HPLC-MS/MS法测定超声提取刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量

目的:建立一个高效液相-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶含量的方法。方法:建立HPLC-MS/MS方法,进行色谱和质谱方法的考察,得到最优的分析条件,即流动相为乙腈-0.05%的甲酸溶液(20∶80,V/V),流速为0.5 ml/min。采用电喷雾离子源(ESI)进行电离,多离子反应监测(MRM)模式进行信号采集,采用外标法进行定量;采用HPLC-MS/MS方法同时测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量。结果:刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶分别在0.7~30 000 ng/ml、0.4~10 000 ng/ml和0.3~16 000 ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r0.999 7),检出限(LOD)分别为0.17 ng/ml、0.12 ng/ml和0.09 ng/ml,定量限(LOQ)分别为0.7 ng/ml、0.4 ng/ml和0.3 ng/ml,不同浓度下的平均加标回收率为98.10%、98.19%和98.21%;在最优提取条件下刺五加果实中刺五加苷B的含量为(1.935 0±0.001 5)mg/g,刺五加苷E的含量为(0.273 0±0.003 5)mg/g,异嗪皮啶的含量为(0.013 0±0.001 2)mg/g。结论:HPLC-MS/MS法灵敏度高、选择性好、分析时间短,可对刺五加果实中刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶进行准确的定量分析。     

高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法测定双黄连粉针剂中奎尼酸的含量

目的建立双黄连粉针剂和金银花药材中奎尼酸的高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱含量测定方法。方法双黄连粉针及金银花药材中的奎尼酸分别用50%甲醇提取,以高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱进行分析,多反应监测扫描,母/子离子对为191/85。结果奎尼酸保留时间为1.645min,标准曲线在42.96～214.80μg·ml-1范围内线性关系良好(r2=0.9995),加样回收率97.61%,RSD1.50%。结论该方法快速、准确、选择性好,灵敏度高,可为奎尼酸的含量测定提供参考。     

高效液相色谱串联质谱联用法测定培养基中丝裂霉素C残留量

目的 建立液相色谱-电喷雾串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定培养基中丝裂霉素C残留量的方法.方法 培养基样品经乙腈直接沉淀蛋白后,采用Thenno Hypurity C18柱(2.1 mm×150 mm,5μm)分离,流速为0.2 ml/min,以乙腈:0.1%甲酸=40:60为流动相等度洗脱.通过电喷雾离子源进入质谱,以二级质谱多反应监测(MRM)方式进行检测.结果 丝裂霉素的线性范围分别为0.098～50 ng/ml,最低检测浓度为0.098 ng/ml,平均相对回收率在91.30%～105.46%范围内,日内和日间精密度<15%.结论 本法简单、快速、灵敏、重现性好,可用于丝裂霉素C的培基中残余量的测定和监控.     

液相色谱串联质谱用于原料药甲氧苄啶含量测定

目的建立甲氧苄啶原料药的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。方法样品经50%的甲醇溶解后进行液质联用分析。色谱柱为C18柱,流动相为甲醇：水（50∶50）,流速为0.2mL/min;质谱采用多重反应监测,正离子模式,离子对m/z（291.1→230.1）。结果甲氧苄啶的线性范围为60～252ng/mL,平均含量为93.64%,平均回收率为99.42%。结论利用液相色谱串联质谱技术测定原料药中甲氧苄啶的方法具有高选择性、高灵敏度等特点,具有一定实用性。     

肿节风滴丸的质量标准研究

目的 建立肿节风滴丸的质量控制方法。方法 采用理化鉴别和薄层色谱进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对制剂中异秦皮啶进行测定。结果 异秦皮啶在1.3～9.7 μg/mL与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率为99.10%,RSD为0.45%。结论 本方法操作简便,可用于肿节风滴丸的质量控制。     

