虎杖苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠PI3K/AKT/mTOR通路以及气道炎症的影响

目的 构建慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型,探讨虎杖苷对COPD大鼠PI3K/AKT/mTOR通路以及气道炎症的影响。方法 100只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松（0.2 mg/kg,阳性药）组和虎杖苷低、高剂量（30、60 mg/kg）组,每组20只。除对照组外,其他组熏香烟加气管注射内毒素法制备COPD模型,COPD造模前1 d开始ig给药,每天1次,持续30 d。ELISA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-6水平;RSE3020肺功能检测仪测定用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV₁）、呼气峰流速（PEF）;取肺组织4%甲醛固定后制作切片,HE染色,并进行肺组织损伤病理评分;Western blotting检测肺组织PI3K、AKT、mTOR蛋白表达。结果 虎杖苷高、低剂量组大鼠BALF中TNF-α和IL-6表达水平、肺组织损伤病理评分以及PI3K、AKT和mTOR蛋白表达均显著低于模型组（P<0.01）;虎杖苷高、低剂量组大鼠FVC、FEV1、PEF肺功能指标显著高于模型组（P<0.01）。结论 虎杖苷可以抑制COPD大鼠PI3K/AKT/mTOR通路,抑制气道炎症,发挥肺损伤保护作用。     

雾化吸入肝素对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠IL-8、TNF-α水平的影响研究

目的：研究雾化吸入肝素对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠IL-8、TNF-α水平的影响。方法：将大鼠随机均分为对照组、模型（生理盐水）组和肝素高、低剂量（12500、6250u·4mL-1）组,每组10只,后3组气管注入脂多糖并熏香烟以建立COPD模型,各组第8天起雾化吸入相应药物,连续3周。放射免疫法测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8和TNF-α的水平,收集血液和BALF进行白细胞和中性粒细胞计数,观察各组大鼠肺组织切片形态学变化。结果：与对照组比较,模型组大鼠肺泡结构紊乱、肺泡壁变薄断裂,模型组、肝素低剂量组血清和BALF中IL-8及TNF-α水平、白细胞总数、中性粒细胞比例均明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组比较,肝素高剂量组肺组织形态学变化明显好转,血清和BALF中IL-8及TNF-α水平、白细胞总数、中性粒细胞比例明显降低（P〈0.05）,肝素低剂量组上述指标相比均无明显差异。结论：雾化吸入肝素可能通过限制炎症细胞的活化及组织破坏修复、抑制内皮细胞与白细胞的强黏附过程,发挥减轻COPD炎症的作用。     

芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的保护作用

目的:研究芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的保护作用。方法:采用复合因素法复制大鼠COPD模型。90只SD大鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、固本咳喘片(0.72 g/kg)组与芪白平肺高、中、低剂量(2.88、1.44、0.72 g/kg)组,复制模型第31天开始灌胃给药,每天1次,连续30 d。测定大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和分类计数,测定BALF中白细胞介素(IL)-8、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠BALF中白细胞总数增加,中性粒细胞总数、淋巴细胞比例、中性粒细胞比例增加,单核-巨噬细胞比例减少,IL-6、IL-8、TNF-α含量增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,芪白平肺胶囊高、中、低剂量组大鼠BALF中白细胞总数、中性粒细胞比例、淋巴细胞比例减少,单核-巨噬细胞比例增加,IL-6、IL-8、TNF-α含量减少,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.01)。结论:芪白平肺胶囊能下调COPD模型大鼠支气管BALF中IL-8、IL-6、TNF-α的含量,减轻气道炎症反应而发挥治疗作用。     

前列腺素E_1对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道炎症的干预作用

目的探讨前列腺素E1(PGE1)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型气道炎症的干预作用。方法30只Wistar大鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组(每组n=10)。以气道内滴注脂多糖(LPS)和熏烟法建立COPD模型,治疗组在第2～28天(第15天除外)在熏烟前将PGE1脂微球载体制剂(凯时)2ml溶于8ml生理盐水,按2.5ml/kg从尾静脉注入大鼠体内,4周后对大鼠行肺功能测定,然后处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),对炎症细胞行总数和分类计数,对大鼠肺组织行病理学检查,采用免疫组织化学法测定肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果所建COPD模型的病理学改变符合人类COPD的特点。治疗组肺组织的病理改变较COPD模型组明显减轻但未恢复正常。治疗组BALF中TNF-α水平、白细胞总数及中性粒细胞数较COPD模型组下降,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组肺组织TGF-β1的表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TNF-α和TGF-β1在COPD大鼠气道组织的表达明显增强,PGE1能抑制COPD大鼠气道TNF-α和TGF-β1的表达,从而对COPD的气道炎症起到一定的防控效应。PGE1对COPD大鼠气道炎症有明显的抑制作用。     

