藏药铁棒锤-诃子药对配伍的减毒存效作用研究

目的：探究铁棒锤配伍诃子对铁棒锤毒性与药效的影响。方法：通过小鼠急性毒性实验,比较铁棒锤配伍诃子、铁棒锤单用的小鼠LD50(半数致死量)差异;通过醋酸扭体实验、热板法实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验,比较铁棒锤与诃子配伍前后的抗炎镇痛效果差异。结果：铁棒锤的LD50为1.257 g·kg-1,铁棒锤与诃子配伍后未能测出半数致死量,只测出了最大给药量为7 g·kg-1,诃子与铁棒锤配伍后显著降低了铁棒锤的毒性;与空白组相比,铁棒锤组(8.7mg·kg-1)、配伍组(8.7mg·kg-1+8.7mg·kg-1)均能够有效地减少小鼠扭体次数,提高小鼠的痛阈值,减轻小鼠耳肿胀程度,铁棒锤与诃子配伍保留了铁棒锤的抗炎镇痛效果。结论：诃子与铁棒锤配伍能够减轻铁棒锤的毒性,保留铁棒锤的抗炎镇痛效果,起到了减毒存效的作用。     

基于均匀设计的诃子制草乌特征性成分对H9c2心肌细胞毒性的影响

摘要：目的:筛选诃子制草乌特征性成分中的主要毒性作用成分和减毒作用成分。方法:采用均匀设计法安排实验,3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法考察诃子制草乌中4种特征性成分的不同配比对H9c2心肌细胞存活率的影响;应用Data Processing System（DPS）数据处理软件,对不同配比的细胞存活率进行逐步回归并绘制等高线图,分析4种特征性成分对H9c2心肌细胞毒性的影响及交互作用关系;以细胞存活率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞核平均荧光强度、线粒体膜电位为指标进一步对分析结果进行实验验证。结果:4种指标性成分中,存在于草乌中的新乌头碱、苯甲酰新乌头原碱均可明显降低H9c2心肌细胞存活率,以新乌头碱对毒性的贡献更大;诃子中的没食子酸、鞣花酸均可提高模型组（新乌头碱+苯甲酰新乌头原碱）细胞存活率,且没食子酸的作用强于鞣花酸。从交互作用的程度来看,具有显著降低H9c2心肌细胞存活率的交互项为新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱;而交互项新乌头碱和鞣花酸、苯甲酰新乌头原碱和没食子酸可明显提高H9c2心肌细胞存活率。实验证实,新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱共同作用,与对照组相比,细胞存活率明显降低（P<0.01）,LDH漏出率和细胞核平均荧光强度增加（P<0.01）,线粒体膜电位降低（P<0.01）;在新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱混合物中单独加入没食子酸或鞣花酸均可提高细胞存活率（P<0.01）,升高线粒体膜电位（P<0.05或P<0.01）,降低LDH的漏出和细胞核平均荧光强度（P<0.01）;同时加入没食子酸和鞣花酸,其毒性作用进一步减弱。结论:诃子制草乌中的新乌头碱和苯甲酰新乌头原碱均具有一定的心肌毒性,以新乌头碱对毒性的贡献更大,两者具有协同作用;没食子酸和鞣花酸均可降低由两种乌头碱类成分产生的毒性作用,以没食子酸的减毒作用贡献更大,两者具有协同作用。     

心肌肽对阿霉素诱导心肌细胞H9c2损伤的影响

目的探讨心肌肽(cardiomyopeptide,Car)对阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的大鼠心肌细胞H9c2损伤的保护作用及其可能机制。方法 MTT法检测不同浓度(0、10、20、40 mg·L~(-1))心肌肽分别预处理6、8、12 h后,对DOX损伤心肌细胞存活率的影响; Western blot法检测心肌肽对DOX诱导心肌细胞中caspase-3、Bcl-2、Bax、IGF~(-1)R和IGFBP-3蛋白表达影响。结果随着心肌肽预处理时间增加,细胞存活率明显提高,且呈剂量依赖性;心肌肽40 mg·L~(-1)预处理8 h,使DOX的IC50值由(1. 2±0. 4)μmol·L~(-1)右移至(2. 3±0. 2)μmol·L~(-1); Western blot分析表明,经心肌肽处理后,Bax、caspase-3和IGFBP-3蛋白表达降低,Bcl-2和IGF~(-1)R蛋白表达增加,呈明显的剂量依赖性。结论心肌肽能保护心肌细胞,对抗DOX诱导的心肌细胞损伤,其机制可能与下调Bax和IGFBP-3,上调Bcl-2和IGF~(-1)R蛋白表达,抑制caspase-3活性有关。     

