耐多药结核病患者外周血中多药耐药相关跨膜转运蛋白的表达

目的 评价耐多药结核病(MDR-TB)患者外周血中单核细胞P糖蛋白和多药耐药相关蛋白(MRP)表达水平的变化.方法选择2004年9月至2007年12月在武汉市结核病防治所住院治疗的MDR-TB患者89例为耐多药组,其中男52例,女37例;年龄17~62岁,平均(45±6)岁;平均病史3.5年;均符合MDR-TB的诊断标准.同期在武汉市结核病防治所住院的初治结核病患者55例为结核病组,其中男34例,女21例;年龄18~60岁,平均(48±8)岁;平均病史1.2年;痰涂片均为阳性.对照组为武汉市结核病防治所无肺结核史的工作人员31例,其中男19例,女12例;年龄25~62岁,平均(44±5)岁.抽取外周血,采用实时定量PCR法,分别检测单核细胞P糖蛋白和MRP的mRNA水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 耐多药组P糖蛋白mRNA表达的吸光度值(1.34±0.32)与结核病组(1.12±0.23)和对照组(1.05±0.16)比较,差异无统计学意义(F=0.536,P>0.05).耐多药组MRP的mRNA表达(3.45±0.43)明显高于结核病组(1.23±0.34)和对照组(1.04±0.12),3组比较,差异有统计学意义(F=24.241,P<0.05),耐多药组分别与其他2组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 MRP高表达与MDR-TB患者的多耐药存在一定的相关性.

Abstract：

Objective To evaluate the expression of P-glycoprotein (P-pg) and multidrug resistance-associated protein (MRP) mRNA levels in peripheral blood mononuclear cells from multidrug resistant tuberculosis (MDR-TB) patients. Methods The subjects of this study included 3 groups: a non-TB control group, a TB control group and a MDR-TB group. The 31 subjects in the non-TB control group were staff from Wuhan Tuberculosis Prevention and Treatment Institute. The 55 cases in the TB control group were in-patients during September 2004 to December 2007 who were diagnosed as having pulmonary tuberculosis. The 89 cases in the MDR-TB group were in-patients during the same period, but who were diagnosed as having MDR-TB. Peripheral mononuclear cells were isolated and mRNA levels of P-pg and MRP were measured by real-time PCR. Comparisons of the data between different groups were performed using one-way ANOVA, and SNK q was used for comparison between 2 groups.Results There was no significant difference in the relative P-pg mRNA levels among the MDR-TB group (1.34±0.32), the non-TB control group (1.05±0.16) and the TB control group (1.12±0.23), F=0.536, P>0.05. The relative MRP mRNA level (3.45±0.43) was the highest in the MDR-TB group (3.45±0.43), as compared to the TB control group (1.23±0.34) and the non-TB control group (1.04±0.12), F=24.241, P<0.05. Conclusion Higher expression of MRP in peripheral mononuclear cells might be related to multidrug resistance in MDR-TB patients.     

谷胱甘肽S-转移酶-π与肿瘤多药耐药的研究进展

肿瘤多药耐药(MDR)是造成肿瘤化疗失败的主要原因,亦是近年肿瘤化疗的研究热点。随着对非P-糖蛋白(P-gp)介导的MDR机制研究的不断深入,证实谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)在肿瘤MDR中发挥重要作用,有望成为新的肿瘤治疗靶点。本文就GST-π的生理特性、分布、耐药机制、检测手段和逆转由GST-π介导的MDR等方面作一综述。     