大孔吸附树脂分离肿节风中异秦皮啶部位的质量评价

目的:对大孔吸附树脂分离肿节风的异秦皮啶部位进行质量评价。方法:采用HPLC测定肿节风及香豆素部位的异秦皮啶含量。结果:香豆素部位的异秦皮啶含量为2.59%,固体回收率为11.2%,异秦皮啶的回收率为95%,异秦皮啶的纯化倍数为7.4。结论:12-1大孔吸附树脂能较好地分离肿节风的异秦皮啶部位。     

固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱测定人血浆中肌苷浓度的方法学建立

目的·建立一种使用固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱(solid-phase extraction-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,SPE-HPLC-MS/MS)测定人血浆中肌苷浓度的方法.方法·采用电喷雾离子化正离子模式和...     

液质联用法检测中成药和保健食品中的6种肾上腺皮质激素

目的 建立中成药或保健食品中非法添加的6种肾上腺皮质激素的检验方法.方法 样品经溶剂提取分离后,采用高效液相色谱-串联质谱法测定.色谱条件:色谱柱为C18柱,流动相为乙腈-水(体积比40∶60),检测波长240 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL;质谱条件:以ESI电喷雾电离源正离子模式进行质谱...     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中forsklin的浓度及其药代动力学

建立了测定大鼠血浆中forsklin的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。方法 血浆样品经叔丁基甲醚萃取后,以水(0.1%甲酸)-乙腈为流动相梯度洗脱, BetaBasic-C₁₈柱分离。通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 411→375.3(forsklin)和285→193(地西泮)。结果 在本实验条件下,forsklin血浆浓度测定方法的线性范围为0.5~1000 ng/ml,定量下限为0.5 ng/ml。日内、日间精密度(相对标准差 RSD)均小于14.4 %;准确度(相对误差 RE)在-3.5 %和3.8%之间。方法的专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。结论 该法快速、灵敏、准确,可用于forsklin的药代动力学研究。     

LC-MS/MS检测血浆中黄连吴茱萸药对生物碱的研究

目的：快速准确测定黄连-吴茱萸药对中生物碱的血药浓度。方法：采用高效液相色谱-质谱联用法对黄连-吴茱萸药对中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱和吴茱萸碱的血药浓度进行测定,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,Hypersil GOLD C18柱（50 mm×2.1 mm,3μm）为固定相,流速为0.2 ml/min,柱温为35℃。质谱采用高温电喷雾离子源,以选择反应监测模式进行定量分析,血浆样品用乙腈直接沉淀处理。结果：盐酸小檗碱在1.243～30.578 ng/ml,盐酸巴马汀在1.240～30.541 ng/ml,盐酸药根碱在1.248～30.647 ng/ml,吴茱萸碱在28.432～553.314 ng/ml范围内均呈良好线性关系。日内、日间RSD均小于15%（n=5）。结论：本方法操作简单、灵敏度高、分析时间短,适用于黄连-吴茱萸药对生物碱血药浓度监测及药代动力学研究。     

HPCE法草珊瑚异秦皮啶和反丁烯二酸的含量测定

目的：建立高效毛细管电泳法同时测定草珊瑚药材中异秦皮啶和反丁烯二酸的含量。方法：电泳条件为未涂层石英毛细管柱62.5cm（50cm to the detector）×75μm;背景电解质（BGE）为7.5mmol·L^-1硼砂-磷酸二氢钠（用NaH2PO4调pH=8.70）;运行电压25kV;柱温23℃;进样量0.4psi（3sec）;检测波长为：210nm。结果：异秦皮啶在1.25-40μg·ml^-1之间线性关系良好,反丁烯二酸在12.5-200μg·ml^-1之间线性关系良好。结论：该方法稳定可靠,可为草珊瑚药材质量控制提供新的参考。     

