狼疮肾炎患者糖皮质激素受体亚型GRα和GRβ mRNA表达的研究

目的探讨狼疮肾炎患者对糖皮质激素(以下简称激素)治疗反应不同的分子机制.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常对照组(10例)和狼疮肾炎组(28例,其中激素敏感组10例、激素依赖组10例、激素抵抗组8例)外周血单个核细胞(PBMCs)内GRα与GRβmRNA表达水平的变化.结果与正常对照组相比,狼疮肾炎患者三组中GRα mRNA的表达水平均降低,差异有显著性(P＜0.05);GRβmRNA在激素抵抗组中表达明显增高,差异有显著性(P＜0.01),而在激素敏感组、激素依赖组中表达无明显差异(P＞0.05).结论狼疮肾炎患者糖皮质激素受体GRα、GRβmRNA表达水平的变化,导致GRα与GRβ比例失调,使组织细胞对激素的敏感性降低,因此,导致狼疮肾炎的患者对糖皮质激素治疗反应不同,狼疮肾炎患者出现激素抵抗可能与GRβmRNA表达水平增高有关.     

多发性肌炎/皮肌炎患者外周血单一核细胞中糖皮质激素受体及热休克蛋白90 mRNA的表达

我们应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对多发性肌炎/皮肌炎(PMDM)患者外周血单一核细胞(PBMC)中糖皮质激素受体与HSP90mRNA的表达水平进行检测,以探讨其表达水平同糖皮质激素疗效的相关性^[1-3]。     

狼疮肾炎患者外周血单个核细胞NF-κB与糖皮质激素受体mRNA的表达

目的：检测狼疮肾炎患者单个核细胞核因子-κB（NF一κB）与糖皮质激素受体mRNA（GR-mRNA）的表达水平。方法：免疫组织化学方法及逆转录酶链反应检测狼疮肾炎患者和正常对照组外周血单个核细胞NF-κB与糖皮质激素受体mRNA的表达。结果：与对照组相比,狼疮肾炎患者外周血单个核细胞GRmRNA表达水平降低,NF-κB表达水平升高（P〈0．01）;激素治疗前,激素敏感组、激素依赖组及激素抵抗组GRmRNA表达水平均降低（P〈0．01）,NF—κB表达水平升高（P〈0．01）。激素敏感组与激素抵抗组GRmRNA表达水平有统计学差异（P〈0．01）。结论：NF—κB与GRmRNA的异常表达可能与狼疮。肾炎病情及糖皮质激素疗效不同有关。     

银屑病患者皮损中诱生型一氧化氮合酶mRNA、热休克蛋白70和细胞周期蛋白D1的表达

一氧化氮 (NO)作为小的气体分子有多种活性,热休克蛋白（ heat shock proteins, HSPs ）可保护细胞之间平衡,细胞周期蛋白 D1（ cyclinD1）是哺乳动物 G1期的限速控制器。 Sirsj等发现诱生型一氧化氮合酶（ iNOS）在银屑病皮损中过表达,为探讨iNOS过表达是由于银屑病表皮角质形成细胞摄取外源性 iNOS还是角质形成细胞自身产生合 成,并且作为与炎症和免疫调节有关以及和细胞增生有关的 iNOS、 HSP70、 cyclin D1在 银屑病皮损中表达情况和相互关系,我们研究了银屑病皮损中 iNOSmRNA、 iNOS、 HSP70和 cyclin D1的表达…     

银屑病患者治疗前后表皮细胞中热休克蛋白60的表达研究

为了探讨热休克蛋白60与银屑病的关系，采用LSAB免疫组织化学法，检测16例银屑病皮损、非皮损及治愈后表皮细胞中和6例正常人对照组表皮细胞中HSP60的表达。结果发现HSP60在正常人及银屑病患者非皮损、治愈后表皮细胞中呈阴性表达，在银屑病皮损中表达增强，提示HSP60在银屑病应激保护机制中可能发挥着重要作用。     

热休克蛋白70在过敏性紫癜中的表达及其临床意义

目的探讨热休克蛋白70表达在过敏性紫癜发病机制中的作用及其与临床的关联。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了66例过敏性紫癜患者和30例正常对照组外周血单一核细胞中热休克蛋白70表达,采用免疫速率散射比浊法检测患者血沉、C反应蛋白和血清IgA。结果过敏性紫癜患者治疗前热休克蛋白70的表达明显高于治疗后和对照组,其在肾型表达明显高于其他类型,治疗后其表达与对照组无明显差异,治疗前热休克蛋白70表达与血沉、C反应蛋白、血清IgA明显正相关,其表达和上呼吸道感染、腹痛、关节痛、蛋白尿、血尿明显相关。结论热休克蛋白70表达在过敏性紫癜活动期明显升高,恢复期则明显下降,且与临床表现密切相关,提示其在该病发生发展中具有一定的作用,可作为疾病活动的指标之一。     

