肝素修饰人血SOD在家兔血液中的稳定性及在小鼠体内的抗凝血作用

报道了肝素修饰的人血ＳＯＤ在家兔血液中的稳定性及在小鼠体内的抗凝血作用。与天然ＳＯＤ相比，修饰酶在血液中的稳定性明显提高，半衰期由天然ＳＯＤ的１０ｍｉｎ延长至６２ｍｉｎ，同时修饰酶仍保持肝素的抗凝血作用。     

肝素修饰人血超氧化物歧化酶稳定性研究

报道了肝素对人血超氧化物歧化酶的化学修饰作用,并对修饰酶与天然酶的稳定性进行了比较研究,结果表明：修饰酶冻干品活力为天然酶的７０％,比活为４２０００ｕ／ｍｇ;修饰酶的热稳定性、酸碱稳定性及抗蛋白水解能力均比天然酶有较大的提高。     

一氧化氮在再灌流肾损伤中的作用

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）在肾缺血再灌流过程中的作用。方法：制作肾缺血再灌流模型,检测缺血６０ｍｉｎ,再灌流１５ｍｉｎ和２４ｈ的肾组织ＮＯ浓度、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性、亚硝酸盐／硝酸盐浓度（ＮＯ＾－２／ＮＯ＾－３）及丙二醛（ＭＤＡ）浓度。结果：肾缺血６０ｍｉｎ后ＮＯＳ活性降低,ＮＯ水平下降,再灌流１５ｍｉｎ后ＮＯＳ活性有所提高,再灌流２４ｈ,ＮＯＳ活性明显提高,ＮＯ水平提高,同时肾损伤逐渐明显     

低抗凝活性肝素修饰超氧化物歧化酶的药代动力学研究

用高碘酸钠活化低抗凝活性肝素（ＬＡＡＨ）修饰猪血红细胞Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ，制成ＬＡＡＨ（ＩＯ４）－ＳＯＤ。给兔１次静注修饰ＳＯＤ１００００ｕ／ｋｇ，药－时数据符合双室模型，经计算机求出药代动力学参数。修饰ＳＯＤ的分布半衰期和消除半衰期比修饰前延长至１．９和８．６倍。小鼠腹腔注射修饰ＳＯＤ２００ｕ／ｇ，酶活性主要分布于肝和肾，并能通过血脑屏障。     

低抗凝活性肝素修饰超氧化物歧化酶的药代动力学研究

用高碘酸钠活化低抗凝活性肝素（ＬＡＡＨ）修饰猪血红细胞Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ制成ＬＡＡＨ（ＩＯ４）－ＳＯＤ。给兔１次静注修饰ＳＯＤ１００００ｕ／ｋｇ，药－时数据符合双室模型，经计算机求出药代动力学参数，修饰ＳＯＤ的分布半衰期和消除半衰期比修饰前延长至１．９和８．６倍，小鼠腹腔注射修饰ＳＯＤ２００ｕ／ｇ酶活性主要分布肝和肾，并能通过血脑屏障。     

再灌注前后稀释血液对兔缺血再灌注心肌SOD和丙二醛的影响

观察应用右旋糖酐４０分别于再灌注前后稀释血液对兔缺血再灌注心肌ＳＯＤ活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量的影响。心肌缺血４５ｍｉｎ，再灌注１８０ｍｉｎ，复制急性心肌缺血再灌注模型。３０只兔随机分为３组，每组１０只。其中Ⅰ组（对照组）、Ⅱ组于再灌注后２０ｍｉｎ稀释血液；Ⅲ组于再灌注前２０ｍｉｎ稀释血液。结果：与Ⅰ组相比，Ⅱ组ＳＯＤ活性无明显变化，ＭＤＡ含量明显降低（Ｐ＜００５）；而Ⅲ组ＳＯＤ活性明显升高及ＭＤＡ含量显著降低（Ｐ＜００５）。提示：再灌注前后稀释血液对缺血再灌注心肌均有保护作用；而且再灌注前稀释血液的效果明显优于再灌注后稀释。     

