2型糖尿病大鼠模型建立及稳定性观察

目的 诱导2型糖尿病大鼠动物模型.方法 86只SPF级200-220g雌性Wistar大鼠随机分为2组:正常对照组及模型组.正常对照组普通饮食喂养,模型组一直用高糖高脂饮食喂养.模型组用链脲佐菌素尾静脉注射(30mg/kg体重),正常对照组用生理盐水尾静脉注射,分别于第4及8周行糖耐量检查.结果 第四周87%模型大鼠血糖升高,笫8周94%模型组大鼠血糖升高,且体重增加,为2型糖尿病动物.结论 尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)并高糖高脂饲料喂养可诱导2型糖尿病大鼠模型,模型稳定.     

2型糖尿病肾病大鼠模型的建立及其肾脏病理特点

目的:探讨糖尿病肾病大鼠模型建立的最优方法及模型的病理特点。方法:32只SD雄性大鼠随机分为4组,每组8只,高脂高糖饮食组(A),手术+高脂高糖饮食组(B),手术+高脂高糖+一次中剂量STZ组(C),手术+高脂高糖+三次小剂量STZ组(D),分别给予不同处理,并在10周后检测大鼠的空腹血糖、血脂、肾功、白蛋白、24 h尿蛋白定量、肾指数及肾脏病理。结果:C组的成模率62.5%,D组的成模率100%,C、D组的空腹血糖、甘油三酯、尿蛋白定量、肾指数明显高于A、B组,白蛋白明显低于A、B组;C、D两组模型的肾脏病理结果均显示了糖尿病肾病的病理改变。结论三联法制作的2型糖尿病肾病模型与人类的2型糖尿病肾病病理相近似,三次小剂量STZ注射较一次中剂量STZ组成模率更高,是制作糖尿病肾病模型更为理想的方法。     

肾阴虚抑郁症大鼠模型的建立及评价

目的建立肾阴虚抑郁症大鼠模型。方法将50只大鼠随机分为正常组、单纯应激组、温燥组、甲状腺素组及激怒组;采用慢性温和不可预见性慢性应激建立抑郁症"病"模的同时,正常组、单纯应激组灌胃生理盐水,甲状腺素组灌胃甲状腺素,温燥组灌胃温燥药;激怒组采用长期激怒法并灌胃生理盐水。使大鼠在抑郁的基础上表现出一定的阴虚"证,"以大鼠一般状态、敞箱试验、液体消耗试验、血清雌二醇(E2)、睾酮(T)及血浆环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)作为检测指标,对各模型进行比较。结果与正常组比较,各模型组的体质量、水平得分、垂直得分、中央格停留时间、糖水消耗、总液体消耗各指标测值减少,温燥组、甲状腺素组及激怒组普遍出现活动减少,大便干燥,毛湿无光泽,易惊怒以及血浆cAMP含量升高,其中甲状腺素组和激怒组大鼠血清E2、E2/T比值显著升高。结论甲状腺素合并应激抑郁模型所致的肾阴虚抑郁,更符合临床实际,简单易行,可作为肾阴虚抑郁症造模方法之一。     

大鼠2型糖尿病动物模型的建立

目的研究链尿佐菌素（STZ）加高糖高脂饮食诱导大鼠2型糖尿病模型的建立。方法将30只SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组（n=20只）饲喂高糖高脂饲料,对照组（n=10只）饲喂基础饲料。实验组又分为2小组：大鼠喂养3周后,采血检测空腹血糖及血清胰岛素（高糖高脂组）;按25mg／（kg·BW）剂量一次性腹腔内注射STZ,3d后,行糖耐量实验证实异常,继续喂以高糖高脂饲料,在第2、4周再2次采血检测糖尿病鼠空腹血糖及血清胰岛素（糖尿病组）。对照组腹腔内注射相应剂量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,采血方法同实验组,比较各组大鼠糖耐量、空腹血糖及血清胰岛素的变化。结果与对照组比较,高糖高脂组血清胰岛索明显上升（P〈0.01）,但血糖无变化（P〉0.05）,糖尿病组血糖及血清胰岛素均显著高于对照组（均P〈0.01）。结论高糖高脂喂养能致大鼠明显的高胰岛素血症,辅以小剂量一次性注射STZ而造成的糖耐量异常,可成功建立大鼠2型糖尿病动物模型。     

从肾阴虚论治2型糖尿病

2型糖尿病的病因比较复杂,病机之本在于阴津亏耗。2型糖尿病肾阴虚者可有口干、口渴、体质量减轻、多食、小便多、小便甜、皮肤干燥或瘙痒、脉象微小等典型症状和体征。安徽中医药大学第一附属医院院内制剂丹蛭降糖胶囊可通过滋肾阴、益气、通络等功效发挥降血糖、降血脂及改善胰岛素抵抗等作用。文章立足于理、法、方、药4个环节,系统分析临床有效原因,从而更好地总结从肾阴论治2型糖尿病的特色及优势。     