女性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞瘦素受体mRNA的表达及其与细胞因子的关系

目的:检测女性狼疮肾炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)表面两种瘦素受体(ob-R)mRNA及血清中瘦素和细胞因子(IL-6和TNF-α)的表达水平.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测了28例女性狼疮肾炎患者和20例正常对照者的外周血单个核细胞表面长型受体(ob-Rb)和短型受体(ob-Ra)mRNA的表达.血清瘦素、IL-6和TNF-α水平的检测采用放射免疫分析法.结果:与正常对照组相比,女性狼疮肾炎患者单个核细胞mRNA(包括长型受体和短型受体)和血清瘦素、IL-6和TNF-α水平明显增高(P<0.01).结论:女性狼疮肾炎患者体内瘦素长型受体(ob-Rb)和短型受体(ob-Ra)mRNA与IL-6和TNF-α水平的增高可能与狼疮肾炎的发生和发展有关.     

银屑病表皮热休克蛋白27、70、60的表达

目的：探讨热休克蛋白（HSP）在银屑病发病中的作用。方法：通过免疫组化和图像分析检测了25例银屑病患者治疗前后皮损、非皮损区表皮组织中HSP27、HSP70和HSP60的表达，并与6例正常人作对照。结果：HSP27、HSP70在非皮损、正常人表皮中呈基础表达，在银屑病患者皮损中的表达很弱，治愈后表皮后HSP27、HSP70的表达又恢复；HSP60的表达在银屑病皮损组表皮中均为阳性，而银屑病非皮损组、治愈后组表皮中及正常人对照表皮组织中HSP60的表达均阴性。结论：热休克蛋白在银屑病应激保护机制中可能发挥一定的作用。     

热休克蛋白及其与皮肤和皮肤病的关系

热休克蛋白（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＳＰ），又称应激蛋白（ｓｔｒｅｓｐｒｏｔｅｉｎ，ＳＰ），广泛存在于原核、真核细胞中，进化上呈高度保守性。正常时在细胞中发挥重要的生理功能，应激时呈高表达，起到应激保护作用。关于热休克蛋白在正常皮肤及一些...     

银屑病患者外周血单一核细胞中趋化因子受体CXCR1及CXCR2 mRNA的表达

目的:探讨银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)中CXC型趋化因子受体CXCR1及CXCR2的表达水平及其临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测了进行期斑块状银屑病患者33例及其中16例患者治疗后PBMC中CXCR1及CXCR2 mRNA的表达,设30名健康人作为正常对照,并将检测结果与患者皮损面积及严重程度指数(PASI)进行了相关性分析。结果:斑块状银屑病患者PBMC中CXCR2 mRNA表达水平为1.38±0.87,明显高于健康人对照组0.73±0.58,治疗后患者1.21±0.62仍高于健康对照组(P<0.05);CXCR1 mRNA表达水平为0.26±0.28,与健康对照组及同一组患者治疗后相比均无明显差异,分别为:0.17±0.26,0.27±0.31(均P>0.05);银屑病患者PBMC中CXCR2 mRNA水平高于CXCR1 mRNA水平,二者均与PASI之间无明显相关性。结论:CX-CR2可能参与了银屑病的发病机制。     

多发性肌炎和皮肌炎患者外周血单一核细胞Fas、FasL和bcl-2分子的表达

目的：探讨多发性肌炎(PM)／皮肌炎(DM)的外周血单一核细胞(PHMC)活化和凋亡的状态。方法：采用免疫细胞化学方法对PM／DM患者的PBMC上凋亡相关分子Fas、FasL和bcl—2等的表达进行了检测。结果：PM／DM患者PBMC上Fas、FasL和bcl—2分子的表达显著高于正常对照组。结论：PM／DM患者的PBMC存在异常活化和凋亡，与PM／DM的免疫学病理过程有关。     

Differential expression analysis of miRNA in peripheral blood mononuclear cells of patients with non‐segmental vitiligo

