Toll样受体4与大鼠肺泡巨噬细胞内毒素耐受性的实验研究

目的　观察大鼠肺泡巨噬细胞对内毒素 (LPS)重复刺激的耐受性与其Toll样受体 4(TLR4)表达的变化 ,研究两者之间的联系。方法　将 30只Wistar雄性大鼠分离所得肺泡巨噬细胞 ,用随机数字表法分为正常对照组 (A组 ) ,LPS单次刺激组 (B组 )和LPS 2次重复刺激组 (C组 )。用酶联免疫吸附测定 (ELISA)法和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法分别检测各组大鼠肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF α)及TLR4、白细胞介素 1 0 (IL 1 0 )、IL 1 8mRNA表达的变化 ,WesternBlot检测TLR4蛋白表达的变化。结果　大鼠肺泡巨噬细胞TNF α分泌和TLR4、IL 1 0、IL 1 8mRNA表达及TLR4的蛋白表达水平 ,A组分别为 (0 4 5 0± 0 0 1 0 ) μg/L、1 1 6± 0 0 4、0 97± 0 0 3、1 32 0± 0 0 2 0、5 8 1± 0 4 ;B组分别为 (0 76 0± 0 0 30 ) μg/L、2 1 8± 0 0 9、1 83± 0 0 7、2 0 6 0± 0 0 6 0、1 4 8.3± 1 4 ;B组与A组比较差异有显著性 (P <0 0 1 ) ;C组分别为 (0 4 90± 0 0 5 0 ) μg/L、1 2 3± 0 0 3、1 1 5± 0 0 5、1 1 70± 0 0 4 0、96 5±0 7;C组与B组比较差异也有显著性 (P <0 0 5或 <0 0 1 )。结论　LPS重复刺激可使大鼠肺泡巨噬细胞对LPS产生耐受性 ;LPS耐受性的产生与TLR4表达     

反义内皮素转换酶核酸对尘螨过敏哮喘患者外周血单个核细胞释放白细胞介素5的抑制作用

目的　探讨转导反义内皮素转换酶 (ECE)核酸的气道上皮细胞对尘螨过敏性患者外周血单个核细胞释放Th1/Th2相关细胞因子的影响。方法　尘螨过敏患者 2 1例 ,分离其外周血单个核细胞 (PBMC) ,根据实验要求分为 :未刺激组 (A组 )、反义ECE上皮细胞 +PBMCs组 (A1组 )、对照组上皮细胞 +PBMCs组 (A2 组 )及螨刺激组 (B组 )、反义ECE上皮细胞 +PBMCs+尘螨提取液组 (B1组 )、对照组上皮细胞 +PBMCs+尘螨提取液组 (B2 组 ) ,共培养 72h ,螨刺激组同时加入尘螨提取液 2 0 μg/ml。培养上清用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测白细胞介素 5 (IL 5 )、γ干扰素 (IFN γ)。结果2 1例患者中有 12例患者经尘螨刺激后IL 5释放明显增加。将 12例患者进行统计学分析发现 ,未经尘螨刺激时 ,A1组IL 5和IFN γ水平分别为 [(6 0± 1 3)× 10 -9g/L]和 [(6 3± 2 6 )× 10 -9g/L],A2 组为 [(7 5± 1 1)× 10 -9g/L]、[(70± 5 2 )× 10 -9g/L],两组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;尘螨刺激后 ,B1组的IL 5水平和IFN γ分别为 [(8 2± 1 6 )× 10 -9g/L]、[(10 0± 4 1)× 10 -9g/L],B2 组分别为[(12 0± 1 8)× 10 -9g/L]、[(15 3± 71)× 10 -9g/L],两组IL 5比较差异有显著性 (P =0 0 4 7) ,而IFN γ水平比较差异无显著性 (P >     

