白桦脂酸在大鼠体肠吸收动力学的研究

目的:建立同时测定肠循环液中白桦脂酸和酚红浓度的HPLC-DAD法,并探讨白桦脂酸在大鼠各肠段的吸收动力学特征及不同药物浓度对吸收的影响。方法:采用大鼠在体肠吸收实验模型,并考察吸收部位、药物浓度和pH对药物吸收的影响。结果:在75～125 mg.L-1白桦脂酸的吸收速率与质量浓度呈线性关系,Ka基本保持不变;各肠段的吸收速率无显著性差异,十二指肠、空肠、回肠和结肠的Ka分别为(0.151±0.004 9),(0.159±0.005 6),(0.156±0.008 3),(0.149±0.004 1)h-1。结论:白桦脂酸在小肠中吸收良好,没有特定吸收部位;不同浓度对白桦脂酸在大鼠全肠道的吸收无显著影响,其在肠道的吸收呈一级吸收动力学特征,吸收机制为被动扩散。白桦脂酸是难溶性药物,可以通过增加药物的溶出度,进而提高药物的生物利用度。     

白桦脂酸抑制食管鳞状细胞癌增殖及相关机制的实验研究

 目的研究抗肿瘤药物白桦脂酸（BA）对人食管鳞癌KYSE170细胞的抑制作用及抗肿瘤作用机制。方法采用不同质量浓度(0、5、10、20、40、60、80、100 μg·mL-1)白桦脂酸处理KYSE170细胞,作用不同时间 (24、48、72 h)后 ,噻唑蓝（MTT）法检测KYSE170 细胞生长的短期抑制作用;不同质量浓度（0、5、20、40 μg·mL-1）白桦脂酸作用于细胞24 h后以克隆形成实验检测药物对细胞生长的长期抑制作用;不同质量浓度白桦脂酸 (10、60、100 μg·mL-1)作用KYSE170细胞 24、48 h后以流式细胞仪FITC Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡变化,不同质量浓度白桦脂酸（0、10、40 μg·mL-1）作用细胞24 h后以流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果噻唑蓝实验显示,不同质量浓度白桦脂酸对KYSE170细胞均有抑制作用,抑制效果呈时间和剂量依赖性,24、48、72 h的IC50分别为(5681±256)、(3973±277)和(2928±305)  μg·mL-1;克隆形成结果显示,0、5、20、40 μg·mL-1药物作用细胞后,克隆形成率分别为（8956+500）%、（6100+203）%、（3133+351）%和（1533+233）%,随白桦脂酸质量浓度增大而明显降低（P< 001）。凋亡结果显示, 各实验组KYSE170细胞凋亡率随白桦脂酸质量浓度加大和药物作用时间的延长明显增高（P＜ 005或001）。细胞周期结果显示,0、1、10 μg·mL-1白桦脂酸作用细胞24 h后,随药物质量浓度增大,G1期细胞比例减少,S期细胞比例不断增加,实验组与空白组对比均有统计学差异（P<001）。结论白桦脂酸能抑制人食管鳞癌KYSE170细胞的生长,这一作用可能是通过诱导细胞凋亡、阻滞细胞停留在S期来实现的。     

经去氧胆酸钠修饰的白桦脂酸醇质体的制备及其体外透皮效果研究

目的 制备并优化白桦脂酸（BA）-去氧胆酸钠（SDC）修饰醇质体处方,并考察其作为BA经皮给药载体的渗透特性。方法 采用乙醇注入法制备BA-SDC修饰醇质体,以包封率作为评价指标,采用正交试验法优化该醇质体处方,并考察其形态及粒径;采用Franz扩散池进行体外透皮吸收实验,比较BA-SDC修饰醇质体与脂质体、普通醇质体的经皮累积渗透量及渗透速率差异。结果 优化后BA-SDC修饰醇质体最佳处方：大豆卵磷脂、SDC和BA的质量比为18：1：1,乙醇体积分数为35%。按优化后处方制得的BA-SDC修饰醇质体的平均包封率为（93.8±1.6）%,平均粒径为（102.3±3.6）nm;体外透皮12 h的累积透过量为（99.62±9.44）μg/cm²,分别达到了普通醇质体、脂质体和10%异丙醇饱和溶液的1.67、3.85和8.33倍。结论 SDC修饰醇质体包封率高,促进BA透皮吸收的效果明显,是BA最有前景的透皮给药剂型之一。     

