特应性皮炎患者外周血Th17细胞比例及不同细胞因子微环境对其分化的影响

目的探讨Th17细胞在特应性皮炎(AD)发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测39例AD患者外周血单一核细胞(PBMC)中Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR(real-timeRT-PCR)检测PB-MC中Th17细胞相关细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23和TGF-βmRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中上述细胞因子的含量;同时以34例性别、年龄匹配的健康儿童做对照。分离AD患者PBMC体外培养,加入不同细胞因子微环境,观察其对Th17细胞数量及特异性转录因子RORγt表达的影响。结果 AD患者外周血Th17细胞比例(CD4+IL17+T细胞/CD4+T细胞%)显著高于正常对照者(P<0.01)。PBMC中IL-1β、IL-6、IL-17和IL-23mRNA表达水平及血清中相应细胞因子含量均显著高于正常对照者(P<0.01),PBMC中TGF-βmRNA表达水平及其血清中含量与正常对照者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。AD患者PBMC在不同细胞因子微环境中培养,IL-1β+IL-23+IL-6处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达最高,TGF-β处理组表达最低,与其余处理组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组Th17细胞比例及RORγtmRNA表达水平低于IL-1β+IL-23+IL-6处理组,高于TGF-β处理组和未处理组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。IL-1β+IL-6、IL-1β+IL-23、IL-6+IL-23处理组间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 AD患者外周血Th17细胞比例及相应促分化细胞因子表达水平升高,IL-1β+IL-23+IL-6对Th17细胞具有明显的促分化作用,Th17细胞在AD发病机制中发挥作用。     

桥本甲状腺炎患者外周血调节性T细胞/Th17细胞平衡动态变化的研究

目的 探讨桥本甲状腺炎(HT)患者外周血调节性T细胞(Treg)与Th17细胞的动态变化及其意义.方法 流式细胞术检测36例HT患者和30例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Treg和Th17细胞的比例,实时定量RT-PCR检测Treg和Th17细胞特异性转录因子Foxp3、RORγt mRNA的表达水平,ELISA检测血清中相关细胞因子TGF-β和IL-17A的含量.结果 HT患者PBMC中Treg细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显低于健康对照者(t=-10.62、-7.624,P均<0.01),HT亚组间差异具有统计学意义(F=4.414、4.512,P均<0.05);Th17细胞比例、RORγt mRNA表达水平及Th17/Treg比值均明显高于健康对照者(t=11.32、19.25、8.386,P均<0.01),HT亚组间差异均具有统计学意义(F分别为34.947、14.551、24.338,P均<0.01),亚组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05).HT患者血清TGF-β的含量较健康对照者略低,但差异无统计学意义(P>0.05);IL-17A的含量均较健康对照者显著升高(P<0.01),HT患者组内各亚组间血清IL-17A的含量差异具有统计学意义(F=11.077,P<0.01),两两比较差异亦具有统计学意义(P均<0.05).HT患者Th17/Treg比值与血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)滴度均呈显著正相关(r=0.349、0.502,P=0.037、0.002).结论 在HT发病过程中,Th17/Treg细胞轴呈动态改变,并且与甲状腺自身抗体滴度正相关,说明Th17/Treg细胞亚群的免疫失平衡可能参与了HT的发生发展.     

丹参对妊娠高血压综合征患者外周血Th1/Th2细胞因子的调节作用

目的 观察丹参对妊娠高血压综合征(PIH)患者外周血Th1/Th2细胞因子的调节作用.方法 选择40例中度PIH患者,予以丹参静滴10d(丹参治疗组),另取正常妊娠对照组40例.双抗体夹心ELISA法检测丹参治疗组治疗前后培养上清单个核细胞(PBMC)中白介素-4(IL-4)和.γ-干扰素(IFN-γ)含量的变化,正常妊娠对照组只测定1次.结果 与正常妊娠对照组相比较,丹参治疗组患者外周血培养上清PBMC中IL-4水平明显下降,而IFN-γ水平明显上升(均P＜0.05).经过丹参治疗1个疗程后,患者外周血培养上清PBMC中IL-4水平明显上升,而IFN-γ水平明显下降(均P＜0.05).结论 PIH患者存在Th1/Th2细胞因子的比例失衡.丹参治疗PIH作用机制是通过抑制Th1介导的细胞免疫,增强Th2介导的体液免疫.纠正Th1/Th2细胞因子比例平衡.     