多药耐药基因蛋白在贲门癌组织中的表达及其临床价值

目的:研究耐药基因P-糖蛋白(P-gP)、谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)、拓朴异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ) 和肺耐药相关蛋白(LPR)在贲门癌组织中表达及其临床意义．方法:采用免疫组化SP法检测P-gP,GST-π, Topo-Ⅱ和LRP在69例贲门癌组织中的表达状况结果:P-gp,GST-π,Topo-Ⅱ和LRP在贲门癌组织中阳性表达分别为49．2％,75．4％,68．1％和58％,均高于正常组织(0,30％,20％和0, P<0．01)．随分化程度由高到低,P-gp阳性表达率分别为40％,42．4％,61．5％,差异无显著意义(p>0．05),GST-π表达率分别为40％,75．8％和88．5％,差异有显著意义(P<0．05),Topo-Ⅱ表达率分别为33．3％,69．7％和80．7％,差异有显著意义(P<0．01),LRP表达率分别为50％, 54．5％和65．3％,差异无显著意义(P>0．05)．临床分期Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期中,P-gp阳性表达率分别为28．6％和58．3％,差异有显著意义 (P<0．05),GST-π表达率分别为57．1％和83．2％, 差异有显著意义(P<0．05),Topo-Ⅱ表达率分别为57．1％和72．9％,差异无显著意义(P>0．05), LRP表达率分别为38％和66．6％,差异有显著意义(P>0．05)．在有无淋巴结转移分组中,P-gp 阳性表达率分别为67．5％和24．1％,差异有显著意义(P<0．01),GST-π表达率分别为87．5％和58．6％,差异有显著意义(P<0．05),TOpo-Ⅱ表达率分别为65％和72．4％,差异无显著意义 (P>0．05),LRP表达率分别为70％和41．4％,差异有显著意义(P<0．05)．四种耐药基因在贲门癌组织中存在共同表达．结论:贲门癌存在多个耐药基因的共同表达, 联合检测有助于对化疗药物敏感性作前瞻性预测和化疗方案的优化组合．     

白血病多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因的表达及临床研究

白血病是造血系统常见的恶性肿瘤 ,化疗是白血病治疗的主要手段 ,但白血病细胞产生的多药耐药是导致化疗失败的主要原因。多药耐药基因(ｍｄｒｌ)和多药耐药相关蛋白基因 (ＭＲＰ)的过度表达是引起白血病多药耐药发生的重要机制之一。本文应用半定量ＲＴ ＰＣＲ方法同时检测 40例急性白血病和慢性粒细胞白血病急变患者的ｍｄｒｌ和ＭＲＰ的表达水平 ,并探讨了它们与临床耐药的关系。1　对象与方法1 .1 　 研究对象40例患者均为我院 1 999年 7月～ 2 0 0 0年 5月住院患者 ,男 2 5例 ,女 1 5例 ,中位年龄 37岁 ( 4～ 68岁 )。初治组 2 7例 ,复…     

多药耐药相关蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

多药耐药（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）的产生是大肠癌化疗失败的重要原因．已有研究表明ｍｄｒ１基因编码的Ｐｇｐ表达是大肠癌ＭＤＲ的机制之一［１］．最近发现的另一个ＭＤＲ相关蛋白－多药耐药相关蛋白（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＲＰ）,成为肿瘤耐药和逆转耐药的热点［２］．我们的初步研究显示,ＭＲＰ在胃肠癌组织中过度表达［３］,但目前国内未见其他有关大肠癌ＭＲＰ表达的报道．我们应用免疫组化方法研究ＭＲＰ在大肠癌中的表达情况,并进一步…     

大肠癌中多药耐药相关蛋白表达的研究

目的:研究多药耐药相关蛋白在大肠癌的表达及其意义。方法:应用单克隆抗体 QCR-1行 LSAB免疫组化法研究42例大肠癌组织中多药耐药相关蛋白的表达水平。结果:大肠癌组织中多药耐药相关蛋白表达的总阳性率为69.1%,其中乳头状腺癌66.7%,管状腺癌70.0%,粘液腺癌69.2%,大肠癌不同病理类型与 MRP表达间无显著性差异(p>0.05);癌旁正常肠组织呈阴性表达;在大肠癌不同病理分期中,MRP 表达率癌阳性率分别为 Dukes'A 期87.5%,Dukes'B 期91.7%,Dkes'C 期60.0%,Dukes'D 期28.6%,大肠癌 Dukes'A 期与 Dukes'B 期MRP 表达率和 Dukes'D 期比较有显著性差异(p<0.01);大肠癌不同部位的 MRP 表达阳性率比较中,左半结肠62.5%,右半结肠63.7%,直肠73.9%,两者无显著性差异。结论:表明多药耐药相关蛋白是参与大肠癌多药耐药的重要因素,其表达与大肠癌病理分期相关。     