脂质体携载SOD的实验研究

本文采用去垢剂透析法成功制备出携载ＳＯＤ的脂质体（Ｌ－ＳＯＤ），其直径为１０２ｎｍ，对ＳＯＤ的包裹率为２１％，９０％以上酶活性存在于脂质体内部。将Ｌ－ＳＯＤ注射到大鼠静脉血中，其半衰期超过４ｈ，明显长于天然ＳＯＤ（８ｍｉｎ）。表明Ｌ－ＳＯＤ优于天然ＳＯＤ，具有临床应用前景。     

天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞形态的影响

在建立人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）体外培养方法的基础上，观察了各种天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人ＳＭＣ形态以及表型的影响。在氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ），氧化修饰高密度脂蛋白（Ｏｘ－ＨＤＬ）和氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）的作用下，ＳＭＣ形态发生以下变化：胞体变大，由梭形变为不规则多边形，突起细而长，而且“谷”、“峰”样生长方式也发生改变；ＬＤＬ和ｖＬＤＬ对ＳＭＣ的形态亦有影响，但不如氧化修饰脂蛋白明显；ＨＤＬ则无影响。电镜下观察，在ＯＸ－ＬＤＬ的诱导下，ＳＭＣ胞浆中的肌丝较对照组明显减少，而高氏器，内质网和线粒体则明显增多。上述结果说明，ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＯＸ－ＬＤＬ、ＯＸ－ＶＬＤＬ和ＯＸ－ＨＤＬ的致动脉粥样硬化作用可能与刺激ＳＭＣ表型由“收缩”型向“合成”型转化有关。     

月桂酸修饰的超氧化物岐化酶保护红细胞抗氧化溶血作用的实验研究

目的：为了证实月桂酸修饰的超氧化物歧化酶（ＡＣ－ＳＯＤ）保护红细胞抗氧化溶血作用是否更优于未修饰的ＳＯＤ．方法：先在人的红细胞悬液中分别加入ＡＣ－ＳＯＤ（Ａ组）、ＳＯＤ（Ｂ组）、生理盐水（Ｃ组），于３７℃温育２０ｍｉｎ后，洗掉未结合在膜上的酶，再于三组红细胞悬液中均加入黄嘌呤（Ｘ）和黄嘌呤氧化酶（ＸＯ）以产生超氧阴离子（Ｏ－２）造成溶血．各组再分别温育３０ｍｉｎ和１ｈ，以红细胞加蒸馏水的全溶血试管作为对照，用分光光度法测光密度值，计算溶血率．结果：温育３０ｍｉｎ的溶血率，Ａ，Ｂ，Ｃ三组分别为１１．６±０．８６，１３．３２±１．２５和１４．３４±１．３８，Ａ组明显低于Ｂ组（Ｐ＜０．０５）．Ｂ组与Ｃ组间无明显差异（Ｐ＞０．０５）．温育１ｈ的溶血率分别为１６．３６±０．４８，２３．５４±１．４９和２７．６６±２．３０，Ａ组非常显著地低于Ｂ组和Ｃ组（Ｐ＜０．００１）．结论：月桂酸修饰的ＳＯＤ保护红细胞抗氧化溶血作用明显优于未修饰的ＳＯＤ．     

脂质体携载SOD的实验研究

本文采用去垢剂透析法成功制备出携载ＳＯＤ的脂质体（Ｌ－ＳＯＤ），其直径为１０２ｎｍ，对ＳＯＤ的包裹率为２１％，９０％以上酶活性存在于脂质体内部。将Ｌ－ＳＯＤ注射到大鼠静脉血中，其半衰期超过４ｈ，明显长于天然ＳＯＤ（８ｍｉｎ）。表明Ｌ－ＳＯＤ优于天然ＳＯＤ，具有临床应用前景。     