白细胞介素12重组腺病毒气道内应用对哮喘豚鼠治疗作用的研究

目的　探讨激发前气道内应用白细胞介素 12 (IL 12 )重组腺病毒对过敏性气道高反应的调节作用。方法　以C5 7BL/ 6小鼠经鸡卵蛋白 (OVA)免疫建立哮喘模型 ,实验分 6组 ,每组 6只。激发前气管内单次使用IL 12重组腺病毒 (10 8pfu/mouse) ,观察抗原激发后反应的变化。结果　 (1)小鼠气道内应用IL 12重组腺病毒在肺内可有效表达 ,48h血浆及肺泡灌洗液IL 12分别为 (5 40± 6 0 )U/ml和 (470 0± 80 0 )U/ml,对照病毒和PBS组未检出 ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。 (2 )在抗原激发阶段使用IL 12重组腺病毒 ,可明显抑制肺内IL 4[(3 5± 2 0 )ng/ml∶85 0± 2 5 0 )ng/ml]和IL 5[(6 5± 4 5 )ng/ml∶(5 4 0± 14 0 )ng/ml];γ干扰素 (IFN γ)的产生增加 [(6 90 0± 32 0 )ng/ml∶(12 5±3 2 )ng/ml];并明显抑制气道高反应性 [(36 0± 30 )cmH2 O∶(810± 5 0 )cmH2 O];抑制外周血 [(0 7±0 1) %∶(9 2± 0 5 ) % ]及肺泡灌洗液 [(3 5± 0 7)∶(2 1 6± 4 7)× 10 4 /ml]中的嗜酸细胞的水平 ;与对照组比较 (t分别 =7 97、7 92、5 1 6、18 9、9 33、47 1,P均 <0 0 1) ;但与总IgE[(6 5± 9) μg/ml∶(6 7± 10 )μg/ml]及抗原特异性IgE[(32± 8)∶(33± 8)U/ml]比较无明显影响 (P均 >0 0 5 )。     

急性呼吸窘迫综合征患者血浆白细胞介素4等含量变化的研究

目的　观察急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)患者血浆白细胞介素 4(IL 4)、IL 10和IL 13含量的变化 ,探讨在ARDS发病机制中抗炎机制变化的意义。方法　采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法 ,检测 2 2例ARDS患者 (ARDS组 )、8例全身炎症反应综合征 (SIRS)患者 (SIRS组 )和 10名健康志愿者 (正常对照组 )的动脉血血浆IL 4、IL 10和IL 13的含量。结果　ARDS组患者的血浆IL 4、IL 10和IL 13含量分别为 (2 61± 5 5 ) μg/L、(45 8± 112 ) μg/L、(5 2 1± 2 0 2 ) μg/L ,SIRS组分别为 (15 5± 2 6)μg/L、(2 60± 5 4) μg/L、(1 69± 0 3 9) μg/L ,正常对照组分别为 (43± 13 ) μg/L、(13 5± 15 ) μg/L、(0 3 3±0 10 ) μg/L ,三组间比较差异具有非常显著性 (P均 <0 0 1) ;SIRS组与正常对照组比较 ,差异也有显著性 (P <0 0 1)。结论　抗炎性细胞因子IL 4、IL 10和IL 13的释放异常 ,可能是ARDS和SIRS的重要发病机制之一。     

血脂异常对血清细胞黏附分子水平的影响

目的 :探讨血脂异常对血清细胞间黏附分子 1(ICAM 1)、血管细胞黏附分子 1(VCAM 1)和E 选择素水平的影响。方法 :入选 12 0例研究对象 ,其中高胆固醇血症 (Ⅰ组 ) 31例 ;高三酰甘油血症 (Ⅱ组 ) 30例 ;混合性高脂血症 (Ⅲ组 ) 2 9例 ;血脂正常 (Ⅳ组 ) 30例。用酶联免疫吸附法检测血清ICAM 1、VCAM 1和E 选择素水平 ,比较上述 3个指标在各组间的差异。结果 :总胆固醇水平 ,Ⅰ组 [(6 .5 5± 0 .6 7)mmol/L]和Ⅲ组 [(6 .2 7±0 .6 7)mmol/L]显著高于Ⅳ组 [(4.38± 0 .4 9)mmol/L],P <0 .0 1;三酰甘油水平 ,Ⅱ组 [(3.39± 0 .6 0 )mmol/L]和Ⅲ组 [(3.4 4± 0 .6 2 )mmol/L]显著高于Ⅳ组 [(1.39± 0 .4 0 )mmol/L],P <0 .0 1。同时 ,血清ICAM 1水平在Ⅰ组 [(76 4± 71) μg/L]、Ⅱ组 [(74 9± 71) μg/L]和Ⅲ组 [(82 3± 80 ) μg/L]明显高于Ⅳ组 [(6 0 4± 6 7) μg/L],P <0 .0 1;血清VCAM 1水平在Ⅰ组 [(1837± 16 4 ) μg/L]、Ⅱ组 [(1836± 16 0 ) μg/L]和Ⅲ组 [(196 3± 181) μg/L]明显高于Ⅳ组 [(130 7± 14 9) μg/L],P <0 .0 1;血清E 选择素水平在Ⅰ组 [(6 6± 12 ) μg/L]、Ⅱ组 [(70± 14 ) μg/L]和Ⅲ组 [(81± 17) μg/L]明显高于Ⅳ组 [(39± 11) μg/L],P <0 .0 1。结论 :血脂异常可使血清I     

