慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞膜表面Fas配体检测及意义

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）膜表面Fas配体（FasL）水平,并探讨其在慢性肝炎发病机制中的作用。方法用免疫组织化学法分别检测42例慢性乙型肝炎患者和20例健康人PBMC细胞膜表面FasL表达,并与其他实验室指标作相关性比较。结果慢性乙型肝炎患者外周血PBMC膜表面FasL阳性百分率为（64．0±7．8）％,明显高于健康对照组（40．7±8．6）％。结论PBMC膜表面FasL表达异常可能在慢性乙型肝炎发病过程中起重要作用。     

肝癌患者外周血单个核细胞HLA-G表达研究

目的了解肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMC）人类白细胞抗原G（HLA—G）的表达水平。方法收集38例HCC患者、25例肝硬化患者和40名健康查体者的PBMC,分别用逆转录一聚合酶链反应（PCR）和流式细胞术（FCM）检测其HLA—GmRNA和HLA—G蛋白表达水平。结果HCC组、肝硬化组和健康对照组PBMCHLA—GmRNA表达率分别为94．7％、84．0％和87．5％,差异无统计学意义（P=0．359）;HCC组HLA—G蛋白表达率高于肝硬化组和健康对照组,差异有统计学意义（P=0．002）。HCC组PBMCHLA—G蛋白主要表达于CD4^＋细胞上。结论HCC患者PBMCHLA—G蛋白表达率升高,其机制与临床意义尚待进一步研究。     

细胞凋亡因子Fas配体

Fas和Fas配体(FasL)是已认识到的一对诱导细胞凋亡的膜蛋白分子,它们之间构成一条独特的细胞凋亡通路。本文对FasL的分子生物学特性和生理功能及其在疾病发生中的作用作一综述。     

HLA-GmRNA在肝癌患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的：了解肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMC）、人类白细胞抗原 G mRNA（HLA-G mRNA）的表达水平及其意义。方法收集44例 HCC患者、21例肝硬化患者和40例健康查体者的 PBMC,建立逆转录-实时荧光 PCR相对定量体系检测PBMC HLA-G mRNA相对表达量。结果 HCC组、肝硬化组和健康对照组的 HLA-G mRNA相对表达量分别为1.71±0.39,1.05±0.38和1.01±0.47,HCC组高于肝硬化组和对照组,差异有统计学意义（F＝33.657,P＜0.001）。HLA-G mRNA高表达的 HCC患者生存率低于 HLA-G mRNA低表达者,差异有统计学意义（χ2＝5.972,P＝0.015）。结论 PBMC HLA-G mRNA相对表达量与肝癌发生发展密切相关,检测 PBMC HLA-G mRNA有助于肝癌的诊断与研究。     

Fas基因与细胞凋亡

Fas抗原和Fas配体是细胞表面的两种跨膜蛋白;Fas介导的细胞凋亡对维持机体的正常免疫功能和在某些疾病的发生发展中有十分重要的作用.     

Genistein在调节肝癌HepG2细胞Fas基因表达及诱导细胞凋亡中的作用

目的: 探讨三磷酸肌醇( IP3) 和Fas基因表达变化在genistein诱导肝癌细胞凋亡中的作用。方法:以肝癌HepG2 细胞培养72h为对照,以20,40.60,80μmol/ L genistein作用于 HepG2 细胞72h和60μmol/L genistein 作用于 HepG2 细胞6h、12 h、24 h、48 h、72 h，应用同位素试剂盒IP3 - [3H] Birtrak检测细胞IP3 含量，RT-PCR分析Fas mRNA表达，Western blotting 分析细胞Fas蛋白表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果: 各浓度的genistein作用于肝癌HepG2 细胞72 h，IP3 含量显著高于对照组[（17.7±1.3）pmol/106cells、（11.2±0.9）pmol/106cells、（4.9±0.5）pmol/106cells、（4.8±0.3）pmol/106cells vs （29.4±0.5）pmol/106cells]，Fas mRNA表达显著高于对照组[RI（灰度与面积之积与β-actin的相对强度）0.25±0.002、0.30±0.01、0.28±0.04、0.30±0.03 vs 0.19±0.01]，Fas蛋白表达显著高于对照组[RI1.08±0.01、 1.11±0.02、1.05±0.06、1.03±0.01 vs 0.17±0.01]，细胞凋亡率显著高于对照组[（10.1±0.9）%、（18.7±1.6）%、（28.7±2.5）%、（27.9±2.0）% vs （2.6±0.1）%]；60 μmol/L genistein 作用于肝癌HepG2 细胞6h、12 h、24 h、48 h、72 h，6h后IP3 含量显著高于对照组[（22.6±0.9）pmol/ 106cells、 (12.0±1.4) pmol/ 106cells、(7.5 ±0.8) pmol/ 106cells、(5.6 ±0.5) pmol/ 106cells、(4.3 ±0.6) pmol/ 106cells vs (29.2 ±0.6) pmol/ 106cells。P < 0.01）；12h后Fas mRNA表达显著高于对照组[RI0.24±0.01、0.24±0.01、0.24±0.02、0.30±0.001 vs 0.20±0.01]，6h后Fas蛋白表达显著高于对照组[RI 0.55±0.08、 1.01±0.03、1.62±0.03、1.46±0.09 、1.56±0.04 vs 0.18±0.01]，24 h后各时相细胞凋亡率为显著高于对照组[(7.4 ±0.5) %、(20.5 ±2.0) %、(30.7 ±1.6) % vs (2.6 ±0.1) %。P < 0.01]。结论: Genistein能减少IP3 生成,上调Fas基因表达,诱导肝癌细胞凋亡。     

