微量稀释法检测酵母菌最低抑菌浓度

目的了解临床常见酵母菌对抗真菌剂的体外药敏试验,以指导临床医生合理使用抗生素.方法收集2001年2～3月临床分离酵母菌共54株,应用微量稀释法测定54株酵母菌对两性霉素、酮康唑和氟康唑的最低抑菌浓度(MIC).结果酵母菌对两性霉素的MIC值在0.25～1.0μg/ml之间,氟康唑的MIC值在2.0~8.0μg/ml之间.酮康唑的MIC值>16μg/ml.结论酵母菌对两性霉素的耐药率最低(0%),其次为氟康唑(18.5%),酮康唑耐药率最高(79.6%).微量稀释法方法简便,结果较可靠,可用于常规检测酵母菌的药敏试验.     

78株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度及耐药性分析

目的了解川北地区鲍曼不动杆菌的耐药性。方法细菌耐药性的检测采用琼脂稀释法。收集我院附属医院2005年1月-2007年3月临床分离的鲍曼不动杆菌78株,用琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌对16种抗菌药的最低抑菌浓度(MIC),敏感、中介、耐药的判定采用美国临床实验室标准化协会(CSLI)2006年公布的标准。结果与结论78株鲍曼不动杆菌对亚胺培南全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦和美罗培南耐药率低,分别为37.2%和1.3%,对环丙沙星、庆大霉素、头孢孟多、哌拉西林、头孢他啶、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢吡肟、阿米卡星、头孢西丁、氯霉素、四环素、哌拉西林/他唑巴坦等13种抗菌药的耐药率达62.8%-96.2%。     

46株洋葱伯克霍尔德菌最低抑菌浓度及耐药性分析

目的 了解川北地区洋葱伯克霍尔德菌临床分离株对21种抗菌药的耐药性.方法 收集我院附属医院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌46株,采用法国生物梅里埃(API)公司生产的Bio-Merieux VITEK-32全自动细菌鉴定系统及非发酵菌鉴定卡(NFC卡)进行菌株鉴定,用琼脂稀释法检测洋葱伯克霍尔德菌对21种抗菌药的最低抑菌浓度(MIC),敏感、中介、耐药的判定采用美国临床实验室标准化协会(CSLI)2006年公布的标准.结果 46株洋葱伯克霍尔德菌对头孢他定、头孢他啶/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南的耐药率较低,分别为56.8%、53.4%、49.3%、48.8%和41.1%,对多粘菌素、庆大霉素、阿米卡星、阿莫西林、阿莫西林/舒巴坦、头孢孟多、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、头孢哌酮、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、环丙沙星、左氧氟沙星、米诺环素等16种抗菌药物的耐药率高达70.6%-100%.结论 川北地区洋葱伯克霍尔德菌对临床常用抗菌药物存在普遍耐药现象,必须加强该菌耐药性的监测和抗菌药物的合理选用.     

微量稀释法检测临床常见细菌的耐药性结果分析

随着抗生素的广泛应用 ,细菌耐药性问题也越来越突出。监测细菌药敏结果 ,不仅可以指导临床用药 ,而且可以观察致病菌耐药性变迁情况,从而控制抗生素使用 ,降低耐药率。微量稀释法是近年来临床细菌实验室较多运用的抗生素体外药物敏感试验的方法 ,可测定细菌ＭＩＣ值 ,操作较琼脂稀释法方便 ［１］。笔者用微量稀释法检测近期从浙江省各地临床分离的３９４株常见菌 ,分析了２６种抗菌药物的最小抑菌浓度 (ＭＩＣ)及耐药率 ,以便了解细菌耐药性情况 ,指导临床用药。报道如下。１．材料收集１９９６年８月～１９９８年４月浙江省各大医院（覆…     

真菌性生殖道炎病原学及主要致病菌种最低抑菌浓度检测

目的鉴定引起真菌性生殖道炎症的假丝酵母菌,并对主要致病菌进行9种抗真菌药物最低抑菌浓度测定。方法常规培养并分离真菌,并鉴定到种,采用最低抑菌浓度法对白假丝酵母菌进行体外药物敏感试验。结果共分离53株菌,白假丝酵母菌占84.91%,白假丝酵母菌生物变种、光滑假丝酵母菌和近平滑假丝酵母菌各占3.77%,季也蒙假丝酵母菌和热带假丝酵母菌各占1.87%;47株白假丝酵母菌耐药率由高到低依次是氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、酮康唑、益康唑、克霉唑、5-氟胞嘧啶啶、两性霉素B和制霉菌素,其中6种药物耐药率〉50%。结论白假丝酵母菌仍是真菌性生殖道炎症最常见的致病菌,且其对多种药物同时耐药。临床上应根据实验室体外药敏试验结果合理用药。     