多药耐药相关蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

采用免疫组化法检测36例胃癌患者癌组织中的多药耐药相关蛋白(MRP)表达情况,其中14例同时应用流式细胞术(FCM)检测MRP表达率。结果36例胃癌组织中29例MRP表达阳性,阳性率为80.6%,MRP表达与肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期无关。FCM检测结果显示,MRP的平均表达率为39.1±13.4%,明显高于正常对照(11.9±2.5%,P<0.01)和阴性对照(1.9±0.1%,P<0.01)。认为胃癌组织存在较高的原发耐药,MRP测定有助于选择化疗药物。     

胃癌组织凋亡相关蛋白Bcl-xL和Bax的表达及其临床意义

背景:胃癌的发生、发展不仅与癌基因/抑癌基因失衡相关,亦与细胞凋亡调控异常相关。目的:探讨凋亡相关蛋白Bcl-xL和Bax在胃癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:收集胃癌手术标本57例、慢性非萎缩性胃炎42例、慢性化生性萎缩性胃炎39例、异型增生33例,同期收集正常胃窦黏膜组织30例作为正常对照。采用免疫组化技术检测Bcl-xL和Bax的定位和表达情况,分析胃癌组织中Bcl-xL与Bax表达,以及与胃癌主要临床病理特征的相关性。结果:胃癌组织Bcl-xL阳性表达率和阳性高表达率显著高于正常胃黏膜、慢性非萎缩性胃炎、慢性化生性萎缩性胃炎和异型增生(P0.05);胃癌组织Bax阳性表达率和阳性高表达率显著低于正常胃黏膜、慢性非萎缩性胃炎、慢性化生性萎缩性胃炎和异型增生(P0.05)。胃癌组织Bcl-xL与Bax表达呈负相关(r_s=-0.302,P=0.022);胃癌组织Bcl-xL和Bax表达与肿瘤分化程度相关(P0.05),与患者的性别、年龄、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期均不相关(P0.05)。结论:胃癌组织Bcl-xL表达增强,其表达与Bax呈负相关。胃癌组织Bcl-xL和Bax表达与肿瘤分化程度相关,可望成为胃癌的早期监测指标。     

多药耐药相关蛋白在胃癌、肾癌中的表达意义

目的探讨多药耐药相关蛋白（MRP）在胃癌、肾癌中表达的临床意义。方法应用免疫组化LSAB法检测52例胃癌和20例肾癌组织中MRP表达，结果MRP在胃癌中阳性表达率为38.5％(20／52)，肾癌为60％（12／20)，MRP在肿瘤细胞膜上和胞浆山均见表达，但以胞浆（粗颗粒状)更显。晚期胃癌和肾癌（Ⅲ、Ⅳ期)阳性表达率分别为60％（15／25)和88.9％(8／9)，分别高于Ⅰ、Ⅱ期早期患(18.5％与36.4‰，分别P<0.01和P<0.5)，且胃癌患教唆MRP阳性表达的平均存活期和五年生存率显低于阴性。结论MRP表达与胃癌和肾癌的浸润转移相关、并或能是两由源性耐药的重要机制。     

人结肠癌组织中肿瘤耐药相关基因的表达及其临床意义

背景：人结肠癌对化疗药物的耐药是其化疗失败的主要原因，一些与肿瘤耐药相关的基因从中起着一定作用，有关耐药相关基因在人结肠癌中表达水平的联合检测报道较少。目的：探讨人结肠癌组织中耐药相关基因p21（^WAF1/CIP1）、MRP2、BRCA2、CYP3A5、BCRP和ELK-1转录水平的表达及其临床意义。方法：对30例结肠癌手术标本的癌组织、癌旁组织和正常组织分别以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测肿瘤耐药相关基因p21^（WAF1/CIP1）、MRP2、BRCA2、CYP3A5、BCRP和ELK-1转录水平的表达．比较它们存不同组织中表达的差异及其与肿瘤临床特点之间的关系。结果：结肠癌组织中，MRP2转录表达水平显著高于正常组织（P=0．037）；CYP3A5转录表达水平显著低于正常组织（P=0．042）；ELK-1转录表达水平显著高于癌旁组织和正常组织（P=0．016和P=0．022）。在结肠癌组织和正常组织中，肿瘤耐药相关基因转录水平表达两两之间相关性有不同。结肠癌组织中．肿瘤耐药相关基因与结肠癌临床特点之间均无相关性。结论：在结肠癌的发生和耐药过程中，肿瘤耐药相关基因MRP2、CYP3A5和ELK-1起了一定作用．而p21^（WAF1/CIP1）、BRCA2和BCRP基因的作用可能不明显。     