苦参素对不同载量DNA的慢性HBV携带者疗效观察

目的观察苦参素对不同DNA载量的慢性HBV携带者的疗效。方法将86例不同DNA载量的HBV携带者分为3组:低载量组(HBV DNA 102~104)27例,中载量组(HBV DNA 105~106)36例,高载量组(HBV DNA≥107)23例,分别给予苦参素片0.3 g口服,每日3次,疗程1 a。期间每3个月分别检测各组患者HBV DNA、ALT和乙肝两对半定量。结果治疗至48周时,3组HBV DNA均明显下降(P0.05),低载量组HBV DNA下降尤为明显(P0.01);低载量组累积HBe Ag血清转阴/转换率为40.74%,高载量及中载量组未见HBe Ag血清转阴/转换。3组均未见HBs Ag转阴/转换;高载量组与中载量组HBs Ag及HBe Ag滴度无明显变化(P0.05);而低载量组HBs Ag滴度显著降低(P0.01)。肝功能方面,高载量组与中载量组有轻度ALT升高,而低载量组未见ALT升高。结论苦参素片能抑制HBV DNA的复制,降低血清HBs Ag及HBe Ag滴度,尤其是对低载量HBV DNA疗效最佳。     

急性乙肝患者血脂水平的动态研究

目的:探讨急性乙型肝炎患者血清脂质水平变化与其预后的关系.方法:定期测定106例急性乙型肝炎患者的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平,并进行前后对比分析.结果:急性乙肝痊愈组血清的脂质水平明显高于急性乙肝慢性化组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:动态测定急性乙型肝炎患者血清脂质水平对判断其预后有着重要作用.     

浅谈中西结合对HBV感染及婴幼儿围产期的传播

围产期婴儿HBV感染的特征及传播阻断方式.单阳母亲、双阳母亲,新生婴儿如何阻断HBV传播.即中西结合对单、双阳母亲所产婴儿进行免疫球蛋白与疫苗配合防治.①不同免疫方案与保护率;②免疫失败的措施;③分娩、喂养、免疫加强.     

中医体质和HBV感染结局的相关性研究

目的:观察中医体质类型与乙型肝炎病毒(HBV)感染不同临床状态的关系,探讨中医体质因素在慢性乙型肝炎发病中的作用。方法:收集慢性乙型肝炎(CHB组)患者120例、慢性HBV携带者(ASC组)60例、自限性HBV感染者(SRHB组)60例,以王琦体质分类判定中医体质类型,比较各组间体质类型分布的差异。结果:(1)CHB组阴虚质、痰湿质的分布频率显著高于SRHB组,平和质的分布频率显著低于SRHB组,差异均具有显著性(P均0.05);(2)CHB组湿热质的分布频率显著高于ASC组,平和质的分布频率显著低于ASC组;(3)与ASC组相比,CHB组阴虚质、瘀血质有增多趋势,阳虚质有减少趋势,但差异未见统计学意义(P0.05)。结论:中医体质因素影响HBV感染后的临床结局,阴虚质、痰湿质、湿热质、瘀血质患者可能更易进展为CHB。     

叶下珠提取物对急性乙型肝炎小鼠乙型肝炎病毒复制及其抗原表达的影响

目的：观察叶下珠提取物在小鼠急性乙型肝炎病毒（HBV）感染模型中对HBV复制及其抗原表达的影响。方法 C57b/6小鼠尾静脉注射1.3倍HBV真核表达质粒（pHBV1.3）,20μg/只,建立小鼠急性HBV感染模型。实验小鼠随机分为正常组、病毒组及中药高、中、低剂量组,感染后第1日起,给药组分别给予相应剂量药物灌胃,连续3 d。感染后第4日,化学发光法检测血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）水平,PCR检测血清HBV-DNA含量;免疫组化法检测肝组织乙型肝炎核心抗原（HBcAg）、HBsAg表达。结果中药各剂量组均能明显降低感染小鼠血清中HBsAg、HBeAg含量,与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01）;中药高剂量组显著降低血清中HBV-DNA水平,与病毒组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,中药中、低剂量组血清HBV-DNA含量降低,但与病毒组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;中药高剂量组明显抑制了肝组织了 HBcAg 及 HBsAg的表达（P＜0.05）。结论叶下珠提取物明显抑制小鼠急性HBV感染模型小鼠HBV的复制与表达,具有直接抗病毒作用。     