兔外周血内皮祖细胞的多功能分子影像探针标记及其在肿瘤模型中的活体示踪

目的:构建多功能分子影像探针——共轭化合物-1,体外标记兔外周血内皮祖细胞(endothelial pro-genitor cells,EPCs),并进行体内细胞示踪。方法:利用磁共振T1对比剂Gd、近红外荧光染料Cy5.5以及罗丹明合成共轭化合物-1,体外标记EPCs,采用四氮噻唑蓝(MTT)比色实验评价不同浓度bCD-PLL标记EPCs后对细胞增殖力的影响;流式细胞术分析对细胞周期的影响及不同孵育时间细胞荧光标记率。将标记共轭化合物-1的EPCs移植于乳腺癌荷瘤鼠模型,通过磁共振成像和近红外光学成像对移植细胞进行活体示踪。结果:共轭化合物-1的标记对EPCs增殖活性及细胞周期无明显影响;2μmol.L-1共轭化合物-1可有效标记细胞。磁共振成像和近红外光学成像表明标记的EPCs在移植后5 d肿瘤信号出现明显改变。结论:共轭化合物-1能有效标记兔外周血EPCs,细胞活力不受影响。两种活体成像均表明经标记的EPCs移植于乳腺癌荷瘤鼠模型后能够归巢至肿瘤组织,显示出共轭化合物-1的成像优越性。     

四氧嘧啶制作家兔糖尿病模型的观察研究

目的探讨四氧嘧啶制作家兔糖尿病模型建立的实验条件,评价模型的稳定性。方法研究禁食时间,四氧嘧啶给药途径和给药剂量,给药后的处理等因素对造模成功率、死亡率及血糖的影响,考察建模后的稳定性。结果禁食时间、给药途径、给药剂量、给药后的处理对造模影响较大,是影响造模的主要条件。结论选择禁食6h的健康家兔,以耳缘静脉注射130mg/kg的四氧嘧啶,注药后立即给饲料、青菜和水,可以获得成模率高、死亡率小、血糖持续稳定的糖尿病家兔模型。     

新西兰家兔大脑中动脉闭塞脑缺血模型建立的经验

目的在大鼠线栓法大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型的制作基础上,应用神经介入"微导丝导管"技术,建立一种改良的以家兔为实验对象的MCAO模型,为脑缺血研究提供新的模型。方法分离麻醉固定后的家兔颈部动脉,在用PE-50管特制的中空导管内插入合适的导丝经颈外动脉残端剪口再经颈内动脉插入颅内,堵塞大脑中动脉。24 h后进行神经功能评分。处死家兔后用TTC染色测定脑梗死体积。结果手术未影响家兔血气pH值、PO2、PCO2、平均动脉压(mean arterial blood pressure,MABP)及血糖水平;动物模型缺血后脑血流平均下降至插栓前的45.8%±16.2%;大脑中动脉缺血后24 h家兔行为学差异较大。脑组织TTC染色均匀,出现梗死的脑组织相对梗死体积百分比为9.43%±5.37%;动物模型成功率为54.3%。死亡原因为蛛网膜下腔出血。失败原因多为脑血管痉挛、脑血管解剖结构变异导致线栓位置有误。结论此模型的成功率为54.3%,用于脑缺血研究时应监测脑血流以及注意术中细小的操作环节。     

益心舒胶囊与氟伐他汀对动脉粥样硬化内皮功能的影响

目的观察益心舒胶囊与氟伐他汀对兔动脉粥样硬化内皮功能的影响。方法 32只新西兰大白兔随机分为正常对照组、高脂组、益心舒胶囊组、氟伐他汀组各8只,喂养4个月后耳缘静脉取血,采用酶学方法测定各组动物的血脂水平;处死动物后取胸主动脉,做内皮依赖性舒张功能检测,HE染色观察病理形态变化。结果高脂组TC、LDL明显高于正常对照组(P<0.05),益心舒组及氟伐他汀组的TC及LDL水平均明显低于高脂组(P<0.05),益心舒组低于氟伐他汀组(P<0.05)。益心舒组及氟伐他汀组舒张最大值高于高脂组(P<0.05),但两者均低于正常对照组(P<0.05)。益心舒组及氟伐他汀组血管病理改变均较高脂组减轻。结论益心舒及氟伐他汀治疗能改善血管内皮依赖性舒张功能,明显减轻实验性动脉硬化兔的动脉硬化程度。     

