包裹破伤风类毒素蛋白的聚乳酸及聚乳酸/聚乙醇酸共聚微球的制备和体外释放特性

 目的探索包裹破伤风类毒素蛋白（TT）的聚乳酸(PLA）及聚乳酸/聚乙醇酸(PLG)共聚微球的制备及其体外释放特性。方法采用溶剂蒸发技术,先以一种小分子量生物染料 伊文思蓝为包裹物模型,通过显微镜观察和比色分析探索微球的制备特性和最佳条件。在此基础上制备包裹TT的PLA和 PLG微球。结果微球的制备过程中存在着内水相蛋白朝外水相的流失,当聚合物浓度加大到25%～30%时可使蛋白流失大大减少。包裹蛋白在微球中的分布与微球粒径的重量分布成正相关关系;随着微球粒径的增大,微球所载蛋白的体外释放高峰期延迟。结论通过本模型条件可制备外观高质量的微球,并可通过制备不同粒径大小的微球来控制包裹蛋白在体外和体内的释放高峰期。     

重组人Cu,Zn-SOD包含体的复性、纯化及复性蛋白稳定性研究

 目的通过体外复性和纯化技术获得具有高纯度、高生物活性的重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCu,Zn-SOD),并研究复性蛋白的稳定性。方法以透析法对在大肠杆菌中以包含体形式表达的rhCu,Zn-SOD进行复性,采用金属螯合亲和层析对复性样品进行纯化,通过酶活性测定考查复性和纯化的rhCu,Zn-SOD的热稳定性、pH稳定性和对变性剂的稳定性。结果建立了体外透析复性的基本条件,其比活可达2 380 U·mg^-1。该复性样品经金属螯合亲和层析纯化后,结果得到纯度大于95%、比活5 000 U·mg^-1、活性回收率大于100%的目的蛋白。复性和纯化蛋白在温度25～70℃和pH 5.0～10.5内活性稳定,并可耐受2～10 mol·L^-1的尿素和2%～8%的十二烷基硫酸钠(SDS),对更强烈的变性剂盐酸胍稳定性较弱。结论确定了重组人Cu,Zn-SOD包含体的体外复性条件和复性蛋白纯化方法,且复性蛋白表现出很好的稳定性,为重组人Cu,Zn-SOD的生产奠定了良好基础。     

新型利培酮PLGA微球的制备及体外释放研究

 目的 制备新型利培酮微球,并快速评价微球的体外释放性质。方法 采用O/W乳化溶剂挥发法制备微球,研究PLGA浓度、乳化均质转速、油相与水相比例等对微球粒径和包封率的影响。通过升高释放介质温度建立体外释放加速评价方法。结果 在37 ℃ pH 7.4 PBS中,利培酮微球以零级释放模式缓释15 d,快速释放的时间与上市利培酮微球基本一致而无延滞期。采用45 ℃加速释放可提高释放速度5倍,在3 d内完成评价,加速释放评价与长期释放相关性好。结论 本实验所制备的利培酮微球,可开发为释放两周的制剂。由于无延滞期,在临床使用和提高患者顺应性上比已上市产品更具优势。加速评价方法可对产品进行快速质量控制。     

一种包埋蛋白质药物注射用多孔微球支架制备工艺及其体外释放研究

 目的制备能缓慢释放蛋白类药物的细胞生长支架并进行制备工艺优化。方法以牛血清白蛋白(BSA)为模型药物,制备含药聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球作为组织工程支架。通过单因素考察实验,寻求影响微球表观形态及释放的主要因素,以正交设计法优化微球制备工艺。用扫描电镜观察微球表观形态,用增重法测定吸水率考察其孔隙率,并对微球粒径分布、体外释药等指标进行评价。结果制得组织工程用PLGA微球为中空疏松多孔结构。制备过程中的搅拌速度、PLGA浓度、均质乳化速度、发泡剂浓度、分散相PVA浓度以及内外水相体积比影响微球粒径、表面孔径大小、空隙率的大小。正交设计优化处方的微球平均粒径为435μm,表面孔穴平均孔径为23μm,30d累计释放可达70%。结论采用可生物降解的聚合物PLGA为载体材料制备的PLGA微球具有可注射、载荷细胞和缓慢释放蛋白类药物的特性,有望成为一种新型组织工程支架用于病变组织的修复和相关疾病的治疗。     

