肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Aloxl2表达的影响

目的:观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠肾脏Aloxl2基因表达的影响,探讨糖尿病肾痛(DN)的发生与Alox 12基因变化的相关性,筛选中药复方肾消康防治DN的药效作用靶点.方法:采用链脲佐菌素加高脂饮食的方法建立糖尿病大鼠肾脏损伤的模型.运用美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片,尤其是通过聚类分析寻找和糖尿病肾病有重要相关性的基因——Alox 12基因是其中之一,并进一步采用实时荧光定量RT - PCR法,观察Aloxl2基因表达的变化.结果:花生四烯酸12-脂加氧酶( Aloxl2),在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调.结论:在糖尿痛肾损伤状态下,Aloxl2表达上调,与糖尿痛肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Aloxl2表达下调,可见肾消康对Aloxl2基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究.     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因Gna12表达的影响

[目的]观察中药复方肾消康对糖尿病。肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病（DN）的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机制,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。[方法]本实验采用链脲佐菌素（STZ）加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT—PCR法做验证实验研究。[结果]鸟嘌呤核苷酸结合蛋白cd2（Gna12）,在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康中剂量组表达上调。[结论]应用Aflymetrix Rat2302．0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,Gna12是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT—PCR测序分析。基因功能分析表明,在糖尿病状态下,Gna12表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中Gna12表达上调,可见肾消康对Gna12基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因ubiquitin mRNA表达的影响

目的观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨DN的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。方法采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察多项指标,通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。结果泛素mRNA(ubiquitin mRNA)在糖尿病大鼠肾脏表达上调,肾消康治疗组表达下调。结论应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,ubiquitin mRNA基因是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一。糖尿病状态下,ubiquitin mRNA基因表达上调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中ubiquitinm RNA表达下调。肾消康对ubiquitin mRNA基因表达具有良性调节作用。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因eIF3s8表达的影响

目的观察中药复方肾消康对糖尿病肾病大鼠的防治作用及对肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)的发病机制,揭示中药复方肾消康防治DN的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。方法采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠肾脏损伤模型。运用放免、生化、光镜、电镜及美国Affymetrix公司的基因表达谱芯片、RT-PCR等先进检测手段和方法,观察了多项指标,尤其是通过聚类分析寻找和DN有重要相关性的基因,并进一步采用实时荧光定量RT-PCR法做验证实验研究。结果真核生物翻译起始因子3,8亚基(eIF3s8),在糖尿病大鼠肾脏表达下调,肾消康治疗组表达上调。结论应用Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片检测糖尿病大鼠肾脏基因的表达,eIF3s8是筛选出的肾脏差异表达基因和药效靶点之一,并对该基因做荧光定量RT-PCR测序分析。这在国内外尚属首次。基因功能分析表明,在糖尿病状态下,eIF3s8表达下调,与糖尿病肾脏损伤有重要相关性,而经肾消康治疗后大鼠肾脏组织中eIF3s8表达上调,可见肾消康对eIF3s8基因表达具有良性调节作用,其作用机制还有待于进一步研究。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌基因Alox 12mRNA表达的影响

观察中药复方糖心康对糖尿病心肌损伤大鼠的作用机理。方法：采用链脲佐菌素（S1Z）加高热量饮食建立糖尿病大鼠心肌损伤模型。采用美国Affymetrix Rat2302．0基因表达谱芯片及聚类分析，筛选差异表达基因，采用荧光定量RT—PCR法验证。结果：花生四烯酸12-脂加氧酶mRNA（Alox12mRNA）是筛选出的差异表达基因。在糖尿病状态下，Alox12mRNA基因表达上调，经糖心康治疗后表达下调。结论：Alox12mRNA和糖尿病心肌损伤有重要相关性，糖心康对其有良性调节作用。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌基因Alox 12mRNA表达的影响

观察中药复方糖心康对糖尿病心肌损伤大鼠的作用机理。方法:采用链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食建立糖尿病大鼠心肌损伤模型。采用美国Affymetrix Rat2302.0基因表达谱芯片及聚类分析,筛选差异表达基因,采用荧光定量RT-PCR法验证。结果:花生四烯酸12-脂加氧酶mRNA(Alox12 mRNA)是筛选出的差异表达基因。在糖尿病状态下,Alox12 mRNA基因表达上调,经糖心康治疗后表达下调。结论:Alox12 mRNA和糖尿病心肌损伤有重要相关性,糖心康对其有良性调节作用。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

