VEGF反义核酸对Lewis肺癌细胞作用的研究

目的 探讨利用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡核苷酸的基因治疗肺癌.方法 制作C57BL/6小鼠皮下肺癌模型30只,分为VEGF反义寡核苷酸(ASODN)治疗组、VEGF正义寡核苷酸(SODN)治疗组及对照组.接种Lewis肺癌细胞后24h内,用ASODN及SODN皮下注射进行治疗,对照组只注射生理盐水,观察小鼠肿瘤的生长情况.用免疫组化方法检测VEGF蛋白表达,RT-PCR方法检测VEGF mRNA的表达.结果 VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组、对照组平均瘤重分别为(4.31±0.45)g、(6.47±0.71)g、(6.23±0.76)g.VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组抑瘤率分别为41.8%、5.2%.VEGF反义寡核苷酸能明显抑制VEGF蛋白表达及VEGF mRNA的表达.结论 原位注射VEGF反义寡核苷酸能抑制小鼠肺癌生长.     

健择治疗非小细胞肺癌的观察及护理

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤 ,是发病率持续增高的少数几种肿瘤之一。目前在我国大中城市 ,肺癌已经成为发病率和病死率最高的恶性肿瘤。对非小细胞肺癌的治疗虽然手术有了很大的改进 ,但复发率仍居高不下 ,5年存活率仅为13% [1] 。近年来发展的一些新药如紫杉醇、健择等对非     

健择对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞免疫功能影响的研究

目的探讨健择对非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞(AM)凋亡及其分泌细胞毒效应分子功能的影响。方法ELISA法、酶法分别检测35例非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液中及其AM培养上清夜中TNF-α和NO水平,并分别用IFN-α、健择和两药联合干预AM培养,检测其培养上清液中TNF-α、NO变化水平。流式细胞仪检测健择对AM凋亡的影响。结果所有非小细胞肺癌患者其肺泡巨噬细胞均可自发地产生一定量的TNF-α和NO。非小细胞肺癌患者荷瘤侧肺NO和TNF-α活性无论是整体状态,还是细胞水平均明显低于非荷瘤侧肺。健择单独干预组肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO的浓度无明显变化(P>0.05);经IFN-α刺激肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO的浓度明显升高,与对照组比较差异呈显著性(P<0.01);健择和IFN-α联合干预下肺泡巨噬细胞培养上清液中TNF-α和NO水平较对照组、IFN-α干预组明显升高,差异呈显著性(P<0.05)。不同时间不同浓度健择对肺泡AM凋亡率无明显差异(P>0.05)。结论健择单独应用对肺泡巨噬细胞免疫功能无明显影响,联合干扰素时能提高非小细胞肺癌患者肺泡巨噬细胞抗肿瘤免疫功能。其机制有待进一步研究。     

健择+顺铂治疗非小细胞肺癌的护理体会

健择是一种抗肿瘤新药 ,与顺铂联合治疗非小细胞肺癌有一定疗效。因疗程长 ,副作用较大 ,故在化疗中的护理尤其重要。本科 1999～ 2 0 0 0年采用健择加顺铂治疗 10例小细胞肺癌患者 ,获得满意效果 ,现报告如下。1　资料与方法1.1　一般资料小细胞肺癌患者 10例 ,男 7例 ,女 3例 ,年龄 4 6～ 6 1岁。1.2　治疗方法全部患者采用 0 .9%NS10 0ml(浙江济民制药有限公司 ;批号 :0 30 2 2 14 4 1)加健择 (法国礼来 ;批号 :VIALNO .75 0 2 ) 10 0mg/m2 ,治疗时间为第 1天 ,第 8天 ,第 15天。每次半小时点滴完。 0 .9%NS5 0 0ml(江西制药有限公司…     

健择联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床探讨

目的 观察健择联合顺铂治疗非小细胞肺癌的疗效和毒性。方法 44例非小细胞肺癌采用健择加顺铂治疗。其中男28例，女16例；腺癌28例，鳞癌12例，大细胞癌4例；ⅢA期6例，ⅢB期18例，Ⅳ期20例。健择剂量1250mg／m^2，静脉滴注，d1，d8；顺铂80mg/m^2，静脉滴注，d1，每21天1周期。结果 全组44例中，CR5例，PR19例，SD16例，PD4例，总有效率54．5％，中位缓解期6．2个月，中位生存期12．9个月。健择的限制性毒性为骨髓抑制，主要是血小板减少，Ⅲ、Ⅳ度血小板减少分别为22．2％和15．9％。结论 健择加顺铂治疗非小细胞肺癌是有效而安全的，值得临床推广应用。     

