多组学在阿霉素心脏毒性中的研究进展

阿霉素心脏毒性（DIC）是限制阿霉素（DOX）临床应用的重要因素。目前DIC的机制尚不明确且无有效预防手段。因此亟需从DNA、RNA、蛋白质和代谢产物等方面探究DIC的发生发展机制,以寻找新的方法对DIC进行诊断与防治。随着高通量技术的兴起与发展,基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学等方法在探索DIC潜在的生物标志物、代谢通路及发病机制上取得了巨大的进步。本文综述了多组学技术在DIC研究中取得的最新成果和进展,为进一步阐明DIC发病机制提供新的思路。     

代谢组学研究进展

代谢组学是功能基因组学和系统生物学研究不可或缺的重要组成部分,是通过考察生物体系受刺激或扰动前后(如将某个特定的基因变异或环境变化后)代谢产物的动态变化,研究生物体系的代谢网络的一种技术.近年来,在药物研发、疾病研究、植物和微生物等领域发展迅速,但在分析技术、方法学和应用等方面急需突破.     

基于非靶标血清代谢组学研究桔梗预防急性肺损伤的潜在作用机制

目的  基于非靶标血清代谢组学探讨桔梗预防急性肺损伤(ALI)小鼠的潜在作用机制。方法  24只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(地塞米松)组和桔梗组, 每组6只。给药干预7 d后, 除空白组外, 其余小鼠气管滴注脂多糖(LPS)3 mg·kg-1建立ALI模型, 测定各组小鼠的肺组织病理和炎性因子水平的表达情况; 收集小鼠血清, 采用GC-MS技术对血清样本进行质谱检测, 应用PCA进行血清代谢轮廓的比较, 运用Metaboanalyst 5.0分析相关代谢通路。结果  与空白组相比, 模型组的肺部病理情况严重, 炎性因子水平显著升高(P < 0.05), 阳性药组和桔梗组较模型组小鼠的肺组织病理有一定的改善, 炎性因子水平明显降低(P < 0.01)。血清代谢组学结果显示: 空白组和模型组的代谢轮廓具有明显的差异, 阳性药组和桔梗组的代谢轮廓趋近正常组。结论  桔梗对ALI小鼠的炎症有一定的改善作用, 其潜在作用机制可能与回调多种血清代谢物的含量及调控多条代谢通路相关。      

纳米雄黄肾毒性的代谢组学研究

采用色谱-质谱联用的代谢组学方法分析纳米雄黄对大鼠肾脏中内源性小分子代谢物的影响,研究代谢物谱变化与肾毒性之间的关联性,为纳米雄黄毒性机制的深入研究、纳米雄黄药物的临床应用提供依据。将SD大鼠随机分为溶媒对照组、雄黄低中高剂量组和纳米雄黄低中高剂量组(40,200,1 000 mg/kg)共7组,连续灌胃28 d后处死大鼠,收集血清和肾脏样本。经血生化和组织病理学检查,证实纳米雄黄可导致肾脏损伤,且受损程度呈剂量依赖性。同时采用LC-MS和GC-MS对肾脏中代谢物变化进行整体表征,利用模式识别进行数据挖掘,发现高剂量纳米雄黄组大鼠肾脏样本中半胱氨酸、蛋氨酸、脯氨酸及LysoPE、LysoPC等32个代谢物含量较对照组均发生明显改变,提示上述代谢物与纳米雄黄肾毒性相关,为潜在毒性标志物。代谢通路分析结果表明,纳米雄黄对肾脏的毒性机制可能与氨基酸和脂质代谢等有关。     

代谢组学及其研究新进展

代谢组学是研究生物体受刺激（如病理生理刺激）或被扰动后（如基因变异、蛋白修饰、环境变化）其代谢物种类、数量及其变化规律的科学。近几年来,代谢组学已经成为生命科学领域一个重要的组学技术,主要应用在药物毒理学研究、疾病诊断、中药等领域。本文综合国内外文献报道,介绍当前代谢组学研究中样品制备、仪器分析技术、数据处理方法和应用的最新研究概况,并对代谢组学的发展趋势以及面临的挑战等问题进行评述。     