目的：比较糖尿病肾病（DN）大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异，并用Evegreen实时荧光RT—PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平。方法：（1）差异表达基因的筛选：实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组。从肾脏组织中抽提mRNA，由纯化的总RNA合成双链cDNA，并将其纯化，以生物素标记cRNA合成，纯化和质控体外转录（IVT）产物，片断化cRNA，然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析，筛选出差异表达数据。不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示。（2）荧光定量RT—PCR的检测：RNA样品反转录，荧光定量PCR反应。结果：仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告。糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调，中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调。结论：CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达，并且表达上调，而中药复方肾消康可使其下调，这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一。     

肾消康对糖尿病大鼠肾组织基因CcL5mRNA表达的影响

目的:比较糖尿病肾病（DN）大鼠和中药复方肾消康治疗组大鼠肾脏组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测CcL5mRNA在各组大鼠肾脏组织的表达水平。方法:（1）差异表达基因的筛选:实验大鼠分为空白组、模型组、治疗组。从肾脏组织中抽提mRNA,由纯化的总RNA合成双链cDNA,并将其纯化,以生物素标记cRNA合成,纯化和质控体外转录（IVT）产物,片断化cRNA,然后进行杂交、洗脱、染色、芯片扫描并用软件进行统计分析,筛选出差异表达数据。不同肾脏组织样本用灰度扫描图和杂交信号强度散点图表示。（2）荧光定量RT-PCR的检测: RNA样品反转录,荧光定量PCR反应。结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的CcL5mRNA进行报告。糖尿病肾病模型组肾脏组织基因CcL5mRNA表达上调,中药复方肾消康治疗组肾脏组织基因CcL5mRNA表达下调。结论:CcL5mRNA在糖尿病状态下肾脏也有表达,并且表达上调,而中药复方肾消康可使其下调,这也是中药复方对糖尿病性肾组织损伤具有保护作用的机制之一。     

肾消康对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及对tensin表达的影响

目的：探讨肾消康对糖尿病肾病（DN）的保护作用及机理。方法：建立糖尿病肾病大鼠模型,以肾消康治疗,观察各组大鼠的血糖、尿素氮、肌酐、24h尿微量白蛋白的数值及tensin的表达。结果：正常大鼠肾脏tensin表达很弱,DN大鼠肾脏tensin表达明显增强（与正常对照组相比P〈0.01,有统计学意义）,肾消康对DN大鼠肾脏组织tensin的表达有下调作用（与模型组相比P〈0.01,有统计学意义）。同时肾消康能有效降低血糖、尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白。结论：肾消康能够调节血糖水平,下调ten-sin的表达,降低尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白,从而防止肾纤维化及延缓肾衰。     

肾消康对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及对血管紧张素Ⅱ影响的实验研究

目的:探讨肾消康对糖尿病肾病的保护作用及机理。方法:采用STZ加高脂饮食造模。设空白组、模型组、治疗组。结果:肾消康能够调解血糖、胰岛素水平,降低肌酐、尿素氮、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、血管紧张素Ⅱ,疗效优于模型组(P<0.01)。结论:肾消康能够调解血糖及胰岛素水平,降低糖化血红蛋白、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、血管紧张素Ⅱ,从而防止肾纤维化及延缓肾衰。     

糖肾康对实验性糖尿病大鼠肾组织P27蛋白含量的影响

目的：本实验通过观察糖肾康对实验性糖尿病大鼠体重、肾脏肥大指数、肾组织p27蛋白含量的影响,探讨该制剂对糖尿病肾病的防治及其作用机理。结果：①在抑制肾脏肥大方面,糖肾康组优于依那普利组（P〈0．05）②糖肾康组、依那普利组均能抑制肾组织p27蛋白含量的影响,两组无显著性差异（P〉0．05）．     

中药复方糖肾康对实验性糖尿病大鼠肾组织中TNF-α mRNA表达的影响

目的:探讨中药复方糖肾康胶囊对早期糖尿病肾病的肾脏保护机制.方法:大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、糖脉康治疗组(C组)、伊那普利治疗组(D组)、糖肾康治疗组(E组),每组10只.观察8周后,用RT-PCR检测各组肾皮质TNF-α mRNA的表达.检测体重、血糖、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、肾重指数.结果:B组8周后出现体重显著降低(P＜0.01);血糖、肾重指数、血BUN与Cr水平显著升高(P＜0.01);肾皮质TNF-α mRNA的表达明显增高(P＜0.01).经过糖肾康8周的治疗后,体重显著回升(P＜0.01);血糖、肾重指数、UAER显著降低(P＜0.01);肾皮质TNF-α mRNA的表达明显降低(P＜0.01).结论:糖肾康对早期糖尿病肾病的肾脏具有保护作用.其机制可能为糖肾康下调TNF-α系统的表达,后者有抑制细胞肥大、减少细胞外基质成分的合成的作用.     

