大鼠脑组织中单胺类神经递质及其代谢产物的液相色谱测定法

用高效液相色谱-电化学检测法测定大鼠6个脑区单胺类神经递质及其主要代谢产物的含量。此法可同时分离和测定10种化合物,且快速、灵敏和简便,适用于临床分析和实验研究。     

用高效液相色谱电化学检测器测定大小鼠脑内单胺类物质的研究

应用反相高效液相色谱法和电化学检测器对单胺类物质如去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺及酸性代谢产物3,4二羟基苯乙酸、5-羟吲哚醋酸和高香草酸的色谱条件及样品的制备进行了研究.结果表明:降低流动相的pH及甲醇含量或增加离子对B_8的含量可使样品的保留时间延长,而增加二正丁胺的含量可缩短保留时间。当pH=3.7,甲醇10％,二正丁胺1.3mmol,离子对B_81.2 mmol时,分离效果最好,能在25 min内将七种物质完全基线分离.在样品的制备方面,用高氯酸沉淀蛋白提取单胺类物质,45,000g×20 min一次离心取上清液20μl直接进样,所含杂质少且不干扰单胺类物质的测定.本实验方法简单,快速、灵敏,比较实用.     

小鼠脑组织中单胺类神经递质含量测定方法的建立与比较

目的 比较高效液相色谱(HPLC)-紫外光(UV)、HPIC-荧光(FLD)和HPLC-质谱(MS)3种检测方法测定小鼠不同脑组织中单胺类神经递质含量的优劣性,并应用最优方法测定血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质的含量.方法 分别采用HPLC仪器搭配UV、FLD和MS检测器建立小鼠不同脑组织中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量测定方法,并进行系统的方法学验证,采用HPLC-FLD法对血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质DA、NE和5-HT含量进行测定.结果 HPLC-UV法的定量限分别为DA 103.5 ng/mL、NE 107.5 ng/mL、5-HT 93.6 ng/mL;HPLC-FLD法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 10.75 ng/mL、5-HT9.36 ng/mL;HPLC-MS法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 32.25 ng/mL、5-HT 9.36 ng/mL.HPLC-FLD和HPLC-MS法对DA和5-HT的测定优于HPLC-UV法,HPLC-FLD法对于NE的测定优于HPLC-MS法,而HPLC-MS法存在较强的基质效应.HPLC-FLD法检测结果示血管性抑郁小鼠海马组织中DA含量最低,大脑皮质中5-HT含量最低,而不同脑组织中NE含量没有明显差别.结论 与HPLC-UV法和HPLC-MS法相比,HPLC-FLD法更适用于小鼠脑组织中单胺类神经递质(DA、NE、5-HT)的含量测定.DA和5-HT可以用作血管性抑郁症疾病的诊断标志物.     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠行为学和脑组织单胺类神经递质的影响

目的:建立抑郁动物模型,观察酸枣仁汤对抑郁模型大鼠行为学和脑组织单胺类神经递质的影响,探讨其抗抑郁作用机理.方法:采用孤养结和慢性不可预见性温和刺激制备抑郁大鼠模型.通过体重增长变化、糖水消耗量和敞箱实验.评定酸枣仁汤对慢性应激抑郁模型大鼠的行为学改变,并用高效液相色谱法测定大鼠脑内单胺类神经递质的含量,运用统计学方法比较组间差异,说明酸枣仁汤对抑郁实验动物模型的影响.结果:模型大鼠出现了明显的行为学异常,脑内单胺类神经递质含量与正常组有显著差异,酸枣仁汤高剂量组可显著提高抑郁大鼠的糖水消耗量、敞箱实验评定、脑内单胺递质含量,其疗效与西药氯丙咪嗪相当.结论:孤养结合慢性不可预见性的温和刺激可制备比较理想的抑郁症模型,酸枣仁汤可显著改善抑郁模型大鼠的行为学异常,增加脑内单胺递质含量,且呈一定的量效关系.酸枣仁汤的抗抑郁作用可能与增加脑内单胺类神经递质含量有关.     