脂多糖诱导2型糖尿病大鼠模型的建立

目的：探讨通过单一皮下注射脂多糖（LPS）诱导产生慢性炎症的方法建立2型糖尿病（T2DM）大鼠模型的可行性。方法将30只雄性 Wistar 大鼠分成对照组（n＝10）和造模组（n＝20）。造模组以 LPS（300μg·kg－1·d－1）皮下注射8周,对照组予以皮下注射等容量生理盐水。每周对大鼠一般情况、体质量、空腹血糖进行监测,8周后对两组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及空腹胰岛素（FINS）进行测定,另外进行口服糖耐量试验（OGTT）和胰岛素释放试验（IRT）。以空腹血糖大于或等于1．1 mmol／L 为造模成功。结果第6周开始 T2DM 造模组大鼠血糖显著高于对照组（P ＜0．05）,达到 T2DM 大鼠模型的成模标准。与对照组比较,造模组大鼠血清中 TNF-α、IL-1、IL-6、MCP-1、FINS 水平均显著升高,差异有统计学意义（P ＜0．05）;OGTT 试验,造模组血糖水平高于对照组,胰岛素峰值低于对照组,（P ＜0．05）。结论通过皮下注射小剂量 LPS 成功地建立了 T2DM 大鼠模型,为糖尿病的病因研究提供了一定的帮助。     

实验性2型糖尿病大鼠病证结合模型的建立

目的:从中西医结合角度,探讨实验性2型糖尿病大鼠病证结合模型的建立。方法:Wistar大鼠70只随机分为空白组30只和模型组40只,空白组给予基础饲料并腹腔注射等剂量柠檬酸缓冲液,模型组给予高热量、高糖、高脂饮食饲养并一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)至12周。观察两组大鼠体重和外观行为变化。结果:模型组大鼠第4周开始体重呈明显持续增加,第12周下降,但仍明显高于正常组(P<0.05);外观行为学变化:模型组大鼠第4～8周被毛脱落、倦怠、懒动、嗜睡,饮食量1～8周增加,9～12周减少,饮水量增加,大便干结,臀尾出汗潮湿;第11～12周出现臀毛枯黄,尾淤斑,舌紫暗。结论:高热量、高糖、高脂饮食配合STZ腹腔注射建立实验性2型糖尿病大鼠模型,随造模时间延长表现出由气阴两虚逐渐发展为气阴两虚兼痰浊(血淤)证演变趋势,具有中医证候动态变化特点。     

实验用2型糖尿病大鼠模型及其肾病观察

目的研究高脂高糖喂养加小剂量链脲佐菌素诱导的2型糖尿病大鼠模型的可行性及其肾病特点。方法SD大鼠高脂高糖喂养8周后,腹腔注射STZ(35mg/kg)诱导糖尿病大鼠,观察血糖,空腹胰岛素,血脂,肾功能,并行光镜及电镜观察肾脏结构改变。结果高脂高糖喂养加小剂量STZ诱导的糖尿病大鼠的体重,血糖,血脂较对照组明显增高,胰岛素敏感指数下降。糖尿病12周时,肾肥大指数、尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐、肾小球截面计、基质面积、基质面积比均较正常对照组升高,而毛细血管面积比下降。结论高脂高糖喂养加小剂量STZ诱导的糖尿病大鼠符合2型糖尿病发病特点及糖尿病肾病病理改变。     

2型糖尿病血瘀证大鼠模型制备的实验研究

目的:研究建立2型糖尿病血瘀证大鼠模型的方法。方法:应用高脂饲料加链脲佐菌素腹腔注射造成2型糖尿病模型后,用强的松龙和肾上腺素制备中医血瘀证大鼠模型,从而得到2型糖尿病血瘀证大鼠模型。造模完成后对各项指标进行检测。结果:2型糖尿病血瘀证大鼠模型与2型糖尿病大鼠模型空腹血糖比较差异无统计学意义(P0.05),血液流变学各项指标与空白组和2型糖尿病模型组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:本实验方法可以作为动物实验中2型糖尿病血瘀证模型的制备方法。     