糖心康对糖尿病大鼠心肌基因ARmRNA表达的影响

糖尿病心肌损伤系DN常见慢性并发症之一,其病变可以是原发的,也可继发于冠状动脉供血障碍,且心肌病变出现较早,主要表现为心肌舒张和收缩功能障碍,易发生充血性心力衰竭。其确切的病理机制尚未彻底阐明,临床尚无特效药物,而中医药在防治该病方面很有潜力,但因其病理机制复杂,其     

糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP-1表达的影响

研究应用免疫组化及RT -PCR测定肾皮质TIMP - 1蛋白水平及TIMP - 1mRNA表达的变化情况 ,探讨糖微康防治DN的作用机理。目的 :观察糖微康对糖尿病大鼠肾脏金属蛋白酶抑制剂 - 1(TIMP - 1)过度表达的抑制的作用。方法 :以STZ诱导糖尿病动物模型 ,采用免疫组化和RT -PCR检测方法观察糖微康对糖尿病大鼠肾皮质TIMP - 1蛋白、基因表达的影响。结果 :与模型组大鼠比较 ,治疗组大鼠肾皮质TIMP - 1免疫染色强度明显减轻 (P <0 .0 1) ,TIMP - 1mRNA的表达降低 (P <0 .0 1)。结论 :糖微康可抑制糖尿病大鼠肾皮质TIMP - 1的过度表达 ,预防DN的发生和延缓DN的发展。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因Igfbp-3mRNA表达的影响

目的:比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Evegreen实时荧光RT-PCR技术定量检测胰岛素样生长因子结合蛋白-3(Igfbp-3mRNA)在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法:(1)差异表达基因的筛选;(2)荧光定量RT-PCR的检测。结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的Igfbp3mRNA进行报道。糖尿病性心肌病模型组心肌组织基因Igfbp3mRNA表达下调,中药复方肾消康治疗组心肌组织基因Ig-fbp3mRNA表达上调。结论:Igfbp-3mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达上调,而中药复方糖心康可使其下调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因骨苷氨酸表达的影响

目的:比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测骨甘氨酸(Ogn mRNA)在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法:①差异表达基因的筛选;②荧光定量RT-PCR的检测。结果:仅对筛选出差异表达基因谱中的Ogn mRNA进行报告。糖尿病性心肌病模型组大鼠心肌组织中Ogn mRNA在心肌组织表达量增多,与空白组比较差异显著(P<0.01),而经糖心康治疗后大鼠心肌组织中Ogn mRNA表达量减少,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。结论:Ogn mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达上调,而中药复方糖心康可使其下调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。     

糖心康对糖尿病大鼠心肌组织基因fgl2mRNA表达的影响

目的：比较糖尿病性心肌病大鼠和中药复方糖心康治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,并用Eve green实时荧光RT-PCR技术定量检测凝血酶原酶（fgl2mRNA）在各组大鼠心肌组织的表达水平。方法：（1）差异表达基因的筛选;（2）荧光定量RT-PCR的检测。结果：本文仅对筛选出差异表达基因谱中的fgl2mRNA进行报告。糖尿病性心肌病模型组心肌组织基因fgl2mRNA表达上调,中药复方糖心康治疗组心肌组织基因fgl2mRNA表达下调。结论：fgl2mRNA在糖尿病状态下心肌组织也有表达,并且表达上调,而中药复方糖心康可使其下调,这也是中药复方糖心康对糖尿病性心肌组织损伤具有保护作用的机制之一。     

二黄糖肾康对糖尿病肾病大鼠细胞因子TGF-β1和PDGF-B表达的影响

我们在临床应用二黄糖肾康治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)取得了较好的疗效,为探讨二黄糖肾康防治糖尿病肾病的作用机制,开展了此项研究并报告如下.