B7-1分子诱导体外抗肝癌免疫反应

目的：了解Ｂ７分子在体外抗肝癌免疫中的作用。方法：健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）与ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１，ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ及亲代ＨｅｐＧ２瘤苗混合培养（ＭＬＴＣ），检测淋巴细胞活化增殖能力，淋巴细胞ＨＬＡ－Ｉ类抗原的表达，培养上清ＩＦＮ－γ水平，ＴＮＦ活性及ＬＡＫ，ＣＴＬ细胞活性。结果：ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１瘤苗促淋巴细胞增殖最高达１４．６倍，明显高于ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ和ＨｅｐＧ２瘤苗的作用     

HLA-A匹配的人胃癌细胞系诱生胃癌特异性T淋巴细胞

目的 用ＨＬＡ－Ａ匹配的人胃癌细胞系诱导对胃癌细胞具有特异性杀伤作用的Ｔ淋巴细胞。方法 分离胃癌患者及正常人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）,用ＨＬＡⅠ类型别已知、经照射的异体胃癌细胞系刺激,进行筛选性的混合淋巴细胞肿瘤细胞培养（ＭＬＴＣ）,初步获得ＨＬＡ－Ａ可能匹配的淋巴细胞供体,血清法测定其ＨＬＡ－Ａ、Ｂ分子确认匹配后,进一步进行ＭＬＴＣ,＾３Ｈ掺入法评估其增殖能力,直接免疫荧光法分析其细胞表型,＾５     

LFA-1/ICAM-1单抗对ConA诱导脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响

通过研究ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１单抗对ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞活化增殖及其分泌细胞因子的影响　，探　讨了ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１分子在Ｔ细胞活化过程中所起的共刺激作用。结果表明，单独应用ＬＦＡ－１α链单抗（Ｍ１７／４．４．１１．９）或ＩＣＡＭ－１单抗（ＹＮ１／１．７．４）均不能引起脾淋巴细胞的增殖，但在加入ＣｏｎＡ诱导脾淋巴细胞增殖反应的最初８小时内加入ＬＦＡ－１单抗可以剂量依赖性地抑制ＣｏｎＡ诱导的脾淋巴细胞增殖反应及脾淋巴细胞分泌ＩＬ－２、ＩＰＮ－γ，而加入ＩＣＡＭ－１单抗却无此效应。说明ＬＰＡ－１在ＣｏｎＡ诱导的Ｔ细胞活化过程中起着重要的共刺激作用，ＬＰＡ－１通过与除ＩＣＡＭ－１以外的其它配体分子（如ＩＣＡＭ－３）相互识别，提供Ｔ细胞活化所必需的共刺激信号。     

小鼠B7-1基因转染的黑色素瘤细胞免疫原性探讨

目的 探讨Ｂ７－１分子对肿瘤细胞免疫原性的影响。方法 将小鼠Ｂ７－１基因转染的黑色素瘤细胞（Ｂ１６－ｍＢ７．１）与野 生型及空载体转染细胞（Ｂ１６－ｗｔ和Ｂ１６－ｎｅｏ）的免疫原性在体内外进行了比较。同源淋巴细胞肿瘤细胞混合培养（ＭＴＬＣＳ）后测定淋巴增殖指数和ＣＴＬＳ活性,将Ｂ１６－ｎｅｏｐ和Ｂ１６－ｍＢ７．１细胞接种于小鼠皮下,观察肿瘤生长速度。结果 Ｂ１６ｍＢ７．１在体外刺激淋巴细胞增殖和诱     

LFA—1／ICAM—1单抗对ConA诱导脾淋巴细胞增殖及分…

通过研究ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１单抗对Ｃｏｎ Ａ诱导的脾淋巴细胞活化增殖及其分泌细胞因子的影响，探讨了ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１分子在Ｔ细胞活化过程中所起的共刺激作用。结果表明，单独应用ＬＦＡ－１α链单抗（Ｍ１７／４．４．１１．９）或ＩＣＡＭ－１单抗（ＹＮ１／１．７．４）均不能引起脾淋巴细胞的增殖，但在加入ＣｏｎＡ诱导脾淋巴细胞增殖反应的最初８小时内加入ＬＦＡ－１单抗可以剂量依赖性地抑制ＣｏｎＡ诱导     