小剂量红霉素对香烟烟雾诱导肺气肿中缺氧诱导因子-1α的抑制作用及其机制

目的探索小剂量红霉素对慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的抗炎作用及其潜在机制。方法将实验大鼠(雄性Wistar大鼠)随机分为3组,每组8只:正常对照组(C组),香烟烟雾模型组(CS组),红霉素+香烟烟雾模型组(ERY+CS组)。通过香烟烟雾诱导制备大鼠肺气肿模型,同时通过灌胃给予大鼠小剂量红霉素治疗。对比三组肺病理组织形态学改变,肺功能,肺泡灌洗液(BALF)中炎症介质(TNF-α及IL-8)表达以及肺组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。结果与C组相比,CS组肺平均内衬间隔(MLI)及平均肺泡数(MAN)均明显增加(P<0.05);与CS组相比,ERY+CS组MLI及MAN均明显好转(P<0.05)。与C组相比,CS组大鼠BALF中炎症介质TNF-α及IL-8表达均明显增高(P<0.01)。经红霉素干预后,ERY+CS组TNF-α及IL-8表达有所降低(P<0.01);香烟烟雾暴露后,CS组大鼠肺功能呈现明显的阻塞性通气功能障碍,FEV0.3及FEV0.3/FVC均降低(P<0.01)。经红霉素干预治疗后,ERY+CS组大鼠肺功能明显改善(P<0.01);免疫组化及Western blot结果表明,香烟烟雾诱导后,CS组大鼠肺气肿组织HIF-α蛋白表达均明显增高(P<0.01);红霉素干预后,ERY+CS组香烟烟雾诱导的HIF-α增高较前降低(P<0.05)。结论小剂量红霉素可通过调控抑制肺部HIF-1α的表达,从而发挥对香烟烟雾诱导的肺气肿的保护性作用,进而改善患者的肺部炎症反应,改善肺功能。     

环氧合酶-2抑制药塞来昔布对CCI模型大鼠疼痛及PI3K/AKT通路的影响

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制药塞来昔布对坐骨神经慢性结扎损伤(CCI)模型大鼠疼痛及正磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)通路的影响。方法:制备CCI大鼠模型,随机分为模型组、塞来昔布低(20 mg·kg^-1)、中(40 mg·kg^-1)、高(60 mg·kg^-1)剂量组、加巴喷丁(100 mg·kg^-1)组,每组12只;另取12只设为假手术组。以机械性疼痛刺激实验、热敏实验、神经传导速率实验分别检测各组大鼠缩爪阈值、热敏潜伏期、神经传导速度;以酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测血清中白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫印迹实验检测脊髓组织中PI3K/AKT通路蛋白(PI3K、pPI3K、AKT、p-AKT)表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠缩爪阈值、热敏潜伏期、神经传导速度明显降低(P<0.05),IL-6及TNF-α水平、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT明显增高(P<0.05);与模型组比较,塞来昔布低、中、高剂量组及加巴喷丁组大鼠缩爪阈值、热敏潜伏期、神经传导速度明显升高(P<0.05),IL-6及TNF-α水平、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT明显降低(P<0.05),塞来昔布各组呈剂量依赖性(P<0.05);塞来昔布高剂量组与加巴喷丁组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:COX-2抑制药塞来昔布可降低CCI模型大鼠炎症反应,减轻疼痛,改善其临床症状,可能是通过下调PI3K/AKT通路实现的。     

