血清脂联素水平与子宫内膜癌患者胰岛素抵抗指数的关系分析

目的探讨血清脂联素水平与子宫内膜癌患者胰岛素抵抗指数的相关性及其临床意义。方法选取135例子宫内膜癌患者为研究对象,选择门诊体检的健康妇女135例为对照组,对2组人员的血清脂联素、空腹胰岛素和空腹血糖进行检测。采用稳态模型评估法对胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）进行计算,对比观察血清脂联素水平与胰岛素抵抗指数之间的关联性。结果观察组空腹胰岛素水平为（11．3±2．7）μIU／mL,正常组为（6．2±1．6）μIU／mL,观察组明显高于正常组,（P〈0．05）;观察组血糖水平为（7．6±2．9）mmol／L,正常组为（4．6±0．7）mmol／L,2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;脂联素在正常组中的表达为（6．8±1．1）mg／L,显著低于观察组的（15．3±2．3）mg／L,2组比较差异显著（P〈0．05）;观察组和对照组的HOMA-IR分别为（3．5±1．8）和（1．1±0．7）,2组比较差异显著（P〈0．05）。脂联素水平越低。HOMA．IR越高,两者呈明显负相关（γ=-0．379,P〈0．05）。结论子宫内膜癌患者脂联素水平降低,导致胰岛素抵抗增强,促进肿瘤细胞增殖,迁移及转化,是发病的危险因素。     

脂联素及其受体与子宫内膜癌关系的研究进展

脂联素是脂肪细胞分泌的一种内源性细胞因子,与肥胖相关疾病如子宫内膜癌等密切相关.子宫内膜癌患者血清中脂联素呈低水平状态.脂联素通过其受体参与糖脂代谢、抗炎、抗肿瘤等生理过程.本文就脂联素及其受体的基因结构、生物学作用、其作用于子宫内膜癌的相关机制做一论述.     

去势后人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型的建立

目的:研究建立去势后人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型的方法.方法: 将裸鼠在麻醉情况下切除双侧卵巢,随机分成3组,采用细胞悬液法和肿瘤组织块法建立人子宫内膜癌的裸鼠皮下移植瘤模型.结果: 细胞悬液法5×106 /0.2ml/只,瘤块法1.5mm×1.5mm×2mm和1.0mm×1.0mm×1.0mm,三种植瘤法成瘤率无统计学意义,但不同的植瘤法成瘤时间有差异;各组肿瘤体积大小不同,差异有统计学意义.结论: 选择适当的方法建立人子宫内膜癌去势裸鼠移植瘤模型是可行的,可为开展人子宫内膜癌的基础和临床研究提供理想的动物模型.     

子宫内膜癌与胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）是指部分胰岛素与其特异性受体结合后产生的生物学效应较正常者低。研究发现IR不仅能够引起机体血糖代谢的异常,同时也引起机体其他方面的代谢紊乱。除了高胰岛素血症对子宫内膜癌的影响外,IR引起的代谢改变对子宫内膜癌亦产生影响。二甲双胍通过激活AMPK促进葡萄糖的利用,LKB1作为其上游的调节因子,能在多种细胞内磷酸化和活化AMPK,从而起到下调血糖的作用。     

晚期糖基化终末产物受体促进子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长

目的:探讨晚期糖基化终末产物受体（RAGE）是否能促进子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长。方法:利用腺病毒介导的RNAi干扰技术下调HEC-1A细胞中RAGE的表达,将干扰前后的HEC-1A细胞接种到裸鼠皮下构建移植瘤模型,观察RAGE对裸鼠皮下移植的子宫内膜癌细胞生长的影响。结果:RAGE shRNAi腺病毒干扰的HEC-1A细胞不再表达RAGE蛋白,干扰后的HEC-1A细胞形成的移植瘤体积及质量显著小于干扰前细胞形成的肿瘤(P<0.01)。结论:RAGE促进子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长。     

小檗碱对多囊卵巢综合征大鼠的胰岛素抵抗及瘦素、脂联素水平的影响

目的探讨小檗碱对多囊卵巢综合征大鼠的空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、瘦素(LPN)、脂联素(APN)水平的影响。方法采用Poresky造模法,制作多囊卵巢综合征大鼠模型,造模后将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、小檗碱组,每组15只。观察药物干预21天后各组大鼠体重、FPG、FINS、LPN、APN的变化,并计算胰岛素敏感性指数(IRI)。结果与模型对照组比较,小檗碱组和二甲双胍组大鼠体重、IRI、LPN水平均下降(P﹤0.05);APN水平上升;小檗碱组APN水平变化较二甲双胍组更为明显(P﹤0.05)。结论小檗碱可能通过降低体重、增加胰岛素敏感性、调节瘦素和脂联素水平,从而改善大鼠生殖功能。     

