HPLC法同时测定保健食品中6种大豆异黄酮类成分的含量

目的:建立同时测定大豆类保健食品中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素6种成分含量的高效液相色谱法。方法:色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5 μm),采用流动相乙腈-0.2%甲酸进行梯度洗脱,流速为1 mL·min~(-1),检测波长为255 nm。结果:大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素的线性范围分别为0.42～3.15,0.20～2.25,0.41～3.06,0.15～1.14,0.051～0.38,0.21～1.55 μg;加样回收率(n=5)分别为95.86%,96.87%,96.85%,96.63%,96.48%,96.67%。结论:本方法简便、灵敏、准确,可用于含大豆异黄酮类保健食品中以上6种成分的含量测定和产品质量控制。     

超高效液相色谱法测定大豆异黄酮胶囊中异黄酮的含量

目的建立同时测定大豆异黄酮胶囊中6种异黄酮含量的超高效液相色谱法(HPLC)。方法采用AcquityUPLCTMBEHC18柱(1.7μm,2.1mm×50mm),流动相为甲醇-0.05mol/L乙酸胺(pH4.6),梯度洗脱,检测波长为260nm,流速为0.4ml/min,柱温为40℃,外标法测定。结果大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素分别在0.02600～0.2600mg/ml、0.02625～0.2625mg/ml、0.02675～0.2675mg/ml、0.012650～0.12650mg/ml、0.012525～0.12525mg/ml、0.012750～0.12750mg/ml范围内线性关系良好(r≥0.9930),加样回收率(6例)分别为:98.5%、98.8%、98.2%、97.7%、98.0%、97.3%。结论本法快速、简便、准确、灵敏度高、成本低,适用于大豆异黄酮胶囊中异黄酮的含量测定及质量控制。     

黑豆、半成品和成品淡豆豉中6种异黄酮含量变化比较

目的 比较发酵前的黑豆及半成品和成品淡豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素6种异黄酮的含量变化。方法 采用高效液相色谱法测定异黄酮的含量,色谱条件为DiamonsilC₁₈色谱柱(4.6×250 mm,5μm),柱温30℃,检测波长为260 nm,流动相为0.2%醋酸水(A)-甲醇(B),梯度洗脱,流速为1.0 ml/min。结果 该方法测定6种异黄酮成分在测定范围内线性良好(r≥0.999 3),且回收率符合要求,黑豆经发酵后其中的6种异黄酮含量明显提升,且成品淡豆豉比半成品淡豆豉中含量更多。结论 本研究建立的高效液相色谱法能够准确测定淡豆豉中6种异黄酮的含量。发酵可提升黑豆中的异黄酮的含量,且在发酵过程中结合型异黄酮向游离型异黄酮苷元转化。     

高效液相色谱法同时测定葛根提取物中5种异黄酮的含量

目的:建立葛根提取物中5种异黄酮含量测定的HPLC方法。方法:采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.02 mol·L-1醋酸铵(醋酸调pH=4.6)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为260 nm,柱温为35℃。结果:葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素分别在0.204～510.4μg·mL-1(r=0.999 9),0.201～503.0μg·mL-1(r=0.999 9),0.233～581.8μg·mL-1(r=0.999 9),0.201～502.4μg·mL-1(r=0.999 9),0.195～487.6μg·mL-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好。平均回收率(n=6)分别为101.52%(RSD=0.69%),102.66%(RSD=0.30%),98.90%(RSD=0.26%),98.64%(RSD=0.29%),100.16%(RSD=0.20%)。结论:本方法快速、简便、精密度和重现性好、灵敏度高,可作为葛根提取物的含量控制方法。     

高效液相色谱法测定大豆提取物中异黄酮的含量

目的:HPLC测定大豆中异黄酮的含量。方法:采用Hypersil BDS C18柱分离测定;以乙腈-0.9%磷酸(1∶1 000)为流动相进行梯度洗脱;检测波长260nm;流速0.6mL.min-1。结果:大豆苷元、染料木素分别在3.78~18.9,4.28~21.4,4.68~23.4mg.L-1范围内呈良好的线性关系,r=0.999 8,r=0.999 9,r=0.999 9,r=0.999 8。平均回收率分别为98.2%,98.6%,99.7%,99.4%;RSD分别为1.1%,1.6%,1.7%,0.9%。结论:方法简便、准确、重复性好。     