内源性硫化氢在慢性阻塞性肺疾病患者中的变化及意义

目的研究内源性硫化氢(H2S)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用。方法COPD急性加重组(AECOPD组)27例、稳定期COPD组37例和健康对照组13名,在入选时测定血清H2S和一氧化氮(NO)水平、肺功能、诱导痰细胞分类计数,对AECOPD患者行超声心动图和血气分析。结果(1)血清H2S水平稳定期COPD组[(50·8±2·5)μmol/L]比健康对照组[(39·8±1·6)μmol/L]、AECOPD组[(33·5±2·2)μmol/L]均显著增加(P均<0·01)。(2)AECOPD组吸烟者血清H2S[(28·1±1·3)μmol/L]比非吸烟者[(39·4±3·9)μmol/L,P<0·05]和健康非吸烟者显著降低[(39·8±1·6)μmol/L,P<0·01]。(3)稳定期COPD组不同程度气流阻塞患者血清H2S水平呈线性下降趋势(P<0·05),COPD全球创议(GOLD)Ⅲ期[(45·1±4·1)μmol/L]较Ⅰ期患者[(70·2±6·2)μmol/L]血清H2S水平显著下降(P<0·05)。(4)AECOPD组伴有肺动脉高压患者血清H2S水平显著降低[(26·3±2·2)、(36·2±2·5)μmol/L,P<0·05]。(5)血清H2S与NO、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%)、诱导痰淋巴细胞计数、诱导痰巨噬细胞计数均呈正相关(r=0·278~0·533,P均<0·05或0·01),与肺动脉收缩压(PASP)、诱导痰中性粒细胞计数均呈负相关(r=-0·561、-0·422,P=0·011、0·001)。结论内源性H2S可能参与COPD气流阻塞的发病,作为一种无创指标监测疾病严重程度和活动度具有一定意义。     

慢性阻塞性肺疾病患者气道尿激酶型纤溶酶原激活物系统成分的高水平状态

目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者气道局部尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)系统状态及其病理生理意义。方法(1)诱导痰检测临床稳定期COPD患者(诱导痰COPD组)56例,平均年龄(51±11)岁,第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%)为(53.5%±14.4)%,诱导痰健康对照组26名,平均年龄(46±9)岁,FEV1占预计值%为(85.1±1.0)%;采用酶联免疫吸附法测定诱导痰中u-PA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)和白细胞介素8(IL-8)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)水平;(2)肺组织病理COPD并肺大疱接受手术治疗患者(免疫组化COPD组)11例,平均年龄(53±7)岁,FEV1占预计值%为(58.3±6.6)%;非COPD因肺部局灶病变接受手术治疗患者(非免疫组化COPD对照组)10例(其中炎性假瘤3例、错构瘤5例、结核球2例),平均年龄(47±12)岁,FEV1占预计值%为(84.3±1.6)%。采用免疫组化检测u-PA、u-PAR、PAI-1在肺组织中的细胞表达。结果(1)诱导痰COPD组诱导痰中可溶性u-PAR、PAI-1和IL-8水平分别为(570±614)ng/L、(6162±9247)ng/L、(12370±17292)ng/L,与健康对照组[(97±74)ng/L、(574±731)ng/L、(1868±1905)ng/L]比较差异有统计学意义(t值分别为5.629、4.346、4.486,P均<0.01);(2)相关分析诱导痰COPD组诱导痰中可溶性u-PAR和PAI-1水平分别与IL-8呈正相关(r值分别为0.483、0.770,P均<0.01),可溶性PAI-1水平与患者FEV1占预计值%呈负相关(r=-0.272,P<0.05);(3)免疫组化免疫组化COPD组u-PAR表达[(49±16)%]见于肺泡上皮细胞、巨噬细胞、中性粒细胞以及淋巴细胞,而免疫组化非COPD对照组[(33±18)%]表达着色浅淡,主要见于肺泡上皮细胞,两组阳性表达率比较差异有统计学意义(t=2.213,P<0.05);免疫组化COPD组PAI-1表达[(61±16)%]见于成纤维细胞、巨噬细胞和中性粒细胞,而免疫组化非COPD组[(37±16)%]表达着色浅淡,主要见于成纤维细胞,两组阳性表达率比较差异有统计学意义(t=3.419P<0.05)。结论u-PA系统成分是COPD气道局部重要的炎性介质,其中PAI-1在COPD的组织重塑中可能具有重要作用。     