肿瘤患者外周血Th1/Th2的检测及意义

目的 检测恶性肿瘤患者机体的Th1/Th2细胞产生的相关细胞因子含量,讨论Th1/Th2的平衡与肿瘤发生发展的关系。方法 利用有丝分裂原ConA刺激人体外周血单个核细胞(PBMC)体外无菌培养适当时间,提取上清液后以ELISA测定IFN-γ和IL-4在培养液中的浓度,共研究了40例肿瘤患者和30例正常人。结果 恶性肿瘤患者的IFN-γ和IL-4分别是687.1±794.6 pg/ml和379.4±144.9 pg/ml,而正常对照组的IFN-γ及IL-4为1 665.8±1 041.6 pg/ml和294.9±73.1 pg/ml。肿瘤患者的IFN-γ明显降低(P<0.005),而IL-4却显著升高(P<0.05)。结论 肿瘤患者的Th1/Th2平衡被打破,使之向Th2漂移,检测肿瘤患者的IFN-γ和IL-4有助于恶性肿瘤病情发展的监测。     

Th1/Th2、CD28、ICOS、PD-1和CTLA-4在桥本甲状腺炎患者外周血中的表达及与甲状腺相关实验室指标的相关性

目的 探讨辅助性T淋巴细胞1与辅助性T淋巴细胞2比值(Th1/Th2)、CD28、可诱导共刺激分子(ICOS)、程序性死亡受体1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)在桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中的表达及与甲状腺相关实验室指标的相关性。方法 收集2021年在该院门诊或住院治疗的HT患者40例为HT组,另选择同期健康体检者40例为对照组。采用全自动化学发光免疫分析仪检测血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10水平,采用流式细胞仪检测外周血中Th1与Th2细胞,以及CD3⁺CD4⁺T淋巴细胞表面共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4水平。结果 HT组血清FT4和TPOAb水平均明显高于对照组,TSH、FT3水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HT组外周血中Th1细胞及其相关细胞因子IFN-γ和IL-2水平,以...     

T淋巴细胞亚群与炎性因子在评估再生障碍性贫血病情及预后中的应用

目的研究T淋巴细胞亚群与炎性因子检测在再生障碍性贫血(AA)病情及预后评估中的价值。方法选取本院收治的40例AA患者作为AA组,并进一步分为急性再生障碍性贫血(AAA)组和慢性再生障碍性贫血(CAA)组;同时选取同期于本院体检的40例健康者作为对照组。比较两组患者的血常规指标、外周血T淋巴细胞亚群百分率和血清炎性因子水平。结果AA组患者外周血辅助性T淋巴细胞(Th)Th1、Th17细胞百分率及Th1/Th2、Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)比例均高于对照组(P0.05),Th2、Treg细胞百分率低于对照组(P0.05);AAA组外周血Th1、Th17细胞百分率及Th1/Th2、Th17/Treg比例高于CAA组,Th2、Treg细胞水平低于CAA组(P0.05)。AA组患者血清白细胞介素(IL)-2、IFN-γ、IL-17水平高于对照组,IL-4、IL-6、IL-10水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);AAA组血清中IL-2、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-17水平高于CAA组,IL-4、IL-6、IL-10水平低于CAA组,差异均有统计学意义(P0.05);血红蛋白(Hb)水平、PTL与Th1、Th17细胞水平及IL-2、IFN-γ、IL-17水平呈负相关,与Th2、Treg细胞水平及IL-4、IL-6、IL-10水平呈正相关。结论 AA患者外周血中T淋巴细胞亚群百分率及血清炎性因子水平存在异常,而且与反映病情严重程度及预后的指标具有良好的相关性。     

慢性丙型肝炎病毒感染者外周血单个CD4+Th 细胞内IFN-γ及IL-4的表达

目的研究慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)中Th细胞内IL-4和IFN-γ的表达情况,探讨Th1/Th2细胞及其细胞因子在慢性HBV感染中的作用.方法常规分离PBMC,在PMA、ionomycin、monensin的刺激下,应用FCM检测慢性HCV感染者外周血Th细胞内IL-4和IFN-γ表达情况,采用ELISA法检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平.结果在慢性HCV感染者中(包括慢性HCV携带者、慢性丙型肝炎以及肝硬化患者)分泌IFN-γ的细胞百分数远高于对照组(P＜0.01);各实验组分泌IL-4的细胞百分数均很低,并且与疾病的进展无任何关联.在慢性HCV感染者中血清sIL-2R水平明显高于健康对照组,并且与分泌IFN-γ的细胞百分数呈正相关.结论在HCV感染的不同阶段,血清sIL-2R和IFN-γ水平均升高,Th1细胞因子或Th1细胞可能在慢性HCV感染肝脏损伤的发病机制中起重要作用.     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

miR-21对1型糖尿病患者外周血单个核细胞分泌IFN-γ与IL-17的影响

目的:探讨mi R-21在1型糖尿病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌干扰素-γ(IFN-γ)与白介素-17(IL-17)的影响。方法:采集60例1型糖尿病患者及60例正常健康人外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),用q RT-PCR检测两组PBMC中mi R-21的表达;向PBMC中转染mi R-21,ELISA检测PBMC分泌IFN-γ与IL-17情况。结果:1型糖尿病患者PBMC中mi R-21表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);增加1型糖尿病患者PBMC中mi R-21的表达,IFN-γ与IL-17的分泌均减少,差异有统计学意义(P值分别<0.05或<0.01)。结论:mi R-21在1型糖尿病患者PBMC中的表达下降,并可抑制PBMC中IFN-γ与IL-17的分泌。     