应用雷公藤多苷灌胃建立小鼠急性肝损伤模型的研究

据报道,雷公藤多苷所致的肝损害类似急性病毒性肝炎,以肝实质细胞损伤为主[1,2]。本课题组曾对雷公藤多苷致小鼠急性肝损伤进行了初步探索,对其致明显急性肝损伤的剂量、时间及可能机理进行了研究[3],进一步建立了小鼠急性肝损伤模型现报告如下。1材料1.1试验药物雷公藤多苷片,上海复旦复华药业有限公司生产,批号040303。甘利欣胶囊,江苏正大天晴药业股份有限公司生产,批号040801。1.2动物昆明种小鼠,体重18-22g,雌雄各半,购自河南省实验动物中心,许可证号:410115。以普通鼠料喂养于河南中医学院动物实验中心,鼠料购自河南省实验动物中心,许…     

大黄素配伍对柯萨奇病毒B3感染小鼠的病毒抑制作用研究

目的:研究大黄素与姜黄素和苦参素的配伍组合对柯萨奇病毒B3感染小鼠的体内病毒抑制作用。方法:建立CVB3感染的小鼠模型24h后,用大黄素配伍姜黄素、苦参碱的复方药物1.0g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg三个剂量组连续15d进行治疗,观察感染小鼠的治愈率和死亡率,并取小鼠的脏器进行组织病理学观察、病毒分离和病毒滴度测定、免疫荧光法检测和RT-PCR测定病毒核酸。结果:经复方大黄素治疗后的染病小鼠发病症状明显减轻,死亡率下降;治疗组的小鼠心、肺、肾等组织中病毒滴度均低于阳性对照组和模型对照组;治疗组的小鼠心、肺、肾等组织切片的荧光反应不明显,荧光点显著少于阳性对照组和模型对照组;从小鼠脏器中提取病毒mRNA经RT-PCR、凝胶电泳分析,在0.5、1g/kg组中未检测出病毒核酸。实验还发现提取物组合比纯化合物组合毒性要低,疗效也好。结论:大黄素配伍姜黄素和苦参碱后能抑制CVB3病毒在小鼠心、肺、肾等脏器中的增殖,对小鼠脏器具有较强的保护作用。     

桦木酸的药理作用研究进展

桦木酸（betulinic acid,BA）属于羽扇豆烷型五环三萜类物质,广泛分布于多种植物中,具有抗肿瘤、抗艾滋病、免疫调节、抗氧化应激、抗菌、抗炎以及抗寄生虫等广泛的药理作用。由于BA具有优越的抗肿瘤和抗艾滋病活性,在恶性肿瘤和艾滋病等威胁人类健康的疾病防治方面具有广阔的应用前景。BA还能提高机体的抗氧化能力、增强免疫力,在机体的抗氧化损伤和免疫调节过程中发挥着重要作用。就BA的药理作用进行详细综述,为BA的研究和开发利用提供参考。     

RP-HPLC测定大叶紫珠中桦木酸的含量

目的:建立云南民间常用药大叶紫珠中桦木酸的含量测定方法。方法:采用Kromasil-C₁₈色谱柱(4.6mm×200mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(63∶37)为流动相,205nm为检测波长。结果:大叶紫珠中桦木酸与其他成分能得到很好的分离,考察3个不同来源的大叶紫珠叶中桦木酸的含量,不同来源桦木酸含量差异较大,其中云南大叶紫珠叶中桦木酸含量最高。测定线性范围为0.0166～0.332mg·mL^-1,r=0.9998,平均回收率为98.5%。结论:该法便捷、灵敏、准确,重复性好,可以控制该药材的质量。     