Vitiligo is a common depigmentary skin disease that may follow a pattern of multifactorial inheritance. The essential factors of its immunopathogenesis is thought to be the selective destruction of melanocytes. As a new class of microregulators of gene expression, miRNA have been reported to play vital roles in autoimmune diseases, metabolic diseases and cancer. This study sought to characterize the different miRNA expression pattern in the peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of patients with non‐segmental vitiligo (NSV) and healthy individuals and to examine their direct responses to thymosin α1 (Tα1) treatment. The miRNA expression profile in the PBMC of patients with NSV was analyzed using Exiqon's miRCURY LNA microRNA Array. The differentially expressed miRNA were validated by real‐time quantitative polymerase chain reaction. We found that the expression levels of miR‐224‐3p and miR‐4712‐3p were upregulated, and miR‐3940‐5p was downregulated in the PBMC. The common clinical immune modulator Tα1 changed the miRNA expression profile. Our analysis showed that differentially expressed miRNA were associated with the mechanism of immune imbalance of vitiligo and that Tα1 could play an important role in changing the expression of these miRNA in the PBMC of patients with NSV. This study provided further evidence that miRNA may serve as novel drug targets for vitiligo therapeutic evaluation.     

SLE患者外周血单个核细胞ER和HSP90基因的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中雌激素受体(ER)和热休克蛋白90(HSP90)基因的表达情况。方法分离58例SLE患者和28例正常人新鲜外周血单个核细胞,提取总RNA,利用半定量RT-PCR方法逆转录并扩增ER和HSP90,通过凝胶图像扫描系统对PCR产物的电泳条带进行扫描分析。结果 SLE患者组PBMC中ER和HSP90mRNA表达明显高于正常对照组(P均<0.05),且活动期患者的表达高于稳定期患者(P均<0.05)。结论 SLE患者中存在ER和HSP90基因的过度表达,并与疾病活动性有关。     

SLE患者外周血单个核细胞一氧化氮合酶mRNA的表达

探讨原生型一氧化氮合酶(cNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及其意义,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测了34例活动期SLE患者和30名正常人PBMC中cNOS和iNOSmRNA的表达水平。结果表明,活动期SLE患者iNOS和cNOS的阳性表达率与正常人对照组相比均无明显差异(P>0.05);活动期SLE患者PBMC中iNOSmRNA的平均表达水平(0.7710±0.1050)明显高于正常人对照组(0.5249±0.0770),差异非常显著(P<0.01);活动期SLE组cNOS的平均表达水平与正常人对照组处于同一表达水平,差异无统计学意义(P>0.05)。提示活动期SLE患者外周血单个核细胞中iNOSmRNA的表达增加,可能通过诱导一氧化氮(NO)及其代谢产物的产生参与SLE的发病过程。特异性iNOS抑制剂的开发与研制可能是治疗SLE新药发展的一个方向。     

性激素对SLE患者外周血单一核细胞凋亡的影响及其意义

研究脱氢表雄酮(DHEA)和(或)雌二醇(E2)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)凋亡的影响。应用吖啶橙(AO)染色法检测SLE患者、健康献血员PBMC与生理、病理浓度的DHEA和(或)E2培养48h的凋亡百分率。SLE患者PBMC凋亡率高于健康献血员(P<0.01)。不论生理或者病理浓度的E2对SLE患者、健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05)。生理浓度的DHEA及DHEA+E2对健康献血员PBMC凋亡无影响(P>0.05),但可显著抑制SLE患者PBMC凋亡(P<0.05);病理浓度的DHEA及DHEA+E2可显著促进SLE患者、健康献血员PBMC凋亡(P<0.05)。DHEA及DHEA+E2对PBMC凋亡的影响,两者间无显著差异(P>0.05)。结果提示,DHEA对SLE患者PBMC凋亡起重要作用;DHEA浓度降低可能导致凋亡加快。     

Impaired responses of peripheral blood mononuclear cells to T-cell stimulants in alopecia areata patients with a poor response to topical immunotherapy

BACKGROUND: Topical immunotherapy with a contact allergen is effective in alopecia areata (AA). However, the mechanism of the effect is still unknown, and pretreatment prediction of the outcome of therapy in each patient remains difficult. OBJECTIVES: To predict the clinical effect of this therapy in AA patients, we investigated the relationship between clinical responses to topical immunotherapy and in vitro proliferative responses of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) to T-cell stimulants. METHODS: PBMC were taken from 67 AA patients before or during diphenylcyclopropenone immunotherapy and from 14 healthy controls, and proliferative responses to phytohaemagglutinin and staphylococcal enterotoxin B were evaluated by measuring [3H]-thymidine incorporation. RESULTS: PBMC from the AA patients with a good clinical response to immunotherapy showed a normal level of proliferation, whereas PBMC from the poor responders showed a markedly suppressed proliferative response and interleukin (IL)-2 production, but increased IL-4 production compared with the controls. CONCLUSIONS: The proliferative response of PBMC to T-cell stimulants may be one of the indicators of the clinical effect of topical immunotherapy for AA.