胃癌及癌前病变中p53蛋白的检测及意义

探讨p53蛋白表达与胃癌及癌病变的相互关系,方法：用免疫组化染色示检测33例肠化,26例异型增生和26例胃癌组织中p53蛋白的表达。结果：p53蛋白在胃癌组织中表达率最高（61．5％）,在异型增生和肠化组织中的表达率分别为34．6％和12．1％,组间有显著差异,各期胃癌组织中p53蛋白的表达无显著差异,结论：p53蛋白在胃癌前病变中已有阳性表达,在肠化、异型增生及胃癌组织中,其表达率依次增高,p53蛋白积累主要发生在癌前病变晚期及胃癌早期,其表达与胃癌发生密切相关。     

胃腺癌微环境caveolin-1的表达及其临床意义

背景：肿瘤的发生、发展是肿瘤微环境中肿瘤实质与间质成分共同作用的结果。目前仅少数研究探讨胃癌微环境小窝蛋白-1（caveolin-1）的表达情况、目的：探讨胃腺癌微环境caveolin-1的表达及其临床意义。方法：收集外科胃腺癌手术切除标本72例,32例正常胃窦黏膜组织作为对照,以免疫组化法检测实质和间质中的caveolin-1和原癌基因蛋白c-myc表达,分析胃癌实质caveolin-1表达与c-myc以及主要肿瘤临床病理特征的相关性。随机选取7例冰冻标本,激光捕获显微切割（LCM）技术获取纯净胃癌和癌旁组织实质和间质细胞,蛋白质印迹法检测caveolin-1和c-myc表达并行相关性分析。结果：常规标本中,胃癌实质和间质caveolin-1高表达率分别显著低于正常胃黏膜实质和间质（P〈0.05）：胃癌实质高表达c-myc,并与caveolin-1呈正相关（r=0.312,P〈0.05）胃癌实质caveolin-1高表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈负相关（P〈0.05）。LCM标本中,胃癌实质和间质caveolin-1表达分别显著低于相应癌旁组织实质和间质（P〈0.05）。caveolin-1与c-myc在胃癌实质中的表达呈正相关（r=0.752,P〈0.05）,在胃癌间质中的表达呈负相关（r=-0.975,P〈0.05）。结论：胃腺癌微环境低表达caveolin-1。胃癌实质caveolin-1高表达与肿瘤浸润、转移、临床进展呈负相关。c-myc可能通过不同机制调节胃癌实质和间质中的caveolin-1表达。胃癌间质caveolin-1低表达有望为胃癌预后判断提供依据。     

BRCAA1蛋白在胃癌组织与不同分化细胞株中的表达及其临床意义

背景：BRCAA1蛋白是-个新蛋白，其在胃癌发生、发展中的作用尚不明确。目的：探讨BRCAA1蛋白在胃癌组织与不同分化细胞株中的表达水平及其临床意义。方法：收集60例胃腺癌患者，分别取胃癌和癌旁组织．应用免疫组化SP法检测BRCAA1蛋白的表达水平，并分析其与胃癌分级的关系。蛋白质印迹分析检测BRCAA1蛋白在胃癌高分化（MKN-1和MKN-74）、中分化（SGC-7901）和低分化（KATO．m和MGC80—3）细胞株中的表达水平。结果：胃癌组织中BRCAA1蛋白的表达阳性率（23，60，38．3％）显著高于癌旁组织（0，60，0％）（P〈0．01）；BRCAA1蛋白在高分化（2／17，11．8％）、中分化（11，26，42．3％）和低分化胃癌组织中（10／17．58．8％）的表达阳性率存在显著差异（P〈0．05）。蛋白质印迹分析结果表明BRCAA1蛋白在胃癌高、中、低分化细胞株中的表达水平逐渐增强。结论：BRCAA1蛋白参与了胃癌的发生、发展，其表达水平与胃癌低分化程度密切相关，BRCAA1蛋白可能是-个胃癌不良预后的标志物。     