基于质谱的代谢组学分析在泌尿系统肿瘤中的应用

泌尿系统肿瘤具有较高的发病率、致死率,严重威胁患者生命健康。目前临床上尚缺乏高敏感性、高特异性的筛查方法,早期诊断十分困难,而在肿瘤的发生发展过程中,体液中往往会出现代谢物种类和数量的变化。代谢组学是继基因组学、蛋白质组学、转录组学后出现的新兴“组学”,可对体液中小分子代谢物进行定性和定量评估。在过去的十年间,代谢组学研究在提高对疾病病理生理和病因机制理解、疾病生物标志物筛选、耐药性研究、治疗效果评估等方面显示出巨大潜力。目前,代谢组学已被广泛应用于多种肿瘤的研究中,并且随着液相色谱-串联质谱、气相色谱-串联质谱等各类质谱技术的快速发展,其将会在肿瘤的临床诊断及治疗中发挥重要作用。     

基于质谱技术的乳腺癌代谢组学研究进展

乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤,是女性死亡的主要原因。鉴于乳腺癌的高发病率和死亡率,迫切需要寻找生物标志物来识别高危人群,监测疾病进展,以及评估治疗反应。近年来,基于质谱技术的代谢组学快速发展,其能动态监测遗传信息的变化、生物的刺激或者病理生理的影响导致生物体系内的总体动态改变,基于该特征,给开发并实施更有效的乳腺癌预防、早期发现、诊断和治疗提供了新的可能。本文通过对质谱检测技术在乳腺癌代谢组学方面的应用研究进展进行了详尽归纳,希望为相关研究提供参考。     

川楝子毒性的血清代谢组学研究

目的：基于1H NMR技术和主成分分析（principal component analysis,PCA）方法,观察给予川楝子乙酸乙酯提取物后小鼠血清代谢物组的变化,并对其毒性机制进行解释。方法给药组灌服川楝子乙酸乙酯提取物,采集血清进行1H NMR检测,利用主成分分析法对小鼠血清内源性小分子代谢产物进行分析处理。建立川楝子毒性模型并收集数据后,运用PCA载荷图对磁共振氢谱和相关代谢产物进行鉴定和分类。结果 PCA三维得分图中给药组与对照组无明显重叠部分,载荷图中显示最大变异代谢物,生物标志物变化明显,发现小鼠血清中参与能量代谢的葡萄糖和乳酸含量增加,甘氨酸等氨基酸水平明显上升,胆碱水平下降。结论结合小鼠体质量和血清生化指标,显示川楝子乙酸乙酯提取物具有肝肾毒性。     

中药代谢组学研究进展

代谢组学是继基因组学和蛋白质组学之后发展起来的一个新的科学研究热点。由于其研究思想和中药作用的整体性相吻合,使得代谢组学成为了中药现代化研究的良好平台。本文通过综述近年相关的研究文献,讨论了中药代谢组学的定义、研究范畴、应用领域等热点问题,结合实际应用分析,探讨了中药代谢组学在中药现代化及国际化发展中的作用与意义。     

法舒地尔对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的:探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致小鼠败血症继发急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及机制?方法:C57BL/6小鼠随机分为对照(Control)组?LPS模型组?LPS+fasudil(10 mg/kg)组?LPS + 地塞米松(dexamethasone,Dex,5 mg/kg)组?造模后观察不同时间点各组生存率,6 h处死小鼠收集血清?支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)?肺组织,ELISA测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)?白细胞介素(IL)-1β?IL-10水平,检测BALF中细胞计数和蛋白浓度,HE染色观察各组肺组织病理改变,湿干重比评估肺含水量,ELISA测定肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量?结果:fasudil可显著改善动物生存率?延长生存时间;缓解肺组织炎性损伤及肺水肿程度,降低MPO含量,下调血清中促炎细胞因子IL-1β?TNF-α水平,上调抗炎细胞因子IL-10表达?结论:fasudil可有效缓解LPS所致的小鼠ALI,其作用可能与减轻受累肺组织炎症反应相关?     

脓毒症小鼠肝肺损伤机制的研究

目的：利用盲肠结扎穿孔伴严重腹腔感染造成的脓毒症模型，探讨脓毒症肝、肺损伤的机制。方法：24只雄性昆明小鼠随机分为2组，盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）组和假手术对照组。于术后3h和12h检测肝、肺微血管通透性改变、组织含水量以及髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性的改变，并检测肝窦内皮细胞和肺微血管内皮细胞的凋亡情况。结果：肝、肺微血管的通透性在CLP后12h明显高于对照组（P〈0.01）。CLP同时造成肝、肺组织的含水量和MPO活性明显高于对照组。另外，在CLP组12h肺微血管内皮细胞的凋亡率为（5.03±0.92）％，对照组为（3.48±1.21）％，两者比较差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：脓毒症可引起严重的肝、肺组织损伤，肺微血管内皮细胞凋亡可能是导致脓毒症肺微血管通透性增高并引起肺损伤的重要原因。     

