氧嗪酸钾致Wistar大鼠高尿酸血症急性模型的剂量探讨

目的:建立Wistar大鼠急性高尿酸血症模型,探讨氧嗪酸钾(oxonic aid potassium salt,OA)致Wistar大鼠高尿酸血症的合适剂量。方法:剂量依赖实验:Wistar大鼠腹腔注射不同剂量OA,对照组腹腔注射1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na);均于给药后0h、1h、2h、4h、8h后尾静脉采血,磷钨酸法检测血清尿酸值,筛选致Wistar大鼠血清尿酸值升高至接近高尿酸血症浓度的OA剂量;验证实验:以剂量依赖实验获得的合适用药剂量建模并同时腹腔注射降尿酸药别嘌醇(allopurinol,ALLO),对照组腹腔注射1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),均于给药0h、1h、2h、4h,8h后尾静脉采血,磷钨酸法检测血清尿酸值,评价所造模型的实用性。结果:300mg/kg OA剂量组血清尿酸值较对照组升高明显,且已经达到临床上对高尿酸血症定义的尿酸浓度,并能维持2h;腹腔注射ALLO能使所造模型尿酸值降低。结论:OA致Wistar大鼠高尿酸血症动物模型造模成功; Wistar大鼠腹腔注射300mg/kg剂量的OA为造模较合适剂量,模型可用于降尿酸药物评价。     

氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症动物模型的研究及评价

目的:通过对小鼠梯度给药,探讨氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症急性模型的用药剂量,并对不同的高尿酸血症动物模型进行比较,为高尿酸血症研究中动物模型的选择提供参考。方法:小鼠腹腔注射不同剂量氧嗪酸钾,诱导体内尿酸蓄积,在一定时间段内对小鼠进行尾静脉采血,测定血清尿酸值,得到小鼠急性高尿酸血症模型氧嗪酸钾合适剂量;再利用实时荧光定量技术检测小鼠给药后肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶基因表达水平的变化。依据文献显示的大鼠和树鼩高尿酸血症动物模型氧嗪酸钾用量和肝脏黄嘌呤氧化/脱氢酶mRNA表达水平的变化对三种动物模型进行分析比较。结果:小鼠腹腔注射600 mg/kg的氧嗪酸钾在给药后1～2 h时能形成较为稳定的急性高尿酸血症;腹腔注射氧嗪酸钾1.5h后,小鼠黄嘌呤氧化酶/脱氢酶mRNA的表达水平较对照组上升2.14倍。综合本实验结果和文献分析显示氧嗪酸钾致三种动物高尿酸血症的用药剂量不同,其中树鼩所需最小。结论:尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾均能诱导出大鼠、小鼠和树鼩急性高尿酸模型,但药物的敏感性差异较大,提示树鼩可作为一种潜在的高尿酸动物模型。     

急性慢性高尿酸血症大鼠模型的建立

目的：筛选出稳定可行的急性、慢性高尿酸血症大鼠模型，为抗高尿酸药物的研发提供模型工具。方法：急性高尿酸血症大鼠模型采用皮下注射次黄嘌呤(HX)+腹腔注射氧嗪酸钾(OAPS)和单纯腹腔注射OAPS的方法造模，在造模后0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、10 h眼眶取血，测定血尿酸、血肌酐及血清尿素氮水平。慢性高尿酸血症大鼠每天灌胃酵母膏(YE)+腺嘌呤(AP)溶液+定期腹腔注射OAPS溶液和每天灌胃乙胺丁醇(EMB)+OAPS混合溶液的方式造模，连续给药14 d，停止给药后继续观察14 d，在第4、6、8、11、14、15、16、18、20、22、25、28天大鼠眼眶取血检测血尿酸、血肌酐、血清尿素氮，在第14、28天取大鼠肾脏进行肾组织病理学检测。结果：2种急性模型均出现了尿酸值短暂性升高和急性肾脏损伤情况，而HX+OAPS联合模型高尿酸水平维持时间更长。2种慢性模型尿酸水平显著提高并出现了肾脏损伤，停止造模后，2种高尿酸水平可以维持1周左右，EMB+OAPS给药肾脏损伤更加严重，2周后各项指标仍处于高水平。结论：4种方法均可建立急性慢性高尿酸血症动物模型，但是HX+OAPS联合给药的急性模型和灌胃EMB+OAPS混合溶液的慢性模型病理症状更加明显，维持时间也更长，更适于药物的筛选。     