梯度洗脱高效液相色谱法同时测定大豆异黄酮中大豆苷和黄豆黄苷的含量

目的建立大豆异黄酮中大豆苷和黄豆黄苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈、水混合体系为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长为260 nm。结果大豆苷在49.3～147.9 mg/L浓度范围内、黄豆黄苷在40.1～120.3 mg/L浓度范围内,与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 7和0.999 4。方法平均回收率分别为98.7%(RSD=0.38%)和98.9%(RSD=0.60%)。结论该方法简便、准确,重现性好,可作为大豆异黄酮质量控制方法之一。     

HPLC-DAD法同时测定血脂康胶囊中8个成分的含量

目的:建立同时测定血脂康胶囊中5个异黄酮类成分(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素)和3个他汀类成分(洛伐他汀羟基酸、美伐他汀和洛伐他汀)含量的方法。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法。色谱柱为Shimadzu Hypersil Gold C_(18);流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为256 nm(大豆苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素)、237 nm(洛伐他汀羟基酸、美伐他汀和洛伐他汀);柱温为30℃;进样量为10μL。结果:大豆苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素、洛伐他汀羟基酸、美伐他汀和洛伐他汀检测质量浓度的线性范围分别为5.01～250.20、3.02～150.91、2.27～113.33、3.01～150.58、3.61～180.43、4.03～201.19、3.32～166.32、5.02～250.82μg/mL(r=0.999 3～0.999 9);检测限分别为0.25、0.13、0.45、0.12、0.21、0.24、0.12、0.15μg/mL;定量限分别为0.84、0.36、1.29、0.41、0.65、0.78、0.33、0.50μg/mL;精密度、稳定性(48 h)、重复性试验的RSD均<3.0%(n=6);平均回收率分别为97.04%、98.49%、99.60%、96.14%、101.88%、96.20%、101.19%、98.46%,RSD为1.76%～4.79%(n=6)。结论:建立的方法操作简便、灵敏度高、结果准确,可用于血脂康胶囊中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素、洛伐他汀羟基酸、美伐他汀和洛伐他汀含量的同时测定。     

培根胶囊的质量标准研究

目的:建立培根胶囊质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对大豆异黄酮和淫羊藿进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定淫羊藿苷、大豆苷、大豆黄苷、染料木苷的含量。结果:TLC斑点清晰、分离度好,阴性无干扰;淫羊藿苷、大豆苷、大豆黄苷、染料木苷进样量分别在0.04～0.80(r=0.9998)、0.03～0.60(r=0.9998)、0.0076～0.1520(r=0.9996)、0.01～0.20(r=0.9997)μg范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系;淫羊藿苷、大豆苷、大豆黄苷、染料木苷的平均回收率分别为99.22%、97.61%、98.25%、98.46%,RSD分别为0.21%、1.64%、1.00%、1.32%(n均为9)。结论:所建标准可用于培根胶囊的质量控制。     

HPLC法同时测定不同产地蔓性千斤拔中5个异黄酮成分的含量北大核心CSCD

目的:建立同时测定不同产地蔓性千斤拔药材中染料木素-4′,7-二-O-葡萄糖苷、大豆苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-6-C-葡萄糖苷、5,4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷、染料木苷5个异黄酮类化合物含量的高效液相色谱法。方法:采用Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长258 nm,柱温30℃。结果:染料木素4′,7-二-O-葡萄糖苷、大豆苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-6-C-葡萄糖苷、5,4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷和染料木苷进样量分别在0.033~0.656μg(r=0.999 7)、0.010~0.204μg(r=0.999 5)、0.034~0.687μg(r=0.999 9)、0.012~0.244μg(r=0.999 7)和0.086~1.725μg(r=0.999 9)范围内与峰面积呈现良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为98.11%、94.27%、93.17%、93.13%和98.97%,RSD分别为1.0%、1.6%、1.4%、1.4%和1.8%。测得染料木素4′,7-二-O-葡萄糖苷、大豆苷元-7-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素-6-C-葡萄糖苷、5,4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷和染料木苷的样品含量分别为0.112~0.192、0.047~0.072、0.110~0.170、0.074~0.115和0.437~0.703 mg·g^(-1)。结论:经方法学验证,本法可用于蔓性千斤拔药材的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定豆粕提取液中4种成分的含量