米屈肼对小鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的:探讨米屈肼(mildronate,MIL)对脂多糖(lipopolysacharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及机制?方法:将50只小鼠按随机数字表法分为5组?其中4组为脂多糖诱导的急性肺损伤模型组(气管内滴注0.1ml LPS 2 mg/kg),分别为单纯模型组(LPS组)?低剂量米屈肼干预组(MIL 50 mg/kg组)?中剂量米屈肼干预组(MIL 100 mg/kg组)和高剂量米屈肼干预组(MIL 200 mg/kg组),每组10只;造模前6 d,后3组小鼠分别腹腔注射2%的米屈肼50?100?200 mg/kg,LPS组腹腔注射等体积的生理盐水,每天1次,连续6 d?另一组为正常对照组(NS组,10只),同时间按同样方法注射等体积生理盐水?各组于气道内滴注LPS后4 h时,处死小鼠,取肺组织,测量肺组织湿干重比(W/D);采用免疫组织化学方法,测定肺组织细胞中NF-?资Bp65的表达;采用ELISA方法测定肺组织中IL-1β?IL-6的水平;光镜下观察肺组织病理变化?结果:模型组的肺组织湿干重比?肺组织细胞中NF-?资Bp65表达和肺组织中IL-1β?IL-6的水平高于对照组(P < 0.01);各干预组的上述指标均高于对照组(P < 0.01),但是低于模型组(P < 0.05),3个干预组间差异无统计学意义?模型组肺泡充血水肿?炎性细胞浸润明显;3个干预组,上述现象减轻?结论:米屈肼能减轻小鼠内毒素性急性肺损伤?可能与下调NF-?资Bp65的表达,减少炎性细胞因子IL-1β?IL-6的生成有关?     

微小RNA-155对脂多糖所致小鼠急性肺损伤的干预作用

目的 探讨微小RNA (miR)-155对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤的干预作用.方法 将30只小鼠按照随机数字表法分为LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组、空白对照组5组各6只.LPS致伤组和其他3个处理组麻醉后行气管穿刺给予5μl LPS(浓度为20 μg/μl,4 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,致伤后30 min起,LPS致伤组气管给予生理盐水;miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组分别气管给予miR-155抑制剂,miR对照剂,miR-155增强剂,空白对照组不做任何处理.24 h后收集各组肺组织:HE染色观察组织形态,绿色荧光染色法检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β (IL-1β)的mRNA表达水平,Taqman法检测miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组中miR-155的表达含量,Western印迹法检测各组环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达,并对数据进行统计学分析.结果 LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组、miR-155增强组、空白对照组的TNF-α mRNA相对表达量分别为24.49±3.64、38.92±3.40、36.00±3.86、12.56±2.06、1.04 ±0.41;IL-1β mRNA相对表达量分别为55.96±4.87、62.90±6.41、59.99±6.48、25.33±3.50、1.11±0.44,miR-155增强组与LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组差异均有统计学意义(均P＜ 0.05),而LPS致伤组、miR-155抑制组、miR对照组间差异均无统计学意义;上述5组COX-2蛋白相对表达量的灰度值分别为0.94±0.06、0.96±0.09、0.91 ±0.03、0.79±0.04、0.63±0.07,空白对照组均显著低于其他各组(均P＜0.05).结论 miR-155可有效减弱LPS所致小鼠急性肺损伤炎症反应.     

急性肺损伤小鼠核转录因子-kB表达意义

研究ＮＦ－ｋＢ在肺多糖诱发的急性肺损伤中的动态表达，证实ＮＦ－ｋＢ参予炎症反应中的信号转导过程，方法纯种雄性昆明小鼠３６只随机分６组，正常对照及不才病组，致病组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模，采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测正常鼠及致病发鼠肺组织中ＮＦ－ｋＢ的总蛋白含量，进行统计学处理。     

