纤维连接蛋白在膀胱癌丝裂霉素化疗药物耐受中的作用

目的 :探讨纤维连接蛋白 (FN)在膀胱癌化疗药物耐受中的作用。方法 :将T2 4膀胱肿瘤细胞分别接种于包被FN、牛血清蛋白 (BSA)的培养板上孵育 2 4h ,加入不同浓度的丝裂霉素C(MMC)作用 2h ,用MTT比色法检测作用后不同时间肿瘤细胞的存活率 ,用ANNEXINⅤ流式细胞分析仪检测不同时间肿瘤细胞的凋亡率。结果 :FN黏附的膀胱肿瘤细胞在不同浓度MMC作用 2h、12h和 2 4h后的平均存活率为 6 8.3%、4 5 .7%及 5 9.1% ,与BSA黏附的膀胱肿瘤细胞平均存活率 4 5 .0 %、2 1.3%、2 6 .6 %比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。FN黏附的膀胱肿瘤细胞在不同浓度MMC作用 2h和 12h后平均凋亡率分别为 1.4 %和 1.0 % ,而BSA组的细胞平均凋亡率为4 .9%和 8.2 % ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :与FN黏附后的膀胱肿瘤细胞对化疗药物MMC的敏感性下降 ,细胞存活率增高 ;FN能抑制MMC引起的膀胱肿瘤细胞凋亡 ,产生药物耐受。     

阿霉素联合4-羟苯维胺酯对膀胱癌细胞生长抑制与凋亡的影响

目的　通过观察盐酸阿霉素 (ADM )联合 4 羟苯维胺酯 (HPR )对人膀胱移行癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用 ,探讨两药对膀胱行癌细胞是否存在协同作用。方法　应用四甲基偶氮蓝比色 (MTT)法检测 0 .0 5mg/L阿霉素及 10 -6、5× 10 -6、10 -5mol/L不同浓度 4 HPR对膀胱癌细胞株T2 4的细胞毒作用 ,应用流式细胞仪检测 4 HPR、阿霉素或两药联合应用时对T2 4细胞生长抑制率。结果　单用 5 μmol/L的 4 HPR、0 .0 5mg/L阿霉素诱导T2 4细胞凋亡率分别为 8%和 2 1% ,两药联合后凋亡率达 5 2 % (P <0 .0 5 )。 0 .5mg/L阿霉素对T2 4细胞凋亡率为 5 2 % ,联合1、5 μmol/L的 4 HPR后凋亡率上升至 81%和 94% (P <0 .0 5 )。 结论　 4 HPR能诱导T2 4细胞凋亡 ,存在浓度和时间依赖性 ,4 HPR与阿霉素联合用药对膀胱癌细胞有明显生长抑制和凋亡诱导的协同作用 ,能缩短产生抑瘤效果的作用时间 ,减少阿霉素的用量。     

γ-干扰素加强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制胆管癌细胞的作用

目的　探讨肿瘤坏死因子 (TNF)相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对人胆管癌的作用及γ 干扰素 (IFN γ)对TRAIL抗瘤活性的影响。方法　应用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪 (FCM ) ,研究TRAIL对人胆管癌细胞的抑制作用及IFN γ对TRAIL抗瘤活性的影响。结果　透射电镜和DNA琼脂糖凝胶电泳可见到典型细胞凋亡特征。FCM分析显示 :浓度为 0、1、10、10 0、10 0 0 μg/L的TRAIL 2 4h引起QBC93 9细胞的凋亡率分别为 (1.66± 0 .73 ) %、(8.83± 0 .5 4) %、(2 2 .3 0± 0 .64 ) %、(4 2 .5 0± 0 .47) %、(4 9.0 6± 0 .72 ) % ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。IFN γ与TRAIL 10 0 μg/L联合应用 ,当IFN γ浓度大于 5 0U /ml或 10 0U /ml时 ,IFN γ作用时间超过 2 4h分别与单用TRAIL组比较 ,明显加强QBC93 9细胞凋亡 (P <0 .0 1)。结论　TRAIL通过诱导胆管癌细胞凋亡而起到抑癌作用 ,IFN γ能加强TRAIL诱导胆管癌细胞的凋亡。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合阿霉素治疗骨肉瘤