可生物降解聚合物用作制剂载体材料的疫苗微球研究进展

 目的 综述可生物降解聚合物材料作为疫苗载体材料制备疫苗微球制剂的研究状况,为此领域的研究提供参考。根据国外文献,结合作者近年的研究,较全面地介绍了疫苗微球制剂的制备、体外降解及抗原释放、体内分布及动物的免疫效果,提出了疫苗微球制剂研究中存在的问题。结果与结论 与目前通用的液体疫苗相比,可生物降解聚合物疫苗微球制剂的研究结果已显示其潜在优势,经不断改进,疫苗微球制剂终将用于人体。     

β-环糊精聚合物微球的合成及药物控释行为的研究

目的:制备药物控释载体β-环糊精聚合物(β-CDP)微球,并探讨微球对中药制剂的控释机理。方法:以反相乳液聚合法制备β-CDP微球,用相溶解度法研究β-CD对盐酸小檗碱(BH)的包合作用,并以人工肠(胃)液为释放介质,用分光光度法研究微球的体外释放。结果:在pH=1.4(胃)和pH=7.4(肠)条件下,β-CD可与BH形成1∶1摩尔比的包合物,包合常数Ka分别为48.85 L/mol和122.11 L/mol。BH在β-CDP微球中的释放速率存在明显的零级释放规律,且pH=1.4下的释放速率比pH=7.4下的快。结论:β-环糊精聚合物微球是一理想的药物控释载体。     

蛋白质药物聚乳酸/羟基乙酸共聚物微球处方工艺设计中稳定化方法的研究进展

 目的 介绍蛋白质药物(PLGA)缓释微球近年来的研究进展,特别是微球制备工艺及其体内外释放过程中稳定化策略。方法根据国内外文献,较全面地综述了目前蛋白质药物PLGA微球在制备工艺和体内外释放过程中蛋白质稳定性方面存在的问题及一些解决的办法。结果与结论 由于蛋白质稳定性较差,开发蛋白类药物缓释微球非常具有挑战性。重组人生长激素微球的上市为蛋白质药物缓释微球的开发提供了范例,也表明这是一项很有前景的技术。     

破伤风类毒素聚乳酸微球中蛋白质稳定性的研究

 目的研究破伤风类毒素聚乳酸微球中破伤风类毒素在制备过程和体内酸性环境中的稳定性及微球中附加剂的稳定作用。方法采用分子排阻色谱法,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法,双向免疫扩散法。结果在制备过程和体内酸性环境中破伤风类毒素活性有轻微下降;附加剂增加微球包封率,改善药物释放,稳定蛋白质活性,尤其是具有多羟基结构的附加剂。结论破伤风类毒素聚乳酸微球中的蛋白质在制备过程和体内酸性环境中基本稳定,聚乳酸微球可望发展成为疫苗控释系统。     

磁性顺铂微球的药物控释研究

 目的：改善磁性顺铂微球的药物突释和滞释，实现控释。方法：用不同的工艺制备磁性顺铂微球并进行体外、体内药物释放的测定。结果：当高分子骨架材料中，疏水性纤维多糖-含水解键的苯酐聚合物=7：3，搅拌速度1500r·min^-1，成型温度20℃时，制备的磁性顺铂微球具有较好的控释特性。结论：对开发磁性微球和导向治疗恶性肿瘤有实际意义。     

正交设计优化五味子中木脂素肠溶微球的制备工艺

目的 探索五味子中木脂素肠溶微球的最佳制备工艺,并考察其体外释药特性.方法 采用相分离法,以聚丙烯酸树脂Ⅱ作为载体材料制备微球,并以微球包封率、收率、外观形态为考察指标,正交设计优化出五味子中木脂素微球的制备工艺.结果 制得微球形态圆整,包封率31.1％,收率95.0％.五味子中木脂素肠溶微球在pH6.8的缓冲介质中体外释药良好,3h释放可达到95.0％.结论 本制备工艺稳定,操作简便,产品体外释放良好,可以用于五味子中木脂素肠溶微球的制备.     