次黄嘌呤和尿酸酶抑制剂在大鼠高尿酸血症模型复制中的应用

目的考察不同剂量尿酸酶抑制剂对大鼠血清尿酸值的影响。方法采用相同剂量次黄嘌呤,不同剂量尿酸酶抑制剂单次和连续给予复制代谢性高尿酸血症模型,测定造模后不同时段大鼠血尿酸值。结果采用次黄嘌呤500 mg/kg,尿酸酶抑制剂100 mg/kg,可使受试动物血清尿酸值明显高于空白对照组(P<0.01),且可维持12 h。采用该剂量连续给予复制的大鼠高尿酸血症模型可使动物血清尿酸持续在饱和浓度以上。结论灌胃给予次黄嘌呤500 mg.kg-1,2次/d,同时皮下注射尿酸酶抑制剂100 mg.kg-1,连续给予,是复制持续性大鼠高尿酸血症模型的适当组合。     

慢性高尿酸血症动物模型的制备及改良

目的：制备高尿酸血症大鼠模型,并采用不同的给药方式,观察模型大鼠不同时间血尿酸的变化,以期建立稳定的慢性高尿酸血症动物模型,为研究慢性高尿酸血症、评估其治疗药物的疗效建立可靠平台。方法：予大鼠尿酸灌胃或自由饮水,同时,氧嗪酸钾（OA）分别灌胃或皮下注射,在不同时间点观察大鼠血尿酸的变化。结果：大鼠尿酸灌胃同时予OA后血尿酸显著升高,2h值最高,尤以OA皮下注射组血尿酸值最高,至6h仍维持较高水平,随着时间的延长血尿酸逐渐降低。结论：建立慢性高尿酸血症大鼠模型必须有赖尿酸及尿酸酶抑制剂同时、分次干预,才能形成稳定的高尿酸血症。     

痛风二号方对湿热型高尿酸血症大鼠血清肿瘤坏死因子α和血管活性肠肽水平的影响研究

目的:研究湿热型高尿酸血症(HUA)大鼠血尿酸、肿瘤坏死因子α(Tnf-α)和血管活性肠肽(VIP)的变化,以及痛风二号方对HUA大鼠血清尿酸、肿瘤坏死因子α、血管活性肠肽的影响。方法:将40只Wistar雄性大鼠,随机分为空白对照组、湿热高尿酸血症模型组(模型组)、别嘌醇组、痛风二号方组。空白对照组:正常喂饲,在其余三组进行模型建立和药物干预的时候予等量生理盐水行灌胃、腹腔注射等相应操作。湿热型高尿酸血症模型组:高脂高糖饮食、白酒灌胃、200g/L蜂蜜水自由饮用,持续14天。自第八天开始,酵母膏按比例混入高脂饲料喂饲联合腹腔注射氧嗪酸钾,制备大鼠模型;同时自第10天开始,将大鼠置入湿热环境中放置4天。痛风二号方组,别嘌醇组:造模同湿热型高尿酸血症模型组,自造模第八天起,灌胃及注射造模药物后6小时,分别给予大鼠痛风二号方(0.3g/kg)或别嘌醇(40mg/kg)灌胃干预,直到第14天。生化分析仪检测大鼠血清尿酸值;通过ELISA法检测大鼠血清VIP、Tnf-α。结果:模型组、两药物干预组(别嘌醇组、痛风二号方组)血尿酸值、血清Tnf-α、血清VIP值与空白对照组相比,差异均具有显著性统计学意义(P0.01),痛风二号方组血尿酸值、血清Tnf-α、血清VIP值与模型组相比差异具有显著性统计学意义(P0.01),别嘌醇组与模型组血尿酸值、血清Tnf-α差异具有显著性统计学意义(P0.01或P0.05),血清VIP差异无统计学意义(P0.05),两药物干预组之间血尿酸值、血清Tnf-α、血清VIP值差异具有显著统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:痛风二号方对湿热型高尿酸血症有明显的治疗作用,在降尿酸的同时还可降低Tnf-α及升高VIP,且疗效优于别嘌醇,对湿热型高尿酸血症有较好的防治作用。     