六味地黄汤及其水提醇沉物对2型糖尿病肾阴虚证大鼠脂代谢的影响

目的观察六味地黄汤及其水提醇沉物对2型糖尿病肾阴虚证大鼠脂代谢的影响。方法采用高脂乳灌胃结合腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)再灌胃氢化可的松的方法建立2型糖尿病肾阴虚证大鼠模型。设空白组、模型组、六味地黄汤组、六味地黄汤水提醇沉物组、罗格列酮组,分组给药30 d,模型组和空白组给等量生理盐水,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血清cAMP、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)。结果模型大鼠FBG≥16.7 mmoL/L,cAMP水平为(1.32±0.04)mmoL/L,成功建立了2型糖尿病肾阴虚证大鼠模型;六味地黄汤及其水提醇沉物均能降低2型糖尿病肾阴虚证大鼠空腹血糖值及CHO、TG、LDL-C水平,升高HDLC水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),改善脂代谢。结论六味地黄汤干预2型糖尿病肾阴虚证的作用可能与其改善脂代谢有关,其水提醇沉物可能是六味地黄汤改善2型糖尿病肾阴虚证的药效物质基础之一。     

肾阴虚证cDNA文库的构建

目的探讨肾阴虚证的相关基因。方法以辨病与辨证相结合，从糖尿病、慢性肾炎、狼疮性肾病以及亚健康状态等肾阴虚证入手，应用RNA微量扩增、抑制性消减杂交、基因克隆等技术和方法。分别构建肾阴虚证的cDNA子消减文库，再运用核酸分子杂交原理和PCR进一步筛选上述消减文库中的相同部分．以构建肾阴虚证的共同文库，然后将PCR产物与U载体连接，经蓝白斑筛选后，再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒。结果该研究成功地构建了肾阴虚证的cDNA文库，其中正向消减文库共获得625个阳性克隆，反向消减文库获得736个阳性克隆。结论该研究初步构建了肾阴虚证的cDNA文库，为进一步克隆肾阴虚证的相关基因奠定了基础。     

不同浓度STZ腹腔注射与2型糖尿病大鼠模型建立

目的：探讨2型糖尿病（1、2DM）大鼠模型的链脲菌素（Streptozocin,STZ）最佳注射浓度。方法：80只8周龄SFP雄性SD大鼠高糖高脂饮食两周后随机分组,分别按40、45、50mg／Kg体重剂量腹腔注射链脲菌素建立T2DM大鼠模型,同时继续高糖高脂食物;对照组腹腔注射柠檬酸50mg／Kg,普通饲料喂养。各组为20只。分别在第2、5、10、20、30、45、60天测大鼠的血糖值,以10天后血糖〉16．7mmol/L计算糖尿病成模率,并计算60天内的大鼠死亡率。结果：实验组各组成模率分别是60％、90％、70％,对照组为0,此外,50mg／Kg剂量组大鼠死亡5只,其他组均为0。结论：45mg／kgSTZ腹腔注射大鼠成膜率高,安全性强,维持时间长,是理想的2型糖尿病造模浓度。     

大鼠肾虚型颈椎病模型的建立

目的：采用病、证模型复合的方法建立大鼠肾亏型颈椎病动物模型。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、颈椎病模型组和肾虚型颈椎病模型组,每组10只。采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合去卵巢肾虚亏模型的方法建立肾虚型颈椎病模型。通过检测大鼠子宫及附件形态和质量、血清雌二醇（estradiol,E2）含量验证肾虚证;通过颈椎间盘组织病理学、Ⅱ型和Ⅹ型胶原的免疫组化检测及聚集蛋白聚糖（aggrecan-1,Agc1）、Ⅱ型前胶原基因（typeⅡprocolla-gen gene,Col2a1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TI MP-1）的基因表达情况评判椎间盘退变。结果：与正常组和颈椎病模型组相比,肾虚型颈椎病模型组动物子宫及附件形态萎缩、质量减轻,血清雌二醇含量降低,颈椎间盘组织病理学退变更加明显,Ⅱ型胶原蛋白表达减少,Ⅹ型胶原表达增高,Agc1和Col2a1基因表达降低,MMP-13基因表达增高。结论：通过病、证模型复合的方式建立了肾虚型颈椎病模型,肾虚可以加重颈椎间盘的退变。     

阴虚证动物模型诊断指标及分析

通过查阅现有关于阴虚证动物实验的文章,认为以往研究涉及肾阴虚、肺阴虚、脾阴虚、胃阴虚、肝阴虚,总结出阴虚动物模型的造模方法、一般观察状态、检测指标、药物反证.为评价阴虚动物模型提供参考,为建立更统一的评价体系提供思路.     