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与阿霉素（ADM）联用对骨肉瘤细胞株HOS是否具有协同杀伤作用，并对其机制进行初步研究。方法 MTT法检测细胞的抑制率和存活率，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测TRAIL受体（receptor，R）的表达水平。结果 单用0．5mg／LTRAIL及1．0、10．0、100．0mg／LADM对HOS8603的抑制率分别为13．18％、5．56％、23．02％和76．72％，联合用药的抑制率分别为42．98％、53．12％、81．91％。0．5mg／LTRAIL和1．0mg／LADM有协同作用．TRAIL和ADM联用时TRAIL R2 mRNA表达较TRAIL单用时明显增强。结论 TRAIL与ADM联用对骨肉瘤细胞有明显的协同作用，其机制可能与ADM上调TRAILR2的表达有关。     

人工合成拟Smac融合多肽促低剂量丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡的研究

目的:探讨人工合成拟Smac融合多肽(SmacN7)对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌T24细胞凋亡的促进作用.方法:运用固相多肽合成技术人工合成SmacN7细胞可穿透性融合多肽,将0.05mg/mlMMC诱导的膀胱癌T24细胞与50～500 μg/L的SmacN7融合多肽共同孵育4～48 h,采用Annexin-V荧光染色技术检测肿瘤细胞凋亡情况;应用流式细胞术和MTT比色法检测诱导后T24细胞凋亡率、增殖抑制率与SmacN7的时间和浓度的效应关系.结果:50～500 μg/L SmacN7作用4～48 h,肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变,随着SmacN7浓度的增加或药物作用时间的延长,肿瘤细胞凋亡率也增加,12 h为5.67%～56.12%,24 h为14.54%～65.24%,48 h为31.48%～87.23%,同时细胞增殖抑制率出现明显增加,药物作用12 h、24 h、48 h后,增殖抑制率分别为9.58%～63.42%、28.94%～72.3%、44.7%～87.12%.结论:SmacN7能够有效地促进低剂量MMC诱导的膀胱癌T24细胞凋亡,并具有时间和浓度依赖性,为膀胱肿瘤的生物治疗提供了新思路.     

Endostatin抑制小鼠膀胱癌的作用机理研究

目的　探讨endostatin抑制膀胱癌生长的作用机理。　方法　体外培养小鼠膀胱移行细胞癌T739细胞 ,以endostatin 10 μg/ml处理 ,观察细胞增殖、凋亡情况 ;endostatin 2 0mg·kg-1·d-1皮下注射T739膀胱癌荷瘤小鼠 ,观察肿瘤细胞增殖、凋亡指数及Fas与Bcl 2在肿瘤细胞中的表达。　结果　体外实验显示 ,对照组及endostatin组T739细胞增殖指数分别为 (5 8.3± 9.3) %、(5 9.4± 8.6 ) % ,凋亡指数分别为 (7.2± 1.1) %、(7.5± 1.0 ) % ,差异均无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;动物实验显示 ,对照组及endostatin组肿瘤细胞增殖指数分别为 (5 9.1± 6 .7) %、(5 8.6± 6 .3) % ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;对照组凋亡指数为 (1.9± 0 .4 ) % ,治疗组为 (9.7± 0 .9) % ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ;endo statin组肿瘤细胞Fas表达明显增加 ,对照组及治疗组肿瘤细胞均无明显Bcl 2表达。　结论　endo statin可能通过抑制血管形成导致组织缺氧 ,上调Fas表达诱导肿瘤细胞凋亡 ,从而抑制小鼠膀胱癌生长。     