杨桃根活性成分对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的改善作用及机制

目的:研究杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的改善作用及机制.方法:将H9c2心肌细胞分为正常组、高糖组、渗透压对照组和DMDD高、中、低浓度组(8、4、2μmol/L).正常组和高糖组细胞分别加入低糖(含5.5 mmol/L葡萄糖,下同)、...     

BMAL1对H2O2诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制探讨

目的 探讨节律基因BMAL1对过氧化氢（H2O2）诱导的H9C2心肌细胞损伤的影响及机制。方法 构建 BMAL1稳定过表达的H9C2细胞系后,实验分为2个部分。（1）实验1。对照组、H2O2组（0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）、 BMAL1 过表达（BMAL1-OE）组（BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞）、BMAL1 过表达+H2O2（BMAL1-OE+H2O2）组 （0.2 mmol/L的H2O2处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h）。（2）实验2。H2O2组、BMAL1-OE+H2O2组、BMAL1过表 达+抑制 NRF2+H2O2（BMAL1-OE+ML385+H2O2）组（NRF2 抑制剂 2 μmol/L 的 ML385 预处理 BMAL1 稳定过表达 H9C2 细胞 24 h,再用 0.2 mmol/L 的 H2O2处理 24 h）、BMAL1 过表达+抑制 HO-1+H2O2（BMAL1-OE+Znpp+H2O2）组 （HO-1抑制剂5 μmol/L的Znpp预处理BMAL1稳定过表达H9C2细胞24 h,再用0.2 mmol/L的H2O2处理24 h）。CCK-8 法检测细胞活力,羟胺法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、TBA 法检测丙二醛（MDA）含量,Western blot 法检测 BMAL1、核因子 E2 相关因子 2（NRF2）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达水平。结果 （1）与 Control 组相比, BMAL1-OE组BMAL1 mRNA表达水平升高,H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性下降、MDA含量增加,BMAL1、 NRF2和HO-1蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）;与H2O2组相比,BMAL1-OE+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活 性增加,MDA 含量减少,而 BMAL1、NRF2 和 HO-1 蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）;（2）与 BMAL1-OE+H2O2组相 比,BMAL1-OE+ML385+H2O2组和BMAL1-OE+Znpp+H2O2组细胞活力和细胞上清液SOD活性降低,MDA含量增加 （P＜0.05）。结论 BMAL1可能通过上调NRF2/HO-1信号轴,减轻H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。     

阿魏酸预处理对阿霉素诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用

目的研究阿魏酸(FA)对阿霉素(DOX)诱导H9c2心肌细胞损伤的影响。方法 1μmol·L-1DOX处理H9c2细胞24 h,建立心肌损伤模型。FA预处理组,10、20、40μmol·L-1FA预处理2 h后,再与DOX共培养24 h。CCK-8比色法测定细胞生存率;相差显微镜观察细胞形态学改变;生化试剂盒检测LDH、CK、MDA、SOD;DCF-DA荧光染色流式细胞术检测细胞内活性氧;AO-EB染色、DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;Western blot法测定caspase-3、Bax、Bcl-2表达。结果 DOX降低H9c2细胞生存率,诱导氧化应激损伤和细胞凋亡。FA预处理剂量依赖性提高细胞生存率,减轻LDH、CK外漏和损伤细胞形态学改变。FA减少ROS生成,降低细胞MDA水平,增加SOD酶活性,抑制DOX诱导的氧化应激。FA下调促凋亡蛋白caspase-3和Bax,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2,减少心肌细胞凋亡。结论 FA可抑制DOX诱导的氧化应激和心肌细胞凋亡,减轻心肌损伤。     