JAB1对缺氧环境肺癌A549细胞化疗敏感性调控的研究

目的观察导入pcDNA3.1-HRE-JAB1真核表达质粒的肺癌A549细胞,在低氧环境下对健择(Gemzar)的化疗敏感性,以期找到一种提高肺癌化疗敏感性的方法。方法首先构建缺氧反应元件启动的pcDNA3.1-HRE-JAB1真核表达质粒,鉴定后将该质粒导入肺癌A549细胞。在低氧环境培养过程中加入化疗药物Gemzar,观察空白组(A549)、空载体组(A549+pcD-NA3.1-HRE)和质粒组(A549+pcDNA3.1-HRE-JAB1)肺癌A549细胞对Gemzar的敏感性。采用Real-time PCR和Westernblot分别检测各组肺癌A549细胞中JAB1的mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测各组肺癌A549细胞周期分布和凋亡情况。结果通过双酶切鉴定,确定构建获得了pcDNA3.1-HRE-JAB1质粒。在有化疗药物Gemzar的情况下,质粒组分别与空白组或空载体组比较,质粒组肺癌A549细胞中JAB1mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),而细胞周期被明显阻滞于G1期(P<0.01)。结论 JAB1在低氧环境下高表达提高了药物Gemzar化疗的敏感性,这将可能成为一种理想的提高肺癌或其他实体恶性肿瘤化疗敏感性的手段。     

健择加顺铂方案治疗非小细胞肺癌的临床观察

目的：评价健择加顺铂方案治疗非小细胞肺癌的疗效及毒副反应。方法：健择１０００ｍｇ／ｍ＾２，静滴半小时，第１，８，１５ｄ；顺铂６０—８０ｍｇ／ｍ＾２，静滴，第１天或分３ｄ用，同时水化，共治疗４２例病人。结果：完全缓解１例，部分缓解１９例，病情稳定１４例，病情进展８例，有效率４７．６％。主要毒副反应为骨髓抑制，全组４２例病人出现白细胞下降３２例，占８４．４％。血小板下降为１６例，占３８．１％。非血液毒性有恶心呕吐、乏力，程度均较绎。结论：健择联合顺铂方案治疗非小细胞肺癌疗效确切，毒副反应较轻，病人容易耐受，值得临床进一步使用观察。     

健择单药维持治疗初治有效的晚期非小细胞肺癌近期疗效观察

目的:观察健择(吉西他滨)单药维持治疗初治有效的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效。方法:46例经病理或细胞学检查确诊、无法手术切除的ⅢB~Ⅳ期初治患者,经健择(由美国礼来公司生产)1 250 mg/m2溶于100 ml生理盐水中静脉滴注30 min(第18、d)、顺铂75 mg/m2加入0.9%氯化钠溶液500ml静滴(第1、23、d),常规应用5-HT受体拮抗剂化疗前静推止吐,应用顺铂时给予水化利尿。定期复查血常规和肝肾功能,在正常范围者按时进行化疗。至少2个周期评价疗效;完成4个周期GP化疗且获完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)有41例患者,随机分为观察组(21例)和对照组(20例)。观察组再给予健择1 250 mg/m2溶于100 ml生理盐水中静脉滴注30 min(第18、d),平均21 d为1周期,用药3个周期。对照组给予支持对症治疗。结果:观察组客观有效率提高至50%,两组总有效率及不良反应相比差异无统计学意义(P>0.05);观察组恶心呕吐发生率、骨髓抑制与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健择单药维持治疗初治有效的晚期NSCLC近期有效率有所增加,不良反应也能耐受。     

威麦宁对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响

目的复制小鼠Lewis肺癌模型,检测威麦宁的抑瘤率.方法采用流式细胞术分析、免疫组化法检测药物对模型鼠肿瘤细胞周期及对Cyclin D1表达的影响.结果威麦宁浓度在100、150、200、250 mg/(kg*d)时,对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%、33.59%、40.63%、51.56%, 药物对肿瘤的抑制作用具有剂量依赖性;药物可将肿瘤细胞阻滞在G0～G1期,并降低肿瘤细胞Cyclin D1的表达(P＜0.01).结论威麦宁可能是通过降低肿瘤细胞Cyclin D1的表达,将肿瘤细胞阻止于G0～G1期,使细胞不能进入S期进行DNA复制,从而抑制肿瘤的生长.     