类风湿关节炎肾虚证大鼠模型的建立

目的：建立类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）肾虚证病证结合大鼠模型。方法：选用6周龄无特殊病原体级Sprague-Dawley大鼠110只,雌雄各半。分别采用去势法和羟基脲法制作肾虚动物模型,然后采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂混合物的方法诱导出关节炎。通过对大鼠一般状态观察,关节炎指数计算和关节肿胀度测量对比两种RA肾虚证病证结合动物模型的发病情况,并采用酶联免疫吸附测定法检测血浆抗Ⅱ型胶原抗体、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）、IL-10、γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）和皮质酮（corticosterone,CORT）含量,放射免疫法检测肾上腺环腺苷酸（cyclic adenylic acid,cAMP）和环鸟苷酸（cyclic guanylic acid,cGMP）含量。结果：与胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）对照组大鼠相比,结合去势法、羟基脲法制作的肾虚CIA大鼠关节红肿程度和关节损伤程度明显加重,并且这两组大鼠出现倦怠、精神萎靡,弓背蜷缩,体毛枯疏,自主活动少,反应逐渐迟钝,喜扎堆,饮食减少,大便质稀,肛周污秽等与临床肾虚证相似的症状;肾虚CIA大鼠cAMP与cGMP比值明显降低,雄性大鼠CORT含量升高,雌性大鼠的CORT水平下降,抗Ⅱ型胶原抗体含量明显升高。采用去势法制作的肾虚CIA大鼠与CIA对照组大鼠相比,IL-6、IL-10及IFN-γ水平明显升高。结论：用去势法和羟基脲法制作的肾虚证RA动物模型,既有明显的肾虚症状,又有明显的RA特征,说明这两种肾虚型RA病证结合模型能够部分地反映肾虚证RA病人的发病特点,具有可行性。而去势法制作的肾虚CIA大鼠更适合RA肾虚证的实验研究。     

滋肾生肝法治疗肝肾阴虚型更年期综合征临床研究

目的观察滋肾生肝法治疗肝肾阴虚型更年期综合征的临床疗效。方法将我院门诊480例肝肾阴虚型更年期综合征患者随机分为中药组与西药组,其中中药组240例给予自拟的中药,西药组240例接受雌孕激素周期疗法,给予谷维素、复合维生素及雌孕激素。观察两组用药前后的主要症状的改善情况,血清雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成激素（LH）的水平变化。结果中药组和西药组总有效率比较差异无统计学意义（P〉0.05）;在中医症候改善方面,中药组优于西药组（P〈0.05）;在激素水平变化方面,中药组与西药组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论滋肾生肝法在改善肝肾阴虚型更年期综合征患者症状、内分泌方面具有优势,且无任何副作用。     

大鼠气虚血瘀肾虚型颈椎病模型的建立

目的：采用病、证模型复合的方法建立大鼠气虚血瘀肾虚型颈椎病模型。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、颈椎病模型组和气虚血瘀肾虚型颈椎病模型组,每组10只。颈椎病模型采用动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型,气虚血瘀肾虚型颈椎病模型采用动静力失衡大鼠颈椎间盘退变模型复合疲劳加饥饱失常法制造的气虚模型、肾上腺皮质激素和肾上腺素法制造的血瘀模型及去卵巢肾虚模型而制成。通过对大鼠行为体征观察和血液流变学、血小板表面α-颗粒膜糖蛋白（alpha-granular membrane protein,CD62p）、血清雌二醇（estradiol,E2）含量等检测,并用放射免疫法检测血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）与环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）含量,验证气虚、血瘀、肾虚证;通过椎间盘组织病理学观察,免疫组织化学法检测椎间盘组织中Ⅱ型、Ⅹ型胶原蛋白含量,实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测颈椎间盘聚集蛋白聚糖（aggrecan-1,Agc1）、Ⅱ型前胶原基因（typeⅡprocollagen gene,Col2a1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TI MP-1）的基因表达等评判椎间盘退变情况。结果：病证结合模型大鼠出现精神萎靡、倦怠、舌质瘀紫、尾色瘀青,体质量下降等气虚、血瘀证的表现,cAMP/cGMP降低,低切还原黏度增高,CD62p表达增高,血清E2含量降低。病理提示颈椎间盘组织结构发生退变,Ⅱ型胶原蛋白表达减少,Ⅹ型胶原表达增高,Agc1、Col2a1和TI MP-1的基因表达降低,MMP-13表达增高。结论：建立了大鼠气虚血瘀肾虚型颈椎病模型,气虚血瘀肾虚加重了颈椎间盘退变。     

滋阴活血方治疗肝肾阴虚型慢性湿疹的临床研究

湿疹是以皮疹特征命名的一种过敏性炎症性皮肤病,根据病情可分为急性、亚急性、慢性三期.并以多形皮损、易于渗出、瘙痒剧烈和慢性化为特征.慢性湿疹是一种病因复杂、诊断分型多样、治疗棘手的疾病.本研究通过总结欧阳恒教授多年临床经验,对慢性湿疹从肝肾阴虚进行辨证论治.现报道如下.