黄芩茎叶-桑白皮配伍对脂多糖致急性肺炎大鼠TRPV1信号蛋白的影响

目的探究黄芩茎叶-桑白皮配伍对脂多糖(LPS)致急性肺炎大鼠模型的保护作用及TRPV1信号蛋白的影响。方法将60只健康SPF级4～6周龄雄性大鼠依体质量随机分6组:空白组,模型组,阿莫西林克拉维酸钾片阳性组(85 mg·kg-~1),黄芩茎叶-桑白皮配伍高、中、低剂量(16、8、4 g·kg-~1)组,每组10只,灌胃10 d,1次·d-~1,空白组与模型组灌胃生理盐水(10 mL·kg-~1)。末次给药2 h后,除空白组外其余各组均于大鼠尾静脉注射LPS(6 mg·kg-~1)建立急性肺炎模型,造模6 h后麻醉、取材,计算大鼠右肺组织的湿/干质量(W/D)比值;测定大鼠肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和中性粒细胞数;ELISA法检测BALF和血清中IL-1β、TNF-α炎症因子水平;HE染色观察肺组织病变程度;RT-PCR法分析大鼠肺组织TRPV1基因表达量;Western blot检测肺组织中TRPV1蛋白表达水平。结果相较空白组,模型组BALF中蛋白含量与中性粒细胞数,BALF和血清中IL-1β、TNF-α炎症因子含量及肺组织中TRPV1基因显著升高(P<0.01)。不同剂量的黄芩茎叶-桑白皮配伍对LPS诱导的急性肺炎大鼠具有保护作用,可不同程度降低BALF中蛋白含量和中性粒细胞数,改善BALF和血清中IL-1β、TNF-α水平和肺组织损伤程度,减少肺组织中TRPV1的基因和蛋白表达。结论　黄芩茎叶-桑白皮配伍对LPS致急性肺炎大鼠具有保护作用,作用机制可能与降低机体炎性因子产生和下调TRPV1信号蛋白有关。     

罗格列酮对百草枯致大鼠肺损伤的炎症抑制作用

目的：研究罗格列酮对百草枯致大鼠肺损伤过程中的炎症抑制作用机制。方法将72只SD雄性大鼠随机分成3组,每组24只。模型对照组：腹腔注射百草枯20 mg·kg-1;罗格列酮组：腹腔注射百草枯前1 h,腹腔注射罗格列酮10 mg·kg-1;空白对照组：腹腔注射0.9％氯化钠溶液1 mL。注射百草枯后4,8 h及1,3 d,收集各组大鼠血清和肺组织标本,组织切片苏木精-伊红( HE)染色进行肺损伤评分,采用酶联免疫吸附法( ELISA)检测血清白细胞介素-1β( IL-1β)和肿瘤坏死因子-α( TNF-α)含量,采用免疫组化方法检测NF-κB蛋白在肺组织的表达,利用Western blot法检测肺组织核因子-κB (NF-κB)和激活蛋白(AP-1)蛋白表达水平。结果模型对照组大鼠血清炎性细胞因子IL-1β和TNF-α含量明显增加。罗格列酮组肺组织损伤程度明显降低,血清IL-1β和TNF-α含量减少,肺组织NF-κB和AP-1蛋白的表达降低。结论罗格列酮可以抑制百草枯中毒大鼠肺组织NF-κB和AP-1蛋白表达,减少IL-1β和TNF-α分泌,对百草枯所致大鼠肺损伤炎症有抑制作用。     

辛伐他汀对慢性阻塞性肺病模型大鼠的治疗作用及其机制研究

目的研究慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠应用辛伐他汀治疗的作用机制。方法雄性健康SD大鼠60只随机分为研究组、模型组、对照组,每组20只,研究组、模型组大鼠建立COPD模型。2周后研究组予辛伐他汀灌胃,模型组、对照组予生理盐水灌胃,连续8周。观察3组肺泡灌洗液(BALF)细胞总数、分类计数水平、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,血清IL-8、TNF-α、C反应蛋白(CRP)浓度。结果造模后COPD大鼠支气管管壁及血管周围均有多种炎性细胞浸润,肺泡壁变薄,大量融合形成大疱。3组BALF细胞总数、分类计数水平、IL-8、TNF-α浓度和血清IL-8、TNF-α、CRP浓度均有明显差异(P<0.05)。结论 COPD大鼠应用辛伐他汀治疗,可使BALF、血清中的炎症因子降低,减轻气道、肺组织炎症,从而达到治疗目的。     

罗格列酮对大鼠肺纤维化的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为4组,即生理盐水对照组、罗格列酮对照组、博莱霉素组、罗格列酮干预组,经气管内注射博莱霉素建立肺纤维化模型。HE染色及Masson染色观察肺组织形态学变化;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数及乳酸脱氢酶(LDH)浓度;测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果博莱霉素气管内注入后大鼠肺Ash-croft评分,胶原沉积、羟脯氨酸含量及BALF中LDH水平与生理盐水对照组比较明显增加(P均<0.05);给予罗格列酮干预后,上述指标均下降(P均<0.05)。生理盐水对照组和罗格列酮对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化过程中,罗格列酮可减少胶原沉积,抑制肺纤维化。     