Th17细胞在特发性血小板减少性紫癜发病中的作用和意义

目的:本研究探讨Th17细胞在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的作用和意义。方法:采用FCM检测ITP患者组和正常对照组外周血中Th17细胞的比例;ELISA技术检测上述两组血浆中IL-17、IL-23、IL-6和TGF-β1的表达水平;RT-PCR技术检测外周血单个核细胞(PBMNC)中IL-17和RORγt mRNA的表达水平;Westernblot法检测PBMNC中pSTAT3和RORγt蛋白的表达水平。结果:ITP患者外周血Th17细胞比例较正常对照组显著升高,血浆中IL-17、IL-23、IL-6和TGF-β1水平明显高于正常对照组(P0.01);ITP患者PBMNC中IL-17和RORγt mRNA表达水平明显高于正常对照组(P0.05);p STAT3和RORγt蛋白的表达水平明显高于正常对照组(P0.05))。结论:在ITP发生和发展中,Thl7细胞亚群比例增高可能是一个重要的决定因素,Th17细胞相关的细胞因子及转录调控因子水平的变化与ITP发病密切相关。     

Th1/Th2 imbalance in HCV-related liver cirrhosis

The mechanism by which Hepatitis C virus(HCV) infection promotes the development of hepatocellular carcinoma(HCC) is not known exactly. HCV related HCC occurs frequency in the patients with cirrhosis. There have been reports indicating that Th2-type cytokines down-regulated antitumor immunity, and the activation of type 1 T cell responses produced antitumor immunity. We thought Th1/Th2 imbalance in HCV-related liver cirrhosis might be closely related to the development of HCC. In this study, therefore, we investigated the Th1/Th2 balance at the single lymphocyte level of the patients with HCV-related liver cirrhosis and compared with normal controls by using flow cytometry. Th1-type cytokines(IFN-gamma, IL-2) production was significantly decreased in patients with cirrhosis, whereas Th2-type cytokine production(IL-10) was increased. These suggest Th1/Th2 imbalance in HCV-related cirrhosis would decrease the antitumor immunity and its improvement might present the protective effect from HCC.     

Neonatal Th activation

A case is reported of a 1-month-old infant with bowel obstruction and suspected sepsis whose red cells were found to be Th activated during the course of evaluating weakened A antigen activity. Neither Th activation nor weakened A antigen activity was present on the red cells of either parent. The Th activation and the weak reactivity obtained with commercial anti-A reagents were unrelated.     

腹腔镜下卵巢型子宫内膜异位囊肿剥除术后T辅助细胞1/T辅助细胞2的动态漂移

目的 研究腹腔镜下卵巢子宫内膜异位囊肿剥除术后Th1(T辅助细胞1)、Th2(T辅助细胞2)各细胞因子的动态变化.方法 2009年7月～2011年8月收住宁夏医科大学附属医院妇科行腹腔镜下卵巢子宫内膜异位囊肿剥除术并经术后病理证实诊断的患者36人,ELISA法检测手术前2d、术后2h、术后72 h血清的IL-2(白介素2)、IL-4(白介素4)、IL-6(白介素6)、IL-10(白介素10)、TNF-α(肿瘤坏死因子α)及IFN-γ(干扰素γ)表达变化.结果 IFN-γ在术后2h下降明显,术后72 h复又升高,且升高程度与术后2h以及术前相比均有统计学差异;IL-4、IL-6在术后2h升高明显,术后72 h下降,且下降程度与术后2h以及术前相比均有统计学差异;IFN-γ/IL-4比值在术后2h下降,与术前相比有统计学差异,而术后72 h比值升高,与术后2h及术前均有统计学差异.结论 腹腔镜下卵巢型子宫内膜异位囊肿剥除术有利于纠正Th2漂移,破坏了有利于异位内膜生长的免疫环境.     

Th1/Th2 cross-regulation and the discovery of IL-10

In the late 1980s, Tim Mosmann and colleagues isolated functionally distinct T helper (Th)-1 and Th2 clones, and provided evidence that these two subsets were mutually inhibitory. Knowledge of the inhibition led to the discovery that Th2 cells make IL-10 to suppress Th1 cells.     

