松果菊苷对乙肝病毒复制和抗原表达的影响

以HBV基因转染的HepG2.2.15细胞为体外模型,研究松果菊苷对乙肝病毒(HBV)复制和抗原表达的影响,采用ELISA法测定细胞上清乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)水平;采用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平。以HBV转基因小鼠为体内模型,研究松果菊苷对HBV复制的影响,首先采用荧光定量PCR法检测转基因小鼠肝组织HBV DNA水平,采用ELISA法检测小鼠血清HBsAg和HBeAg水平;同时检测血清转氨酶水平和肝组织病理变化;然后将HBV表达阳性的转基因小鼠随机分为5组:对照组、拉米夫定(50 mg·kg^-1)组和松果菊苷高、中、低剂量(50,25,12.5 mg·kg^-1)组。每天灌胃给药1次,连续给药30 d。第31天分离小鼠血清检测HBV DNA,HBsAg和HBeAg水平;提取肝组织DNA测定其HBV DNA水平,同时作肝组织病理检查。结果表明:松果菊苷在50,100 mg·L^-1作用HepG2.2.15细胞6 d后能显著抑制HBsAg和HBeAg表达,其最高抑制率分别为42.68%,46.29%;同时在100 mg·L^-1对HBV DNA具有抑制作用。此外,松果菊苷在50 mg·kg^-1剂量时能显著抑制HBV转基因小鼠HBsAg与HBeAg表达,其抑制率分别为42.82%,29.12%,同时对转基因小鼠血清HBV DNA水平有显著抑制作用。提示松果菊苷对HBV复制和抗原表达具有较强抑制作用。     

白花蛇舌草总黄酮对实验性溃疡性结肠炎的作用及免疫学机制研究

目的：观察不同剂量白花蛇舌草总黄酮（FOD）对溃疡性结肠炎（UC）模型小鼠结肠NF-κB及IL-8,TNF-α,IL-10表达的影响,探讨其抗UC的免疫学机制。方法：60只雄性昆明小鼠随机分成6组：对照组（Cont）蒸馏水灌胃,其余5组均自由饮用4%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）水溶液7 d以造成急性UC,同时给予下列药物灌胃：蒸馏水（DSS组）,柳氮磺胺吡啶（SASP）500 mg·kg^-1·d^-1（DSS+SASP组）,FOD 60 mg·kg^-1·d^-1（DSS+FOD-H组）,FOD 40 mg·kg^-1·d^-1（DSS+FOD-M组）,FOD 26.7 mg·kg^-1·d^-1（DSS+FOD-L组）。造模给药期间,每天对各组小鼠进行疾病活动指数（DAI）评分。造模7 d后处死小鼠,取结肠组织标本,对结肠黏膜进行病理组织学损伤评估;用免疫组化法检测NF-κB p65的表达,ELISA法检测结肠组织中IL-8,TNF-α及IL-10的表达。结果：自由饮用4%DSS水溶液7 d可成功造成小鼠急性UC,与对照组比较,DSS组小鼠的DAI、结肠病理组织学损伤评分明显上升,结肠组织中NF-κB p65及IL-8,TNF-α表达显著增多,IL-10表达明显降低（P<0.05）。 FOD可对抗DSS所致的小鼠急性UC,FOD以60,40 mg·kg^-1·d^-1预防给药7 d,可完全或部分对抗DSS引起的上述改变。与DSS组比较,DSS+FOD-H组、DSS+FOD-M组的DAI、结肠病理组织学损伤评分降低,IL-8,TNF-α及NF-κB p65表达下调,IL-10 表达上调（P<0.05）。结论：FOD有明显的抗小鼠UC的作用,其机制可能与抑制NF-κB p65激活,从而减少促炎因子IL-8,TNF-α的表达,增加抗炎因子IL-10表达有关。     