异型巨噬细胞集落刺激因子在人白血病细胞系中的表达及性质

目的 探讨异型巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）在人白血病细胞系中的表达和性质。方法 采用ＡＢＣ免疫酶标技术,间接免疫荧光染色,流式细胞计数,蛋白免疫印迹和反向酶联ＤＮＡ蛋白质相互作用分析技术研究了４株人白血病细胞系（Ｊ６－１、Ｊ６－２、Ｋ５６２、ＨＬ６０）和正常人外周血单个核细胞Ｍ－ＣＳＦ的分布、表达及其分子大小。结果 正常人外笛血单个核细胞示见Ｍ－ＣＳＦ的表达,经植物血浆素刺激后有低水平的表达     

HCMV感染对单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用细胞ＥＬＩＳＡ法，研究发现人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ的影响。结果表明ＨＣＭＶ感染后１ｄ，单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达显著增高（Ｐ＜０．０１），以后逐渐降低，ｄ５降至对照水平；ＩＦＮγ（５００Ｕ／ｍｌ）．ＴＮＦ（２５０Ｕ／ｍｌ）、ＩＬ－６（５００／ｍｌ）、ＩＬ－１（５００／ｍｌ）均能不同程度地刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达；ＨＣＭＶ感染后，细胞因子刺激ＨＬＡ－ＤＲ表达的水平在感染后ｄ５，较对照组均显著降低（Ｐ＜０．０１）；ＩＬ－１＋ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ＋ＩＦＮ－γ在刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达时有协同作用；ＨＣＭＶ感染后，ＩＦＮ－γ＋ＩＬ－１及ＴＮＦ＋ＩＦＮ协同刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达水平较对照组显著降低（Ｐ＜０．０１）。结果提示：在ＨＣＭＶ感染引起免疫抑制过程中，其引起单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达降低是一重要机制。     

HCMV感染对单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用细胞ＥＬＩＳＡ法，研究发现人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ的影响。结果表明ＨＣＭＶ感染后１ｄ，单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达显著增高（Ｐ＜０．０１），以后逐渐降低，ｄ５降至对照水平；ＩＦＮγ（５００Ｕ／ｍｌ）．ＴＮＦ（２５０Ｕ／ｍｌ）、ＩＬ－６（５００／ｍｌ）、ＩＬ－１（５００／ｍｌ）均能不同程度地刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达；ＨＣＭＶ感染后，细胞因子刺激ＨＬＡ－ＤＲ表达的水平在感染后ｄ５，较对照组均显著降低（Ｐ＜０．０１）；ＩＬ－１＋ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ＋ＩＦＮ－γ在刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达时有协同作用；ＨＣＭＶ感染后，ＩＦＮ－γ＋ＩＬ－１及ＴＮＦ＋ＩＦＮ协同刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达水平较对照组显著降低（Ｐ＜０．０１）。结果提示：在ＨＣＭＶ感染引起免疫抑制过程中，其引起单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达降低是一重要机制。     

逆转录病毒载体介导的IL-4基因修饰对HL-60细胞增殖及T细胞功能的影响

目的观察ＩＬ－４基因转染对ＨＬ－６０增殖及Ｔ细胞功能的影响及其可能机制。方法采用逆转录病毒载体介导基因转染法将人ＩＬ－４基因导入髓系白血病细胞ＨＬ－６０,观察高表达外源性ＩＬ－４基因ＨＬ－６０株的增殖反应及其诱导的正常人ＰＢＭＣ增殖,ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ基因表达及肿瘤特异性ＣＴＬ杀伤活性。结果ｒＩＬ－４或瘤细胞产生的ＩＬ－４早期促进ＨＬ－６０细胞增殖,培养５天后则明显抑制其增殖;与ｒＩＬ－４处理的ＨＬ－６０细胞比较,ＩＬ－４基因修饰的ＨＬ－６０细胞明显促进正常人ＰＢＭＣ增殖并合成ＩＬ－２、ＩＬ－６及ＩＦＮ－γｍＲＮＡ,其诱导的特异性ＣＴＬ杀伤活性明显高于野生型ＨＬ－６０、仅导入载体的ＨＬ－６０和加入ｒＩＬ－４共育的ＨＬ－６０细胞诱导者。结论ＩＬ－４基因转染在影响ＨＬ－６０细胞增殖和分化过程的同时,可能促进某些抗原（如ＭＨＣⅠ类抗原）的抗原性,从而有利于机体建立有效的抗肿瘤免疫反应。     