E试验检测革兰阴性杆菌的最低抑菌浓度

目的 分析1998、1999年1－2月临床分离的200株革兰阴性杆菌的耐药性。方法 用E试验检测13种抗生素对200株革兰阴性杆菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果 伊米配能（IP）、头孢他啶（TZ）、庆大霉素（GM）、头孢曲松（TX）、阿米卡星（AK）、头孢哌酮（CP）、头孢噻肟（CT）、头孢呋肟（XM）对肠杆菌科细菌科细菌的抗菌效果优于非发酵菌。用E试验方法检出15株产超广谱β－内酰胺酶菌株（ESBLs）。结论 E试验检测MIC可用于细胞耐药性监测、分析以及ESBLs的筛选、检测。     

幽门螺杆菌感染及体外抑菌浓度的研究

随着近年来幽门螺杆菌 (HP)根除治疗中抗生素的广泛使用 ,HP的耐药性日益突出 ,给临床治疗带来诸多困难。关于该菌的分离及对常用抗生素的耐药性 ,国内外均有报道 ,但在抗生素抑菌浓度方面却少有研究。为探讨抗生素对幽门螺杆菌的抑菌浓度 ,我们采用琼脂稀释法 ,测定 5种抗生素对 2 1株 HP的抑菌浓度 ,并计算测定值的几何均数 ,现将结果报告如下。1　临床资料1.1　材料 :酪蛋白绵羊血药敏平板制备 ,由本实验室自制。1.1.1　 5种抗生素原液的配制及抗生素稀释 :按《全国临床检验操作规程》第 2版进行 [1] 。1.1.2　制备 :培养基为 Muller-…     

微量板倍量稀释法检测IgG抗A（B）效价改进研究

目的通过实验研究改进微量板倍量稀释法检测IgG抗A(B)效价。方法采用微量板倍量稀释法,选取一个高值和一个低值标本来比较裂解液类型(2-Me、DTT)与稀释比例、裂解液处理时间和细胞温浴时间差异对结果的影响,综合得出最佳操作方案,将此方案与试管倍量稀释法进行比较,判断改进后的效果。结果得出改进后的操作方案:DTT与血清比例为3∶1,37℃处理时间为60min,细胞温浴时间为30min。与试管倍量稀释法比较无显著性差别(P>0.05)。结论改进后的方法是准确、有效的,更适合实验室进行大批量标本检测。     

细菌药敏最低抑菌浓度微孔检测板的研制

介绍细菌药物敏感最低抑菌浓度 (MIC)微孔检测板的性能及用途。本微孔检测板制作上以聚苯乙稀为主材料 ,一排四方型盲孔为药物载体。全板条密封、干燥 ,确保药物稳定。操作上只需将细菌悬液穿刺灌入板条内 ,随即抽回孔外多余细菌悬液 ,使达到各孔细菌悬液一致的接种目的。 35℃孵育过夜 ,观察细菌在盲孔中生长与否 ,从而测定出最低抑菌浓度 (MIC)。此法与琼脂稀释法比较 ,结果一致 ,可以认为是一种既方便又准确的好方法     

结核分枝杆菌最低抑菌浓度测定方法及临界值设置研究进展

结核病迄今仍是全球单一病原体引起死亡人数最多的传染性疾病.耐药及耐多药的产生是结核病流行和广泛传播的重要原因之一.建立规范、有效的结核分枝杆菌药敏最低抑菌浓度(MIC)的检测方法及设置有效的临界值对于结核病个体化治疗、快速耐药检测方法的研究以及新型抗结核药物筛选等领域具有重要意义,也是控制耐药结核病产生和传播的关键.该文就结核分枝杆菌MIC测定方法及临界值设置等方面的研究进展进行综述.     