高血压病患者血清Ⅰ型和Ⅲ型前胶原浓度变化及其临床意义探讨

目的　探讨高血压病 (EH)患者心肌纤维化的无创性检测指标。方法　采用放免法测定 30例正常人和 6 0例EH患者 (伴心肌肥厚者 35例和不伴心肌肥厚者 2 5例 )血清Ⅰ型前胶原 (PCⅠ )和Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )的浓度 ,用M型超声测算左室重量指数 (LVMI) ,用多普勒超声测定二尖瓣口舒张早期和晚期最大血流速度 (VE 和VA)。结果　①EH患者血清PCⅠ和PCⅢ均明显高于正常对照组 [(4 6 6 5± 11 0 1)μg/Lvs (34 31± 5 91) μg/L ,P <0 0 5和 (146 0 0± 2 9 35 ) μg/Lvs (96 2 4± 2 1 18) μg/L ,P <0 0 1]。②EH非左室肥厚组血清PCⅢ浓度明显高于正常对照组 [(12 0 6 2± 16 2 3) μg/Lvs(96 2 4± 2 1 18) μg/L ,P <0 0 1],而血清PCⅠ与正常对照组无差别 [(33 73± 6 83) μg/Lvs (34 31± 5 91) μg/L ,P >0 5 ];EH左室肥厚组血清PCⅢ高于非肥厚组 [(16 4 14±2 2 2 8) μg/Lvs (12 0 6 2± 16 2 3) μg/L ,P <0 0 1]和正常对照组 [(16 4 14± 2 2 2 8) μg/Lvs (96 2 4± 2 1 18) μg/L ,P <0 0 1];血清PCⅠ亦高于非肥厚组 [(5 5 88± 12 86 ) μg/Lvs(33 73± 6 83) μg/L ,P <0 0 1]和正常对照组 [(5 5 88±12 86 ) μg/Lvs (34 31± 5 91) μg/L ,P <0 0 1]。③血清PCⅢ与V     

哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者肺灌洗液Th亚群及B7分子的差异

目的探讨哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)及正常对照者支气管肺泡灌洗液(BALF)中淋巴细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)水平和肺泡巨噬细胞(AM)表达C80(B7-1)、CD86(B7-2)共刺激分子百分率有何不同及其意义.方法分别对16名健康自愿者、16例过敏性哮喘患者和16例COPD患者进行了支气管肺泡灌洗(BAL),获取淋巴细胞和AM,用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELASA)测定了经植物血凝素(PHA)刺激培养的淋巴细胞上清液中IFN-γ和IL-4水平;用生物素-抗生物素复合物(ABC)夹心法测定了经脂多糖(LPS)剌激培养的AM膜表面表达CD80和CD86阳性率,并将正常对照组中已经LPS剌激的和未经LPS刺激的AM膜表面表达CD80与CD86阳性率进行对照.结果在反映Th2的IL-4水平,哮喘组为(331±150)ng/L,与正常对照组(106±42)ng/L及COPD组(49±20)ng/L比较,差异均有显著性(P均<0.01);COPD组IL-4水平与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01);在反映Th1的IFN-γ水平,COPD组(342±122)ng/L与正常对照组(188±67)ng/L及哮喘组(77±32)ng/L比较,差异也均有显著性(P均<0.01);哮喘组IFN-γ水平与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01).AM表达CD86阳性率哮喘组为(22±8)%,与正常对照组(12±6)%及COPD组(11±6)%比较,差异均有显著性(P均<0.01);COPD组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);正常对照组中未经LPS刺激的与已经LPS刺激的AM在表达B7百分率上差异无显著性(P>0.05).三组48例受检者IL-4水平与经LPS刺激的AM表达CD86阳性率呈显著正相关(r=0.61,P<0.05).结论哮喘和COPD患者肺内淋巴细胞在细胞因子分泌谱上存在截然相反的格局,前者存在向Th2而后者存在向Th1极化的调控,其差异可能与抗原提呈细胞提供的共刺激信号不同有关,CD86在哮喘向Th2极化中可能起重要调控作用,这提示哮喘与COPD在肺局部细胞免疫学上无论从抗原提呈方式还是T细胞分泌谱上都是本质不同的两种疾病.     