预防性使用英夫利西单抗对肺气肿模型大鼠气道炎症的影响研究

目的:探讨预防性使用英夫利西单抗对肺气肿模型大鼠气道炎症的影响。方法:取大鼠随机分为正常对照组、模型组和干预组(英夫利西单抗5mg·kg-1),每组13只,后2组建立肺气肿模型。当烟雾暴露1个月时,各组皮下注射相应药物,每隔10d注射1次;烟雾暴露74d后,下腔静脉抽血,处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),检测各组大鼠BALF中中性粒细胞数和巨噬细胞数各占白细胞总数的百分比,血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-8、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的浓度,观察各组大鼠肺组织病理变化,检测肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)。结果:与模型组比较,干预组MLI、中性粒细胞数占白细胞总数的百分比明显减少,巨噬细胞数占白细胞总数的百分比、MAN明显增加,血清和BALF中TNF-α、MMP-9浓度均明显降低,仅BALF中IL-8浓度明显降低(P均<0.05)。正常对照组少数大鼠肺组织可见轻度炎症变化,模型组出现较多慢性炎症细胞浸润,干预组较模型组症状相对减轻。结论:预防性使用英夫利西单抗干预可减轻肺气肿模型大鼠的气道炎症,其可能通过拮抗细胞因子和抑制局部炎症细胞浸润而发挥作用。     

尼可地尔对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症的影响

目的观察钾通道开放剂尼可地尔对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和气道炎症细胞表面黏附分子CD11b表达的影响。方法18只Wistar大鼠分为3组:对照组、模型组和治疗组,每组6只。以气道内滴注脂多糖(LPS)和熏烟法建立COPD模型,治疗组从第2天起每天熏烟前以尼可地尔3 mg.kg-1灌胃,对照组同时予0.9%氯化钠溶液。4周后收集支气管肺泡灌洗液(BALF),对炎症细胞行总数和分类记数,对大鼠肺脏行病理学检查,并采用免疫组化法检测炎症细胞表面CD11b的表达,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IL-6、TNF-α的表达水平。结果模型组BALF中IL-6、TNF-α及CD11b的表达明显高于对照组(P<0.05),而治疗组的表达较模型组明显降低(P<0.05)。结论IL-6、TNF-α和CD11b在COPD大鼠气道的表达明显增多,尼可地尔能抑制COPD模型大鼠气道炎症细胞表面CD11b的表达和BALF中IL-6、TNF-α的表达,从而对COPD的气道炎症起到一定的防治作用。     

罗格列酮对内毒素诱导气道MUC5AC表达的调控

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮对内毒素所致大鼠气道MUCSAC表达的影响及其机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组（A组）、罗格列酮对照组（B组）、脂多糖组（LPS组）（C组）、以及低、中、高剂量罗格列酮组（D组、E组和F组）。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-10浓度。免疫组化染色及实时荧光定量逆转录-PCR检测气道肺组织MUC5AC蛋白及mRNA表达。结果与生理盐水对照组比较,LPS组BALF中TNF-α、IL-1β和IL-10浓度,以及气道肺组织MUC5AC蛋白和mRNA表达增加（P〈0．01）;TNF-α、IL-1β与MUC5AC mRNA表达呈正相关（r分别为0．851,0．803。P〈0．05）;IL-10浓度与MUC5AC mRNA表达呈负相关（r为-0．812,P〈0．05）。给予低、中、高剂量罗格列酮干预后,D组、E组和F组BALF中TNF—α浓度及MUC5AC蛋白、mRNA表达均逐渐降低,IL-10水平逐渐升高,各组间差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论罗格列酮对内毒素诱导的气道黏液高分泌有拮抗作用,其具体机制可能与调节炎症反应,下调气道MUC5AC转录有关。     

