ＜0.05）;观察组治疗满意度高于对照组（P ＜0.05）。结论 对于轻中度面部皮肤松弛患者, 微聚焦超声治疗具有效果好、并发症少、满意度高的优势,且可提升患者面部美观度,值得临床应用。