库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学研究

目的建立库仑阵列电化学高效液相色谱法快速测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质的含量。方法采用库仑阵列电化学检测器检测去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）,采用Phenomenex C18反相色谱柱（150mm×4.60mm,5μm）,流动相为缓冲液-乙腈（体积比87∶13）,流速为1mL.min^-1,柱温为35℃。结果 4种单胺类神经递质的最低检测限为0.01515～0.01815ng,回收率为85.3%～100.5%。结论该法具有快速、准确、灵敏、样品制备简便等优点,可用于大鼠脑组织中单胺类神经递质的分离检测。     

胎儿脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相色谱分析

单胺类递质是调节生理功能的重要物质基础,单胺类递质及其代谢产物在体内浓度和代谢的异常,往往会出现精神性的功能紊乱和其它疾病,因此这类化合物的测定对疾病的诊断、治疗和药物研究都有重要意义。目前在     

砷对小鼠脑单胺类神经递质浓度影响及牛磺酸、维生素C的保护作用

[目的]观察亚慢性砷暴露对小鼠脑组织单胺类神经递质浓度的影响.[方法]昆明种小鼠70只,随机分为6组,即饮用水对照组、1ppm As2O3染砷组、2 ppm As2O3染砷组、4 ppm As2O3染砷组、2个保护组(4 ppm As2O3+150 mg/kg牛磺酸和4 ppm As2O3+45 mg/kg维生素C)....     

高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质

建立高效液相色谱-荧光分析方法,研究小鼠脑皮层、海马、纹状体、丘脑等不同部位的单胺类神经递质及其相关物质。脑组织样本经高氯酸沉淀蛋白后进行色谱分析,采用Lichrospher C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为pH 3.06缓冲液(含1 mmol/L庚烷磺酸钠;30 mmol/L磷酸二氢钠-磷酸溶液)-甲醇(85∶15);流速：1.0 mL/min;柱温：35 ℃。荧光检测：激发波长为280 nm,发射波长为315 nm。采用建立的方法,鉴别出小鼠脑中存在去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、酪氨酸、色氨酸、3,4-二羟苯乙酸和5-羟吲哚乙酸等物质;对NE、DA和5-HT进行定量研究,确定它们的线性范围分别为2.4～471.0 ng/mL(r=0.999 6),2.6～519.5 ng/mL(r=0.999 4),2.4～469.3 ng/mL(r=0.999 1),日内、日间RSD均小于9.0%,准确度达到限度要求,提取回收率大于90%。本法专属性好,准确度高,可以反映不同鼠脑区域单胺类神经递质及相关物质含量上的差异。     

高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物

[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。[方法]色谱柱采用WatersC18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每500mL中含辛烷磺酸钠1.25g,磷酸二氢钾6.8g,乙二胺四乙酸18mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V。[结果]5种物质保留时间分别为:去甲肾上腺素3.6min,5-羟吲哚乙酸4.5min,高香草酸5.2min,多巴胺6.2min,5-羟色胺11.9min;线性范围均为20～1000μg/L,最低检测限为4～8μg/L。[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高。     

高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质

目的 建立同时检测小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法 .方法 采用的色谱条件为:C18柱分离,梯度洗脱.结果方法 的检测限(以3倍信噪比计算)2.5μg/L以下,回收率均在87.8%～105.7%之间,样品日内测定峰面积的相对标准偏差在3.4%以下.结论 该方法 具有检测灵敏度高、样品制备简便等优点,对小鼠脑内的3种单胺类递质的检测具有实用价值.     

酸枣仁总皂苷的含量测定

[目的] 测定经大孔树脂纯化后酸枣仁总皂苷的含量。[方法] 酸枣仁药材经乙醇提取,正丁醇萃取,大孔树脂纯化得酸枣仁总皂苷。以人参皂苷Rb1为标准品,香草醛-硫酸液显色,采用紫外分光光度法,543 nm为检测波长,以相应的吸收度A为横坐标（X）,浓度（g/L）为纵坐标（Y）绘制标准曲线。[结果] 回归方程为：Ŷ= 32.526X - 1.675 9,r=0.999 7.皂苷测定在取量1.818~ 29.09 mg/L时,吸光度与皂苷含量呈良好线性关系。精密度实验相对标准偏差（RSD）为0.09%,重现性实验RSD为0.28%,样品和标准品稳定性实验RSD分别为0.42%和1.13%,加样回收率实验结果平均回收率为99.88%,RSD为1.13%,样品中总皂苷的平均含量为54.59%,RSD为0.38.[结论] 建立的含量测定方法可行,稳定,可以用于浸膏的质量控制。     