柚皮素对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞炎症和凋亡的作用机制研究

目的探讨柚皮素对脂多糖(LPS)诱导的H9c2心肌细胞的炎症和凋亡的作用机制。方法将大鼠H9c2心肌细胞随机分为4组:空白对照组、模型组和低、高2个浓度实验组。用10μg·mL-1 LPS处理模型组和实验组的细胞造成细胞损伤,空白对照组用正常含血清培养液处理细胞。低、高2个浓度实验组分别加入5,20μmol·mL-1柚皮素处理12 h。用实时荧光定量-PCR法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因的表达水平,缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡情况(阳性细胞数与总细胞数比值),蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和核转录因子-κB (NF-κB)蛋白表达水平。结果空白对照组、模型组和低、高2个浓度实验组的IL-1β基因相对表达量分别为1.00±0.18,1.57±0.17,1.55±0.26和1.15±0.13;IL-6基因相对表达量分别为1.00±0.16,1.75±0.21,1.71±0.16和1.32±0.20;TNF-α基因相对表达量分别为1.00±0.15,2.68±0.17,2.65±0.23和1.51±0.18;心肌细胞凋亡率分别为(2.87±0.81)%,(13.82±1.34)%,(13.78±1.82)%和(7.32±0.64)%。上述指标:模型组与空白对照组比较,或高浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白结果的趋势与基因一致。结论柚皮素通过调控NF-κB通路改善脂多糖诱导的H9c2心肌细胞的炎症反应和细胞凋亡。     

不同剂量前列腺素E2对H9c2心肌细胞肥大的影响

目的:研究前列腺素E2(PGE2)对H9c2心肌细胞的肥大作用,并分析其量效关系,为寻找抗心肌肥大的潜在靶点提供理论依据.方法:将H9c2心肌细胞分为空白对照组(C组)和PGE2处理组,PGE2处理组又分为小剂量PGE2组(D1组)、中剂量PGE2组(D2组)和大剂量PGE2组(D3组).各组细胞培养液中PGE2终浓度分别为0、0.1、1及10 μmol/L.给药孵育48 h后,利用荧光显微镜观察大鼠H9c2心肌细胞形态及体积;通过测量细胞直径大小、BCA法测定细胞总蛋白含量来确定心肌细胞是否肥大;RT-PCR技术测量心钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(Brain natriuretic peptide,BNP)mRNA的表达水平,以此判断是否发生病理性肥大.结果:与C组比较,免疫荧光显示D1组、D2组及D3组细胞形态改变、体积增大;细胞直径及总蛋白含量显著增加(P＜0.05),不同剂量PGE2组间亦具有统计学差异(P＜0.05);D2组及D3组较C组细胞内ANP、BNP mRNA表达水平显著增高(P＜0.05).结论:PGE2可剂量依赖地诱导H9c2心肌细胞肥大,较大剂量PGE2引发心肌细胞病理性肥大.抑制PGE2合成有望为抑制心肌肥大提供靶点.     

小檗碱对棕榈酸诱导大鼠心肌细胞H9c2脂毒性损伤的影响

摘要：目的:探讨小檗碱对棕榈酸（PA）诱导大鼠心肌细胞H9c2脂毒性损伤的影响。方法:在正常培养的H9c2细胞中,采用细胞计数试剂盒（CCK8）检测细胞存活率;采用ELISA试剂盒检测细胞裂解液中氧化还原指标：丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）;采用免疫印迹法Western blot检测细胞内能量感受器磷酸化AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/AMPK及肝激酶B1（LKB1）、沉默调节蛋白1（SIRT1）和成纤维细胞生长因子-21（FGF-21）的蛋白表达。结果:PA在100μmol·L-1浓度时,处理H9c2细胞24 h以上产生明显细胞毒性,与正常对照组（不含PA）比较,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。使用5μmol·L-1小檗碱预处理H9c2细胞4 h可以逆转PA对H9c2中MDA、SOD和GSH的影响,同时细胞存活率明显上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。同时,在给予小檗碱治疗后,p-AMPK/AMPK、LKB1、SIRT 1和FGF-21蛋白的表达水平亦显著增加（P＜0.05）。但使用FGF21的干扰RNA（siRNA）后,小檗碱激活AMPK的现象几乎被逆转,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:小檗碱可显著改善PA诱导的心肌细胞脂毒性,其机制可能与经典的FGF-21/AMPK信号通路有关。     

青藤碱对脂多糖诱导损伤H9c2大鼠心肌细胞的保护作用

目的 探讨青藤碱对脂多糖诱导损伤的H9c2大鼠心肌细胞的保护作用及其机制.方法 将H9c2大鼠心肌细胞分为正常对照组、脂多糖组和青藤碱(25,50,100μmol·L-1)组.按实验因素处理后,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞促炎因子的mRNA水平.通过免疫印迹法(Western blottin...     