口服胸腺肽肠溶微球的制备及其体内外评价

 目的制备胸腺肽肠溶微球,并对其体外释药特性及调节免疫的体内活性进行评价。方法以聚丙烯酸树脂Ⅱ号为载体材料,用改良的O/O液中干燥法制备胸腺肽肠溶微球。考察了载药量、聚合物浓度对包封率和微球体外释药特性的影响,并进一步探讨口服胸腺肽微球对氢化可的松免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果实验表明,随着载药量的增加,包封率呈下降趋势;聚合物溶液浓度提高会增加微球的包封率。通过优化制备工艺参数,药物包封率可达89.7%。胸腺肽微球在体外释药有明显突释,提高聚合物浓度,降低载药量可以减少体外突释。氢化可的松免疫抑制小鼠经口服胸腺肽微球后可以提高小鼠淋巴细胞玫瑰花结形成率,证明所制备的胸腺肽微球具有免疫调节活性。结论用改良的O/O液中干燥法制备胸腺肽肠溶微球,通过调节制备工艺参数,可以得到高包封率的微球。动物实验表明,胸腺肽肠溶微球口服后具有调节和增强免疫的作用。     

磷酸川芎嗪星型聚乳酸缓释微球的制备与体外释放研究

目的制备磷酸川芎嗪星型聚乳酸载药微球,研究制备工艺参数对载药微球的药物包封率的影响,并对其体外释放特性进行表征。方法以星型聚L-乳酸(sPLLA)为聚合物基材,采用复乳-溶剂挥发法制备磷酸川芎嗪(LP)星型聚乳酸载药微球(sPLLA/LP),采用正交试验优化处方,研究sPLLA/LP的体外缓释特性,并用FT-IR和SEM对微球进行表征。结果通过极差分析与方差分析建立sPLLA/LP的药物包封率与制备工艺参数之间的关系,并在此基础上遴选出优化工艺。LP与sPLLA结合良好,sPLLA/LP微球缓释7 d后,sPLLA出现部分降解。采用优化工艺所制备的sPLLA/LP微球具有良好的缓释效果,SEM分析与缓释模型的拟合结果表明,0~48h阶段的释药机制为药物扩散和聚合物降解协同作用;48~144 h阶段则主要为药物扩散释药。结论采用复乳-溶剂挥发法制备的sPLLA/LP微球的药物包封率较高、体外释药平稳。     

人参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及纯化

研究提取人参叶中的总RNA,采用RT-PCR扩增人参叶Cu/Zn-SOD基因,构建pET-28（a）-Cu/Zn-SOD原核表达载体。使用Escherichia coli BL21（DE3）感受态细胞进行IPTG诱导表达。利用镍离子亲和层析进行纯化,并采用黄嘌呤氧化酶法测定目的蛋白的酶活。经RT-PCR扩增的人参Cu/Zn-SOD基因序列与GenBank数据库中公布的高丽参Cu/Zn-SOD基因序列同源性为99.00%。经IPTG诱导,目的蛋白的表达量约为44.42%,相对分子质量为16.30 kDa。纯化后的蛋白酶活可达到10 596.69 U·mg^-1。通过分子生物学方法,成功构建了人参pET-28（a）-Cu/Zn-SOD原核表达载体,为进一步研究人参Cu/Zn-SOD生物学功能奠定了基础。     

盐酸普萘洛尔微球剂的制备及其质量评价

 目的:对盐酸普萘洛尔白蛋白微球的制备工艺进行考察,并评价其质量?方法:采用乳化-热固化法制备微球,并对其形态学、载药量、体外释药等性质进行了研究,同时用在体蟾蜍上腭模型评价了其鼻纤毛毒性?结果:微球形态圆整,大小较均匀,粒径1～10μm,载药量4.05%,24h累计释药达85.5%?给予微球4h后,蟾蜍上腭70%纤毛活动剧烈,而溶液剂给药5min,纤毛全部死亡?结论:微球剂的制备工艺对其质量有较大影响,制备良好的微球剂能有效降低盐酸普萘洛尔的鼻纤毛毒性?     

