Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸抑制鼻咽癌细胞增殖活性的研究

目的　观察并探讨阳离子脂质体 (L ipofectin,L ip)介导的 bcl- x L 反义寡核苷酸 (antisenseoligodeoxynucletide,ASODN)对鼻咽癌细胞株 CNE- 1、CNE- 2 Z细胞体外抑制增殖活性的影响。方法　人工合成硫代修饰型 bcl- x L 反义寡核苷酸 (ASODN) ,与 L ip混合制备成 L ip+oligodeoxynucletide(ODN)复合物 ,处理鼻咽癌细胞株 CNE- 1、CNE- 2 Z细胞 ,用 MTT比色法检测细胞存活状态 ;流式细胞术检测细胞凋亡。结果　 ASODN处理细胞 3 6小时 ,于 40 0 μm ol/ L 浓度条件下鼻咽癌细胞的增殖受到明显抑制 ,且这一抑制作用随着浓度的增加与时间的延长而加强 ,与硫代修饰型随机序列对照寡核苷酸 (sequence control ODN,SCODN)组及单独脂质体组比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　 bcl- x L 反义寡核苷酸可显著抑制鼻咽癌细胞株 CNE- 1、CNE- 2 Z细胞体外增殖活性 ,其抑制作用可能通过封闭 bcl- x L 基因表达实现 ,bcl- x L 反义寡核苷酸有可能成为一种潜在性的基因治疗药物用于鼻咽癌的治疗     

细胞调亡相关基因bcl—2与bax在肺癌组织中表达的意义

目的探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在人肺癌组织中的表达情况及其与肺癌的各种临床病理特征和预后的关系.方法用免疫组织化学SABC法检测经手术治疗的72例肺癌患者的病理标本,用TUNEL法检测其中的细胞调亡情况,其中小细胞未分化癌4例,鳞癌38例,腺癌30例,同时检测11例正常肺组织作为对照.结果在肺癌组织中bcl-2蛋白的阳性表达率为37.50%,bax的阳性表达率则为51.39%,两者与正常肺组织比较均存在显著性差异(P＜0.05/0.01);bcl-2在小细胞未分化癌中的阳性表达率为100.00%(4/4),高于非小细胞肺癌的33.82%(P＜0.05);bcl-2在鳞癌的阳性表达率为50.00%,高于腺癌的13.33%(P＜0.05);bax在鳞癌中的阳性表达率为39.47%,小于腺癌的73.33%(P＜0.05).分析两基因在非小细胞肺癌中的阳性表达情况,bcl-2/bax＞1者在高分化癌中占50.00%,大于中、低分化癌及未分化癌的17.86%(P＜0.05);在Ⅰ期肺癌中占39.13%,高于Ⅱ-Ⅲ期肺癌的15.56%(P＜0.05);在生存时间大于3年的肺癌中占40.00%,高于生存时间小于3年的肺癌的13.90%(P＜0.06).bcl-2/bax＜1者在生存时间大于3年的肺癌中占20.00%,低于生存时间小于3年的肺癌的51.16%(P＜0.05).肺癌组织的调亡指数(AI)为1.83±0.52,小于正常肺组织的14.33±5.62(P＜0.05);在bcl-2/bax＞1的肺癌中,AI值为1.27±0.49,小于bcl-2/bax＜1者的3.32±1.01(P＜0.05).结论bcl-2和bax基因与肺癌的组织类型、分化程度、临床分期及预后有关,参与了肺癌的发生、发展.     

肺非小细胞癌患者中p53、bax的差异表达

目的探讨p53、bax 抑癌基因在肺非小细胞癌组织及癌旁组织中的差异表达.方法以凝胶上rRNA条带的亮度为依据对后续分析用的起始RNA浓度进行调整;以组成型表达的β-actin基因为外对照,对两类组织来源的起始RNA量进行监测;基因克隆及序列分析来验证所用引物的可靠性;随后采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）的方法对各基因在两类组织中的表达谱进行对比分析,并以Northern杂交加以验证.结果在两类组织来源的起始RNA量基本一致的前提下,p53、bax 2个抑癌基因在成对组织中的表达谱存在明显差异.bax在肺癌组织及癌旁组织中均有表达;p53基因在肺癌组织中的表达量较高,且p53的带型与在癌旁组织中表现也明显不同.结论肺癌组织及癌旁组织中存在bax促凋亡基因的转录;p53基因在肺癌组织出现异常转录.     

bcl-2、bax 基因与胃癌

bcl-2、bax是细胞凋亡的重要调控基因，bcl—2的超表达使细胞生存期延长，而bax的超表达则使细胞凋亡。二者不同程度的表达在胃癌的发生、发展中起重要作用。该文就bcl—2，bax与胃癌关系作一综述。     