人参皂苷Rb1改善高脂喂养肥胖小鼠胰岛素抵抗和脂肪异位沉积

人参皂苷Rb₁是人参的主要活性成分,前期体外实验显示人参皂苷Rb₁能够抑制脂肪细胞脂肪分解和促进葡萄糖转运的作用。本研究利用高脂饮食诱导的肥胖小鼠,研究人参皂苷Rb₁对胰岛素抵抗和脂肪异位沉积的影响及其作用的分子机制。将高脂喂养的肥胖雄性C57/L小鼠,随机分为高脂组（DIO组）,人参皂苷Rb₁组（Rb₁组）和罗格列酮组（Rog组）,继续给予高脂饲料喂养,另设立正常饲料喂养的C57/L小鼠为正常组（NC组）;分别按20,10 mg·kg^-1体重给予Rb₁组和Rog组小鼠每天腹腔注射人参皂苷Rb₁和罗格列酮,NC组和DIO组以等量的生理盐水腹腔注射。治疗2周后,进行腹腔注射葡萄糖耐量试验（IPGTT）,3 d后,处死小鼠,留取血清,检测胰岛素、游离脂肪酸（FFA）及生化指标;称取肝脏质量,检测肝脏内甘油三酯含量和病理检测;称取附睾脂肪质量,蛋白印迹检测PDE3B,HSL,周脂素。结果显示人参Rb₁治疗2周明显改善肥胖小鼠的葡萄糖耐量,除了0~120 min,Rb₁组葡萄糖耐量曲线下面积（0~30,0~60,0~90 min）较DIO组均显著下降（P<0.05,n=5）,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）显著下降（P<0.05,n=5）;并且Rb₁显著降低了肥胖小鼠肝脏内的脂肪水平（P<0.05,n=5）,肝脏质量/体重也明显下降（P<0.05,n=8）;Rb₁治疗后,肥胖小鼠血中升高的FFA水平也明显下降（P<0.05,n=8）;附睾脂肪中周脂素表达水平得到部分恢复,但对PDE3B的表达以及HSL的表达和磷酸化激活未见明显影响。以上研究结果表明人参皂苷Rb₁能够通过上调脂肪组织周脂素的表达,减少游离脂肪酸的释放和甘油三酯的异位沉积,这可能是其改善机体胰岛素抵抗和糖代谢异常的作用机制之一。     

黄独素B诱导小鼠急性肝损伤及其机制

目的： 观察黄药子中的二萜内酯类成分diosbulbin B（DB）诱导的急性肝毒性,并进一步探讨其对小鼠血清中炎性细胞因子和肝脏血红素加氧酶1（heme oxygenase-1,HO-1）表达的影响。方法：小鼠一次性灌胃给药DB（0,113,150,200 mg·kg^-1）,通过检测血清谷丙转氨酶（ALT）,天冬氨酸转氨酶（AST）,碱性磷酸酶（ALP）的活性来观察DB诱导的急性肝损伤,采用酶联免疫法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）,白细胞介素4（IL-4）,白细胞介素1β（IL-1β）的含量,采用免疫印迹法（Western blot）观察HO-1的表达。结果：血清ALT,AST,ALP结果显示,DB 113 mg·kg^-1灌胃后24 h,DB没有引起肝毒性;在150 mg·kg^-1时,DB引起微弱的肝损伤;到200 mg·kg^-1时,DB诱导明显的肝损伤。ELISA结果显示,DB能够剂量依赖性的增加血清中TNF-α的含量（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,DB（200 mg·kg^-1）能够降低 IL-4的含量（P<0.01）,而不同剂量的DB对IL-1β的含量均没有明显影响。Western blot结果显示,DB（200 mg·kg^-1）能够明显诱导肝组织中HO-1的表达（P<0.01）。结论：由TNF-α介导的炎性肝损伤以及氧化应激损伤可能是DB所诱导的急性肝毒性的主要原因。     

芍药苷对胶原诱导型关节炎大鼠外周血单个核细胞糖皮质激素受体的影响

研究芍药苷（paeoniflorin,PF）对胶原诱导型关节炎大鼠外周血单个核细胞（PBMCs）糖皮质激素受体（GCR）的影响。采用胶原诱导型关节炎（CIA）大鼠模型,初次免疫后第14天灌胃给予PF 25,50,100 mg·kg^-1或雷公藤甲素20 μg·kg^-1或PF 50 mg·kg^-1+RU486 15 mg·kg^-1,每天1次,连续给药28 d。末次给药后第2天,除PF+RU486组外所有实验大鼠摘眼球取血,处死并取所有大鼠未免疫关节,ELISA法检测PBMCs中GCRα,GCRβ表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法分析PBMCs中GCRα,GCRβ mRNA表达,免疫组化法分析关节滑膜组织IL-1β,NF-κB p65,TNF-α,PGE₂的表达。PF 50,100 mg·kg^-1可抑制CIA大鼠关节滑膜组织IL-1β,NF-κB p65,TNF-α,PGE₂的表达（P<0.05,P<0.01）,而RU486 15 mg·kg^-1可明显影响PF 50 mg·kg^-1的这一作用（P<0.05）;PF 50,100 mg·kg^-1可上调GCRα,GCRα mRNA的表达、下调GCRβ和GCRβ mRNA的表达（P<0.01）,PF抑制CIA大鼠关节滑膜炎性介质可能与其调节GCR表达有关。     