西青果的质量标准提升和指纹图谱建立

目的 建立西青果Terminalia chebula Retz.诃黎勒酸和鞣花酸HPLC检测方法及指纹图谱鉴别方法,同时对15批次西青果药材进行质量标准研究。方法 收集3个道地产地15批次西青果药材,按《中国药典》中方法对西青果药材进行全检;新建诃黎勒酸和鞣花酸HPLC检测方法,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量为1 mL·min^-1,检测波长为258 nm,柱温为35℃,进样量为5 μL,并进行方法学验证;同时建立西青果HPLC指纹图谱检测方法,进行多批次药材相似度分析,指认药材特征峰并进行聚类分析。结果 15批次药材检查结果均符合《中国药典》2020年版标准,薄层色谱法（TLC）结果显示,供试品在西青果对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点;3产地15批西青果样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物（冷浸法）质量分数分别为6.74%～9.36%、2.41%～5.87%、0.05%～0.61%、51.03%～73.23%,平均值分别为7.66%、2.88%、0.22%、64.13%;新建立HPLC方法学考察均符合《中国药典》相关要求,15批次西青果药材中诃黎勒酸、鞣花酸质量分数为122.56～224.37、19.32～63.60 mg·g^-1。15批西青果指纹图谱相似度均大于0.90。结论 在西青果原有标准上增加灰分检查,新建诃黎勒酸和鞣花酸含量测定及指纹图谱方法,该方法专属性强,简便可靠,利用所建方法对不同产地批次的15批样品进行测定并综合评价,可为丰富该药材质量控制内容和药典修订提供依据。     

白花蛇舌草乙醇提取物体外诱导人AML-M2白血病细胞凋亡机制研究

目的 观察白花蛇舌草乙醇提取物（ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd.,EEHDW）对AML-M2白血病Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响机制。方法 采用MTT比色法、Hoechest荧光染色检测测定EEHDW作用后Kasumi-1细胞增殖和凋亡的情况,Western blotting法检测Kasumi-1细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、Cyto-C、P65、p-P65、IkBα、p-IkBα、IKKα/β、C-myc以及AML1-ETO的蛋白水平。结果 EEHDW抑制急性髓系白血病Kasumi-1细胞增殖,并具有时间和浓度依赖性。0.04,0.06,0.08 mg·mL^-1的EEHDW能诱导细胞凋亡（P<0.05或P<0.01）。EEHDW可以显著上调Cyto-C、cleaved PARP、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9以及Bax的表达水平,而降低Bcl-2、C-myc和AML1-ETO蛋白的表达,同时EEHDW能够浓度依赖性地增加p-P65、p-IkBα的蛋白表达。结论 EEHDW诱导Kasumi-1细胞凋亡一方面是通过调节Bax/Bcl-2的表达影响线粒体途径,另外一方面还与激活NF-кB信号通路有关,在这个过程中同时抑制原癌基因C-myc和AML1-ETO融合基因的表达。     