Fas配体在膀胱肿瘤细胞系免疫逃逸中的作用

目的　探讨膀胱肿瘤细胞系的免疫逃逸机制。　方法　采用免疫细胞化学方法检测膀胱癌细胞系BIU 87中Fas配体 (FasL)的表达 ,应用BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养的方法体外研究FasL诱导T淋巴细胞凋亡的作用。　结果　膀胱癌细胞系BIU 87FasL表达阳性。BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养T细胞凋亡率为 (33.2± 6 .5 ) % ,应用抗体NOK 2中和BIU 87细胞FasL后 ,T细胞凋亡率减少为 (10 .1± 2 .7) % ,两组相比 ,差别有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　膀胱肿瘤细胞系可能通过表达FasL主动诱导T淋巴细胞凋亡从而在膀胱肿瘤的免疫逃逸中发挥作用     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是能够较特异性诱导肿瘤细胞凋亡的肿瘤坏死因子超家族成员 ,由于对正常组织不表现毒性[1] ,在肿瘤治疗方面得到广泛研究。我们对TRAIL诱导膀胱癌细胞EJ凋亡的作用进行了研究 ,现报告如下。材料与方法　重组人TRAIL(rhTRAIL)由KamiyaBiomedical公司制备和纯化 ,浓度设置为 10 0、5 0、2 0和 10ng/ml。Annexin V FluosStainingKit试剂盒购自罗氏公司。人膀胱癌EJ细胞用含 10 %小牛血清 ,10 0U/ml青霉素和10 0 μg/ml链霉素的RPMI 16 4 0 37℃、5 0ml/LCO2 、饱和湿度下培养。细胞按 5× …     

TRAIL联合阿霉素诱导肝癌耐药株凋亡的实验研究

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)及TRAIL和阿霉素(ADM)联用对肝癌耐药株诱导凋亡的作用。方法通过浓度递增法用阿霉素处理人肝癌细胞株HepG2获得肝癌耐药株HepG2/ADM。并通过MTT方法鉴定耐药株的耐药性。构建可溶型TRAIL真核表达质粒真核表达质粒pIRES-EGFP-TRAIL。通过脂质体(Lipofectamine)2000介导转染质粒入HepG2/ADM。通过RT-PCR和Westernblot证实转染的HepG2/ADM有sTRAIL的mRNA和蛋白的表达后,用MTT方法和AnnexinVFITCPI染色流式细胞仪检测单纯TRAIL处理和联合阿霉素处理HepG2/ADM的生长抑制率和凋亡率。并用共聚焦显微镜观察处理后细胞凋亡的形态。结果肝癌耐药株筛选成功,sTRAIL质粒构建、转染成功。用MTT测HepG2/ADM抑制率阿霉素处理组40.9%;TRAIL处理组29%;合用组58.4%;联合后抑制率有显著差异。凋亡检测为阿霉素处理组18.37%;TRAIL处理组14.8%;合用组52.71%。但TRAIL处理HepG28.9%和HepG2/ADM8.54%的凋亡率无显著差异。结论TRAIL联合阿霉素能明显增加HepG2/ADM的凋亡从而逆转耐药。同时单纯TRAIL治疗对耐药株作用与亲代细胞作用相仿,说明TRAIL可能有另外的诱发凋亡的途径,受HepG2/ADM耐药性的影响小。     

西妥昔单抗单用及与化疗药物联合对膀胱癌细胞株T-24的增殖抑制作用

目的 观察西妥昔单抗(Cetuximab)单用及与丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、羟基喜树碱(HCPT)联用对人膀胱癌T-24细胞的增殖抑制作用.方法 选用Cetuximab(0～500 mg/L)和MMC(0～50 mg/L)、ADM(0～10 mg/L)、HCPF(0～10 mg/L),单独或联合作用于T-24细胞,CCK-8法检测细胞增殖抑制作用;金氏公式判断两药联用的协同效应;流式细胞仪检测凋亡率.结果 Cetuximab、MMC、ADM、HCPT对T-24细胞存在程度不同的增殖抑制作用,其20%～30%抑制的工作浓度(IC_(20～30))分别为20.0、0.5、0.1、0.2 mg/L;以该浓度的Cetuximab分别与MMC、ADM、HCPT联合,协同指数q值分别为1.22、1.17、1.25;联合组凋亡率分别为(18.9±1.9)%、(20.1 ±1.9)%、(21.6±2.4)%,显著高于单独药物组(P＜0.05).结论 Cetuximab对膀胱癌T-24细胞存在一定的增殖抑制作用,与化疗药物MMC、ADM、HCPT联合均可取得较好的协同效应,这可能与其进一步促进T-24细胞凋亡有关.     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