乳腺浸润性导管癌bcl-2、bax基因蛋白表达与预后的关系

目的：研究ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因蛋白在乳腺浸润性导管癌中表达的相关性及和预后的关系。方法：应用免疫化学ＡＢＣ法检测乳腺浸润性导管癌组织ｂｃｌ－２、ｂａｘ基因蛋白的表达。结果：存活组ｂｃｌ－２基因蛋白阳性表达率（４６／６５）明显高于死亡组的ｂｃｌ－２阳性表达率（１２／３５），且ｂｃｌ－２基因蛋白表达与淋巴结转移和临床分期呈负相关关系；而ｂａｘ在死亡组的阳性率（３１／２６）较ｂｃｌ－２（－）ｂａｘ（＋     

肝细胞癌细胞凋亡相关蛋白bcl—2和bax的表达及意义

目的探讨原发性肝细胞癌(简称肝癌)细胞凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达情况及其意义.方法采用免疫组化ABC法检测bcl-2和bax蛋白在66例人肝癌组织和24例人正常肝组织,以及3种人肝癌细胞系HCC-9204、SMMC-7721、HHCC和1种人正常肝细胞系QZG的表达情况,并分析肝癌组织的bcl-2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间的关系.结果bcl-2蛋白在正常肝组织中表达的阳性率只有4.2%(1/24),在肝癌组织中的阳性率为25.8%(17/66),二者具有显著性差异(P＜0.05).bax蛋白在正常肝组织中表达的阳性率为70.8%(17/24),在肝癌组织中的阳性率为43.9%(29/66),二者也具有显著性差异(P＜0.05).肝癌组织的bcl-2和bax蛋白表达阳性率与其病理分级之间均未见明显的相关性.在正常肝和肝癌组织中,bcl-2蛋白的阳性率均明显低于bax蛋白(P＜0.01,P＜0.05).在正常肝细胞系QZG中未见明显的bcl-2阳性信号,bax蛋白的阳性细胞计数率为61.0%.肝癌细胞系SMMC-7721和HHCC的bcl-2蛋白阳性细胞计数率分别为14.3%和11.8%,bax蛋白阳性细胞计数率分别为58.3%和47.1%.肝癌细胞系HCC-9204中未见明显的bcl-2阳性信号,bax蛋白阳性细胞计数率为43.2%.结论与正常肝组织相比,肝癌组织可出现bcl-2蛋白表达低度升高,bax蛋白表达下降.正常肝和肝癌组织的bcl-2蛋白表达水平均低于bax蛋白.肝癌和正常肝细胞系的bcl-2蛋白表达水平很低,可见中等程度的bax蛋白表达.     

bcl－2、bax基因产物表达与大肠癌术后化疗疗效关系初探

本文的目的是为探讨大肠癌ｂｃｌ—２／ｂａｘ基因产物表达与对化疗疗效的影响之间的关系。用免疫组化Ｓ—Ｐ技术检测２８例手术后随访５年以上的大肠癌标本中ｂｃｌ─２／ｂａｘ基因产物的表达。结果显示ｂｃｌ─２基因产物阳性表达者２３例，化疗后复发率５４．６％，５年生存率６９．５％。ｂｃｌ—２阴性表达者５例，复发率２５％，生存率８０％。ｂａｘ基因产物阳性表达者７例，复发率２０％，生存率８５．７％。ｂａｘ阴性表达者２１例，复发率５８．３％，生存率６６．７％。提示ｂｃｌ—２阳性表达对抗了化疗诱导的凋零，肿瘤复发率高于ｂｃｌ－２阴性者。ｂａｘ阳性表达促进了化疗诱导的凋零，肿瘤复发率低于ｂａｘ阴性者。监测ｂｃｌ—２／ｂａｘ表达有助于观察化疗疗效和预后。     

人肺癌组织癌基因表达的研究

人类肿瘤的发生与某些原癌基因的活化有密切关系,同时还与抗癌基因的突变、失活有关。一般认为,小细胞肺癌主要是myc基因家族成员的扩增和表达,而非小细胞肺癌主要是ras基因家族成员的硷基点突变。各种类型的肺癌的发生还与P53基因的丢失和突变有关。为了解人原发肺癌组织中c-myc癌基因与P53抗癌基因突变体的mRNA表达水平及其与吸烟、煤烟暴露之间的关系,我们进行了本实验研究。     