麻花秦艽-红景天药对不同比例配伍抗缺氧作用及机制研究

目的 筛选麻花秦艽-红景天药对抗缺氧的最佳配伍比例,联合体内、外实验及网络药理学探讨其抗缺氧作用及可能机制。方法 将PC12细胞进行分组,通过Na₂S₂O₄法、H₂O₂法及物理缺氧法建立细胞缺氧模型,对麻花秦艽-红景天药对抗缺氧配伍比例进行初步筛选;将80只SPF级雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、麻花秦艽-红景天不同配伍比例组（2：8,3：7,4：6,5：5,6：4,7：3,8：2）,每组8只。预先灌胃给药15 d后,除空白组外,其余各组均进行常压缺氧试验,记录各组小鼠生存时间并检测空白组、模型组、阳性组、麻花秦艽-红景天4：6组及麻花秦艽-红景天3：7组小鼠肺组织中的炎性细胞因子、MDA含量及SOD活力;通过网络药理学、分子对接技术对麻花秦艽-红景天药对抗缺氧机制进行初步探讨,并通过qPCR进行实验验证。结果 体外实验研究发现,麻花秦艽-红景天药对具有较好的抗缺氧活性;体内实验结果显示,4：6及3：7配伍比例麻花秦艽-红景天药对可明显提高小鼠的存活时间,降低肺组织中NF-κB、IL-6及IL-1β及MDA含量,升高IL-10含量及SOD活力,且以麻花秦艽-红景天3：7组疗效最佳;网络药理学研究发现,麻花秦艽-红景天药对抗缺氧的潜在活性成分可能为熊果酸、齐墩果酸、没食子乙酸乙酯等,核心靶点有SRC、PIK3CA、MAPK3等,其抗缺氧作用信号通路主要为PI3K-Akt、HIF-1等。qPCR结果显示,麻花秦艽-红景天可升高缺氧小鼠肺组织中的PI3K、Akt、mTOR及p62表达。分子对接验证显示核心靶点SRC、PIK3CA及p62与潜在活性成分齐墩果酸、山奈酚、没食子乙酸乙酯、槲皮素的结合活性较好。结论 麻花秦艽-红景天药对具有抗缺氧活性,其通过抗炎、抗氧化应激及调控自噬发挥抗缺氧作用,可能与PI3K/Akt信号通路有关。     

醉香含笑树皮提取物诱导HepG2细胞凋亡的作用机制

目的 探讨醉香含笑树皮提取物（extrat of barks of Michelia macclurei Dandy.,EBMMD）诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及相关机理。方法 采用倒置生物显微镜、流式细胞仪、Western-blotting等技术,考察EBMMD对HepG2细胞凋亡及COX-2蛋白表达的影响。结果 流式细胞术分析可见,EBMMD能明显诱导HepG2细胞凋亡,且呈浓度依赖关系;倒置生物显微镜观察可见细胞凋亡的形态学改变;随EBMMD浓度增高,细胞内COX-2蛋白的表达逐渐减少,且当EBMMD浓度达25.00μg.mL 1时,能明显抑制COX-2蛋白表达。结论 EBMMD可以明显诱导HepG2细胞凋亡,其作用机理可能与下调细胞内COX-2蛋白表达进而诱导其凋亡有关。     

夏枯草HPLC-ECD指纹图谱建立及抗氧化谱效关系研究

目的 建立高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)夏枯草指纹图谱,测定其体外抗氧化活性并进行谱效关系的研究。方法 样品经80%甲醇提取,采用XBridge BEH shield RP₁₈色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.5 μm)为固定相,乙腈-柠檬酸缓冲溶液(50 mmol·L^–1,pH 2.8)为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.6 mL·min^–1;ECD检测电压为600 mV,柱温为40 ℃;通过DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和铁离子还原能力评价其抗氧化活性,Folin-Ciocalteau法测定总酚含量,结合相似度评价对21批夏枯草进行质量分析,进一步采用灰色关联分析和偏最小二乘法回归分析对抗氧化谱效关系进行研究。结果 HPLC-ECD指纹图谱共标定19个共有峰,指认了其中的14个成分,21批样品相似度均>0.9;夏枯草具有较强的ABTS、DPPH自由基清除能力和铁离子还原能力。HPLC-ECD指纹图谱可以特异性体现样品中抗氧化成分的信息,且色谱图总峰面积同总酚含量、抗氧化活性之间呈显著线性相关。灰色关联分析结果表明19个共有峰与抗氧化活性的关联度>0.6,偏最小二乘法回归分析的结果表明迷迭香酸、咖啡酸、芦丁等化合物对抗氧化活性的贡献较大。结论 HPLC-ECD的指纹图谱结合体外抗氧化法可用于夏枯草的质量评价和抗氧化物质基础研究。     