利用固定化酵母细胞生产ATP

利用明胶戊二醛制备的固定化啤酒酵母细胞,由腺苷酸(AMP)生产腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)。在含有15 mmol/L AMP,75 mmol/L葡萄糖,5mmol/L硫酸镁(MgSO_4·7 H_2O)的0.2 mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)中,在34℃振荡反应1h,ATP转化率可达100%,分批连续反应10次,ATP转化率保持在90%以上。     

NCCLS微量法测定妇康乐洗剂体外抗白色念球菌活性

目的：观察妇康乐洗剂体外抗白色念珠菌作用。方法：采用NCCLS法测定妇康乐洗剂最低抑菌浓度（MIC）值和最低杀菌浓度（MFC）值。结果：妇康乐洗剂MIC为0．75～3．75mg／ml,MFC为1.20～4.80mg／ml。结论：妇康乐洗剂对白色念珠菌具有较强的抑菌和杀菌作用。     

固定化啤酒酵母细胞合成5’-三磷酸腺苷

用K-卡拉胶包埋啤酒酵母制成固定化细胞,在0.05mol/L葡萄糖,0.022mol/L腺苷酸,0.012mol/LMgSO_4·7H_2O,0.2mol/L氯化钾,0.2mol/L磷酸钾缓冲溶液(pH7.0)中,35℃反应4小时,5′-三磷酸腺苷转化率可达42%,在50ml三角烧瓶中分批反应,连续使用5次,5′-三磷酸腺苷转化率仍维持在37%以上。     

HPLC法测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定人血浆中替米沙坦的血药浓度。方法采用高效液相色谱-荧光检测法,色谱为shima-pak(C18,150 mm×4.65 mm,5μm),流动相为乙睛-磷酸盐缓冲液(45∶55,pH5.8),流速为1.0 mL/min,激发波长和发射波长分别为305 nm和365nm,进样量10μL,内标物为ɑ-萘酚,采用乙睛沉淀除蛋白的方法。结果替米沙坦在0.625~110μg/L范围内线性良好(r=0.9996),此方法精密度试验结果较好。结论HPLC法便捷,准确,灵敏,适于替米沙坦血药浓度测定和药动学研究。     

用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱

κ－卡拉胶－魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞，经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱（CDP－胆碱）。结果表明：250mL摇瓶中加入50mL反应液（葡萄糖400mol/L，CMP10mmol/L，磷酸碍碱50mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液100mmol/L，MgSO410mmol/L,pH=8.0），固定化细胞1200g/L,34℃、150r/min下，反应4h后补加400mmol/L葡萄糖，反应8h可使60％以上的CMP转化为CDP－胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶I（NAD^ ）后，固定化细胞可连续使用4次，CDP－胆碱转化率维持在40％以上。     

阻抑荧光动力学法测定痕量头孢他啶

目的：建立头孢他啶的阻抑荧光动力学测定方法。方法：利用头孢他啶对罗丹明 B-KBrO3体系的荧光反猝灭作用,以559.0 nm 为激发波长,581.0 nm 为发射波长,以对应试剂空白的荧光强度为F0,计算△F=F-F0。根据△F值与溶液中头孢他啶的浓度呈正比关系,建立阻抑荧光动力学法测定头孢他啶的新方法。结果：头孢他啶的质量浓度在0.636-8.268 ng/mL 范围内与其荧光强度呈良好线性关系（R=0.9998）,检出限可达0.283 ng/mL。结论：该法简便、快速、可靠,可用于药物制剂中头孢他啶含量的测定。     

ELISA竞争抑制法检测实验动物的多杀性巴氏杆菌

设计了一种灵敏的ＥＬＩＳＡ竞争抑制法，用以检测实验动物多杀性巴氏杆菌，在该系统中，从多杀性巴氏杆菌Ｐ－１０５９，Ｘ－７３和Ａ－８９８中抽提可溶性物质作为包板抗原。用３株全菌体免疫兔，提纯兔抗多杀性巴氏杆菌ＩｇＧ，用辣根过氧化物酶标记兔抗多杀性巴氏杆菌ＩｇＧ将酶结合物与待检动物血清做ＥＬＩＳＡ竞争抑制试验，同时用常规ＥＬＩＳＡ间接法做验证实验。结果表明此法准确可靠，可用于各种实验动物的多杀性巴氏杆菌     

顺序转化法进行酵母双杂交筛选相互作用蛋白质

目的：利用顺序转化法进行酵母双杂交从人胎脑cDNA文库中筛选PAK4新的相互作用蛋白。方法：将PAK4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。提取质粒并转化酵母菌AH109,验证蛋白表达。用顺序转化法将质粒和人胎脑cDNA文库转化酵母菌AH109,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade和SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/x-α-gal平板上筛选,对阳性克隆质粒进行酶切鉴定。结果：利用顺序转化酵母双杂交方法筛选出了多个与PAK4蛋白质相互作用的Ade＋/His＋/LacZ＋阳性转化子。结论：利用顺序转化酵母双杂交方法成功筛选了与PAK4相互作用的蛋白质。