养阴益气活血方药对干燥综合征NOD小鼠颌下腺Fas/FasL及其mRNA表达的影响

目的：观察养阴益气活血方药对干燥综合征NOD小鼠颌下腺组织Fas/FasL及其mRNA表达的影响。方法：32只NOD小鼠随机分为模型组、中药组（每天按100 g·kg^-1灌胃养阴益气活血煎剂0.4 mL）、羟氯喹组（每天按60 mg·kg^-1灌胃羟氯喹0.4 mL）、中西药组（每天灌胃养阴益气活血煎剂50 g·kg^-1+羟氯喹60 mg·kg^-1,0.4 mL）,每组8只,选8只Balb/C小鼠做为正常对照组。实验进行8周后处死小鼠,解剖摘取颌下腺,免疫组织化学法检测颌下腺组织Fas,FasL蛋白的表达;RT-PCR法检测颌下腺组织Fas,FasL mRNA的表达。结果：模型组小鼠颌下腺组织Fas,FasL表达均高于其他各组（P<0.05）。对照组FasL表达明显低于羟氯喹组（P<0.05）。模型组小鼠颌下腺Fas mRNA相对表达量均高于其他组,对照组明显低于其他各组（P<0.05）。模型组小鼠颌下腺FasL mRNA表达高于中药组、中西药组（P<0.05）;中西药组表达明显低于羟氯喹组（P<0.05）。结论：养阴益气活血煎剂能下调干燥综合征NOD小鼠颌下腺Fas,FasL及其mRNA的表达,且与羟氯喹合用效果较好。养阴益气活血煎剂可能通过减少Fas/FasL调控的细胞凋亡达到治疗SS的作用。     

颠茄托品烷生物碱合成途径基因表达分析与生物碱积累研究

托品烷类生物碱（tropane alkaloids,TAs）是临床上广泛使用的抗胆碱药物,颠茄是药典收录的TAs最主要的商业栽培药源植物。基于颠茄转录组测序数据构建TAs合成途径中9个结构基因（ODC,ADC,AIH,CPA,SPDS,PMT,CYP80F1,H6H,TRⅡ）UniGene序列的数字表达谱,采用qPCR对其中4个已报道基因（PMT,CYP80F1,H6H,TRⅡ）的表达水平进行验证分析,同时采用HPLC测定不同组织中TAs含量。数字表达谱分析结果表明4个TAs上游合成途径基因（ODC,ADC,AIH,CPA）和2个支路途径基因（SPDS,TRⅡ）在颠茄各器官中均有表达,但在须根中高水平表达;3个TAs合成途径特异的结构基因PMT,CYP80F1和H6H均只在须根中大量表达,主根中其次。qPCR检测PMT,CYP80F1,H6H,TRⅡ的表达结果与数字表达谱基本一致,但PMT,CYP80F1,H6H在主根中表达量很低。莨菪碱质量分数在嫩茎中最高（3.364 mg·g^-1）,幼叶,根,幼果和果萼中其次（分别为1.526,1.598,1.271,1.413 mg·g^-1）;东莨菪碱质量分数在果萼中最高（1.003 mg·g^-1）,嫩茎和幼叶（分别为0.600,0.601 mg·g^-1）中其次;2种生物碱在老茎（莨菪碱0.283 mg·g^-1,东莨菪碱0.043 mg·g^-1）和老叶（莨菪碱0.313 mg·g^-1,东莨菪碱0.080 mg·g^-1）中质量分数均为最低。该研究结果表明须根是颠茄TAs 生物合成主要器官,而地上幼嫩组织是TAs主要存贮积累器官,TAs合成后存在转运过程。PMT下游基因均只在须根中表达,筛选颠茄须根的转录组数据库就可能为解决该途径中不清晰的合成步骤和相关转录调控因子提供有力的帮助。     