调亏灌溉对小桐子幼树形态特征与水分利用的影响--测试文章

在盆栽条件下,研究调亏灌溉对小桐子幼树形态特征与水分利用的影响。设置2种调亏水平：重度亏缺W1（田间持水量的25%～45%）和轻度亏缺W2（田间持水量的45%～65%）;3种亏水处理时间：D1（亏水120 d）、D2（亏水90 d）和D3（亏水60 d）;CK为常规灌溉（田间持水量的65%～85%）。结果表明：亏水度对小桐子幼树的株高、茎粗、壮苗指数、叶面积、基茎截面积、干物质质量和水分利用效率的影响趋势表现为轻度调亏处理＞重度调亏处理;对根冠比和胡伯尔值的影响趋势表现为：重度调亏处理＞轻度调亏处理。亏水时间对小桐子幼树的株高、茎粗、壮苗指数、叶面积、基茎截面积、干物质质量和水分利用效率的影响趋势表现为60 d＞90 d＞120 d;对根冠比和胡伯尔值的影响趋势均表现为120 d＞90 d＞60 d。与正常灌水相比,轻度调亏60 d的处理节约灌溉用水11.2%,其叶干重和叶柄干重显著下降,根系、茎秆和总干重下降并不明显,而粗高比和根冠比显著提高,因此,灌溉水利用效率和壮苗指数显著增加7.8%和8.1%。可见,苗后期轻度亏水不仅具有明显的壮苗作用,而且促进水分利用效率显著增大。     

香青兰及其含药血清对H9c2心肌细胞三种缺氧/复氧损伤模型的影响

目的:比较香青兰醇提物及其含药血清对H9c2心肌细胞3种缺氧/复氧损伤模型的影响,考察香青兰对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法:体外培养H9c2心肌细胞,以Na2S2O4,N2和厌氧袋为缺氧环境分别建立缺氧/复氧损伤模型,以T-SOD,MDA,LDH为指标,考察香青兰醇提物(1,10,100μg.mL-1)及其含药血清对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。结果:与模型组比较,香青兰醇提物及其含药血清能明显抑制缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞LDH释放和MDA含量,升高T-SOD活力(P<0.05或0.01)。结论:香青兰醇提物及其含药血清对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,提示香青兰具有保护心肌缺血/再灌注损伤的作用。     

洋甘菊活性组分对LPS诱导人支气管上皮细胞的保护作用及机制研究

目的 基于驱动蛋白家族 3A 基因（Kif3a）和 Sonic hedgehog（SHH）信号通路探讨洋甘菊活性组分对脂多糖（LPS）诱导的人支气管上皮细胞（16HBE）的保护作用及机制。方法 用LPS诱导16HBE建立哮喘炎症细胞模型。CCK-8法检测不同浓度洋甘菊活性组分对LPS诱导16HBE的增殖的抑制作用,筛选出最佳洋甘菊活性组分给药浓度。将细胞分为空白对照组、LPS模型组、阳性药物组（1 µmol•L^-1地塞米松干预2 h）、洋甘菊活性组分组（200 µg•mL^-1,48 h）。Annexin V/PI结合流式细胞术检测各组的凋亡率。实时荧光PCR法和Western blot法检测Kif3a、SHH、Ptch1和Gli1的mRNA和蛋白表达变化。结果 LPS干预后,可显著降低16HBE活力（P < 0.05）,并诱导其细胞凋亡（P < 0.01）。洋甘菊活性组分在浓度200 µg•mL^-1处理48 h时,可以显著逆转LPS对细胞的损伤并促进增殖（P < 0.01）,减弱LPS诱导的细胞凋亡（P< 0.01）。与空白对照组比较,LPS诱导的16HBE内Kif3a在mRNA水平和蛋白表达水平显著降低（P < 0.05）,SHH、Ptch1、Gli1在mRNA水平和蛋白表达水平显著升高（P < 0.05）;与LPS模型组相比较,洋甘菊活性组分处理后可显著逆转mRNA水平和蛋白表达（P< 0.05）,增加Kif3a的mRNA水平和蛋白表达水平,并降低SHH、Ptch1、Gli1的mRNA水平和蛋白表达（P< 0.05）。结论 LPS诱导16HBE损伤,下调Kif3a水平从而上调SHH、Ptch1、Gli1水平,调控SHH信号通路处于异常激活状态。洋甘菊活性组分可显著逆转LPS诱导的细胞炎症损伤,上调Kif3a水平,下调SHH、Ptch1、Gli1水平,通过Kif3a调控SHH信号通路,对LPS诱导的16HBE发挥保护作用,改善哮喘气道炎症。