LC-MS/MS法检测血液和尿液中东莨菪碱和阿托品

  目的  建立曼陀罗中毒人体血液和尿液中东莨菪碱和阿托品的LC-MS/MS检测方法。  方法  采用Shim-pack GISR-HP C18色谱柱,以乙腈-甲酸（0.1%）水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源正离子多反应监测模式质谱分析,采用2个特征离子对和外标标准曲线法对曼陀罗中毒人体血液和尿液中东莨菪碱和阿托品进行定性定量分析。  结果  东莨菪碱和阿托品的定量离子对分别为m/z 304.25 [M+H]+→138.15和m/z 290.2 [M+H]+→124.15。东莨菪碱和阿托品在质量浓度1～100 ng/mL范围内线性良好（R≥0.999）,检出限（LOD）分别为:血液0.45 ng/mL和0.19 ng/mL,尿液0.38 ng/mL和0.16 ng/mL;定量限（LOQ）分别为:血液1.01 ng/mL和0.63 ng/mL,尿液1.07 ng/mL和0.38 ng/mL;提取回收率分别为:血液94.38%和94.49%,尿液94.96%和96.52%;基质效应为-3.51%～0.84%。2种目标物的准确度为89.38%～102.86%,日内和日间精密度均小于6%。  结论  建立的LC-MS/MS检测方法能快速、准确的测定生物检材中东莨菪碱和阿托品的含量。     

LC-MS/MS法定量检测恩格列净原料药中杂质的含量

目的：建立一种LC-MS/MS法用于定量检测恩格列净原料药中杂质X（简称EPLZ-X）的含量。方法采用Thermo BDS C18（4.6 mm ×100 mm,2.4μm）色谱柱,以乙腈-水（75∶25,V/V）为流动相,流速0.7 ml/min。质谱扫描方式选用正离子模式,用于定量的多反应监测（MRM）离子对为m/z 785→m/z 475（CE为43 V）和m/z 785→m/z 418（CE为50 V）。结果在0.5~100.6 ng/ml范围内线性关系良好,低、中和高浓度质控样品的日内精密度分别为5.9%、5.4%和7.9%。日间精密度分别为6.3%、11.8%和10.7%,加样回收率分别为105.1%、109.8%、102.6%,最低定量下限为0.5 ng/ml。结论使用此法成功测定了3批原料药中该杂质的含量,均符合要求（不得超过60×10-6 g）。本法专属性强,灵敏度高,可用于其他批次样品的分析。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的含量(英文)

目的建立了测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)的液相色谱-串联质谱法。方法血浆样品经液-液萃取后,以甲醇-水(70∶30,V/V)为流动相,通过Restek PinnacleⅡC18柱分离,格列吡嗪为内标,选择负离子扫描方式,以多反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 531→m/z 431(DAS)和m/z 444→m/z319(格列吡嗪,内标)。结果DAS血浆浓度测定方法的线性范围为5～2500 ng/ml,定量下限为5 ng/ml。日内、日间精密度(RSD)均小于9.51%,准确度(RE)在-0.18%~1.93%。样品提取回收率为79.73%~85.99%,每个样品的测试时间为3 min。应用此法测试了大鼠口服或静注穿琥宁(DAS的单钾盐)后DAS的血药浓度,计算出其绝对生物利用度为3.69%。结论本方法灵敏度高、专属性强,适合于DAS的临床前药动学研究。     

人血浆中盐酸多奈哌齐的HPLC-MS测定法

目的:建立人血浆中盐酸多奈哌齐的HPC-MS法.方法:血样经饱和NaHCO3碱化后用乙酸乙酯提取,进行HPLC-MS分析,色谱柱为Hypersil ODS(5μm,250mm×4.6 mm),流动相为甲醇-水-三乙胺-冰醋酸(70:30:0.3:0.3),内标为盐酸非洛普,检测离子为m/z 380(多奈哌齐)、m/z 344(内标),裂解电压为120V.结果:在0.2～20ng/ml范围内多奈哌齐与内标峰面积比值与浓度线性关系良好(r=0.9996),最低可定量浓度为0.1 ng/ml,提取回收率为87.52%～90.91%.结论:本实验建立的分析方法灵敏、准确、简便.     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芍药内酯苷的浓度及其在毒代动力学研究中的应用