绿豆药材质量标准研究

为了对绿豆药材进行有效的质量控制,该研究建立了绿豆药材的质量控制方法与标准。参照《中国药典》2010年版附录相关方法,对绿豆药材的水分、灰分及醇溶性浸出物进行测定;采用薄层色谱法,以硅胶GF254为薄层板,乙酸乙酯-甲醇-水 （10：1.7：1.3）为展开剂,以牡荆苷和异牡荆苷为对照,建立其薄层鉴别方法;采用HPLC建立主要有效成分牡荆苷和异牡荆苷的含量测定方法： 采用Prevail C₁₈ （4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-水（23：77）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温30℃;检测波长337 nm。结果绿豆中各成分在紫外光灯（254 nm）下检视,能得到较好的分离;含量测定方法学研究结果表明,牡荆苷在6.12~98 mg·L^-1,异牡荆苷在6.85~109.6 mg·L^-1线性关系良好,回归方程分别为Y=46.213X-7.100 （r=1.000）和Y=54.515X+6.829（r =1.000）;平均回收率分别为98.2%（RSD 1.9%）和97.2%（RSD 0.79%）。25批绿豆药材样品的测定结果表明,牡荆苷的质量分数为1.076~2.062 mg·g^-1,异牡荆苷的质量分数为1.127~2.303 mg·g^-1,不同产地样品中牡荆苷和异牡荆苷的含量差异不大;醇溶性浸出物的结果为13.27%~18.46%,水分为9.59%~12.43%,总灰分为2.63%~3.53%。上述结果表明建立的标准具有很好的专属性和准确性,可用于绿豆药材的质量控制。     

六君子汤合左金丸治疗小鼠急性放射性十二指肠炎的疗效及机制研究

目的：评估六君子汤合左金丸治疗小鼠急性放射性十二指肠炎的疗效,与临床常规抑酸联合黏膜保护制剂对比,探讨其产生疗效的机制。方法：根据文献研究,参考放射性肠炎模型建模标准结合十二指肠特征,首创小鼠放射性十二指肠损伤模型。将模型小鼠随机分为对照组（n=26）、中药干预组（n=16）、西药干预组（每只法莫替丁悬液0.5 mL+铝镁加混悬液0.3 mL灌胃,每日1次,n=16）。标准给药后通过小鼠一般情况、体重、健康评分变化、病理学、炎性因子表达等客观指标评价疗效。结果：选取12 Gy成功建立小鼠放射性十二指肠炎模型。对照组小鼠出现体重下降,厌食、少饮、稀便,偶有黏液血便,精神差,皮毛不光整、少动、弓背等表现。药物干预组小鼠一般情况较单纯照射组好转。中、西药干预组脾、肠系膜淋巴结组织IL-6,IL-1β,TNF-α的表达与对照组相较有下降趋势,外周血中三者浓度变化亦有所体现,中药组在降低炎性因子方面优势显著。镜下观察可见中、西药干预组较单纯照射组黏膜有所修复,改良Chiu氏法评分中西药组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论：六君子汤合左金丸治疗急性放射性十二指肠炎除能调节机体免疫、抑制急性损伤、促进局部组织修复外,还具有抗辐射肠道纤维化等不良反应潜力,其中调节炎性因子释放是疗效产生机制之一。     