深圳市某两所小学流行性腮腺炎突发疫情的流行病学分析

目的：通过对深圳市某两所小学发生的流行性腮腺炎突发疫情的流行病学特点及差异性进行分析,为制定科学、高效的防控策略提供科学依据。方法2013年5～7月深圳市大鹏新区某两所小学爆发流行性腮腺炎,以学校为整体研究对象,分别标记为学校A（24个班,学生1210例）和学校B（27个班,学生1274例）,对比两所小学的疫情流行病学差异性。结果分析发现,学校A流行性腮腺炎发病率为4.30%,发病班级所占比54.17%,均较学校B1.73%和29.63%高,对比差异有统计学意义（P＜0.05）;分析显示学校A学生出现疫病平均年龄为（11.2±1.1）岁,较学校B（9.34±1.0）岁,对比差异明显（P＜0.05）;且两组疫病患儿在接种疫苗率对比上差异无统计学意义（P＞0.05）;但疫情发生时,学校B疫苗紧急接种率明显高于学校A,对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小学作为流行性腮腺炎爆发的主要场所之一,疫病爆发高峰季节前,针对易感染人群给予相应的疫苗接种等预防控制措施,同时加强流行性腮腺炎的监测,对于降低感染人群数量,减轻、遏制疫情有着积极的意义,值得相关防控部门重视。     

Frequency of complications of manipulation of the spine

Summary A survey of all members of the Swiss Medical Association of Manual Medicine was undertaken for the year 1989. Informative data were given by 425 respondents on the frequency of complications of manipulation as related to the spine. The number of thoraco-lumbar manipulations during 1989 (225 working days) was 805 for each respondent, and the number manipulations of the cervical spine 354. Thus, the total number of thoraco-lumbar manipulations was 342 125, and the total number of cervical manipulations was 150 450. The overall incidence of side-effects of transient complications due to cervical spine manipulation such as disturbance of consciousness or radicular signs was 1: 16716. Seventeen patients (ratio 1: 20 125) after manipulation of the lumbar spine presented, in addition to increased pain, a transient sensorimotor deficit with precise radicular distribution. Nine of the 17 patients (ratio 1: 38013) developed a progressive radicular syndrome with sensorimotor defict and radiologically verified disc herniation and had to be referred for surgery. Side effects and complications of cervical and lumbar spine manipulation are rare. Taking in to account the yearly number of manipulations performed by a single physician in Switzerland and the rate of complications, it can be calculated that a physician practicing manual medicine will encoutner one complication due to manipulation of the cervical spine in 47 years and one complication due to lumbar spine manipulation in 38 years of practice. However, it is important that a careful clinical assessment is carried out to avoid complications due to manipulation carried out on the basis of inappropriate indications. Furthermore, the decision as to which technique is indicated for any particular functional disorder of the spine should be made on the basis of rational criteria resting on a knowledge of clinical biomechanics, functional anatomy and neurophysiology. The authors recommend a prospective morbidity study to be carried out among physicians, chiropractors, osteopaths and physiotherapists, taking into account the different indications and therapeutic techniques in relation to complications.     

Oddi括约肌肌电活动实验模型的建立

目的建立研究Oddi括约肌肌电活动的动物模型和实验方法。方法将双极金属钩状电极通过浆膜层置入Oddi括约肌，记录不同条件干预下家兔的Oddi括约肌肌电活动信号，调整电生理实验参数并经放大、滤波及计算机处理后，对其大小、波形、幅度进行分析。结果不同条件干预下的家兔Oddi括约肌的肌电活动在波形、频率、幅度等方面均有明显的不同，具有明显的规律性。重复实验可得到相似的结果。结论使用双极金属钩状电极配以合理的电生理实验参数调整可以稳定地采集到在体的家兔Oddi括约肌肌电活动信号。这为今后广泛、深入地研究Oddi括约肌肌电活动搭建了一个技术平台。     