河北道地药材酸枣仁HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的建立河北道地药材酸枣仁的HPLC-ELSD指纹图谱,为科学评价及有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法收集不同产地酸枣仁药材21批,采用HPLC-ELSD法测定其指纹图谱。色谱条件:C18柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,ELSD检测器,体积流量1.0mL/min,柱温35℃。结果建立了道地酸枣仁药材HPLC-ELSD指纹图谱共有模式,并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。结论方法简便、可靠,可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供依据。     

酸枣仁茶改善小鼠睡眠作用的研究

目的研究酸枣仁茶改善小鼠睡眠作用的影响。方法分别以334、667、1334mg／kgBW剂量的酸枣仁茶给小鼠连续灌胃30d后,通过直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、巴比妥钠闽下剂量催眠实验和巴比妥钠睡眠潜伏期实验,观察不同剂量酸枣仁茶对小鼠睡眠的影响。结果酸枣仁茶能显著延长戊巴比妥钠睡眠时间（P〈0．01）、且睡眠发生率明显增加（P〈0．05）、缩短巴比妥钠睡眠潜伏期（P〈0．01）,且无直接催眠作用,对小鼠的体重无明显影响。结论该酸枣仁茶具有改善小鼠睡眠的作用。     

酸枣仁、酸枣叶化学成分与药理作用研究进展

对宁心安神之要药酸枣仁进行文献研究,通过对已有研究的分析和总结,把握目前酸枣仁的研究方向、深度和广度,为后续的药学研究工作提供理论依据.同时,对酸枣叶的研究文献进行了梳理,通过与酸枣仁的对比分析来探明二者之间的共性与差异,并探讨酸枣叶替代酸枣仁入药的可行性.本文按照研究方向的不同,归纳总结成六个部分,分别为化学成分、药理研究、临床应用、含量测定方法、提取技术与炮制加工.酸枣仁中化学成分丰富,已探明的具有生理活性的成分为黄酮类、皂苷类、生物碱类、脂肪油等,酸枣叶中亦含有这些化学成分,由于二者为同一植株的不同部位入药,因此,同出一源而导致的某些化学成分一致是可以被预计的.但是酸枣仁与酸枣叶不能相互代替使用.酸枣叶具有的宁心安神作用虽然不及枣仁显著,但作为酸枣仁栽培种植的副产品,仍具有很好的临床功效,因此,其具有进一步被研究和开发的商业价值.     

Comparative pharmacokinetics of six major compounds in normal and insomnia rats after oral administration of Ziziphi Spinosae Semen aqueous extract

Ziziphi Spinosae Semen (ZSS), a traditional Chinese medicine, is used in clinics for the treatment of insomnia in China and other Asian countries. Herein, we described for the first time a comparative pharmacokinetics study of the six major compounds of ZSS in normal control (NC) and para-chlorophenylalanine (PCPA)-induced insomnia model (IM) rats that were orally administered the aqueous extract of ZSS. An ultra-high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole orbitrap mass (UHPLC-Q-Orbitrap-MS) method was developed and validated for the simultaneous determination of coclaurine, magnoflorine, spinosin, 6‴-feruloylspinosin, jujuboside A (JuA), and jujuboside B (JuB) in ZSS in rat plasma. The established approach was successfully applied to a comparative pharmacokinetic study. The systemic exposures of spinosin and 6‴-feruloylspinosin were decreased in the IM group compared to the NC group, while plasma clearance (CL) was significantly increased. The T_max values of JuA and JuB in IM rats were significantly lower than those in NC rats. The T_1/2 of JuA in the IM group was significantly accelerated. The pharmacokinetic parameters of coclaurine and magnoflorine were not evidently affected between the two groups. These results indicate that the pathological state of insomnia altered the plasma pharmacokinetics of spinosin, 6‴-feruloylspinosin, JuA, and JuB in the ZSS aqueous extract, providing an experimental basis for the role of ZSS in insomnia treatment. The comparative pharmacokinetics-based UHPLC-Q-Orbitrap-MS using full-scan mode can therefore provide a reliable and suitable means for the screening of potentially effective substances applied as quality markers of ZSS.     