脂联素通过AMPK/mTOR/4EBP1通路对子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的影响

背景与目的：脂联素（adiponectin，APN）被认为是一种强有力的抑制肿瘤细胞生长的抗癌因子，但APN调节细胞转移的作用机制尚不清楚。探讨在子宫内膜癌HEC-1B细胞中，APN能否通过腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）/磷酸化真核启动因子4E结合蛋白1（4E binding protein 1，4EBP1）通路抑制细胞迁移及侵袭。方法：实验设计为4组：① APN组：20 μg/mL APN作用于细胞30 min；② 抑制剂组：10 μmol/L复合物C（AMPK抑制剂）作用于细胞30 min；③ APN+抑制剂组：10 μmol/L复合物C预处理细胞30 min后，加入20 μg/mL APN作用30 min；④ 对照组：仅加入无血清DMEM培养基。实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）技术检测4组细胞中B细胞淋巴瘤-2（B- cell lymphoma 2，Bcl-2）和基质金属蛋白酶9（matrix metallopeptidase 9，MMP-9）的mRNA表达；蛋白质印迹法（Western blot）检测4组细胞中Bcl-2、MMP-9及AMPK信号通路中AMPK、mTOR、4EBP1蛋白水平；Transwell及划痕实验检测4组HEC-1B细胞的迁移能力。结果：Bcl-2和MMP-9 mRNA的表达水平在APN组中分别为0.64±0.08和0.68±0.02，均明显低于APN+抑制剂组（分别为0.98±0.11和0.96±0.08；P=0.02和0.03)。APN组中，HEC-1B细胞Bcl-2、MMP-9蛋白水平分别与对照组、抑制剂组、APN+抑制剂组比较，差异均有统计学意义（P=0.00）。APN组中，HEC-1B细胞AMPK、mTOR、4EBP1蛋白水平分别为1.49±0.02、0.48±0.00、0.19±0.00。与对照组比较，蛋白水平明显升高（P=0.00）。APN组穿膜细胞数为（78.72±10.74）个，APN+抑制剂组为（131.45±9.11）个，对照组为（131.91±12.29）个，APN组与对照组比较，差异有统计学意义（P=0.00），APN+抑制剂组与对照组相比，差异无统计学意义（P=0.12）。APN组中，HEC-1B细胞迁移率为（19.27±1.14）%，与其余3组比较，4组组间差异均有统计学意义（P=0.00），其余3组组间差异无统计学意义（F=2.78，P=0.39）。结论：APN可经AMPK/mTOR/4EBP1信号通路发挥抑制子宫内膜癌细胞迁移及侵袭的效应，达到抗肿瘤作用。     

米非司酮对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞凋亡调控的研究

目的探讨抗孕激素米非司酮对人子宫内膜癌HHUA细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的调控作用。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸鼠皮下接种HHUA细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机分为2组,分别应用米非司酮、精制花生油治疗4周,应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率;免疫组化技术检测凋亡基因bcl2、Fas和FasL蛋白的表达情况。结果米非司酮治疗组裸鼠移植瘤细胞G0/G1期比例升高,S期细胞比例(SPF)降低(P<0.05),移植瘤细胞凋亡率为15.03%±2.19%,明显高于对照组(3.06%±1.13%)(P<0.01);移植瘤细胞bcl2蛋白表达水平明显下降,而Fas蛋白表达水平升高,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论抗孕激素米非司酮通过调节移植瘤细胞周期分布和凋亡基因,抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型及其生物学特性的探讨

目的建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,为人子宫内膜癌的诊断和治疗提供理想的在体研究工具.方法体外培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1B,采用皮下注射接种至裸鼠体内,待肿瘤直径达0.8～1.0cm时,将其切下剪成直径为1～2mm小块,再接种至另一裸鼠皮下进行传代.病理组织学检查,光镜、电镜、流式细胞术分析,检测皮下瘤组织和肿瘤细胞系ER、PR、CK表达.结果成功建立了人子宫内膜癌细胞株HEC-1B裸鼠皮下移植瘤模型,并传至第二代,形成的肿瘤具备人肿瘤生物学特点.HEC-1B、皮下移植瘤DI(DNA index)值分别为1.81±0.46、1.95±0.53,均示异倍体.可见裸鼠皮下移植瘤与HEC-1B细胞的恶性肿瘤生物学特性基本一致.结论通过此细胞系建立的人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的组织病理学免疫组化表型,超微结构,DNA倍体水平特点与来源肿瘤细胞相一致,而且肿瘤的移植生长率为100%,说明该模型系统的生物学特性是稳定的.建立的人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型具有人子宫内膜癌特征,可用于研究子宫内膜癌的生物学特性,为进一步开展子宫内膜癌的实验研究提供理想的动物模型.     