吸氧对慢性缺氧高二氧化碳大鼠肺血管L-精氨酸转运的影响

目的　探讨慢性缺氧 (O2 )高二氧化碳 (CO2 )对大鼠肺动脉L 精氨酸 (L Arg)转运的影响与吸氧的作用。方法　将 4 0只大鼠以随机区组设计法分成 4组 ,用 0 2mmol/L和 5 0mmol/L [3 H] Arg将肺动脉孵育 ,测定其对 [3 H] L Arg的摄取率、一氧化氮合酶 (NOS)活性与一氧化氮 (NO2 /NO3)含量。每组 1 0只。正常对照组 (A组 )、慢性缺O2 4周后伴高CO2 4周组 (B组 )、慢性缺O2 4周伴高CO24周后吸空气 4周组 (C组 )及慢性缺O2 4周伴高CO2 4周后吸O2 4周组 (D组 )。结果　 (1 )肺动脉平均压 (mPAP)、右心室 (RV)和左心室 +室间隔 (LV +S)重量比值 (RV/LV +S) :B组 (33% )与A组(35 % )比较差异有显著性 (P均 <0 0 1 ) ;D组 (2 4 % )与C组 (2 4 % )比较 ,差异也有显著性 (P均 <0 0 5 )。 (2 )离体孵育的肺动脉摄取低浓度 (0 2mmol/L)和高浓度 (5 0mmol/L) [3 H] L Arg比较 :B组分别为 [(3 0 4± 0 1 6 ) μmol·g-1 min-1 ]、[(8 1 2± 0 1 4 ) μmol·g-1 ·min-1 ],A组分别为 [(4 6 2± 0 5 5 )μmol·g-1 ·min-1 ]、[(1 1 2 4± 1 0 2 ) μmol·g-1 ·min-1 ],A、B两组比较差异有显著性 (P均 <0 0 1 ) ;而D组分别为 [(4 30± 0 1 8) μmol·g-1 ·min-1 ]、[(1 2 31± 0 6 5 ) μmol·g-1 ·m     

慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰和血浆中白三烯B4的变化以及茶碱对其的影响

目的探讨白三烯B4(LTB4)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰和血浆的变化以及茶碱对其的影响.方法这个试验是前瞻性随机对照非盲法研究.40例COPD稳定期患者(C组),随机分为CA组(口服茶碱0.2 g/次,每天2次,1个月)与CB组(不用任何茶碱类药物).15名健康非吸烟者为正常对照组(H组).评定各组基线水平以及C组随访1个月后的临床症状与生活质量评分,测定肺功能指标、诱导痰细胞计数与分类,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)与酶免疫试验(EIA)方法分别测定诱导痰和血浆白细胞介素8(IL-8)与LTB4浓度.结果 (1)C组诱导痰及血浆的LTB4水平分别为(794±305)pg/mg·pro、(5 219±1 185)ng/L,均显著高于H组[(155±64)pg/mg·pro、(2 283±489)ng/L,P均＜0.05].(2)诱导痰的LTB4水平与中性粒细胞、IL-8水平呈显著正相关(r分别为0.453、0.364,P均＜0.05).(3)CA组在茶碱治疗前、后诱导痰LTB4水平分别为(812±592)、(657±459)pg/mg·pro,血浆水平为(5 422±935)、(4 589±1 057)ng/L;CB组试验前、后诱导痰LTB4水平分别为(776±227)、(860±194)pg/mg·pro,血浆水平为(5 074±1 850)、(6 063±2 450)ng/L;这两组治疗前、后比较差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 COPD患者LTB4水平增高,参与气道炎症过程.茶碱的治疗不能显著降低诱导痰与血浆的LTB4水平.     