酸枣仁总黄酮抗抑郁作用的实验研究

[目的]研究酸枣仁总黄酮对行为绝望小鼠抑郁模型的影响。[方法]采用小鼠强迫游泳实验和悬尾实验等抑郁模型,小鼠行为绝望的不动时间作为指标,考察酸枣仁总黄酮抗抑郁活性。[结果]酸枣仁总黄酮低、中、高剂量组均能减少小鼠强迫游泳和悬尾不动时间,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05);与阳性药组比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]酸枣仁总黄酮具有显著的抗小鼠实验性抑郁作用。     

河北道地药材酸枣仁脂肪油GC-MS指纹图谱研究

目的建立河北道地药材酸枣仁的气象质谱色谱连用(gaschromatograph mass spectrometer,GC-MS)指纹图谱,为科学评价及有效控制酸枣仁药材质量提供新方法。方法收集不同产地酸枣仁药材21批,采用GC-MS法测定其指纹图谱。色谱柱,HP-5柱(50 m×250μm×0.25μm);柱温50℃,以10℃/min升至160℃,保持5min;再以6℃/min升至250℃。流速0.70 mL/min,分流比为30∶1,进样口温度250℃,进样量1μL。质谱条件,电离方式为电子电离,离子源温度230℃,电子能量70 eV;采集方式,全谱扫描,扫描质量范围0~800 mAU;载气为He。结果建立了道地药材酸枣仁GC-MS指纹图谱共有模式,并对不同产地酸枣仁药材进行了相似度比较。分析鉴定了8种脂肪油成分,分别计算了相对百分含量。结论方法简便、可靠,可用于不同产地酸枣仁药材的指纹图谱测定和质量评价,为有效控制酸枣仁药材的内在质量提供依据。     

含与不含朱砂的万氏牛黄清心丸解热作用的实验研究

目的比较万氏牛黄清心丸与去除朱砂及酸枣仁替代朱砂的万氏牛黄清心丸对发热动物体温的影响作用。方法给大鼠灌胃相应的药物后,于背部皮下注射酵母,制备大鼠发热模型,用非接触式红外测温仪分别于致热后o．5、1、2、4、6、8h测量动物肛温,比较各药物对动物体温的影响。结果万氏牛黄清心丸组动物体温在1～4h与模型组无明显差异,6—8h时体温明显下降（P〈0．01）。去除朱砂及酸枣仁替代朱砂的万氏牛黄清心丸的高、低剂量组在4h内体温与模型组比较均无明显差异;去除朱砂的万氏牛黄清心丸高剂量组、酸枣仁替代朱砂的万氏牛黄清心丸低剂量组在4h后体温明显低于模型组,直至8h时体温抑制作用仍明显存在。与万氏牛黄清心丸比较,不含朱砂的各药组在致热6h内体温差异无统计学意义,至8h时去除朱砂的万氏牛黄清心丸高、低剂量组体温明显高于万氏牛黄清心丸组。结论含与不含朱砂的万氏牛黄清心丸在动物致热4h后均表现出明显的解热作用,且在6h内各药物作用差异无统计学意义,但在作用强度上以酸枣仁替代朱砂的万氏牛黄清心丸低剂量与万氏牛黄清心丸更接近。     

蜜炙酸枣仁炮制工艺初步研究

目的：优选蜜枣仁最佳炮制工艺。方法以饮片外观、水溶性浸出物、脂肪油、总黄酮、斯皮诺素、酸枣仁皂苷A含量为指标,选定炮制温度、炮制时间、加蜜量三因素,按L9(34)正交试验设计优选蜜枣仁最佳炮制工艺。结果通过工艺优化后,蜜枣仁最佳炮制工艺为：炮制温度150℃、炮制时间4.5 min、加蜜量7.5%。结论优化后的蜜炙酸枣仁工艺稳定可行。     

酸枣仁合剂对大学生考试焦虑的防治研究

观察酸枣仁合剂对学生考试焦虑的防治效果。方法将考试前具有焦虑情绪（或焦虑症）的大学生随机分为二组：服药组，于考试前一周服酸枣仁合剂，连服７ｄ；对照组，服等量的红糖水。两组学生服药（或糖水）前后结果以自测Ｚｕｎｇ焦虑自评量表（ＳＡＳ）得分及考试成绩进行比较，数据用ｔ检验行统计学分析。结果服药组服药前后ＳＡＳ得分之差明显大于对照服糖水前后得分之差（ｐ＜０．００１）；服药组学生考试成绩明显优于对照组（ｐ＜０．０５）。结论酸枣仁合剂具有防治情绪紧张引致焦虑的作用。