正交试验法优选酸枣仁中白桦脂酸的提取工艺

目的优化酸枣仁中白桦脂酸的提取工艺。方法以白桦脂酸和干浸膏得率为检测指标,采用L9(34)正交试验,考察乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间和提取次数4个影响因素,采用高效液相色谱法进行白桦脂酸测定。结果乙醇体积分数对提取物中白桦脂酸有显著影响,其他因素影响不显著,最佳提取工艺条件为3倍量95%乙醇热回流3次,每次2 h。结论优选得到的工艺稳定、方法可行。     

白桦酯酸及其衍生物的生物活性及作用机制研究进展

白桦酯酸是一种天然存在的五环戊烷型三萜类物质,通常是从白桦Betula platyphylla树皮中分离出来,在其他植物中也有发现,以游离糖苷和糖基衍生物的形式存在于不同植物中。通过对其化学结构的修饰可以得到多种多样的衍生物,研究表明白桦酯酸及其衍生物在抗肿瘤、抗病毒、消炎止痛、抑制脑神经及血管损伤和对其他常见疾病的治疗作用等方面具有积极的作用。综述了白桦酯酸及其衍生物的种类、生物活性及作用机制,以期为今后对其进一步的研究与应用提供理论参考。     

慢性乙型肝炎中医辨证分型的论证——血清和肝组织HBV抗原、HBVDNA以及病理变化与证型关系的研究

应用分子生物学和免疫组化等技术,对131例慢性乙型肝炎中医辨证分型进行了论证,发现肝郁脾虚型临床符合慢性迁延性肝炎(CPH)者占94.6%,肝组织病理呈CPH改变者为69.2%;血清HBeAg和(或)HBVDNA阳性占61.5%,肝组织HBsAg阳性率为69.2%,其中呈弥漫型者占44.4%,HBVDNA阳性率为33.3%。肝肾阴虚型临床符合慢性活动性肝炎(CAH)者占75.5%,肝脏病理呈CAH改变者占88.5%;血清HBeAg和(或)HBVDNA和肝组织HBsAg阳性率均为80.8%,后者弥漫型占阳性病例85.7%,高于肝郁脾虚型(P<0.05);肝内HBcAg阳性率为34.6%,其中浆型占阳性者55.6%,HBVDNA阳性率63.2%,高于肝郁脾虚型(P<0.05)。气滞血瘀型临床属CAH伴早期肝硬化者占75.0%,病变较重,HBV复制程度与肝郁脾虚型相近。     

星点设计-效应面法优化紫杉醇-白桦脂酸混合纳米混悬剂

目的制备一种紫杉醇-白桦脂酸混合纳米混悬剂,优化制备工艺。方法采用高压均质法,以泊洛沙姆188、卵磷脂为稳定剂,以稳定剂浓度、稳定剂比例、均质压力、循环次数为考察因素,以粒径及PDI为评价指标,采用星点设计-效应面法优化处方,并对其进行体外评价。结果最优工艺为稳定剂质量浓度0.6mg/m L,泊洛沙姆188-卵磷脂(2∶1),均质压力100 MPa,循环次数20次。最优工艺制备的纳米混悬剂平均粒径为(282.54±5.40)nm,PDI为0.242±0.020。紫杉醇-白桦脂酸混合纳米混悬剂中药物粒子呈棒状,再分散性与短期稳定性均良好,其中的紫杉醇和白桦脂酸均以无定形形式存在。制备成纳米冻干粉后,紫杉醇水中溶解度提高约90倍,白桦脂酸提高约100倍。在2h内纳米冻干粉中2种药物累积溶出百分率显著提高,均达到95%。结论采用星点设计-效应面法优化纳米混悬剂制备工艺是有效、可行的,纳米混悬剂可改善紫杉醇和白桦脂酸溶出。     