薄型子宫内膜 PI3K、AKT、p-AKT 的表达研究

目的：研究磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶（AKT）、p-AKT 在薄型子宫内膜组织中的表达情况,探索 PI3K/ AKT 信号通路在薄型子宫内膜中作用。方法收集2013年8月至2015年1月妇科子宫内膜40份,正常内膜组20份,薄型内膜组20份。采用 RT-PCR 检测 PI3K、AKT mRNA 表达,免疫组化 S-P 法 PI3K、AKT、p-AKT 蛋白质表达。结果 PI3K 及 AKT mRNA 和蛋白质表达在薄型内膜组明显降低,2组差异有统计学意义（ P ＜0.05）。p-AKT 蛋白质表达在薄型子宫内膜组明显降低,2组对比差异有统计学意义（ P ＜0.05）。PI3K、AKT 及 p-AKT 蛋白质表达水平呈正相关（ r 值分别为0.708、0.651、0.650、0.632、0.611、0.623,P ＜0.05）。结论薄型子宫内膜组织增殖期 PI3K、AKT 及 p-AKT 表达下降,其发生及发展可能与 PI3K/ AKT 信号通路有关。     

麻芩消咳颗粒平喘消炎作用研究

目的探讨麻芩消咳颗粒的平喘抗炎作用。方法SD大鼠随机分为6组,分别为肺宁颗粒2.5 g·kg^-1组、麻芩消咳颗粒(1、2、4 g·kg^-1)组、模型组和溶剂对照组。第0、7天皮下注射卵蛋白混悬液致敏。第15天开始给药并用1%的OVA溶液激发哮喘,每天给药1次,连续给药4周。给药结束后检测大鼠肺泡盥洗液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)含量及血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素4(IL-4)水平,观察肺组织病理学变化,Western blot检测肺组织中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达水平。结果麻芩消咳颗粒2 g·kg^-1能够降低大鼠肺泡盥洗液中白细胞介素6、白细胞介素17含量及血清中免疫球蛋白E、白细胞介素4水平,降低PI3K、ATK磷酸化水平。结论麻芩消咳颗粒对卵蛋白诱发的大鼠过敏性哮喘模型有显著的平喘抗炎作用,与PI3K/AKT调节的炎症信号通路有关。     

二甲双胍通过miR-129-5p缓解脓毒症相关肺损伤

目的 探究二甲双胍(metformin, MET)与miR-129-5p在脓毒症相关肺损伤中的相互作用及其可能的作用机制。方法 脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导MHS细胞构建脓毒症细胞模型,盲肠结扎穿孔建立脓毒症动物模型,MET干预细胞、动物模型,CCK-8、流式细胞术检测细胞活力及凋亡,RT-qPCR测定miR-129-5p表达变化,酶ELISA测定TNF-α、IL-6、IL-1β炎症因子表达,HE染色探索肺组织病理学改变,并测量肺干湿比重(D/W);Western blot测定PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白水平。结果 与模型组相比,MET处理可抑制细胞凋亡并提高细胞活力。还可降低TNF-α、IL-6、IL-1β,上调miR-129-5p的表达。而过表达miR-129-5p能改善LPS诱导的炎症反应,敲低miR-129-5p则显示出相反的炎症调控反应,并减弱MET的保护作用。在小鼠模型中,MET处理可下调TNF-α、IL-6、IL-1β水平,减轻肺水肿,提高其存活率。此外,MET可使LPS诱导的PI3K/AKT通路激活,上调p-PI3K、p...     

脐带间充质干细胞外泌体对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部炎症的作用机制探讨

目的 探讨人脐带间充质干细胞外泌体对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺部炎症的作用及机制。方法将18只SD雄性大鼠随机分为Control组、COPD组、COPD+Exo组,每组6只;COPD组、COPD+Exo组大鼠采用香烟烟熏+脂多糖（LPS）雾化吸入的方法建立COPD大鼠模型,COPD+Exo组经尾静脉注射100μL人脐带间充质干细胞外泌体稀释液（含2×107个外泌体）,Control组和COPD组注射等量的磷酸盐缓冲液。干预后1周处死大鼠,收集外周血、肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。HE染色观察大鼠肺组织病理改变,全自动血细胞分析仪计数外周血炎性细胞数目,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BALF和血清中白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α水平,qRTPCR检测肺组织中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达,Western blot检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB p65)和核因子抑制蛋白（IκBα）的表达。结果 Control组大鼠肺泡结构完整、形态规则;COPD组大鼠肺泡结构紊乱,部分肺泡不规则扩张...     