基因修饰肿瘤疫苗研究进展

近年来基因修饰肿瘤疫苗包括ＭＨＣ分子、共刺激信号Ｂ７分子及各种细胞因子基因修饰的肿瘤疫苗，在体内外试验和基础研究中取得了相当的进展，本文主要对其作用机理进行了小结。肿瘤细胞表达外源ＭＨＣ、Ｂ７分子，使宿主免疫系统能有效识别、杀伤肿瘤；表达某些细胞因子（如ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＧＭ－ＣＳＦ、ＴＮＦ－α等）能诱导产生ＣＴＬ，而某些细胞因子则激发非Ｔ细胞的杀伤作用（如ＩＬ－４、Ｇ－ＣＳＦ诱导中性粒细胞的炎症反应，ＩＬ－２诱导ＮＫ细胞的杀伤作用，ＩＬ－４、ＩＬ－７、ＩＦＮ－γ等诱导肿瘤局部Ｍφ的浸润）。     

人胎垂体体外刺激胎脾淋巴细胞增殖的研究

采用ＭＴＴ法测定人胎儿垂体培养上清刺激胎脾淋巴细胞增殖反应。实验中观察到：（１）ＦＰＳ能刺激胎脾淋巴细胞增殖，其刺激能力随胎龄增大而增强；（２）胎儿垂体体能 在体外培养１ｍｏ内持续分泌对淋巴细胞增殖的有效刺激成分；（３）ＦＰＳ能延长胎脾淋巴细胞外培养存活时间；（４）ＰＨＡ对ＦＰＳ刺激胎脾淋巴细胞增殖无影响。实验结果显示ＦＰＳ对人胎脾淋巴细胞在体有刺激增殖作用。     

玉竹提取物B对肿瘤的抑制作用

目的：玉竹提取物Ｂ（Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｂ ｏｆ ｐｏｌｙ－ｇｏｎａｔｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ,ＥＢ－ＰＡＯＡ）对肿瘤的抑制作用。方法：检测肿瘤细胞株ＣＥＭ增殖和表面分子表达以及观察对小鼠Ｓ－１８０移植瘤的抑制作用。结果：玉竹提取物Ｂ１０＾－３ｍｌ＾－１（Ｖ／Ｖ,以下同）浓度对ＣＥＭ的增殖有显著的抑制作用,并捉进ＣＥＭ表面分子ＨＬＡ－Ｉ分子、ＣＤ２和ＣＤ３的表达,尤其对ＣＤ２分子的表达作用更为显著     

腺病毒介导M-CSF和IFN-γ基因联合转染对巨噬细胞抗原提呈功能的影响

研究观察了Ｍ－ＣＳＦ和ＩＦＮ－γ基因转染的巨噬细胞（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，Ｍφ）的体外抗原提呈能力，并对其机制进行了初步探讨，结果表明，ＩＦＮ－γ基因转染及Ｍ－ＣＳＦ／ＩＦＮ－γ联合基因转染的Ｍφ抗原提呈功能显著增强，联合基因转染组优于单基因转染组（Ｐ＜０．０５），Ｍφ表面Ｉａ、Ｂ７－１、ＩＣＡＭ－１的表达水平有不同程度的提高，这些细胞表面相关分子的高表达可能与其抗原提呈能力增加有关。混合淋巴细胞反应结果提示，当用５倍于Ｍφ量的肿瘤细胞制备的肿瘤抗原触发４ｈ，Ｔ淋巴细胞的增殖能力最强，该结果为过继回输肿瘤抗原体外触发的基因转染的Ｍφ治疗肿瘤提供了实验依据。     

共刺激分子B7-1与IL-6协同诱导T细胞活化的研究

目的：探讨Ｂ７－１单独或者与ＩＬ－６联合体外诱导Ｔ细胞活化的能力。方法：在混合淋巴细胞肿瘤细胞培养（ＭＬＴＣＳ）后,测定淋巴细胞增殖指数和ＣＴＬ杀伤活性。结果：Ｂ７－１＾＋的Ｂ１６细胞能够较有效地刺激淋巴细胞增殖,诱导特导ＣＴＬ杀伤活性,当与ＩＬ－６结合时效更加显著。结论：Ｂ７－１基因在肿瘤细胞中表达可增强其免疫原性在体外有效诱导Ｔ细胞活化;在此过程中ＩＬ－６与Ｂ７－１分子存在协同效应。     