结肠良、恶性病变中细胞凋亡及其与bcl-2、bax、PCNA蛋白表达的关系

目的　了解结肠良、恶性病变中细胞凋亡与增殖 ,及其与相关基因蛋白表达的关系及其生物学意义。方法　应用免疫组织化学S P法检测 14 8例结肠良、恶性病变标本中bcl 2、bax和PCNA蛋白的表达 ;并对其中 75例标本进行凋亡指数 (AI)和有丝分裂指数 (MI)测定。结果　PCNA与AI和MI密切相关 (P <0 .0 1) ;而bcl 2和bax仅与AI有关 (P <0 .0 1) ;bcl 2和PCNA蛋白在结肠腺癌和腺瘤中表达率显著高于正常组织 (P <0 .0 1) ;而bax蛋白则相反 ,在正常及良性病变中表达率较癌组织为高 (P<0 .0 1)。其次发现 ,以结肠腺瘤为分界点 ,前半阶段凋亡指数逐渐上升 ,后半阶段则下降 ,而细胞增殖指数在整个演进过程中呈上升趋势。结论　凋亡与增殖间平衡的破坏与结肠粘膜的恶变密切相关 ,在这一过程中有多种基因参与调控 ,其中bcl 2和bax即参与了此调控过程 ,且其蛋白产物的异常表达是结肠腺癌发生过程中的早期事件。     

子宫内膜癌中细胞凋亡和bcl-2、bax基因的表达

目的 探讨细胞凋亡及其调控基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ在子宫内膜癌变过程中的作用。方法应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法和ＴＵＮＥＬ技术,对子宫内膜腺癌癌变过程各级病变组织中细胞凋亡、ｂｃｌ－２和ｂａｘ蛋白进行测定。结果 正常增生期子宫内膜有偶发凋亡,子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌的细胞凋亡率分别为０．６％和２．８％。ｂｃｌ－２蛋白在正常增生期子宫内膜、子宫内膜增生症和子宫内膜腺癌的表达率分别为１００％、７４．４％     

p53mRNA、bcl-2、bax蛋白在肺癌中的表达

目的 :探讨原发性肺癌中 bcl- 2、bax和 p5 3m RNA表达水平及其与临床病理特征的关系。方法 :用免疫组织化学 Dako Envision TM二步法、反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)方法分别检测5 2例肺癌组织中 bcl- 2、bax、p5 3m RNA表达情况。结果 :5 2例肺癌组织中 bcl- 2、bax蛋白表达阳性率分别为 4 2 .3%、5 9.6 1%。肺癌中 bcl- 2蛋白过表达在低分化癌、 期肺癌中高于高分化癌以及 期肺癌差异有显著性意义 (P<0 .0 1)。 p5 3m RNA、bax蛋白的阳性表达与 bcl- 2蛋白呈负相关。结论 :bcl- 2蛋白在晚期肺癌中过表达 ,p5 3m RNA、bax蛋白在早期肺癌中起着重要作用 ,它们共同参与细胞内死亡和存活信息的平衡状态的调节。     

p21、p27、bcl-2和bax在肺癌组织中表达的意义及相关性研究

目的:探讨p21、p27、bcl-2、bax蛋白在肺癌中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组化S-P法,检测85例肺癌患者及21例良性肺疾病患者术后组织标本中p21、p27、bcl-2、bax的表达.结果:p21、p27、bcl-2、bax蛋白总阳性表达率分别为72.94%、37.65%、61.18%、41.18%.各种蛋白的阳性表达率在肺癌组织与对照组间均存在差异性(P＜0.05).仅bcl-2蛋白表达与肺癌的不同病理类型有关,其中在小细胞肺癌中表达率最高、鳞癌次之、腺癌最低.p27、bcl-2、bax三者的阳性表达随病理分化程度的降低而降低(P＜0.05).p21与bcl-2蛋白的阳性表达与肺癌临床TNM分期有关(P＜0.05).bax蛋白的表达与有无淋巴结转移有关.p27、bcl-2、bax三者之间存在相关性.结论:p21、p27、bcl-2、bax蛋白与肺癌的发生、发展有密切关系.联合检测p21、p27、bcl-2、bax对于临床诊断肺癌及判断病情、预后有重要意义.     

肺癌组织中白介素-8基因表达的实时定量PCR研究

目的建立白介素-8 (IL-8)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术.方法应用实时定量PCR和ELISA方法检测2株人肺癌细胞H460及A549中IL-8 mRNA表达及蛋白分泌.同时对9例正常肺及44例非小细胞肺癌(NSCLC)组织中IL-8 mRNA进行分析.结果应用实时定量PCR方法能够对肺癌细胞中IL-8 mRNA拷贝数进行定量分析,IL-8表达值与蛋白分泌量呈正相关.正常肺组织中IL-8基因表达值为4.87±1.69 (单位:拷贝数/104 GAPDH拷贝),肺癌组织为17.04±23.96,两组间差异有统计学显著意义(P＝0.002).若以正常肺组织均数的2倍(9.74)和4倍(19.48)分别作为IL-8阳性表达及过表达的界限,52.3%(23/44例)的肺癌组织IL-8表达增高,其中IL-8阳性表达率为29.5 %(13/44例),过表达率为22.7 %(10/44例).统计分析显示,在女性、鳞癌和晚期肿瘤(III期及T2～T4)中IL-8过表达率明显增高,具有统计学显著差异(P<0.05).结论应用实时定量PCR技术能够对IL-8表达水平进行定量分析,IL-8过表达与患者性别、组织类型和病期密切相关.     