脉络宁注射液中5种酚酸类成分血药浓度的LC-MS/MS测定及大鼠体内药代动力学研究

通过建立准确灵敏的LC-MS/MS法,测定8只SD大鼠,单剂量尾静脉注射（4 mL·kg^-1）脉络宁注射液后,血浆中绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰基奎宁酸（3,4-DCQA）、阿魏酸、肉桂酸的浓度,所测数据使用DASver 1.0软件进行处理,计算主要药动学参数。结果显示,绿原酸、咖啡酸、3,4-DCQA、阿魏酸、肉桂酸的线性范围分别为2.006~1 027 μg·L^-1（r=0.999 6）,1.953~1 000 μg·L^-1（r=0.999 7）,28.51~1.459×10⁴ μg·L^-1（r=0.998 9）,1.836~940.0 μg·L^-1（r=0.997 7）,4.780~2 447 μg·L^-1（r=0.998 6）。方法学考察5种酚酸类成分血浆样品反复冻融3次、-75 ℃放置20 d、室温放置4 h以及血浆样品处理后的分析物放置24 h的稳定性均良好,日内、日间变异系数（RSD）小于5.0%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中绿原酸药代参数：t_1/2为（49.78±12.81） min,AUC_0-t为（123.55±14.82） mg·min·L^-1, CL为（0.004 3±0.000 5） L·min^-1;咖啡酸药代参数t_1/2为（36.65±10.59） min,AUC_0-t为（91.67±11.77） mg·min·L^-1,CL为（0.005 7±0.000 7） L·min^-1;3,4-DCQA药代参数：t_1/2为（50.08±13.78） min,AUC_0-t为（278.34±31.82） mg·min·L^-1,CL为（0.001 6±0.000 2） L·min^-1;阿魏酸药代参数t_1/2为（51.39±15.52） min,AUC_0-t为（34.72±4.67） mg·min·L^-1,CL为（0.000 4±0.000 1） L·min^-1;肉桂酸药代参数t_1/2为（74.42±18.32） min,AUC_0-t为（34.63±4.82） mg·min·L^-1,CL为（0.007 7±0.001 1） L·min^-1。该文所建立的LC-MS/MS适用于绿原酸等5种酚酸类成分的药代动力学研究。     

氧化苦参碱体外抗乙型肝炎病毒作用

目的:体外观察氧化苦参碱(OM)抗乙型肝炎病毒(HBV)作用,并初步探讨其作用机制.方法:用125,250,500,1000,2000 mg·L-1OM连续作用于90％汇合度的HepG2.2.15细胞9d,以MTT比色法观察药物细胞毒性;用酶联免疫法测定细胞上清液中乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg),乙型肝炎病毒s抗原(HBsAg);采用荧光定量PCR法(FQ-PCR)测定细胞上清液中HBV DNA,细胞中HBV DNA和共价闭合环状DNA(cccDNA).结果:OM对细胞内HBV DNA和cccDNA,以及细胞外HBV DNA均有抑制作用,随着浓度升高抑制作用加强,2000 mg·L-1OM对细胞内HBV DNA,cccDNA和细胞外HBV DNA的抑制率分别为64.56％,52.12％,54.25％;对HBsAg和HBeAg的分泌也有抑制作用,且浓度越高、处理时间越长,抑制作用越明显;在相同条件下对HBsAg的抑制作用强于HBeAg,OM浓度为2000 mg·L-1时对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为51.59％,17.88％.结论:OM能有效抑制HepG2.2.15细胞中HBV复制,该作用是抑制病毒核酸复制和基因表达的结果.     

连翘酯苷对东莨菪碱模型小鼠学习记忆的影响及其机制研究

目的:研究连翘酯苷对东莨菪碱模型小鼠学习记忆的影响,并探讨其作用机制,为连翘酯苷抗阿尔茨海默病研究提供数据支撑。方法:昆明种小鼠,随机分为4组,分别为正常组,东莨菪碱模型组,多奈哌齐组(3 mg·kg-1)和连翘酯苷(200 mg·kg-1)组,每组12只。各组连续给药14 d。给药第14天,东莨菪碱模型组、多奈哌齐组和连翘酯苷组给予东莨菪碱(3 mg·kg-1),腹腔注射。20 min后,进行跳台实验。同时,观察连翘酯苷对乙酰胆碱酯酶(Ach E)和环磷酸腺苷-细胞外信号调节激酶通路的影响。另设一批实验,昆明种小鼠分为4组,分别为正常组,东莨菪碱模型组,维生素E组(100 mg·kg-1)和连翘酯苷(200 mg·kg-1)组,给药14 d后,断头处死动物,检测连翘酯苷对东莨菪碱模型超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),单胺氧化酶(MAO)的影响。结果:跳台实验获得期和巩固期,东莨菪碱模型组与正常组比较,安全期时间比率显著下降(P0.05),连翘酯苷显著增加安全期时间比率(P0.05)。连翘酯苷显著降低东莨菪碱模型小鼠大脑皮层和海马Ach E活性(P0.05)。连翘酯苷显著升高东莨菪碱模型小鼠海马P-ERK含量,与东莨菪碱组比较,具有显著性差异(P0.05)。同时,东莨菪碱组与正常组比较,显著降低小鼠大脑皮层和海马SOD活性、升高MDA含量、升高MAO活性(P0.05)。连翘酯苷能显著升高小鼠大脑皮层和海马SOD活性、降低MDA含量和MAO活性,与东莨菪碱组比较,具有显著性差异(P0.05)。结论:连翘酯苷可提高东莨菪碱模型小鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制模型小鼠大脑皮层Ach E活性,促进环磷酸腺苷(c AMP)表达,活化细胞外信号调节激酶(ERK)及抗氧化有关。     