二丁颗粒抗痛风药效学研究

目的:研究二丁颗粒的抗痛风作用。方法:采用氧嗪酸钾单次造模和连续造模建立两种小鼠高尿酸血症模型,观察二丁颗粒的降尿酸作用;采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进实验,观察二丁颗粒抗炎作用;采用醋酸扭体实验,观察二丁颗粒镇痛作用;建立尿酸钠晶体诱导的大鼠急性痛风性关节炎模型,观察二丁颗粒抗痛风性关节炎作用。结果:40g/kg二丁颗粒能显著性降低高尿酸血症(单次造模和连续造模)小鼠血清尿酸水平,能够显著抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加;10g/kg二丁颗粒能够显著减少冰醋酸刺激引起的扭体次数;12g生药/kg和6g生药/kg在造模后4h、6h、8h能显著性的抑制痛风性关节炎大鼠关节肿胀,降低关节浸出液中IL-1β水平。结论:二丁颗粒具有较强的抗痛风作用。     

积雪草水提液对高尿酸血症模型大鼠尿酸代谢的影响

目的探讨积雪草水提液治疗高尿酸血症的可能作用机制。方法将48只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、苯溴马隆组、积雪草组,每组12只。除空白组外其余各组建立高尿酸血症大鼠模型,检测造模前后和给药7、14、21天各组大鼠血尿酸、尿尿酸浓度及24 h尿量,计算24 h尿酸总量。结果与空白组比较,造模后各组大鼠血尿酸、尿尿酸浓度、24 h尿酸总量均显著升高(P0.01)。与模型组比较,给药后各时间点苯溴马隆组和积雪草组血尿酸、尿尿酸浓度、24 h尿酸均明显降低;给药7天苯溴马隆组24 h尿量降低,积雪草组24 h尿量升高(P0.05或P0.01)。与苯溴马隆组比较,给药7天积雪草组血尿酸、24 h尿量升高,尿尿酸浓度、24 h尿酸总量降低(P0.05)。结论积雪草水提液可降低高尿酸血症模型大鼠血尿酸、尿尿酸浓度及24 h尿酸总量,并增加24 h尿量,对尿酸代谢作用的影响是其治疗高尿酸血症的可能作用机制。     

东革阿里乙醇提取物对氧嗪酸钾致高尿酸血症大鼠尿酸的影响

目的:评价东革阿里乙醇总提物对氧嗪酸钾致高尿酸血症模型大鼠的影响。方法:使用氧嗪酸钾诱导高尿酸血症大鼠模型,以大鼠血清中尿酸含量110μmol/L为造模成功。将造模成功的大鼠随机分为模型组、别嘌醇阳性对照组及东革阿里乙醇总提物高、低剂量组,给予相应药物处理。测定不同时间点大鼠血清尿酸水平。给药结束后检测大鼠肝脏和血清中黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)活性。病理组织切片HE染色方法检查东革阿里乙醇总提物对大鼠肾脏组织病理学的影响。结果:东革阿里乙醇总提物能显著降低大鼠血清尿酸水平及肝脏和血清中XOD、ADA活性,改善肾脏组织病理学改变。结论:东革阿里乙醇总提物能显著降低高尿酸血症大鼠尿酸水平,改善肾脏组织病理学改变。     