目的:高效液相色谱(HPLC)法同时测定豆粕提取液中大豆苷、染料木苷、大豆黄素、染料木素的含量.方法:高效液相色谱条件:预柱:Fusion-RP(4 mm×30 mm);分析柱:Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇(含1%醋酸的水溶液);流速:1 mL·min-1;柱温:25℃.首先用30%甲醇洗脱15 min,然后5 min内用30%甲醇梯度洗脱到48%甲醇,最后用48%甲醇洗脱维持20 min.结果:得到大豆苷、染料木苷、大豆黄素、染料木素4种成分峰面积和进样量的线性方程,测定大豆苷、染料木苷、大豆黄素、染料木素的日内精密度分别为0.52%,0.61%,0.35%,0.47%;日间精密度分别为1.52%,1.82%,1.05%,1.20%;回收率分别为98.7%,98.9%,99.1%,99.6%.结论:该方法用来测定豆粕提取液中大豆异黄酮的含量准确、简便、可靠.     

HPLC法快速测定葛花提取物中4种异黄酮类化合物的含量

目的：建立同时测定葛花中大豆苷、鸢尾苷、大豆苷元和鸢尾苷元4种异黄酮含量的快速分析方法。方法：采用Agilent C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-乙腈-水（2∶1∶2）为流动相,流速为1.0 ml·min-1;检测波长为264 nm,柱温为25℃,进样量为20μl。结果：4种异黄酮的保留时间分别3.4,3.8,5.7,7.2 min,一次分析可在10 min内完成。其线性范围分别为0.784~78.440μg·ml-1（大豆苷）、2.000~200.000μg·ml-1（鸢尾苷）、0.800~80.020μg·ml-1（大豆苷元和鸢尾苷元）;r分别为0.999 9,0.999 8,0.999 7,0.999 9,平均回收率分别为100.54%（RSD=1.66%,n=6）、100.03%（RSD=1.00%,n=6）、99.48%（RSD=1.76%,n=6）和100.92%（RSD=2.26%,n=6）。结论：本方法简便易行,快速准确,重复性好,可以为葛花异黄酮的研发提供方便快捷的检测方法。     

HPLC法同时测定升麻葛根汤中四种有效成分的含量

目的：建立HPLC法同时测定升麻葛根汤中4种有效成分的含量.方法：采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相：甲醇-乙腈-[1.6%冰醋酸的0.1 mol·L-1醋酸铵溶液]（12：7：81）,流速：1.0 ml·min-1,检测波长：320mm.结果：咖啡酸的线性范围为0.2～4 mg·L-1（r=0.999 6）,平均回收率为104.0%,RSD为0.59% 葛根素的线性范围为10～200 mg·L-1（r=0.999 5）,平均回收率为99.8%,RSD为0.63% 阿魏酸的线性范围为1～20 mg·L-1（r=0.999 5）,平均回收率为102.8%,RSD为0.96% 异阿魏酸的线性范围为2～40 mg·L-1（r=0.999 6）,平均回收率为98.O%,RSD为1.37%（n=9）.结论：方法简便、快捷、重复性好,可用于该汤剂的质量控制.     

HPLC法同时测定苋菜黄连素胶囊中甘草酸和盐酸小檗碱的含量

目的：采用同时测定苋菜黄连素胶囊中甘草酸和盐酸小檗碱的含量。方法：色谱柱用CAPCELLPAKC18（4．6mm×250mm,5μm）;以0．025mol·L-1磷酸二氢钾溶液-0．0025mol·L-1庚烷磺酸钠水溶液一乙腈（30：30：40）为流动相,流量1．0mL·min-1;检测波长250nm。结果：甘草酸在0．00128-0．0128mg·mL-1浓度范围内与峰面积成良好的线性关系（r=0．9994）,平均回收率为99．1％,RSD为0．81％;盐酸小檗碱在0．008-0．080mg·mL-1浓度范围内与峰面积成良好的线性关系（r=0．999998）,平均回收率为97．5％,RSD为1．08％。结论：方法简便、专属性强,可用于苋菜黄连素胶囊的质量控制。     