骨盆骨折的治疗进展

对于骨盆骨折的治疗 ,传统方法以卧硬板床 ,股骨髁上持续骨牵引 ,骨盆兜等保守治疗为主 ,常常引起下肢不等长 ,骶髋痛 ,步态失常等而严重影响生活质量 ,同时长期卧床易引发肺部感染、褥疮、应激性溃疡、泌尿系统结石等并发症而危及生命。下面就骨盆骨折的治疗进展作一综述。1     

Pathogenesis of carcinoma of the papilla of Vater

Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7–, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20–, MUC2–). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.     

主动脉窦瘤破裂外科治疗的临床研究

目的　探讨主动脉窦瘤破裂局部病理改变及其合并主动脉瓣关闭不全的手术方法。方法　 3 6例主动脉窦瘤破裂 (RASV)合并主动脉瓣关闭不全 (AI) 15例、室间隔缺损 (VSD) 2 6例。补片修补 3 5例 ,其中合并VSD的均以一片法修补 ,合并AI的主动脉瓣置换 (AVR) 6例 ,主动脉瓣成形 4例。手术取材作病理检查 5例。结果　本组 3 6例中手术死亡 2例 ( 5 .6% )。存活的 3 4例病人均经门诊复查或通信随访 0 .3～ 18年 ,其中 2例死亡。病理检查见RASV合并VSD的瘤壁为纤维素样坏死或玻璃样变性。结论　主动脉窦壁纤维素样或玻璃样变性可能是其形成的病理基础。合并主动脉瓣关闭不全时应探查其病变程度 ,酌情一期矫正 ,瓣膜损伤明显时宜行主动脉瓣置换 ,对主动脉瓣环细小的病例 ,可借修补VSD和RASV的补片扩大主动脉瓣环。     

鼻尖、鼻翼缺损修复方法的探讨

１９５７年以来共收治鼻尖、鼻翼缺损１１９例，据情分别采用以下四种方法修复：①全层皮片移植２７例；②游离耳廓复合组织片移植３６例；③鼻唇沟皮瓣移转１２例；④上臂内侧皮管移植４４例，效果较为满意。我们在文章中就选用的原则、手术方法及注意事项等进行了探讨     

食管穿孔83例分析

８３例不同原因引起的食管穿孔，保守治疗５７例；手术２６例，行单纯食管修补术２０例、开胸行纵隔和／或胸腔引流２例、切除贲门肿物行胃食管吻合１例、颈部食管外置２例（其中１例并行二期结肠代食管手术）、１例开胸取异物形成食管瘘后，行二期修补瘘术。全组死亡８例，其中死于纵隔胸腔感染和主动脉破裂出血各４例。总治愈率８５％。并指出异物假牙造成食管穿孔的重要性，对严重的腐蚀性食管灼伤应早期行食管镜检，并针对食管穿孔部位、种类、间隔期、纵隔与胸腔的感染程度及病人具体情况采取相应的治疗措施。     

手部深度烧伤的临床治疗分析

目的 总结手部深度烧伤的临床治疗经验. 方法 46例54只深度烧伤手,其中深Ⅱ度烧伤30例33只手,Ⅲ度烧伤16例21只手.根据伤情不同,早期选择不同手术方式修复创面,术后早期进行功能锻炼. 结果 54只手的修复方式:中厚皮片移植33只手,异体脱细胞真皮与自体薄皮片复合移植12只手,腹部带蒂皮瓣1只手,前臂骨问背动脉逆行皮瓣3只手,股前外侧皮瓣5只手.治疗后,51只手移植皮片、皮瓣均成活,仅3只手移植皮片后有局灶性坏死,创面得到有效覆盖.按关节活动范围( range of motion,ROM)评定,本组优31只手(57.4％),良17只手(31.5％),中4只手(7.4％),差2只手(3.7％). 结论 手部深度烧伤后,选择合适术式,早期手术修复创面及功能锻炼,可取得很好的疗效.