替比夫定阻断乙肝病毒母婴传播的疗效和安全性研究

 目的 观察HBsAg和HBeAg双阳性孕妇妊娠晚期应用替比夫定阻断乙型肝炎病毒（HBV）母婴传播的疗效和安全性。方法 选择HBsAg和HBeAg双阳性且乙型肝炎病毒 DNA≥1×10⁶拷贝·mL^-1的孕妇80例,分为治疗组和对照组各40例。治疗组自孕28周开始口服替比夫定600 mg,1次·d^-1,至分娩时停药,对照组不服用替比夫定及其他抗病毒药。观察治疗组服药后出现的不良反应,并检测两组孕妇在孕28周、分娩时和产后6个月时血清乙型肝炎病毒 DNA水平;两组孕妇所产婴儿在出生时和1个月时肌注乙肝免疫球蛋白各200 IU,同时在出生时、1个月和6个月时肌注乙肝疫苗各10 μg,检测两组婴儿在出生时、6个月和12个月时血清HBsAg及乙型肝炎病毒 DNA的阳性率。结果 ①孕28周时治疗组与对照组孕妇血清乙型肝炎病毒 DNA水平比较,差异无统计学意义;分娩时治疗组孕妇血清乙型肝炎病毒 DNA（3.48±0.90）×10²拷贝·mL^-1较对照组血清乙型肝炎病毒 DNA（6.96±0.94）×10⁶拷贝·mL^-1明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;产后6个月治疗组与对照组孕妇血清乙型肝炎病毒 DNA水平比较,差异无统计学意义。②治疗组与对照组孕妇所产婴儿12个月时乙型肝炎病毒母婴传播阻断率分别为97.5％和75％,差异有统计学意义（P＜0.05）。③治疗组服药期间未见明显不良反应;两组婴儿出生时Apgar评分及发育指标差异均无统计学意义。结论 HBsAg和HBeAg双阳性孕妇在妊娠晚期服用替比夫定可有效阻断乙肝病毒母婴传播,安全性好。     

黑莓籽降血脂有效部位研究

目的: 研究黑莓籽石油醚部位、正丁醇部位及黑莓籽油对高脂血症小鼠的脂质代谢和脂质过氧化的影响. 方法: 120只小鼠随机分为12组:正常组,模型组,阳性对照组和石油醚部位高剂量组(800 mg·kg^-1),中剂量组(400 mg·kg^-1)和低剂量组(200 mg·kg^-1),正丁醇部位高剂量组(600 mg·kg^-1),中剂量组(300 mg·kg^-1)和低剂量组(150 mg·kg^-1),黑莓籽油高剂量组(1 000 mg·kg^-1),中剂量组(500 mg·kg^-1)和低剂量组(250 mg·kg^-1),采用灌胃高脂乳剂诱导高脂血症小鼠模型, 测定血清中甘油三脂(TG),总胆固醇(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性及肝、肾、脾系数. 结果: 石油醚部位低剂量组能显著性的降低血清中TG,TC,LDL-C和MDA的含量及肝、脾系数,升高HDL-C的含量及SOD的活性(P<0.05);正丁醇部位中、低剂量组均能显著性的降低血清中TG,TC,LDL-C,MDA的含量及肝、脾系数,升高SOD的活性(P<0.05);黑莓籽油中剂量组均能显著性的降低血清中TG,TC,MDA的含量及肝、脾系数,升高HDL-C的含量及SOD的活性(P<0.05);油高剂量组均能显著性的降低血清中TG,TC,MDA的含量及肝、脾系数,升高SOD的活性(P<0.05);正丁醇部位高剂量组能显著性的降低血清中TG,MDA的含量及肝、脾系数,升高HDL-C的含量及SOD的活性(P<0.05);油低剂量组能显著性的降低血清中TG,TC,LDL-C的含量及肝、脾系数,升高HDL-C的含量(P<0.05);石油醚部位高剂量组(TG,TC)和中剂量组(TC,HDL-C)及肝脾系数)能显著性改变,其他各指标虽不具有显著性,但与模型组相比,具有一定的效果. 结论: 黑莓籽石油醚部位、正丁醇部位及黑莓籽油具有一定程度的调节脂质代谢和抗脂质过氧化,改善脂质在小鼠肝脏和脾中的蓄积,减少氧化应激,推测其可能是黑莓籽有效部位降血脂的作用机制之一.     