食管癌bax和bcl-2蛋白表达和DNA含量的流式细胞定量研究

ax和bcl-2是一对作用相反的凋亡促进和抑制基因,它们之间的平衡失控可能在肿瘤发生中起重要的作用.DNA倍体异常在人体多种肿瘤中被认为是重要的预后参数.我们应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术对70例食管鳞癌和10例正常食管粘膜组织中凋亡基因 bax和bcl-2蛋白和DNA倍体含量进行检测,探讨其在食管癌发生中的作用.     

脑星形细胞瘤组织中p16 bcl-2、bax蛋白的表达及其意义

目的：探讨p16,bcl-2,bax蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其意义。方法：采用S－P免疫组织化学法，检测P16，bcl-2,bax蛋白在60例不同病理分级脑星形细胞瘤组织中的表达情况。结果：60例脑星形细胞瘤组织中，p16,bcl-2,bax蛋白表达阳性率分别为50．0％（30／60），58．3％（35／60），66．7％（40／60），其中P16蛋白阳性表达与病理分级有显著性相关（P＜0．05），bcl-2,bax蛋白表达与病理分级无相关性（P＞0．05），60例脑星形细胞瘤组织中，p16,bcl-2,bax蛋白共同表达率，I级为47．8％（11／23），Ⅲ-Ⅳ级为0（0／16），在bcl-2,bax蛋白表达的基础上，不同病理分组织中p16蛋白的缺失率：I级为4．3％（1／23），Ⅲ-Ⅳ级为50．0％（8／16），有非常显著性差异（P＜0．01），结论：P16蛋白表达与脑星形细胞瘤的发生发展密切相关，在脑星形细胞瘤的发展过程中，bcl-2,bax,p16蛋白可能有某种协调作用。     

人体肺癌组织中肥大细胞对癌细胞的溶解作用

以１５例人体肺癌手术切除组织作肥大细胞组织化学和电镜观察。酸化甲苯胺兰染色显示的肥大细胞不仅存在于间质，而且进入癌巢内。超微结构观察到肥大细胞与癌细胞密切接触，可见肥大细胞旁的瘤细胞有变性及溶解现象。提示肥大细胞在人体内可能参与瘤细胞的溶解过程。     

胃癌及癌前病变细胞增殖和凋亡与bcl-2/bax表达的关系

目的：观察细胞凋亡和增殖及其调控基因在胃癌及癌前病变发生发展过程中的异常变化,探讨细胞凋亡在胃癌演变中的作用。方法：对１２８例胃癌及癌前病变患者和正常人,采用原位末端标记法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｌｙ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｌａｂｅｌｌｉｎｇ,ＴＵＮＥＬ）及免疫组化技术检测胃粘膜上皮细胞凋亡、增殖及ｂｃｌ－２／ｂａｘ表达。结果：正常人、浅表性胃炎、萎缩性胃     

凋亡相关基因Fas、bax和bcl—2蛋白在食管癌中的表达及其意义

目的研究凋亡相关基因Fas、bax和bcl-2蛋白在食管癌发生发展中的作用。方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术对70例食管鳞癌组织中Fas、bax和bcl-2蛋白进行定量检测。结果Fas阳性42例（60．0%），Fas蛋白表达与肿瘤的病理分级明显相关（P＜0．05），与肿瘤临床分期和淋巴结转移与否无明显相关性（P＞0．05）；bax阳性39例（55．7％），bxl-2阳性65例（91．5％），bax和bxl-2蛋白表达与肿瘤的病理分级，临床分期和淋巴结转移无明显相关性（P＞0．05）。结论Fas、bax和bcl-2基因与食管癌发生和发展有关。     

bcl-2基因表达与肺癌细胞凋亡的关系

目的：观察体外培养肺瘤细胞bcl-2表达与机体免疫攻击致癌细胞凋亡的关系。方法：把bcl-2表达不同的肺瘤细胞株与从肺瘤组织中分离出来的肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL）共同培养,通过JAM试验观察肺瘤细胞凋亡的情况。结果：体外JAM试验中,随着TIL浓度增加,bcl-2阴性的肺瘤细胞凋亡也增加,但bcl-2阳性者则无变化。结论：bcl-2表达阳性的肺瘤细胞具有抗凋亡特性,能耐受肿瘤浸润淋巴细胞的免疫攻击。