野葛、粉葛与云南葛中葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素的含量比较

目的：比较野葛、粉葛与云南葛中葛根素、大豆苷、大豆苷元和染料木素的含量。方法：样品以30%乙醇回流提取后采用高效液相色谱法测定含量。色谱柱为Uvis-201（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（梯度洗脱）,流速为1.0mL·min-1,检测波长为250nm,柱温为室温。结果：葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素的进样量分别在0.68～5.44μg（r=0.9992）、0.143～1.144μg（r=0.9993）、0.0245～0.1960μg（r=0.9992）、0.088～0.704μg（r=0.9994）范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;平均加样回收率分别为98.1%、99.5%、101.1%、99.2%,RSD分别为2.17%、2.42%、2.53%、2.65%（n均为6）。葛根素含量高低排序为河南野葛〉云南葛〉山西野葛〉大别山野葛〉广西粉葛;大豆苷含量为云南葛〉河南野葛〉大别山野葛〉山西野葛〉广西粉葛;大豆苷元含量为河南野葛〉云南葛〉山西野葛〉大别山野葛〉广西粉葛;染料木素含量为河南野葛〉云南葛〉山西野葛〉大别山野葛〉广西粉葛。结论：野葛、粉葛与云南葛中葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素含量差别较大,且云南葛为野葛的伪品之一,三者不能同等应用。     

复方托吡卡胺滴眼液含量测定方法的改进

目的:建立同时测定复方托吡卡胺滴眼液中两组分含量的方法.方法:C18柱,以甲醇-0.03 mol·L-1辛烷磺酸钠溶液(1∶1)为流动相(用磷酸调节pH为3.0),检测波长263nm;柱温30℃;流速1.0 mL·min-1.结果:盐酸去氧肾上腺素在0.054 0～0.504 0 mg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9);托吡卡胺在0.05021 ～0.502 1 mg· mL-1范围内呈良好的线性关系(r =0.999 8).盐酸去氧肾上腺素的平均回收率为99.58％,RSD值为1.6％(n=9);托吡卡胺的平均回收率为100.5％,RSD值为1.1％(n=9).结论:方法简便,分离度符合要求,结果准确可靠,可以用于复方托吡卡胺滴眼液的含量测定.     

固相萃取-高效毛细管电泳法检测牛奶中磺胺类药物残留

目的:采用固相萃取-毛细管电泳法（SPE-HPCE）同时检测牛奶中磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶等的含量。方法:以60 mmol·L^-1硼砂盐缓冲液（pH 7.32）为电泳介质,运行电压15 kV,压力法进样5 s;柱温15℃;检测波长254 nm。结果:该方法能使5种药物在16 min内得到完全分离,磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶分别在13.1～104.8 mg·L^-1（r=0.999 4）,12.8～102.0 mg·L^-1（r=0.999 4）,14.4～1 15.6 mg·L^-1（r=0.999 8）,12.7～101.8 mg·L^-1（r=0.999 5）,和13.7～109.6 mg·L^-1（r=0.999 6）的范围内线性关系艮好,平均加样回收率分别为100.8%（RSD=1.5%）,101.0%（RSD=1.2%）,102.4%（RSD=1.3%）,100.9%（RSD=1.9%）,104.1%（RSD=0.9%）。结论:本方法简单、可靠,灵敏度高,适用于牛奶中磺胺类药物残留的检测。     

复方茶碱麻黄碱片HPLC测定方法的建立

目的：采用高效液相色谱法测定复方茶碱麻黄碱片各成分含量。方法：KromasilC18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱；流动相为0．05mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-甲醇-三乙胺（77：23：0．2）；检测波长为215nm；柱温为45℃；流速为0．8mL·min^-1。结果：可可碱在15．5～36、1mg·L^-1浓度范围内呈良好的线性关系，回归方程Y=112719X＋51638（r=0．99996）；茶碱在15．1～35．1mg·L^-1浓度范围内呈良好的线性关系，回归方程Y=106984x＋29631（r=0．9999）；盐酸麻黄碱在4．97～15．9mg·L^-1浓度范围内呈良好的线性关系，回归方程Y=31478X＋13426（r=0．9998）；咖啡因在5．01～25．0mg·L^-1浓度范围内呈良好的线性关系，回归方程Y=1271846X-8936（r=0．9998）。平均回收率分别为可可碱100．49％、茶碱100．42％、盐酸麻黄碱99．38％、咖啡因99．66％，RSD分别为1．1％、0．7％、0．9％和0．3％。结论：本方法简便、快速、灵敏、准确，可为今后修订该制剂的质量标准提供参考。     