痛风汤对高尿酸血症模型大鼠肾脏功能的影响

目的:观察痛风汤对高尿酸血症大鼠肾功能的保护作用。方法:60只大鼠随机分为6组,正常对照组,模型组,痛风汤高、中、低剂量组和别嘌醇阳性对照组,每组10只;各组给予相应药物或生理盐水灌胃7d后,采用腺嘌呤+乙胺丁醇灌胃7d造模,继续灌胃给药3d;测定各组大鼠24h尿量、尿pH值及血肌酐、尿素氮和尿酸变化,水平变化情况。结果:与正常组比较,高尿酸血症模型组大鼠尿量增加,尿pH值降低;血肌酐、尿素氮及血尿酸水平升高,两组比较均具有统计学意义(P0.05)。痛风汤中、高剂量可以增加大鼠尿量,降低尿pH值,并能够降低大鼠血清肌酐、尿酸、尿素氮水平,作用于阳性药组相当。结论:痛风汤对高尿酸血症大鼠肾功能具有一定的保护作用。     

普洱茶提取物对高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响

目的:观察普洱茶提取物对实验性高尿酸血症小鼠血清尿酸的影响。方法:采用含5%氧嗪酸钾饲料喂饲小鼠形成高尿酸血症模型,从2wk开始给予普洱茶提取物,连续灌胃7d,7d后测定给普洱茶提取物血清尿酸。结果:普洱茶提取物给药7d,高、中剂量组大鼠血清尿酸浓度与模型组比较有显著差异(P0.05);低剂量组大鼠血清尿酸浓度与模型组比较无显著差异(P0.05)。结论:普洱茶提取物对氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症有明显的降尿酸作用。     

利湿通痹汤及其拆方对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎大鼠疗效机制研究

目的:观察利湿通痹汤及其拆方对高尿酸血症合并急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,GA)大鼠的疗效并探索其作用机制。方法:42只大鼠分为利湿通痹汤全方组,祛风通经组,清热利湿组,活血化瘀组,西药组,模型组和对照组。先建立大鼠高尿酸血症模型,然后在后关节腔内注射尿酸钠诱导大鼠GA模型,对照组予以等量生理盐水。以缚线法测量大鼠踝关节同一部位周径(取均值),观察其关节肿胀度;于造模48 h后腹腔静脉采血,测定血清尿酸(UA)、白介素-1β(IL-1β)水平及黄嘌呤氧化酶(XOD)活力。结果:利湿通痹汤及其拆方均可不同程度降低高尿酸血症合并GA大鼠关节肿胀度;降低血清IL-1β、UA水平,抑制XOD活力,以全方组最为明显(P0.01)。结论:利湿通痹汤及其拆方可通过降低IL-1β与UA水平、抑制XOD活力而发挥较好的治疗作用,拆方中以清热利湿类药物作用较强。     

高尿酸对小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体基因表达的影响

目的:研究高尿酸条件下尿酸盐阴离子转运体1(Urate anion exchanger 1,URAT1)、葡萄糖转运体9(glucose transporter 9,GLUT9)、有机阴离子转运体10(Organic Anion Transporter 10,OAT10)基因表达的动态变化。方法:(1)研究不同剂量尿酸对小鼠血尿酸水平的影响:遵循随机化原则将50只雄性昆明种小鼠分为5组(每组10只):分别为正常组、尿酸每天100、200、300、400mg/kg剂量组。每天2次腹腔注射尿酸磷酸盐溶液,共造模14天,确定最佳剂量。(2)确定最佳剂量后,小鼠腹腔注射最佳剂量尿酸每天300 mg/kg,复制高尿酸血症模型。在给予尿酸1、3、7、14天处死小鼠,用磷钨酸法测定小鼠血清尿酸水平和肝尿酸含量,用RT-PCR检测小鼠肾脏尿酸盐重吸收转运体URAT1、GLUT9、OAT10基因表达水平。结果:(1)腹腔注射尿酸每天300 mg/kg及400mg/kg能有效升高小鼠血尿酸水平(P<0.01),但400 mg/kg组小鼠死亡率高。而尿酸100、200 mg/kg组与正常组相比无统计学差异,300 mg/kg为最佳剂量;(2)与正常组相比,模型组血尿酸水平在造模1、3、7、14天均升高(P<0.05),造模成功;与正常组相比,模型组肝匀浆尿酸含量在造模1天显著升高(P<0.01);而造模3天、7天及14天均无统计学差异;与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏GLUT9基因表达水平在1、3、14天均增加(P<0.05);与正常对照组相比,模型组小鼠肾脏URAT1和OAT10基因表达水平在各时间点均无显著变化(P>0.05)。结论:在尿酸诱导的高尿酸血症小鼠模型上,模型组GLUT9基因在给予尿酸1、3、14天后表达均上调,但URAT1、OAT10的基因表达均无显著变化。     