Serum leptin,adiponectin and endometrial cancer risk in Chinese women

Objective

To investigate the relationship between serum concentrations of leptin or adiponectin, and endometrial carcinoma in Chinese women.

Methods

We conducted a case-control study of a total of 516 Chinese women to detect the relationships between serum concentrations of leptin or adiponectin, and endometrial carcinoma in Chinese women. The study subject constituted 206 cases of endometrial cancer and 310 normal controls.

Results

Patients with endometrial carcinoma had higher serum leptin concentrations than controls (28.8±2.2 ug/L vs. 19.8±1.4 ug/L; p<0.001). The adiponectin levels in patients were lower than in controls with borderline statistical significance (2,330.7±180.5 ug/L vs. 2,583.9±147.2 ug/L; p=0.078). Logistic regression analysis confirmed the associations between leptin or adiponectin, and endometrial carcinoma after adjustment for age, body mass index, fasting insulin, serum glucose, cholesterol, triglycerides, and high-density lipoprotein cholesterol (odds ratio for the top tertile vs. the bottom tertile: leptin 2.05; 95% confidence interval [CI], 1.28 to 3.29; p<0.001; adiponectin 0.52; 95% CI, 0.32 to 0.83; p<0.001).

Conclusion

Increased leptin or decreased adiponectin levels are associated with endometrial carcinoma.     

Insulin resistance and endometrial cancer risk: A systematic review and meta-analysis

AimIt has been suggested that chronic hyperinsulinemia from insulin resistance is involved in the etiology of endometrial cancer (EC). We performed a systematic review and meta-analysis to assess whether insulin resistance is associated with the risk of EC.MethodsWe searched PubMed-Medline, Embase, Scopus, and Web of Science for articles published from database inception through 30th September 2014. We included all observational studies evaluating components defining insulin resistance in women with and without EC. Quality of the included studies was assessed by Newcastle–Ottawa scale. Random-effects models and inverse variance method were used to meta-analyze the association between insulin resistance components and EC.ResultsTwenty-five studies satisfied our inclusion criteria. Fasting insulin levels (13 studies, n = 4088) were higher in women with EC (mean difference [MD] 33.94 pmol/L, 95% confidence interval [CI] 15.04–52.85, p = 0.0004). No differences were seen in postmenopausal versus pre- and postmenopausal subgroup analysis. Similarly, non-fasting/fasting C-peptide levels (five studies, n = 1938) were also higher in women with EC (MD 0.14 nmol/L, 95% CI 0.08–0.21, p < 0.00001). Homeostatic model assessment - insulin resistance (HOMA-IR) values (six studies, n = 1859) in EC patients were significantly higher than in women without EC (MD 1.13, 95% CI 0.20–2.06, p = 0.02). There was moderate-to-high heterogeneity among the included studies.ConclusionCurrently available epidemiologic evidence is suggestive of significantly higher risk of EC in women with high fasting insulin, non-fasting/fasting C-peptide and HOMA-IR values.     

siRNA介导的间皮素基因沉默对卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤生长的影响

目的:研究间皮素(mesothelin, MSLN)基因被沉默后的卵巢癌细胞SKOV3-MSLN-shRNA增殖能力的变化,以及MSLN基因沉默对裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤生长的影响.方法:利用针对MSLN基因的siRNA慢病毒液和对照组慢病毒液分别感染SKOV3细胞,建立SKOV3-MSLN-shRNA细胞和SKOV3-MSLN-neg细胞的稳定转染株;以SKOV3细胞作空白对照,用平板克隆形成法和细胞计数法检测3组细胞的增殖能力.应用3组细胞分别建立裸鼠卵巢癌腹腔移植瘤模型,2周后处死裸鼠,观察每组动物的成瘤率及每只裸鼠的肿瘤质量、肿瘤数目和肿瘤种植部位等.结果:SKOV3-MSLN-shRNA细胞的体外增殖能力明显低于SKOV3-MSLN-neg细胞和SKOV3细胞,差异有统计学意义(P<0.05).SKOV3-MSLN-shRNA组裸鼠成瘤率为60%,而2个对照组SKOV3-MSLN-neg和SKOV3细胞的裸鼠成瘤率均为100%,差异无统计学意义(P＞0.05).SKOV3-MSLN-shRNA组动物的肿瘤数目、肿瘤质量及肿瘤种植部位明显低于2个对照组 (P<0.05).结论:MSLN基因沉默可以降低卵巢癌SKOV3细胞的体外增殖能力,同时可以抑制卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的生长和种植.     