DNA甲基转移酶1蛋白在人胃癌黏膜组织中的表达及其临床意义

背景：肿瘤组织存在DNA甲基化紊乱．包括与细胞增殖周期密切相关的癌基因低甲基化和抑癌基因高甲基化等。DNA甲基转移酶（Dnmt）参与甲基化的形成（主要是Dnmt3a和Dnmt3b）和维持（主要是Dnmt1），但目前对胃癌Dnmt蛋白的表达情况仍知之甚少，更缺乏其与肿瘤生物学行为和临床参数关系的研究。目的：探讨癌区、癌旁和外周正常黏膜组织中Dnmt1蛋白表达的差异及其临床意义。方法：收集38例胃癌患者标本，取癌区、癌旁和外周正常黏膜组织各1．2块，应用免疫组化SP法分析各黏膜组织中Dnmt1蛋白的表达．并探讨其与胃癌浸润和转移的关系。结果：在38例胃癌黏膜组织中，Dnmt1蛋白的表达阳性率为81．6％，显著高于相应癌旁（39．5％）和正常黏膜组织（10．5％）（P〈0．001）。阳性切片中可见Dnmt1蛋白表达弥散分布于肿瘤或腺体的细胞质和细胞核，染色较均匀。Dnmt1蛋白表达与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度和有无淋巴结转移无明显相关性（P〉0．05），与性别呈一定的相关性（P=0．007）。结论：Dnmtl蛋白过表达在人胃癌的发生和发展中起一定作用。     

胃癌组织中核因子-kB和环氧合酶-2的表达及其临床意义

背景：有关核因子（NF）一KB和环氧合酶（COX）一2在肿瘤组织中表达的研究虽然较多．但其临床意义和相互关系尚无定论。目的：研究NF-kB和COX-2在胃癌组织中的表达及其关系。方法：采用免疫组化SP法检测142例胃癌组织中NF-kB和COX-2蛋白的表达，以相应的癌旁正常组织（30例）作对照。结果：NF-kB在胃癌组织中的阳性表达率为62．0％，显著高于对照组（P〈0．01）；NF-kB的表达与组织学类型、淋巴结转移和远处转移的临床指标呈显著相关（P〈0．05）。COX-2在胃癌组织中的阳性率为64．1％，在对照组中无表达，两者比较有显著性差异（P〈0．01），且在淋巴结转移组阳性率显著高于无转移组（P〈0．01）。胃癌组织中NF-kB和COX-2的表达呈显著正相关（r=0．380，P〈0．01）。结论：NF-kB和COX-2在胃癌的发生、发展中起重要作用，NF-kB可能促进了COX-2的表达。     

胃癌患者CK20和Ki-67的表达及其临床意义

背景:有关CK20和Ki鄄67在肿瘤组织中表达的研究虽较多,但其临床意义尚无定论。目的:研究胃癌患者外周血CK20mRNA和癌组织中CK20、Ki鄄67的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测40例胃癌患者术前外周血CK20mRNA的表达,采用免疫组化染色检测相应癌组织中CK20、Ki鄄67的表达。结果:随着胃癌临床分期的增高和分化程度的降低,外周血CK20mRNA的阳性率相应增高(P<0.001和P=0.038),癌组织中CK20、Ki鄄67的表达亦增强(P<0.001和P<0.01;P<0.001和P<0.001)。癌组织中CK20、Ki鄄67的表达越强,外周血CK20mRNA的阳性率越高(P=0.009和P<0.01),且癌组织中Ki鄄67的表达随CK20表达的增强而增强(P=0.002)。外周血CK20mRNA和癌组织中CK20、Ki鄄67的表达均与胃癌的组织学类型无关(P>0.05)。结论:外周血CK20mRNA和癌组织中CK20、Ki鄄67的表达与胃癌的临床分期和分化程度关系密切,可作为预测胃癌转移和评估预后的指标。     

环氧合酶—2蛋白在胃癌组织中的表达

流行病学调查发现长期使用非巢体类抗炎药（ＮＳＡＩＤｓ）的患者强肠癌发病率明显下降。ＮＳＡＩＤｓ能抑制环氧合酶（ＣＯＸ）,而ＣＯＸ－２在结肠癌的发生、发展中起一定作用。目的：调查ＣＯＸ－２蛋白在胃癌组织中的表达。方法：用免疫组化半定量方法检测ＣＯＸ－２和ＣＯＸ－１蛋白在胃癌及相应正常组织中的表达。结果：９７．１％（３３／３４）的胃癌组织中有ＣＯＸ－２蛋白表达,其强度明显高于正常胃窦粘膜,分伦型胃癌的