白桦酸对人胰腺癌细胞增殖、迁移、细胞周期和凋亡的影响

目的:研究白桦酸(BA)对人胰腺癌细胞(BxPC-3)增殖、迁移、细胞周期和凋亡的影响。方法:磺酰罗丹明B(SRB)方法测定BA对BxPC-3细胞的增殖抑制率,通过显微镜观察BxPC-3形态变化,用划痕法检测BxPC-3的迁移能力,流式细胞术检测BA对BxPC-3细胞周期的影响,Hoechst33342-PI双染色法观察细胞凋亡,Western Blot印迹检测Bcl-2,Bax的表达。结果:BA在体外明显抑制BxPC-3细胞的增殖,IC50为16.54 mg.L-1,BA在5 mg.L-1时即能抑制细胞的迁移;流式细胞术分析表明,BA可将BxPC-3细胞阻滞于G0期;Hoechst33342-PI双染显示,当BA质量浓度提高到20 mg.L-1以上,可见明显的凋亡细胞和死亡细胞;Western blot的结果说明,随着BA浓度的递增,Bax表达逐渐增加,Bcl-2表达逐渐减少,Bcl-2/Bax下降,并呈剂量依赖性。结论:BA具有明显抑制BxPC-3细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡的作用,有可能成为一个有效的治疗人胰腺癌药物。     

Isolation,characterization and biological activity of betulinic acid and ursolic acid from Vitex negundo L

Two pentacyclic triterpenoids, betulinic acid (3beta-hydroxylup-20-(29)-en-28-oic acid) (3), and ursolic acid (2beta-hydroxyurs-12-en-28-oic acid) (4), were isolated for the first time from leaves of Vitex negundo L. along with three other compounds; an aliphatic alcohol n-hentriacontanol (1), beta-sitosterol (2) and p-hydroxybenzoic acid (5). Their antifeedant activity against the larvae of an agricultural pest, the castor semilooper (Achoea janata), in a no-choice laboratory assay and their antibacterial activity against Bacillus subtilis and Escherichia coli, by the paper disc method, were tested. Ursolic acid (4) showed more effective antifeedant activity than the betulinic acid (3). However, both these compounds have shown a very mild antibacterial activity. The other three compounds; n-hentriacontanol (1), beta-sitosterol (2) and p-hydroxybenzoic acid (5) have shown a little antifeedant activity against the larvae and did not show any antibacterial activity.     

白桦脂酸对人Raji淋巴瘤细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 研究D类细胞周期蛋白(cyclin D3)在Burkitt淋巴瘤细胞Raji中的表达及白桦脂酸对其的影响.方法 MTT法检测细胞增殖活性,Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,RT-PCR法分析白桦脂酸作用于Raji细胞后cyclin D3 mRNA表达的变化,Western blotting法检测细胞内cyclin D3的蛋白表达.结果 白桦脂酸对Raji细胞有明显的增殖抑制作用,Annxin-V/PI双标法显示,白桦脂酸诱导细胞凋亡呈剂量依赖性.随着白桦脂酸剂量的加大,凋亡率增高.白桦脂酸作用Raji细胞后主要使细胞周期阻滞于G0/G1期,G0/G1期细胞比例随白桦脂酸剂量增大而逐渐增高,而S期细胞比例随白桦脂酸剂量增大而逐渐降低,对G2/M期细胞作用不明显.RT-PCR结果显示白桦脂酸作用于Raji细胞使cyclin D3 mRNA表达减少,并与其剂量呈正相关.Western blotting结果显示白桦脂酸使cyclin D3蛋白表达降低,呈剂量依赖性.结论 白桦脂酸抑制Raji细胞增殖并诱导细胞凋亡,可使细胞阻滞于G0/G1期,其可通过下调cyclin D3表达而发挥抗肿瘤作用.     

HPLC-ELSD法分析酸枣果中的白桦脂酸和熊果酸

目的 采用高效液相蒸发光检测器法对10个地区的野生酸枣果中的白桦脂酸和熊果酸进行研究.方法 WatersSunFire色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A为乙腈,B为0.3％乙酸水溶液(pH 2.8);洗脱程序为20％A(0min)-30％A (10 min)-60％A(20 min)-100％A (50 min).ELSD-UM 6000蒸发光检测器,数据采集为Trisep-2003软件.结果 10个地区酸枣果白桦脂酸质量分数范围为(3.97±0.04)-(7.35±0.18)mg/g,熊果酸质量分数范围为(5.73±o.23) ～(9.92±0.27)mg/g.聚类分析表明样品4、5、7、10、6、8、9有别于其他样品,归为一类.结论 本研究可为野生酸枣资源开发利用提供质量评价的依据.