肝细胞肝癌病人Th1/Th2免疫评估

目的 通过检测135例原发性肝癌（PLC）患者手术前后血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平,并与30例健康查体者（对照组）进行对照分析,观察肝细胞癌病人免疫功能改变并进一步结合临床病理学指标,分析免疫功能变化对临床诊断的指导意义.方法 肝癌病人在术前和术后10d、20d、30d抽取清晨空腹静脉血,对照组在体检合格后抽取空腹静脉血,ELISA技术检测血清IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度.结果 肝癌患者IL-2含量平均为98.2pg/ml,较对照组明显降低（p〈0.05）;IL-4、IL-10含量肝癌组为114.8±27.3 pg/ml和65.6 pg/ml,均明显高于正常对照组（p〈0.01）; TNF-α、IFN-γ血浆含量在肝癌组分别为153.3 pg/ml和89.0 pg/ml,与正常对照组比较均具有显著差异（P〈0.01）.IL-2、TNF-α血清含量在Ⅱ、Ⅲ期肝癌患者均低于Ⅰ期（p〈0.01）,IL-4、IL-10 血浆含量随着病情进展逐渐升高,呈现III期〉II期〉I期趋势,其差异具有显著意义;PHCⅡ、Ⅲ期患者IFN-r含量与Ⅰ期患者间比较差异有显著性.手术后 IL-2、IFN-γ、TNF-α呈逐渐升高趋势,术后20天起血浆浓度与术前血浆浓度相比即具有明显差异（p〈0.05）,术后30天即基本接近正常水平,与术前、术后10天相比具有显著统计学意义（p〈0.05）;IL-4、IL-10呈现逐渐降低趋势,术后20天、术后30天与术前相比其差异具有显著统计学意义（p〈0.05,p〈0.01）.结论 肝癌病人免疫功能失衡,出现Th1/Th2漂移,表现为IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10等指标明显改变,并且与肿瘤的分期有关,可作为判断肿瘤分期指标之一.手术切除肿瘤在一定程度上可促进患者免疫失衡的恢复,但手术、麻醉等大的损伤可进一步加重病人的免疫失衡,故不能完全切除病灶者,手术适应症的选择需慎重.     

Th1 and Th2 cytokine responses to academic stress.

Predominant Th2 profiles are associated with the worsening of asthma, and stress is speculated to induce a Th2 profile. The goals of this study were to examine the responses of the cytokines Th1 (IFN-gamma and IL-2) and Th2 (IL-4, IL-5, and IL-6) to a stressor and to look at the relationships between cytokine and psychological responses. Twenty-four students with and without a history of asthma completed questionnaires and gave blood samples during nonexam and exam periods. Cytokines were measured by ELISA from supernatants of stimulated mononuclear cells (MNC) and whole blood. During examinations, there were a significant decrease in IL-2 and a significant increase in IL-6 production (both cultures) and a significant decrease in IFN-gamma production (MNC cultures). Baseline IL-2 levels showed significant negative correlations with several stress and mood scores. Findings of this study indicate a down-regulation of Th1 and a selective up-regulation of Th2 cytokines during a stressful exposure.     

Th1、Th2、Th17相关细胞因子与儿童系统性红斑狼疮疾病活动程度的相关性研究

目的 检测儿童系统性红斑狼疮(cSLE)血液辅助性T细胞(Th)亚群Th1、Th2、Th17相关细胞因子的表达水平,探讨其与疾病活动程度的相关性,寻找cSLE疾病活动期的潜在生物标志物.方法 选取该院cSLE患儿47例作为观察组.依据SLE疾病活动度评分(SLEDAI评分)将观察组分为非活动期组(18例),活动期组(29例).另选取同期该院健康体检儿童20例作为对照组.采用流式细胞术检测3组研究对象血浆中Th1亚群细胞因子白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ,Th2亚群细胞因子IL-4、IL-6和IL-10,Th17亚群细胞因子IL-17表达水平,以及CD4+T和CD8+T细胞水平.结果 非活动期组和活动期组TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10和IL-17水平较对照组升高(P<0.05),活动期组IL-6、IL-10和IL-17水平高于非活动期组(P<0.05).活动期组CD4+/CD8+低于对照组(P<0.05).血清IL-6水平与IL-10、IL-17呈正相关(r=0.415、0.497,P<0.05),IL-10水平与IL-17呈正相关(r=0.402,P<0.05).血清IL-6、IL-10、IL-17水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.373、0.440、0.412,P<0.05).IL-6预测cSLE活动程度的最佳临界值为23.25 pg/mL,曲线下面积(AUC)为0.907(P<0.05);IL-10预测cSLE活动程度的最佳临界值为32.50 pg/mL,AUC为0.853(P<0.05);IL-17预测cSLE活动程度的最佳临界值为33.00 pg/mL,AUC为0.767(P<0.05).结论 血清IL-6、IL-10和IL-17与cSLE疾病活动程度具有相关性,IL-6和IL-10的预测效能高于IL-17,可作为预测疾病活动程度的生物标志物.