人胎胸腺素对T细胞增殖及IL－2分泌的影响

胸腺素具有广泛的免疫调节作用。本文观察了人胎胸腺素（ＨＦＴ）在体外对人周围血Ｔ细胞的增殖及对周围血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－２的影响，实验结果表明：ＨＦＴ能刺激Ｔ细胞增殖，１％ＨＦＴ的作用最强，但未见ＨＦＴ与ＰＨＡ对Ｔ细胞增殖的协同促进作用；而ＨＦＴ对ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的影响不明显，ＨＦＴ与ＰＨＡ共同作用的效应约有提高，亦仅相当于ＩＬ－２在１．９～７．８ｕ／ｍｌ时的效应。     

人胎胸腺素对T细胞增殖及IL—2分泌的影响

胸腺素具有广泛的免疫调节作用。本文观察了人胎胸腺素（ＨＦＴ）在体外对人周围血Ｔ细胞的增殖及对周围血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌ＩＬ－２的影响，实验结果表明：ＨＦＴ能刺激Ｔ细胞增殖，１％ＨＦＴ的作用最强，但未见ＨＦＴ与ＰＨＡ对Ｔ细胞增殖的协同促进作用；而ＨＦＴ对ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的影响不明显，ＨＦＴ与ＰＨＡ共同作用的效应约有提高，亦仅相当于ＩＬ－２在１．９￣７．９ｕ／ｍｌ时的效应。     

抗Thy—1单克隆抗体的免疫抑制作用

从体内，体外研究了抗Ｔｈｙ－１单克隆抗体（Ｍｃ－Ａｂ）的免疫抑制作用，结果表明：（１）体外抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞，无补体时能抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；（２）在体内，可以抑制小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖，但不影响ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖反应。结果说明：抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ的免疫抑制使用可能包括补体依赖性细胞毒作用和通过Ｔｈｙ－１分子 地     

抗Thy－1单克隆抗体的免疫抑制作用

从体内、体外研究了抗Ｔｈｙ－１单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的免疫抑制作用。结果表明：（１）体外抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞，无补体时能抑制ＣｏｎＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；（２）在体内，可以抑制小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ和ＰＨＡ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖、但不影响ＬＰＳ诱导的Ｂ淋巴细胞增殖反应。结果说明：抗Ｔｈｙ－１ＭｃＡｂ的免疫抑制作用可能包括补体依赖性细胞毒作用和通过Ｔｈｙ－１分子对Ｔ淋巴细胞功能的抑制。     

转染B7—1基因至鼻咽癌细胞株及其诱导的细胞免疫应答

通过包装细胞把逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ／Ｂ７－１导入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１，利用ＲＴ－ＰＣＲ及ＦＡＣｓ等技术证实Ｂ７－１的表达情况，同时检测了ＣＮＥ１细胞表面ＭＨＣＩ抗原。在此基础之上，观察了表达Ｂ７－１的ＣＮＥ１细胞（ＣＮＥ１／Ｂ７－１）对健康个体ＰＢＬ（外周血淋巴细胞）的增殖及细胞因子分泌的影响，结果表明：ＣＮＥ１／Ｂ７－１可以促进ＰＢＬ的增殖及细胞因子的分泌，且增高水平的细胞因子主要是ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ。提示：ＣＮＥ１／Β７－１诱导的免疫应答以细胞免疫为主。     

EB病毒潜在膜蛋白对鼻咽癌细胞系CNE1生长及HLA表达的影响

目的研究ＥＢＶ－ＬＭＰ对高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１生长及ＨＬＡ表达的影响。方法以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象，采用电穿孔基因转染技术，将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒ｐＣＭＶａ－ＬＭＰ转染ＣＮＥ１细胞。用细胞体外增殖试验、免疫组化和流式细胞术等方法，观察细胞生长及ＨＬＡ表达的变化。结果ＥＢＶ－ＬＭＰ在体外可明显促进ＣＮＥ１细胞的增殖，增殖吸光度（Ａ）比值试验组与空白组及阴性对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；实验组细胞软琼脂克隆形成率显著高于空白及阴性对照组（Ｐ＜０．０１）；细胞ＤＮＡ含量明显增高（Ｐ＜０．０１／０．０５）；ＦＣＭ法测定细胞角蛋白表达，实验组比空白及阴性对照组阳性率显著降低（Ｐ＜０．０５）；ＨＬＡ免疫组化检测结果表明，ＬＭＰ表达细胞系ＨＬＡⅠ类及Ⅱ类抗原的表达都明显下降（Ｐ＜０．０１）。结论ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞生长有明显的促进作用且可明显抑制细胞分化，ＬＭＰ可致鼻咽癌细胞ＨＬＡ抗原的表达改变。