脂多糖对慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者原代培养的气道上皮细胞Toll样受体4(TLR4)介导的炎症反应及其作用机制。方法华中科技大学同济医学院同济医院胸外科2004年1月至10月因肺部肿瘤而行肺叶切除术的患者24例,体外分离其肺标本并培养气道上皮细胞,根据肺功能检查结果及有无吸烟史分为COPD组、非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组,每组8例。用100μg／L LPS刺激原代培养的气道上皮细胞;采用流式细胞仪(FCM)检测原代培养的气道上皮细胞表面的TLR4,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其TLR4 mRNA表达。结果FCM检测显示,COPD组的气道上皮细胞表面TLR4荧光阳性细胞数[(10．23±0．58)％]与非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组比较差异均有统计学意义[(1．52±0．06)％、(1．78±0．06)％, q=5．61、5．38,P均<0．05];LPS刺激后,非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组气道上皮细胞表面TLR4荧光阳性细胞数显著升高[(10．69±0．74)％、(11．28±0．68)％,q=9．58、8．98,P均< 0．05],荧光强度增强,而COPD组则未见明显升高[(11．89±0．89)％,q=1．95,P>0．05]。LPS刺激前,COPD组气道上皮细胞TLR4 mRNA(吸光度值)水平(0．359±0．032)与非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组比较差异均有统计学意义(0．147±0．008、0．152±0．013,q=5．12、4．99,P均< 0．05);LPS刺激后,非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组TLR4 mRNA水平显著升高(0．425±0．037、0．418±0．035,q=4．58、4．65,P均<0．05),而COPD组无显著变化(0．398±0．028, g=0．86,P>0．05)。结论慢性炎症和LPS刺激导致原代培养的COPD患者气道上皮细胞表面TLR4和TLR4 mRNA水平升高可能是COPD发病的一个关键因素。     

肺泡巨噬细胞在慢性阻塞性肺疾病气道炎症中的作用

目的探讨肺泡巨噬细胞(AM)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用.方法收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和支气管黏膜,用ELISA法测定BALF和AM培养上清液中巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-lα、明胶酶B(MMP-9)及白细胞介素(IL)-8的浓度,用放射免疫法测内皮素(ET)浓度,用免疫组化法测BALF中淋巴细胞功能相关抗原1阳性(LFA-1+)AM数、黏膜内CD+/68细胞数和气道黏膜厚度.结果COPD组AM培养上清液中MIP-1α、MMP-9、ET、IL-8的浓度分别为(1446.9±126.7)μg/L、(16.98±5.15)μg/L、(43.98±5.54)ng/L、(168.10±21.22)μg/L,正常对照组为(1123.5.5±90.6)μg/L、(5.24±0.93)μg/L、(25.99±6.05)ng/L、(124.68±9.96)μg/L;COPD组支气管黏膜内CD+/68细胞数为(1.71±0.48)细胞/Hp,正常对照组为(0.59±0.18)细胞;COPD组支气管黏膜厚度为(1.96±0.96)×100-μm,正常对照组为(0.83±0.43)×10-1μg;两组比较差异均有显著性.BALF中AM数、AM培养上清液中MMP-9及ET的浓度、黏膜内CD+/68细胞数均与1秒钟用力呼气容积(FEV1)占预计值的百分比呈负相关(r=-0.511,P《0.01;r=-0.678,P《0.01;r=-0.871,P《0.01;r=-0.588,P《0.01);BALF中MIP-1α浓度、IFA-1+AM数与AM数呈正相(r=0.572,P《0.01;r=0.625,P《0.01).结论AM在COPD气道炎症和气道重建的发展过程中可能具有重要作用.     

Effect of cholecystokinin on cytokines during endotoxic shock in rats

AIM To study the effect of cholecystokinin-octapeptide(CCK-8)on systemic hypotension and cytokine productionin lipopolysaccharide(LPS)-induced endotoxic shock(ES)rats.METHODS The changes of blood pressure were observedusing physiological record instrument in four groups ofrats:LPS(8mg·kg~(-1),iv)induced ES;CCK-8(40μg·kg~1,iv)pretreatment 10min before LPS(8mg.kg~(-1));CCK-8(40μg·kg~(-1),iv)or normal saline(control)groups.Differences in tissue and circulating specificity of theproinflammatory cytokines(TNF-α,IL-1β and IL-6)wereassayed with ELISA kits.RESULTS CCK-8 reversed LPS-induced decrease of meanartery blood pressure(MABP)in rats.Compared withcontrol,LPS elevated the serum level of IL-6 significantly(3567±687ng·L~(-1) vs 128±22ng·L~1,P<0.01),whilecontents of TNF-α and IL-1β elevated significantly(277±86ng.L~1 vs not detectable and 43±9ng·L~1 vs notdetectable,P<0.01)but less extent than IL-6.CCK-8significantly inhibited the LPS-induced increase in serumTNF-α,IL-1β and IL-6.LPS elevated spleen and lungcontent of IL-1β significantly(5184±85ng·L~1 vs 1047±21ng·L~1 and 4050±614ng·L~1 vs not detectable.P<0.01),while levels of TNF-α and IL-6 also rosesignificantly but in less extent than IL-1β.CCK-8 inhibitedthe LPS-induced increase of the cytokines in spleen andlung.In the heart,CCK-8 significantly inhibited LPS-induced increase of TNF-α(864±123ng·L~1 in CCK-8 LPS group vs 1599±227ng·L~1 in LPS group,P<0.01),and IL-1β(282±93ng·L~1 in CCK-8 LPS group vs 621±145ng·L~1 in LPS group,P<0.01).CONCLUSION CCK-8 reverses ES,which may be relatedto its inhibitory effect on the overproduction of cytokines.     