ILK-ASODN对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用

目的 探讨ILK-ASODN对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用。方法 研究分为对照组和实验组。在转染后72 h采用RT-PCR和Western blot法检测细胞ILK mRNA及蛋白表达量;运用流式细胞术评价ILK-ASODN转染对肿瘤细胞周期的影响;同时将转染后的HO-8910细胞接种于裸鼠皮下,观察裸鼠体重变化、体内成瘤率、肿瘤出现的时间、肿瘤体积及重量的变化,并计算抑瘤率。结果 实验组与对照组比较,细胞的ILK mRNA及蛋白表达量显著下降、G₀/G₁期细胞明显增多,差异具有统计学意义(P＜0.01);实验组裸鼠肿瘤出现时间明显晚于对照组,肿瘤体积及重量增长速度显著减缓,差异有显著统计学意义(P＜0.01)。结论 ASODN可以阻断人卵巢癌细胞ILK基因表达,抑制细胞生长;而 ILK基因的表达沉默对裸鼠皮下移植瘤的形成具有明显抑制作用。     

High insulin levels in newly diagnosed breast cancer patients reflect underlying insulin resistance and are associated with components of the insulin resistance syndrome

Background High insulin levels have been associated with poor outcomes in breast cancer. Our goal was to investigate whether hyperinsulinemia was associated with insulin resistance in a cohort of newly diagnosed locoregional breast cancer patients and to examine associations of hyperinsulinemia with the broader insulin resistance syndrome (IRS). Methods Five hundred and four women with T1-3, N0-1, M0 breast cancer provided fasting blood that was analyzed for glucose, insulin and lipids. They underwent anthropomorphic measurements and provided information on diet, exercise and sleep. Relationships of insulin with three validated indices of insulin resistance and with attributes of the IRS were examined. Results High insulin levels were strongly correlated with insulin resistance calculated using the three indices of insulin resistance/sensitivity (Spearman r = 0.83–0.98). Hyperinsulinemia was also associated with other components of the IRS (obesity, high waist–hip ratio, lipid profile). Conclusions High insulin levels in women with locoregional breast cancer reflect the presence of insulin resistance and are associated with other components of the IRS. These observations have implications for the development of therapies that target hyperinsulinemia in early stage breast cancer and for the long-term management of breast cancer survivors.     

红景天对裸鼠乳腺癌移植瘤的影响

背景与目的：体内外的肿瘤研究显示红景天具有一定的抗肿瘤作用，本文探讨红景天对于乳腺癌移植瘤的生长的抑制作用及其可能的机制。方法：以人乳腺癌MDA—MB-435细胞的裸鼠移植瘤模型作为研究对象，采用免疫组织化学方法，从转移瘤内的肿瘤细胞增殖活性方面，探讨红景天对乳腺癌移植瘤的作用。结果：与生理盐水对照组相比，红景天治疗组的移植瘤体积有所缩小，但未达到统计学意义（99．95mm^3比174．60mm^3，P=0．535）；红景天治疗后移植瘤内乳腺癌细胞增殖指标Ki-67染色比例、染色强度降低，其综合评价指数H-分数均值明显降低（152．8比86，P=0．014）；移植瘤内增殖指标PCNA的染色强度和比例的综合评价指数H-分数均值有所降低，但未达到统计学意义（242比210，P=0．221）。结论：红景天的体内抗癌机制可能部分通过抑制肿瘤的增殖活性而实现。     