健择联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

目的观察健择（gemcitabine）联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及毒性反应。方法经病理证实的50例晚期非小细胞肺癌患者采用健择＋顺铂方案;健择1 000 mg/m^2,第1、8天;顺铂80 mg/m^2,第1天或分3天应用,21天为1个周期。结果完全缓解（CR）1例,部分缓解（PR）22例,稳定（SD）19例,进展（PD）8例,总有效率46%。初治26例中,CR＋PR 14例,有效率53.85%;复治24例中,CR＋PR 9例,有效率37.5%,两组差异有显著性（P〈0.05）。毒副反应以白细胞及血小板下降为常见,但均可耐受。结论健择联合顺铂对晚期非小细胞肺癌有较好疗效,毒副反应可以耐受。     

Cyclin B1正、反义全长cDNA腺病毒载体的构建及对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 利用pAd/CMV/V5-DEST腺病毒载体系统构建含有人细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)正、反义全长Cdna的重组腺病毒,并研究其对人宫颈癌细胞株HeLa增殖及凋亡的影响.方法 通过RT-PCR获取Cyclin B1全长Cdna,分别以正、反方向插入Pentr11,与pAd/CMV/V5-DEST进行同源重组后获得正确的重组腺病毒质粒,经293A细胞包装扩增获得重组病毒颗粒.重组腺病毒体外感染HeLa细胞,通过细胞计数和流式细胞术观测其对细胞增殖及凋亡的影响.结果 Cyclin B1基因成功克隆到载体上,并经293A细胞包装出病毒颗粒.此重组腺病毒感染HeLa细胞后,反义Cyclin B1能明显抑制细胞的生长并且促进细胞凋亡.结论 成功构建了携带人Cyclin B1正、反义全长Cdna的重组腺病毒载体,此载体可在HeLa细胞中发挥生物学作用.     

反义细胞周期素D1基因对肝癌细胞的作用

目的研究反义基因封闭技术体外抑制细胞周期素D1（cyclin D1）表达后对肝癌细胞增殖的影响。方法肝癌HepG2细胞被转染表达cyclinD1反义互补脱氧核苷酸（AScDNA）的质粒后，观察其cyclinD1表达及体外增殖活性的改变。结果cyclinD1反义cDNA可特异性地抑制肝癌细胞，cyclinD1蛋白的表达。从而调控细胞周期，抑制肝癌细胞增殖。结论利用cyclin D1反义cDNA进行细胞周期干预对肝癌的治疗具有潜在的意义。     

Lewis肺癌细胞小鼠KAI1基因表达受清金得生片影响的研究

目的:研究清金得生片对Lewis肺癌细胞小鼠KAI1基因表达的影响。方法:按8.1 g·kg-1·d-1剂量的清金得生片灌胃接种了Lewis肺癌细胞的小鼠,并设立模型对照组及正常对照组;采用荧光定量PCR技术检测小鼠KAI1基因的表达,观察KAI1基因表达受清金得生片的影响。结果:KAI1基因在肿瘤组织中的表达显著低于正常肺组织及癌旁组织。结论:清金得生片抗肿瘤作用可能与其上调KAI1基因的表达有关。     

细胞周期蛋白B1与存活素蛋白在肝细胞癌中的表达

目的研究细胞周期蛋白B1和存活素蛋白在不同分化程度肝癌细胞中的表达情况及与临床因素之间的关系,以探讨两者在肝细胞癌发病机制中的作用。方法选取我院病理科手术切除肝细胞肝癌存档蜡块46例,另取正常肝组织13例作为对照,以免疫组化法染色,测定细胞周期蛋白B1和存活素蛋白的表达情况,并结合患者的临床资料,运用统计学分析数据。结果细胞周期蛋白B1及存活素蛋白均在正常肝组织无表达,均在肝癌组织中有明显表达（P〈0.01）,并随着肝癌细胞分化程度的降低,表达逐渐增强（P〈0.01）,在低分化肝癌组织中的表达最强。均与肝内转移与否及3年生存率有关（P〈0.05）。两者的阳性表达呈显著正相关（r=0.476,P〈0.001）。结论细胞周期蛋白B1与存活素蛋白在肝癌细胞中,均随肝癌分化程度的降低表达增强,且两者的表达呈正相关。     

Cyclin D1和Cyclin B1在鼻咽癌中表达的免疫组织化学研究

目的为探讨Cyclin D1和CyclinB1在鼻咽癌中的表达、相关性及临床意义.方法用免疫组化SP法分别检测Cyclin D1和Cyclin B1在58例鼻咽癌组织标本中的表达.结果Cyclin D1和Cyclin B1在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为58.6%(34/58)和60.3%(35/58);Cyclin D1和Cyclin B1 阳性和阴性病例的平均生存期、五年生存率和中位生存期存在显著性差异(P＜0.05);鼻咽癌组织中Cyclin D1和Cyclin B1的表达一致率为60.3%(35/58),无显著相关.结论Cyclin D1和Cyclin B1表达均可以反映鼻咽癌的生存情况,在鼻咽癌预后预测中有重要意义.     