糖皮质激素受体水平与高眼压的关系

目的 探讨兔外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（GR）数量对预测糖皮质激素性高眼压的价值。方法 隔日给兔球结膜下注射地塞米松1个月,制作糖皮质激素性高眼压模型。实验前后采用3^H地塞米松放射配体法测定兔外周血淋巴细胞GR数目,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定外周血淋巴细胞GR的mRNA水平,比较GR数量和表达的变化并分析GR数量与高眼压的关系。结果 兔外周血淋巴细胞中GR数量和表达与地塞米松处理后眼压升高的程度呈正相关。同时,地塞米松对兔外周血淋巴细胞中GR有下调作用。结论 兔外周血淋巴细胞中GR数量和表达可以作为预测糖皮质激素性高眼压的一个指标。     

壳聚糖挂膜修饰聚丙烯网片与兔脂肪源性间充质细胞的黏附性研究

目的 研究壳聚糖挂膜修饰聚丙烯网片的技术参数及其与兔脂肪源性间充质细胞(ADSCs)的黏附性.方法 分别称取1、1.25和1.5g壳聚糖加2％的乙酸溶液、5％的戊二醛和50％的正庚烷溶解后,得到质量分数分别为2.0％、2.5％和3.0％的壳聚精铸膜液.将聚丙烯网片在壳聚糖铸膜液中反复浸泡、晾干后得到壳聚糖挂膜修饰的聚丙烯网片.将兔ADSCs接种于壳聚糖挂膜的聚丙烯网片上,培养24 h后观察细胞与材料的黏附性.结果 三种浓度的壳聚糖铸膜液挂膜修饰的聚丙烯网片柔软性均较挂膜前下降,壳聚糖铸膜液浓度越高,聚丙烯网片柔软性越低,而且3.0％铸膜液修饰的聚丙烯网片出现涂敷效果不均匀的现象.兔ADSCs在壳聚糖挂膜修饰的聚丙烯网片材料上生长良好.兔ADSCs与未挂膜的聚丙烯网片共培养24h后,表面未见细胞生长.结论 2.5％壳聚糖铸膜液为挂膜修饰聚丙烯网片的理想浓度.壳聚糖挂膜修饰的聚丙烯网片与兔ADSCs有良好的黏附性.     

VEGF基因在兔骨髓基质细胞中的表达及活性测定

目的 探讨人血管内皮细胞生长因子(VECF)基因修饰的免骨髓基质细胞对VEGF基因的表达及表达产物的生物学活性。方法 制备真核表达质粒pAdCMV-VEGF165,以Superfect转染试剂介导VFGF基因转染兔骨髓基质细胞,收获转染后24h至6d的转染上清和细胞,采用RT-PCR技术、免疫组化SABC法检测转染细胞中外源性VECF165基因的转录及表达,用血管内皮细胞增殖试验测定转染细胞培养上清中VEGF的生物活性。结果 VEGF基因转染的兔骨髓基质细胞可有效转录VEGF165,其分泌于培养上清中的表达产物可促进血管内皮细胞增殖,具有很强的生物活性。结论 VEGF基因转染的兔骨髓基质细胞可有效表达具有生物活性的VEGF。     

溶栓丸水浸液药理作用的初步研究

本文报道了溶栓丸水浸液对血块、纤维蛋白溶解作用及降压作用。     

高压氧对家兔心肌血流量的影响

目的观察高压氧（ＨＢＯ）对家兔心肌血流量的影响,并探讨其机理。②方法应用放射性核素标记蛙红细胞（９９ｍＴｃ－ＦＲＢＣ）作为示踪剂,解剖家兔,经左心耳注入示踪剂,将实验组家兔置于２０２．６５ｋＰａ高压氧环境下,呼吸纯氧１ｈ;对照组家兔则置于常压下１ｈ,观察家兔心肌血流量变化。③结果实验组家兔左心室壁血流量为（２．７４±１．３６）ｍＬ·ｇ－１／ｍｉｎ,右心室壁心肌血流量为（２．３９±１．２３）ｍＬ·ｇ－１／ｍｉｎ,室间隔血流量为（２．８６±１．４８）ｍＬ·ｇ－１／ｍｉｎ,均明显低于对照组（ｔ＝２．３９～２．６６,Ｐ均＜０．０５）。④结论在高压氧状态下家兔心肌血流量减小。