乙肝清热解毒胶囊联合拉米夫定治疗活动性肝炎肝硬化临床研究

目的观察乙型肝炎清热解毒胶囊联合拉米夫定治疗活动性肝炎肝硬化的临床疗效。方法将乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性,中医辨证为肝胆湿热型的活动型肝炎肝硬化患者173例随机分为2组。治疗组102例予乙型肝炎清热解毒胶囊,每次6粒,每日3次口服;同时予拉米夫定,每次100 mg,每日1次口服,疗程1年。对照组71例予拉米夫定,每次100 mg,每日1次口服,疗程1年。观察2组血清HBV-DNA、HBsAg、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阴转率和肝功能变化。结果治疗组HBsAg阴转率为5.9%,对照组阴转率为7.0%,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组HBV-DNA阴转率67.6%、HBeAg阴转率32.4%,对照组HBV-DNA阴转率42.3%、HBeAg阴转率12.2%,2组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;肝功能指标改善及Child-Pugh评分下降治疗组较对照组明显（P〈0.01）。结论乙型肝炎清热解毒胶囊联合拉米夫定对肝胆湿热型的活动性肝炎肝硬化疗效理想,能有效抑制HBV复制。     

升麻治疗乙型病毒性肝炎的活性部位筛选

目的: 筛选升麻药材中治疗乙型病毒性肝炎的药用活性部位。 方法: 采用树脂分离技术,制备升麻总酚酸、总皂苷部位,并以拉米夫定为阳性药,选择HBV转基因小鼠作为受试动物,以小鼠血清中HBsAg及HBeAg为指标;以HepG2-2.2.15细胞株为模型,检测细胞内核心颗粒HBV DNA的变化,考察升麻水提液、总酚酸、总皂苷、升麻苷及阿魏酸5个组分对HBsAg及HBeAg的影响。 结果: 5个组别对小鼠血清中HBsAg及HBeAg均有一定的降低作用,且总酚酸显著降低HBsAg及HBeAg,与对照组有显著性差异(P<0.01),且阿魏酸是其中的有效成分;总皂苷可以降低HBsAg,与对照组有较显著性差异(P<0.05),但是升麻苷对HBsAg及HBeAg的作用均无显著性差异;升麻总酚酸能明显降低HepG2-2.2.15细胞胞浆核心颗粒HBV DNA水平(P<0.01)。 结论: 升麻中的总酚酸部位是其治疗乙型病毒性肝炎的药用活性部位,本研究为治疗乙型病毒性肝炎的药物开发提供了数据参考。     

钩藤碱对甲基苯丙胺依赖小鼠位置偏爱和海马谷氨酸受体1表达的影响

目的:观察钩藤碱对甲基苯丙胺依赖小鼠位置偏爱和海马谷氨酸受体1(GluR1)蛋白表达的影响。方法:随机将50只小鼠分为5组:空白对照组,甲基苯丙胺模型组(4 mg·kg-1),氯胺酮(15 mg·kg-1)组,钩藤碱低剂量(40 mg·kg-1)组,钩藤碱高剂量(80 mg·kg-1)组,每组每天给予相应的药物,连续4 d,建立小鼠位置偏爱模型;免疫组化法和Western blot法检测GluR1蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠在伴药箱中逗留的时间明显增多(P<0.01),成功复制甲基苯丙胺依赖的小鼠位置偏爱模型,与模型组比较,氯胺酮组、钩藤碱低、高剂量组均可以明显减少小鼠在白箱逗留的时间(P<0.01)。免疫组化结果显示,甲基苯丙胺模型组与正常对照组相比蛋白GluR1表达明显增强(P<0.01),而与模型组比较,氯胺酮组、钩藤碱低剂量和高剂量组蛋白GluR1表达减少(P<0.01);Western blot结果显示,与正常对照组比较,模型组GluR1蛋白表达量明显上调(P<0.01),与模型组比较,氯胺酮组、钩藤碱低剂量和高剂量组GluR1蛋白表达下调(P<0.01)。结论:GluR1蛋白在甲基苯丙胺依赖小鼠位置偏爱形成中发挥着重要作用。     