拟黑多翅蚁抗痛风作用研究

目的:研究拟黑多翅蚁醇提物、水提物抗痛风作用。方法:昆明种小鼠、Wistar大鼠各90只,设正常对照组、模型组、阳性对照组及给药组(按生药量计为4,2,1 g.kg-1),ig给药,给药15 d,末次给药后,小鼠ip次黄嘌呤复制高尿酸血症模型,观察拟黑多翅蚁醇提物、水提物对高尿酸血症及正常小鼠尿酸水平的影响;大鼠足跖注射微晶型尿酸钠结晶,复制痛风性炎症模型,观察拟黑多翅蚁醇提物、水提物对痛风性炎症的影响。结果:正常对照组血清尿酸(131.09±45.78)μmol.L-1,模型组血清尿酸(198.63±47.27)μmol.L-1,与模型组比较,拟黑多翅蚁醇提物(4,2 g.kg-1)、水提物(4 g.kg-1)可以显著降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平(P<0.05),对正常小鼠血尿酸水平无显著影响;拟黑多翅蚁醇提物、水提物可显著抑制微晶型尿酸钠引起大鼠足跖肿胀,致炎后1～3 h肿胀较模型组有显著降低(P<0.05,P<0.01)。拟黑多翅蚁醇提物的药效略优于水提物。结论:拟黑多翅蚁有降低痛风模型血清尿酸水平及抗炎作用。     

迷迭香酸对高尿酸血症的影响

目的:研究迷迭香酸对次黄嘌呤为模型高尿酸血症小鼠的影响。方法:选用尿酸生成的前体物质次黄嘌呤(Hypoxanthine),i.p小鼠造成高尿酸血症动物模型,首先探讨造模剂的时效关系。应用低、中、高三个剂量(50,100,200mg·kg-1·d-1)迷迭香酸,i.g给药,连续3d。采用生化全自动分析仪测定小鼠血清尿酸水平。结果:选择次黄嘌呤i.p后45min血清尿酸水平的峰值造模,迷迭香酸(100,200mg·kg-1·d-1)均能显著减少小鼠高尿酸血症的血清尿酸水平,并有一定的量效关系,对正常小鼠的血清尿酸水平同样也有显著影响。结论:迷迭香酸对正常和高尿酸血症小鼠均具有降低血清尿酸水平的作用。     

痛风停药效学实验研究

目的:研究痛风停复方制剂治疗痛风的药效学作用,探讨其作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法:采用大鼠关节腔内注射尿酸钠(MSU)混悬液致大鼠踝关节肿胀模型实验,观察痛风停抗急性痛风性关节炎的作用;采用小鼠腹腔注射1g/Kg次黄嘌呤造成小鼠高血尿酸模型实验,观察痛风停对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响。结果:19.44g药材/Kg痛风停于致炎后1h、5 h均能降低尿酸钠(MSU)所致大鼠踝关节肿胀,与模型组比较,有显著性差异(P0.05);能降低致炎大鼠关节腔积液白细胞计数,与模型组比较,有显著性差异(P0.05);能降低次黄嘌呤所致的小鼠高血尿酸值,与模型组比较,有显著性差异(P0.05)。结论:痛风停具有抗痛风的作用。     