紫星溶液对小鼠Lewis肺癌体内增殖的抑制作用

目的：评价紫星溶液（紫草萘醌色素提取物）对实验肿瘤体内生长的作用。方法：建立可移植性小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌皮下接种动物模型，以荷瘤小鼠生存时间、瘤块质量和肺部转移性病变为观察指标。结果：按每１ｋｇ体重灌胃给药０．６～１５ｍｇ／ｄ，紫星溶液可延长荷瘤鼠生存时间并抑制接种肿瘤的原位增长；皮下注射给药有效剂量为０．１２～３．０ｍｇ／ｄ；印度墨汁染色显示转移性肺病变较对照组明显轻微。结论：紫星溶液可抑制Ｌｅｗｉｓ肺癌的体内增殖     

Effects of Cyclin D1 Antisense Oligodeoxyneucleotides on the Growth and Expression of G_1 Phase Regulators in Gastric Carcinoma Cells

CyclinDisinvolvedintheregulationofG1phrasecellcycle ,andithasthreesubtypes (D1,D2 ,D3) .CyclinD1islocatedin 11q13,withitscDNAbeing 4 .3kb .Itisidentifiedastheproto oncogengandisfoundtobeoverexpressedinbreast,esophageal,andhepaticcarcinoma .ItwasreportedthatthepositiverateforCyclinD1ingastriccarcino mawas 2 3.7% - 47% [1,2 ] .CyclinD1mRNAoverexpressionwasfoundin 2 2 %ofgastriccancertissues,andwascorrelatedwithinvasionoftu mors[3] .WetransfectedgastriccarcinomacellswithCyclinD1antisenseo…     

麦门冬汤合苇茎汤抑制小鼠Lewis肺癌生长的体内实验研究

目的?研究麦门冬汤合苇茎汤（简称金方/JIN）对Lewis肺癌小鼠移植瘤的抑制作用并初步探讨药物作用机制。方法?皮下注射LLC（Lewis lung carcinoma,Lewis肺癌细胞）于C57/BL6小鼠右腋下,观察小鼠生存期、抑瘤率、胸腺指数和肿瘤组织EGFR/Raf/MEK的表达。结果?金方可以显著延长小鼠的生存时间,与对照组相比有显著性差异（P<0.01）,金方、DDP组对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为35%、89%,金方组胸腺指数明显升高,DDP组胸腺指数明显下降,金方、DDP组的EGFR表达均下降(P<0.05,P<0.01),而各组Raf和MEK表达无显著性差异。结论?金方可以显著延长荷瘤小鼠的生存期,有一定的抑制肿瘤增长和增强免疫能力的作用,其机制可能与其下调肿瘤组织中EGFR的表达进而影响其下游信号通路的传导相关。      

川陈皮素对肺癌的增殖抑制作用及其机制

目的 观察川陈皮素对肺癌的体内外抑瘤作用并初步探讨其机制.方法 应用MTT法检测不同浓度川陈皮素作用对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用.Western blot检测川陈皮素处理后A549细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达情况.彗星电泳检测川陈皮素作用后A549细胞DNA损伤情况.通过C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型进行体内抗瘤实验,TUNEL法观察药物作用后的肿瘤细胞凋亡情况,并用免疫组化法检测瘤组织中Bax、Bcl-2和Caspase-9蛋白表达情况.结果 体外实验显示,川陈皮素作用对A549细胞有明显的增殖抑制作用,并且抑制效应随浓度增加而增强;川陈皮素作用A549细胞24 h后,随着作用剂量的加大,Bcl-2蛋白表达下调,而Bax蛋白则表达上调;对细胞DNA具有损伤作用,当达到一定作用剂量和作用时间时可以使A549细胞发生凋亡.体内抑瘤实验表明,川陈皮素高(300 mg/kg)、中(200 mg/kg)、低(100 mg/kg)浓度组对小鼠Lewis肺癌的抑瘤率分别为43.70%、27.59%和20.14%,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);川陈皮素能使Lewis肺癌细胞发生凋亡;使Lewis肺癌组织内Bax和Caspase-9表达上调,Bcl-2表达下调.结论 川陈皮素在体内外均有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用,其作用机制可能与改变Bcl-2/Bax的比值,启动Caspase级联反应相关.