HPLC法同时测定依普罗沙坦/氢氯噻嗪片的两组分含量

目的：建立 HPLC 法测定复方依普罗沙坦/氢氯噻嗪片含量的方法。方法：采用菲罗门 C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以0.5%甲酸水溶液-乙腈（60∶40, pH 2.80）为流动相,流速1.0 ml·;min-1,检测波长272 nm,柱温30℃,进样量20μl。结果：依普罗沙坦质量浓度在60.0~1200.0 mg·;L-1范围内（r=0.9999）,氢氯噻嗪质量浓度在1.25~25.00 mg·; L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率分别为100.02%（RSD=0.35%,n=9）、97.93%（RSD=1.54%, n=9）。结论：本方法简便、快速、准确,重复性好,可用于复方依普罗沙坦/氢氯噻嗪片中两组分的含量测定。     

HPLC法测定滴强灵胶囊中3组分的含量

目的:建立滴强灵胶囊中3组分的HPLC测定方法。方法:以COSMOSIL C₁₈（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,以醋酸铵溶液[0.25 mol·L^-1醋酸铵溶液-0.05 mol·L^-1EDTA-2Na溶液-三乙胺（100:10:1）,用醋酸调pH至7.5]-乙腈（88:12）为流动相测定甲硝唑和土霉素的含量,流速1 ml·min^-1,检测波长280 nn,柱温30℃;以甲醇-水（60:40）为流动相测定醋酸泼尼松的含量,流速1 ml·min^-1,检测波长240 nm,柱温30℃。结果:建立的HPLC法能排除辅料对主药中3组分的干扰,甲硝唑、土霉素、醋酸泼尼松的含量测定的线性范围分别为0.04～0.80 mg·ml^-1（r=0.999 9）,0.02～0.40 mg·ml^-1（r=0.999 9）和0.02～0.40 mg·ml^-1（r=0.999 9）;平均回收率分别为99.94%（RSD=0.07%）、99.85%（RSD=0.09%）、98.16（RSD=1.58%）（n=6）。结论:本法操作简便可靠,可用于滴强灵胶囊的质量控制。     

New 6-O-acyl isoflavone glycosides from soybeans fermented with Bacillus subtilis (natto). I. 6-O-succinylated isoflavone glycosides and their preventive effects on bone loss in ovariectomized rats fed a calcium-deficient diet

Three new 6-O-acylated isoflavone glycosides were isolated from soybeans fermented with Bacillus subtilis (natto) and identified as daidzein 7-O-beta-(6'-O-succinyl)-D-glucoside (1), genistein 7-O-beta-(6'-O-succinyl)-D-glucoside (2), and glycitein 7-O-beta-(6'-O-succinyl)-D-glucoside (3) on the basis of spectral data and chemical transformations. During fermentation, the content of the isoflavone glycosides first decreased and then increased, whereas the corresponding 6'-O-succinyl derivatives first accumulated and then decreased, in either soybeans or soybean cooking solution. These changes suggest that enzymatic interconversion of isoflavone glycosides and the corresponding 6'-O-succinylated derivatives occurs in these media during fermentation. The 6-O-succinylated isoflavone glycosides 1, 2 and 3 accounted for 4.8, 7.2 and 0.6%, respectively, of the total isoflavones in commercial fermented soybeans (Japanese natto). Oral administration of 1 or 2 alone for 4 weeks at a dose of 50 mg/kg/d prevented bone loss in ovariectomized (ovx) rats fed a calcium-deficient diet, being as effective as the positive controls, daidzin and genistin, respectively. Compound 1 seems to be proestrogenic, like daidzin, which suppresses bone resorption to prevent bone loss after ovariectomy by directly acting on bone sites, while 2 appears to have a different mechanism of action, like that of genistin.