过氧化氢上调白细胞介素1β诱导人肺上皮细胞表达环氧合酶2

目的探讨过氧化氢(H2O2)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导人肺上皮细胞(HPEC)环氧合酶2(COX-2)表达的影响.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法和酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定IL-1β、H2O2或二者联合干预后HPEC COX-2 mRNA表达量及前列腺素E2(PGE2)释放量的变化, 以不加任何试剂的细胞为对照组.结果 (1)COX-2 mRNA表达量1、5、10 mg/L 的IL-1β处理组COX-2 mRNA表达量分别为(143.1±7.2)%、(179.9±9.0)%、(190.0±9.5)%,对照组为(32.9±1.7)%,1、5、10 mg/L 的IL-1β处理组与对照组比较差异有显著性(P均<0.05); (2)培养基上清液PGE2浓度5、10 mg/L 的IL-1β处理组培养基上清液PGE2浓度分别为 (20.86±5.23)×10-6 g/L、(31.16±2.64)×10-6 g/L,对照组为(10.49±0.36)×10-6 g/L, 5、10 mg/L 的IL-1β处理组与对照组比较差异有显著性(P<0.05);(3) COX-2 mRNA表达量 0.10、0.25、0.50 mmol/L 的H2O2和IL-1β共处理组COX-2 mRNA表达量分别为 (149.2±7.5)%、(189.6±9.5)%、(239.1±12.0)%, IL-1β单独处理组为(66.1±3.7)%, 对照组为(41.6±2.1)%, 0.10、0.25、0.50 mmol/L 的H2O2和IL-1β共处理组与IL-1β单独处理组比较,差异有显著性 (P<0.05); (4)培养基上清液PGE2浓度0.10、0.25、0.50 mmol/L的H2O2和IL-1β共处理组,培养基上清液PGE2浓度分别为 (27.01±5.16)×10-6 g/L、(32.79±3.01)×10-6 g/L、(41.13±3.41)×10-6 g/L,对照组为(10.49±0.36)×10-6 g/L,0.10、0.25、0.50 mmol/L的H2O2和IL-1β共处理组与对照组比较差异有显著性(P<0.05).0.25、0.50 mmol/L的 H2O2和IL-1β共处理组PGE2浓度均与IL-1β单独处理组[(20.86±5.23)×10-6 g/L]比较差异有显著性 (P<0.05). 结论过氧化氢上调IL-1β对HPEC COX-2的诱导表达,其调节机制可能发生在转录水平.     

慢性阻塞性肺疾病患者血清抵抗素和瘦素水平及其与营养状况的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清抵抗素、瘦素水平及其与营养状况的关系。方法用酶联免疫吸附测定(ELISA)和放射免疫法检测57例稳定期COPD患者和31名健康对照者血清抵抗素、瘦素水平,分析相关因素。结果COPD患者血清抵抗素、瘦素水平[(2·1±1·2)、(0·65±0·41)μg/L]与对照组[(3·6±2·3)、(1·03±0·71)μg/L]比较差异均有统计学意义(P均<0·01)。COPD营养不良患者抵抗素、瘦素水平[(1·7±0·7)、(0·43±0·16)μg/L]显著低于非营养不良患者[(2·2±1·2)、(0·73±0·48)μg/L,P均<0·05]。COPD患者抵抗素与瘦素、第一秒用力呼气容积(FEV1)及FEV1/用力肺活量(FVC)显著正相关(r=0.426~0.531,P均<0·01),瘦素与体重指数(BMI)、胸围、腹围、抵抗素及FEV1/FVC显著正相关(r=0.371~0.580,P均<0·01)。结论COPD稳定期患者血清抵抗素、瘦素水平下降,合并营养不良时下降更显著。     