依达拉奉对脂多糖引起的小鼠急性肺损伤的保护效应研究

[目的]探讨依达拉奉在急性肺损伤当中的保护效应及其可能的机制.[方法]成年C57小鼠54只被随机等分为3组:正常组(假手术组),对照组(LPS+生理盐水)和实验组(LPS+依达拉奉).将对照组和实验组小鼠,采用气道内注入LPS溶液(2 mg/mL)1 mL/kg造急性肺损伤模型,正常组小鼠不注.实验组小鼠尾静脉注射依达拉奉溶液(2 mg/mL)2.5 mL/kg,对照组小鼠注射等体积生理盐水.24 h后,每组取6只小鼠腹腔注射过量麻醉戊巴比妥( 100 mg/kg),后断头处死,取肺组织用于组织学及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNF -α,IL - 13和IL -6的检测.每组余下的12只小鼠用做生存率实验,每12h观测1次并记录小鼠存活的情况,观察周期为4d.[结果]实验组小鼠生存率明显高于对照组(P＜0.05);LPS刺激后,小鼠肺组织内的MDA含量由(1.41±0.119) nmol/mg上升到(4.48±0.159) nmol/mg,而依达拉奉治疗后则降到(2.56±0.157) nmol/mg (P＜0.01);LPS刺激后,小鼠肺组织内的SOD活力由(12.86±1.49) U/mg下降到(8.95±1.02) U/mg,而依达拉奉治疗后则上升至(10.69±1.77)U/mg (P＜0.01);同时,LPS刺激后,小鼠肺组织内的TNF-α,IL - 1β和IL -6含量分别由(47.89±4.71) pg/mg、(79.39±3.45) pg/mg和(81.9±6.39) pg/mg上升到(300.48±12.18) pg/mg、(717.99±35.01) pg/mg和(428.99±21.89) pg/mg,而依达拉奉治疗后小鼠肺组织的含量则降到(191.84±6.43) pg/mg、(236.87±13.46) pg/mg和(136.92±12.47) pg/mg.病理结果显示:依达拉奉减轻了LPS引起的肺水肿,弥漫性出血和炎性细胞的浸润等症状.[结论]依达拉奉可以减轻LPS引起的急性肺损伤.     

急性肾损伤小鼠肺组织损伤特点及水孔蛋白表达研究

目的研究急性肾损伤小鼠肺组织损伤特点及水孔蛋白(AQP)表达变化。方法 75只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=25)和急性肾损伤组(n=50),后者分别经缺血再灌注(I/R组,n=25)和双侧肾切除(BNx组,n=25)建立急性肾损伤模型。于造模后即刻(0 h)和2、4、6、24 h时点,分批处死动物留取肺脏组织。HE染色光学显微镜观察肺组织病理学改变,进行中性粒细胞浸润计数;计算肺湿质量与干质量比值(W/D);采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)技术和免疫组织化学方法检测肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA和蛋白表达。结果 I/R组和BNx组小鼠分别从造模后2 h和4 h出现肺组织炎症细胞浸润、肺泡内出血和肺间质水肿;BNx组造模后4、6、24 h时点和I/R组造模后2、4、6、24 h时点小鼠肺脏组织中性粒细胞浸润计数均显著高于假手术组(P<0.05)。BNx组和I/R组小鼠造模后4、6、24 h时点的W/D均显著高于假手术组(P<0.05)。BNx组和I/R组小鼠造模后各时点肺组织AQP-1 mRNA和蛋白表达与假手术组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。BNx组...     

吴茱萸碱对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探究吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对酵母多糖(zymosan)诱导的急性肺损伤的保护效应及其作用机制.方法 24只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常对照组、EVO对照组、模型组、EVO治疗组,每组6只.各组分别于处理作用12 h后处死小鼠,收集眼眶血及肺组织.酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液及肺组织中白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-0(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平及肺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性及核转录因子NF-κBp65的DNA结合活性,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况,HE染色观察肺组织病理改变并测量肺湿干质量比.结果 酵母多糖作用12h后,小鼠出现精神萎靡、活动减少等症状.EVO治疗组小鼠状态有所好转.EVO可明显改善酵母多糖所致的肺泡壁毛细血管扩张充血及炎性细胞浸润,降低肺湿干质量比,并显著下调酵母多糖刺激下血清和肺脏中IL-6和TNF-α的含量(P＜0.01),同时抑制肺组织中MPO含量以及NF-κB p65的DNA结合活性(P＜0.01).结论 EVO可缓解酵母多糖诱导的急性肺损伤.该作用可能是通过抑制NF-κB的活性以减少炎症介质释放实现.     

急性肺损伤患者肺损伤评分与AGEs在预后评价中的作用

目的:探讨联合应用肺损伤评分(LIS)及晚期糖基化终末产物(AGEs)在预测急性肺损伤患者转归的作用。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定30例ALI患者血浆AGEs浓度,同时进行肺损伤评分(LIS);根据转归情况将ALI患者分为死亡组(8例)和生存组(22例),结合AGEs、LIS对两组进行比较分析。结果:死亡组与生存组血浆AGEs及LIS评分比较差异有统计学意义(P<0.05);AGEs与LIS评分呈显著正相关(r=0.926,P<0.01)。结论:血浆AGEs及LIS评分可用于预测ALI患者转归。