复方菊明对高嘌呤饲料饲喂SHR致高血压伴高尿酸血症模型大鼠降血压作用的研究

目的:探讨复方菊明(FJM)对高嘌呤饲料饲喂SHR致高血压伴高尿酸血症模型大鼠的降血压作用,初步探讨FJM降血压的作用机制。方法:SHR大鼠50只,随机分为5组:模型对照组、FJM(10.0 g/kg、5.0 g/kg、2.5 g/kg)剂量组、阳性对照组;正常对照组Wistar大鼠,雄性,每组10只。采用连续饲喂高嘌呤饲料8周建立SHR大鼠高血压伴高尿酸血症模型。每天在给予高嘌呤饲料造模的同时给药,给药第3周、第6周、第8周眼眶取血测定血清尿酸(UA);末次取血,测定血清一氧化氮(NO)含量,测定血浆内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肾素活性(RA)、醛固酮(ALD)、心钠素(ANP)、前列环素(PGI2)、血栓素B2(TXB2)的含量。结果:①造模第3周,FJM三个剂量组(10 g/kg、5.0 g/kg、2.5 g/kg)均已经开始降低高血压伴高尿酸血症模型大鼠收缩压、舒张压、平均动脉压水平。②FJM(10.0 g/kg、5.0 g/kg、2.5 g/kg)均能降低高血压伴高尿酸血症大鼠血清UA水平,降低血浆AngII、ANP水平,FJM(5.0 g/kg、2.5 g/kg)可降低血浆ET、RA、ALD、TXB2,升高血浆PGI2水平。结论:FJM具有显著的降尿酸作用的同时,具有显著的降血压作用。     

贞草痛风消胶囊治疗高尿酸血症的药效研究

目的:研究贞草痛风消胶囊治疗高尿酸血症的药理作用。方法:利用腺嘌呤和盐酸乙胺丁醇致大鼠高尿酸血症模型,灌胃给予贞草痛风消胶囊,共给药7 d。取血测尿素氮、肌酐、尿酸,取肾测定肾重指数并进行病理组织学检查。结果:贞草痛风消胶囊可减少模型大鼠血清中的尿酸含量、降低模型大鼠肾脏指数、减轻高尿酸血症引起的大鼠肾脏病理组织学变化。结论:贞草痛风消胶囊对高尿酸血症有良好的治疗作用。     

痹清胶囊对鸡高尿酸血症模型尿酸代谢的影响

目的:建立与人类代谢相似的高尿酸血症动物模型,观察中药复方制剂痹清胶囊对其血尿酸代谢的影响并探讨机理.方法:选用鸡为模型动物,以高蛋白,高钙饲料制备造模剂,塑造高尿酸血症模型,于造模第七天选取血尿酸水平大于80mg/L的蛋鸡,分组给药,观察痹清胶囊3个剂量组连续灌胃给药2周后,检测血尿酸和XOD活力的变化.结果:模型组用药后,模型鸡的血尿酸值显著下降,粪便尿酸排泄量增加,血清XOD活性降低.结论:痹清胶囊有明显的降尿酸作用,其机制可能是既抑制尿酸生成又促进尿酸排泄.     

秦皮总香豆素降低小鼠急性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究

目的:研究秦皮总香豆素对高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响,并初步探讨其作用机理。方法:采用氧嗪酸钾腹腔注射复制小鼠急性高尿酸血症模型,给予不同剂量秦皮总香豆素(440、220、110mg/kg),观察高尿酸血症小鼠血清尿酸水平及肝脏黄嘌呤氧化酶、鸟嘌呤脱氢酶和腺嘌呤脱氢酶水平。结果:秦皮总香豆素组小鼠的血清尿酸值明显低于模型组,其中以大、中剂量组为佳;对黄嘌呤氧化酶的活性有明显的抑制作用;而对小鼠鸟嘌呤脱氢酶和腺嘌呤脱氢酶的影响无统计学意义。结论:秦皮总香豆素能明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平,其机理可能和抑制黄嘌呤氧化酶的活性有关。