吡拉米司特在大鼠急性肺损伤模型中降低PDE4活性与TNF-α/IL-10平衡有关

目的观察PDE4活性与TNF-α/IL-10平衡在脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤模型(ALI)中相互关系,探讨选择性磷酸二酯酶4抑制剂吡拉米司特(piclamilast)对ALI的作用及机制。方法脂多糖(LPS)诱导大鼠ALI模型,设对照组、模型组、吡拉米司特组(1、3、10mg.kg-1)和地塞米松组(1mg.kg-1),常规细胞形态学检测肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中中性粒细胞的浸润情况,比色法测定BALF中超氧阴离子自由基(O2.)和中性粒细胞髓过氧化酶(MPO),ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10含量,高效液相(HPLC)法测定肺组织中PDE4活性。结果①吡拉米司特(1、3、10mg.kg-1)灌胃给予能够抑制BAL中MPO、O2.的增加,改善LPS诱导的大鼠ALI模型BALF中的炎症细胞聚集和肺水肿程度,②吡拉米司特可抑制LPS诱导的大鼠ALI肺组织TNF-α上升(P<0.05～0.01),并能明显提高LPS引起的大鼠ALI肺组织IL-10分泌下降,③大鼠ALI模型肺组织中PDE4活性明显上升(P<0.01),吡拉米司特预处理可抑制PDE4活性的上升,而且其对PDE4活性抑制性变化与TNF-α/IL-10比值的变化基本一致。地塞米松1mg.kg-1也能降低TNF-α和升高IL-10水平,调节TNF-α/IL-10平衡关系,但DXM不能抑制PDE4活性的升高。结论TNF-α/IL-10可能是ALI病理生理学的一对重要的平衡性细胞因子。吡拉米司特可能通过抑制PDE4活性,调节TNF-α/IL-10平衡改善LPS诱导的大鼠ALI。     

鼠曲草提取物对COPD模型大鼠气道炎症的抑制作用及对NF-κB通路的影响

目的:研究鼠曲草提取物对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠气道炎症的影响及作用机制。方法:大鼠随机分为正常组,模型组,鼠曲草提取物低、中、高剂量组(0.75,1.5,3g·kg^-1)和地塞米松组(阳性对照药,27mg·kg^-1),每组9只。除正常组外,其余各组大鼠采用香烟烟熏联合气管内滴注脂多糖建立COPD大鼠模型。造模15d后,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠溶液,每日1次,连续14d。末次给药后,检测各组大鼠肺功能;HE染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫法检测肺泡灌洗液、血清中IL-6、IL-8、IL-17、IL-1β、TNF-α、TGF-β含量;RT-PCR法检测右肺组织中NF-κB mRNA的相对表达量;Western blot法检测右肺组织中NF-κB、IKKβ、IκBα及其p-IκBα蛋白的相对表达量。结果:不同剂量的鼠曲草提取物干预后,均可显著提高大鼠肺功能参数FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC,明显降低肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、TNF-α及血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α、TGF-β含量,改善大鼠肺组织病理变化,同时显著降低p-IκB、IKK蛋白及NF-κB mRNA和蛋白相对表达量。结论:鼠曲草能够改善COPD模型大鼠的肺功能,减轻肺组织病理损伤,抑制炎症反应,其作用可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

阿奇霉素对哮喘致敏大鼠气道炎症及Th1/Th2失衡的调节作用

目的:探讨阿奇霉素对哮喘(OVA)致敏大鼠气道炎症及Th1/Th2失衡的调节作用。方法:SD大鼠40只,随机分为生理盐水组、哮喘模型组、地塞米松组以及阿奇霉素组,每组10只。利用卵白蛋白(Ovalbumin,OVA)/Al(OH)3致敏与OVA雾化吸入激发建立大鼠过敏性气道炎症模型,收集肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞分类计数。采用ELISA法测定肺泡灌洗液中IL-2、IL-4、TNF-α与ET-1的表达情况。光镜观察肺组织病理结构变化。结果:OVA模型大鼠肺泡灌洗液中的中性粒细胞、淋巴细胞以及嗜酸性粒细胞含量明显增加;HE染色观察肺组织病理结构出现明显的支气管上皮脱落、杯状细胞增生,支气管周围嗜酸性粒细胞明显浸润现象;BALF中IL-2、IL-4、TNF-α与ET-1的表达均明显高于生理盐水对照组(P<0.05)。阿奇霉素则显著降低肺泡灌洗液中中性粒细胞、淋巴细胞以及嗜酸性粒细胞含量;明显改善支气管上皮脱落、杯状细胞增生,支气管周围嗜酸性粒细胞浸润现象;BALF中IL-2、IL-4、TNF-α与ET-1的表达也明显低于OVA模型大鼠(P<0.05)。结论:阿奇霉素通过调节Th1/Th2失衡对过敏性哮喘的气道炎症具有明显的治疗作用。