胸腺肽α1联合大剂量地塞米松治疗慢性特发性血小板减少性紫癜的疗效分析

目的探讨胸腺肽α1（Tα1）联合大剂量地塞米松（Dex）短程冲击治疗初治慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）的疗效及其细胞免疫机制。方法（1）66例初诊ITP患者口服Dex 40mg/d,连用4d;其中39例同时给予Tα1 1．6mg皮下注射,每周3次,连续应用4周。（2）ELISA法检测正常对照组20例及初诊ITP患者治疗前后血浆Tα1、IFNγ、IL-2、IL-4、IL-10及转化生长因子（TGF）-β1水平。结果（1）Tα1＋Dex联合治疗组与Dex单药治疗组,完全缓解（CR）率分别为76．9％（30／39）、44．4％（12／27）（P〈0．05）;长期反应率分别为61．5％（24／39）、34．6％（9／26）,复发率分别为38．5％（15／39）、65．4％（17／26）,差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）Tα1＋Dex治疗后Tα1水平为（1．83±1．22）μg/L较治疗前（2．43±1．47）μg／L明显降低（P〈0．05）。（3）Tα1＋Dex治疗后患者IFNγ和IL-2的血浆水平[（11．57±4．33）、（14．56±10．76）]ng／L均较治疗前[（22．71±7．98）、（28．42±11．27）]ng／L显著降低（P〈0．01）,且与正常对照组比较[（10．23±3．97）、（8．73±8．22）]ng／L,差异无统计学意义（P〉0．05）。IL-4和IL-10的血浆水平[（9．87±4．82）、（7．90±2．71）]ng／L均较治疗前[（5．93±3．85）、（3．24±1．36）]ng／L明显升高（P〈0．05）,且与正常对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）Tα1＋Dex治疗后患者血浆TGF-β1水平（4．19±1．80）μg/L较治疗前（1．31±0．71）μg／L明显升高（P〈0．01）。（5）Tα1＋Dex治疗后患者Tα1水平与TGF-β1含量之间呈显著正相关（r=0．6028,P〈0．05）。结论（1）Tα1＋Dex联合治疗可以纠正ITP患者体内Th1／Th2平衡紊乱,减少血小板破坏,其CR率高、复发率较低且耐受性好,可作为ITP治疗的一种新的尝试。（2）Tα1＋Dex治疗后患者Tα1水平与作为Th3特异性标志的TGF-β1之间呈显著正相关,可能与NK细胞的生理性抑制功能上调有关。     

Abhd2与慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能和气道炎症的相关性研究

目的：探讨 Abhd2对 COPD 大鼠的肺功能和气道炎症的影响。方法将20只 Wistar大鼠随机分为正常对照组和 COPD 组,每组10只。采用熏吸香烟加气管内注入脂多糖的方法构建COPD 模型。分别检测2组大鼠的肺功能 FEV0.1、Abhd2 mRNA 的表达、IL-6和 IL-8及气道炎症细胞的变化,并分析 Abhd2与肺功能 FEV0.1及炎症因子 IL-6和 IL-8之间的相关性。结果 COPD 大鼠与正常对照组大鼠相比,①肺功能指标 FEV0.1[(0.68±0.02)ml,(0.73±0.04)ml]明显降低(t =3.386,P <0.05);②肺组织 Abhd2 mRNA 的表达水平(0.26±0.07 vs 1.0)明显下降(t =5.831, P <0.05)。③气道内炎症细胞明显浸润,以中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞为主。肺泡灌洗液中炎症因子 IL-6[(403.68±42.67)μg/L,(16.96±2.50)μg/L]和 IL-8[(1208.80±145.61)μg/L,(43.49±4.92)μg/L]明显增高(t =27.87、24.69,P 值均<0.05);肺组织中二者 mRNA 的表达水平(5.46±0.27,16.35±1.24 vs 1.0)增高,差异有统计学意义(t =8.256、5.470,P 值均<0.05)。④COPD 大鼠肺组织中 Abhd2 mRNA 表达水平与肺功能 FEV0.1、炎症因子 IL-6和 IL-8的表达水平均呈负相关(r 1=0.892,P 1=0.000;r 2=0.697,P 2=0.001;r 3=0.682,P 3=0.001)。结论COPD 大鼠 Abhd2基因表达下降,上调 Abhd2基因的表达可能成为改善肺功能、减轻气道炎症及治疗COPD 的新途径。