目的 建立测定大鼠血浆中芍药内酯苷的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法.方法 血浆样品经乙酸乙酯-异丙醇(95:5,V/V)提取后,以Poroshell 120 EC-C18柱(50 mm×2.1 mm,2.7μm)为分析柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,采用ESI源在多反应监测(MRM)方式下进行正离子检测.用于定量分析的离子反应为m/z 498.5→m/z 197.1(芍药内酯苷)和m/z 251.3→m/z 108.2(拉科酰胺,内标).结果 芍药内酯苷血浆浓度测定方法的线性范围为20~2000 ng/ml,日内、日间精密度RSD%均<15%,准确度(RE)在±8.06%之间.结论 该法适用于芍药内酯苷在大鼠体内的毒代动力学研究.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定6-巯基嘌呤血浆药物浓度方法的建立与评价

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测人血浆中6-巯基嘌呤(6-MP)的浓度,为临床制定个体化给药方案提供基础.方法 使用 Waters公司超高效液相色谱(I-Class)-质谱(TQ-S)联用仪,以Waters ACQUITY BEH HILIC (2.1 mm×50 mm,1.7 μm)为色谱柱,pH 3.0,0.02 mol/L 醋酸铵缓冲液(含0.3%HCOOH)-乙腈(20:80)为流动相,流速0.4 mL/min,以6-硫鸟嘌呤(6-TG)为内标,乙腈沉淀蛋白,取4 μL上清液进样分析.采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为 m/z 153.03→119.1(6-MP)和m/z 168.06→134.13(6-TG).结果 6-MP 血浆浓度在0.5~2000 ng/mL 内线性关系良好(r=0.9989),定量下限为0.125 ng/mL.日内、日间 RSD<6%,方法回收率89%~104%(RSD<6%),提取回收率>95 %(RSD<8%).血浆中6-MP 在室温避光保存6 h,冻融3次和-20 ℃保存15 d 的 RSD 分别为<4.66%、4.74%和5.11%.结论 该方法操作简单、快速、灵敏度高、稳定性强,适用于血浆中6-MP 药物浓度监测.     

肿节风浸膏溶液对鼻咽癌细胞系CNE-2的放射增敏作用

目的：探讨肿节风浸膏对鼻咽癌细胞系CNE-2的细胞毒性作用以及对放射敏感性的影响。方法：应用克隆形成方法,观察不同浓度的肿节风浸膏对CNE-2的细胞杀灭效应,求得IC50,选择合适浓度的肿节风浸膏配合照射和单纯照射对细胞的杀伤作用,计算细胞存活率,用多靶单击数学模型进行曲线拟合作图。结果：与照射配合的肿节风浸膏的合适浓度为10mg／L。单纯照射组D0值为3．096Gy,照射加肿节风浸膏组D0值为2．441Gy,放射增敏比（SER）为1．268（3．096／2．441）。结论：肿节风浸膏具有一定的放射增敏作用。     

LC／MS／MS测定犬血浆中氯米帕明浓度及体内药动学

目的：建立液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中氯米帕明（Clomipramine）。方法：色谱柱为ZorbaxExtend—C18柱（150mm×4．6mm,5μm,美国Agilent公司）;C18保护柱（4．0mm×3．0mm,5μm,迪马公司）;流动相为乙腈-10mmol／L醋酸铵-甲酸（60：40：0．1,V／V／V）;流速为0．5ml／min;进样量为20μl;柱温为20℃;采用三重四极杆串联质谱仪,ESI电离源,以选择反应监测方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z315．2,86．1（氯米帕明）和m／z285．1～86．2（内标异丙嗪）。500μl血浆样品经正己烷液提取后蒸干,流动相复溶,进行分析。结果：测定血浆中氯米帕明的线性范围为1～500ng／ml,定量下限为1ng／ml;日内、日间精密度RSD均小于15％,准确度在85％。115％范围内．符合《中国药典》2010年版二部的规定．结论：本方法可用干氯米帕明的女体内药代动力学研究。