橘红多糖增强小鼠免疫功能及抗疲劳作用

目的:观察橘红多糖对小鼠免疫功能的影响及抗疲劳作用。方法:小鼠分为空白组、模型组、阳性药对照组(10g·kg-1剂量ig贞芪扶正颗粒混悬液)、橘红多糖低、中、高剂量(23,46,92 mg·kg-1),各组每日按10 mL·kg-1ig给药1次,空白和模型组ig给予等体积蒸馏水,持续30 d。第26日,除空白组外以不含2,4-二硝基氟苯(DNFB)的溶剂处理,其余各组以DNFB致敏,耳廓激发的方法建立迟发型超敏反应模型,计算激发后各组小鼠左右耳廓增重值;于第3周后除空白组外给予免疫抑制剂(氢化可的松40 mg·kg-1,肌注,隔天1次),共5次,建立免疫功能低下小鼠模型。计算末次给药1 h后小鼠胸腺、脾脏指数,观测橘红多糖对小鼠免疫功能的影响。采用小鼠负重游泳及耐缺氧试验,观察抗疲劳作用。结果:采用5%DNFB溶液致敏,1%DNFB诱发,制成迟发型超敏反应模型,造模后,小鼠耳显著肿胀,贞芪扶正颗粒组、橘红多糖46,92 mg·kg-1组能够增强迟发超敏效应(P<0.01,P<0.05),小鼠耳肿胀度分别达到(6.57±1.67),(8.29±2.41)mg。采用免疫抑制剂氢化可的松造免疫抑制小鼠模型,造模后小鼠胸腺指数、脾指数下降,贞芪扶正颗粒组、橘红多糖92 mg·kg-1组能显著提高免疫抑制小鼠脾脏及胸腺指数(P<0.01,P<0.05)。贞芪扶正颗粒组、橘红多糖(23,46,92 mg·kg-1)组能够显著延长小鼠负重游泳时间,游泳时间分别为(286±46),(188±34),(227±28),(291±48)s。贞芪扶正颗粒组、橘红多糖3个剂量组均能够显著延长小鼠耐缺氧时间(P<0.01,P<0.05),橘红多糖对增强小鼠免疫和抗疲劳作用均呈现剂量依赖性趋势。结论:橘红多糖具有增强免疫、抗疲劳的作用,多糖是橘红抗炎、增强免疫的有效部位。     

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区AKT及p-AKT表达的影响

目的: 观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠丝/苏氨酸激酶(serine-threonine kinase, AKT,又称PKB)和磷酸化的丝/苏氨酸激酶(phosphorylated serine-threonine kinase, 即p-AKT)表达的影响. 方法: 将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为5组,分别为模型组、罗格列酮组(10 mg·kg^-1·d^-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg^-1·d^-1),选取同月龄同背景的非转基因小鼠为对照组.连续灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法检测小鼠海马CA1区中AKT和p-AKT的蛋白表达. 结果: 免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区AKT和p-AKT阳性细胞均较对照组明显减少(P<0.05,P<0.01),与模型组相比,罗格列酮组与姜黄素高、中剂量组AKT和p-AKT阳性细胞均有明显恢复(P<0.05,P<0.01),其中姜黄素中剂量组p-AKT阳性细胞数增加最为显著(P<0.01).Western blot检测结果与免疫组化结果基本一致. 结论: 姜黄素可以使AD模型APP/PS1双转基因小鼠海马CA1区中减少的AKT和p-AKT细胞有所恢复,提示姜黄素可能通过调节AKT及其磷酸化过程,从而进一步调节PI3K/AKT途径的胰岛素信号转导通路发挥抗AD作用.