重组人生长激素对人肝癌细胞Bel-7402裸小鼠移植瘤生长的影响

背景与目的:在原发性肝癌患者围手术期应用重组人生长激素(recombinanthumangrowthhormone,rhGH),于改善患者状况同时是否会促进原有肿瘤生长、转移与复发,鲜见相关的研究报道。大多数原发性肝癌能表达生长激素受体(growthhormonereceptor,GHR),本研究拟探讨rhGH对表达GHR的人肝癌细胞Bel-7402裸小鼠移植瘤生长的影响。方法:放射配体分析法证实肝癌细胞Bel-7402表达GHR后行裸鼠肝内移植,将32只肝内移植人肝癌细胞Bel-7402的裸小鼠随机分为4组:1组为对照组,实验组则根据rhGH剂量不同分为3组[即0.5u·(kg·d)-1、1.0u·(kg·d)-1、2.0u·(kg·d)-1]。在肝脏肿瘤移植术后2周开始动物皮下注射rhGH2周,实验结束处死动物,检查肿瘤情况;用抗增殖细胞核抗原(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)单克隆抗体免疫组化染色检测瘤组织PCNA表达情况。结果:移植瘤组织的重量与体积在rhGH1.0u·(kg·d)-1、2.0u·(kg·d)-1组与对照组之间比较有显著性差异(P<0.05),但0.5u·(kg·d)-1组与对照组无显著性差异(P>0.05)。各实验组肿瘤PCNA标记指数(labelingindex,LI)均高于对照组(P<0.05),各实验组之间相互比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。rhGH用药剂量与LI显著相关(r=0.779,P<0.001)。结论:rhGH能促进裸小鼠肝脏人肝癌细胞Bel-7402移植瘤的生长,其作用有随用药量增加而增强的趋势,两者之间存在一定相关性。     

多西他赛联合基质金属蛋白酶抑制剂SB-3CT对前列腺癌移植瘤生长的影响

目的 探讨多西他赛联合基质金属蛋白酶抑制剂（SB-3CT）对前列腺癌移植瘤生长的影响及其可能的作用机制。方法 用前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为SB-3CT组（注射SB-3CT溶液25 mg/kg）,联合用药组（SB-3CT 25 mg/kg+静脉注射多西他赛溶液 10 mg/kg）和空白对照组（注射等量生理盐水）,每组5只。测量肿瘤体积和质量并绘制生长曲线。免疫组化检测移植瘤组织中PDK1和PFKFB4的表达。结果 联合用药组、空白对照组和SB-3CT组平均瘤体质量比较差异有统计学意义（F=29.556,P=0.001）,且联合用药组的肿瘤生长速度明显较空白对照组和SB-3CT组慢。免疫组化结果显示,PDK1在联合用药组、空白对照组和SB-3CT组的染色评分分别为（2.33±0.47） 分、（6.00±0.81） 分和（4.33±0.48） 分,组间比较差异有统计学意义（F=18.200,P=0.003）,且联合用药组评分低于SB-3CT组（P=0.017）;PFKFB4在3组的染色评分分别为（5.33±0.49） 分、（11.33±0.47） 分和（9.00±1.41） 分,组间比较差异有统计学意义（F=17.643,P=0.003）,且联合用药组评分低于SB-3CT组（P=0.011）。结论 多西他赛联合基质金属蛋白酶抑制剂SB-3CT对前列腺癌移植瘤生长具有抑制作用,糖代谢相关酶PDK1和PFKFB4表达下调可能是潜在的分子机制。     

生酮饮食对人肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的： 建立人肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型，观察生酮饮食对裸鼠皮下移植瘤生长的影响并对其作用机制进行研究。方法： 10只雌性BALB/c裸鼠右下肢皮下注射人肺癌A549细胞，建立肺癌细胞裸鼠移植瘤模型后，随机分为标准饮食组（SD组）和生酮饮食组（KD组），分组当天测量裸鼠体质量、移植瘤体积、血糖及血酮浓度，以后每5 d测量1次。接种肿瘤细胞后第30天，摘眼球取血处死裸鼠，取血后进行血脂四项检测。剥离移植瘤组织，分别采用Western blot及免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤组织中4-HNE蛋白的表达水平。结果： 接种肿瘤细胞后第15天起，KD组裸鼠血酮浓度较SD组升高，血糖浓度较SD组降低，差异均有统计学意义（P < 0.05）。接种肿瘤细胞后第20天起，KD组裸鼠体质量及移植瘤体积小于SD组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。接种肿瘤细胞后第30天，KD组裸鼠的总胆固醇（CHOL）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）浓度高于SD组，甘油三酯（TG）浓度低于SD组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。Western blot法分析结果显示KD组裸鼠移植瘤组织中4-HNE蛋白相对表达水平（1.45±0.10）高于SD组（1.00±0.03），差异有统计学意义（P < 0.05）。免疫组化法检测结果显示KD组裸鼠移植瘤组织中4-HNE表达水平（4.40±0.89）高于SD组（2.40±0.89），差异有统计学意义（P < 0.05）。结论： 生酮饮食可以抑制人肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长，其作用机制可能与肿瘤细胞氧化应激的增强有关。