多指标综合评价法优选阿霉素微球的制备工艺及体内的初步考察

 目的优化阿霉素微乳-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球制备工艺。方法采用“复乳-液中干燥”法制备阿霉素PLGA微球。通过正交实验结合多指标综合评价法优选最佳制备工艺。并通过测定大鼠皮下注射微球残留药量对优化制备工艺制备的微球进行初步的体内释放研究。结果通过对正交实验Z值结果进行分析,最佳制备工艺为:PLGA质量浓度为800 g·L^-1,W/O相体积之比为1∶3,PVA质量浓度为4%。阿霉素PLGA微球在大鼠体内释放平稳,突释较小,10 d的残留药量为24.1%。结论正交实验结合多指标综合评价法用于载药微球的制备工艺优化实用有效。阿霉素PLGA微球能达到治疗肿瘤的长效释药的要求。     

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??OBJECTIVE To develop an easy to scale-up preparation process for exenatide-loaded long-acting microspheres, and develop a method that can be used to rapidly evaluate the in vitro release properties of the microspheres. METHODS The primary emulsion could be made by high shear emulsification process combined with high pressure homogenization method , then exenatide-loaded microspheres were prepared by a modified coacervation method. In the coacervation step, static mixer was used for mixing the primary emulsion and the coacervation reagent. RESULTS High pressure homogenization could reduce the size of the primary emulsion to about 200 nm. The encapsulation efficiency of microspheres was greater than 96.8%, and the amount of burst release in 1 h was less than 0.5%. When the scale of microspheres preparation was magnified by five times, the characteristics of the obtained microspheres was the same as the small scale batch. The in vitro release curves showed that the continued release time lasted for nearly 4 weeks after the 17 d lag phase. The drug release rate at 45 ??was as high as 2.5 times of that at 37 ??, with same release curves. CONCLUSION The established preparation process of exenatide-loaded long-acting microspheres, which uses static mixer for mixing the primary emulsion and coacervation reagent, is easy for scaling-up and industrialization. Accelerated test at 45 ?? can be used to rapidly evaluate the in vitro release profile of the microspheres.
     

壳聚糖─—绞股蓝总皂甙缓释微球的研制

以交联壳聚精为载体．制备了绞股蓝总皂甙缓释微球，考察了壳聚精浓度、绞股蓝总皂甙／壳聚精配比及交联时间等因素对微球的制备和溶出度的影响．结果表明：此缓释微球在水和人工胃液中均具有显著的缓释作用．微球的收率达90％以上．     

低分子肝素修饰超氧化物歧化酶及修饰酶的理化性质研究

 目的用低分子肝素(LMWH)化学修饰超氧化物歧化酶(SOD),并研究修饰酶(LMWH-SOD)的理化性质,以期获得高稳定性的酶。方法采用高碘酸钠法活化LMWH,与Cu,Zn-SOD共价结合;凝胶过滤层析法和SDS-PAGE法测定其相对分子质量 (M_r);分别用Folin-酚法、Elson-Morgan法、Bitter-Muir咔唑法、Teho法测定其酶蛋白、氨基葡糖、葡糖醛酸及硫酸基含量;用水浴、酸碱缓冲液及蛋白酶分别考察其耐热、耐酸碱及抗蛋白酶酶解能力。结果用LMWH成功修饰Cu,Zn-SOD;修饰酶M_r增大且不均一,耐热、耐酸碱及抗蛋白酶酶解能力均提高。结论用LMWH可成功修饰SOD,并改进SOD性能。