肝细胞肝癌患者血清可溶性Fas测定及其临床意义

目的检测肝细胞肝癌患者血清可溶性Fas(sFas)水平并探讨其在肝癌发生机制中的作用.方法用ELISA法检测了31例肝细胞肝癌和20名正常人血清sFas水平(5.9±2.0ng/m1)明显高于正常对照组(2.6±0.8ng/m1)(t=3.87,p＜0.01).患者血清sFas与肝炎活动程度指标无相关性.结论外周血中sFas在肝细胞肝癌的发生发展中可能起着重要作用.     

尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞凋亡与Fas、FasL表达的研究

目的 :研究尖锐湿疣 (CA)患者外周血淋巴细胞 (PBLC)凋亡及Fas、FasL的表达情况 ,探讨CA免疫发病机制。方法 :采用流式细胞仪 (FCM)的直接免疫荧光标记法检测CA患者PBLC表面Fas、FasL的表达与细胞凋亡率。结果 :CA患者PBLC凋亡率及Fas、FasL表达水平均明显高于对照组 (P <0 0 1 ) ,PBLC凋亡率与Fas、FasL表达水平呈正相关 (r =0 6781 ,P <0 0 1 ;r <0 72 82 ,P <0 0 1 )。结论 :CA患者体内免疫功能异常与淋巴细胞凋亡过度有关 ,Fas/FasL在介导凋亡中可能起重要作用     

Fas抗原分子

Fas抗原，又称APO-1或CD95，是一种319个氨基酸组成的Ⅰ型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子和神经生长因子受体超家庭成员。Fas抗原表达于各种细胞，如活化的T，B细胞，NK细胞，胸腺细胞，恶性的T、B细胞，成纤维细胞等。人与小鼠的Fas基因分别定位于第10号及第19号染色体。Fas抗原的天然配体是一种Ⅱ型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子家族成员，其主要分布于活化的T细胞。Fas抗原及配体系统异常的两种小鼠Lpr与gld表现自身免疫病理变化。抗Fas抗体或表达Fas配体的细胞交联Fas抗原，可诱导细胞凋亡，提示Fas／Apo──1抗原是细胞凋亡过程中重要信号传递分子。Fas抗原诱导的细胞凋亡在调控免疫细胞的发育，增殖及免疫应答中起主导作用。已经证实Fas系统在T细胞的发育，细胞毒作用及细胞毒性T介导自身免疫病中发挥重要作用。而且抗Fas抗体或Fas配体可诱导肿瘤细胞凋亡。Fas抗原系统的研究将有助于阐明自身免疫病发病机制，开辟肿瘤治疗的新途径。     

Fas配体在髓系白血病细胞中的表达及功能研究

为了解Fas配体 (FasL)在髓系白血病细胞中的表达水平及其诱导Fas+敏感细胞发生凋亡的功能 ,用流式细胞术检测 38例髓系白血病患者 (外周血白细胞 >10 0× 10 9/L)的白血病细胞在新鲜分离及IL 2和IFN γ刺激后表面膜FasL的表达水平 ,将白血病细胞 ( 1× 10 6/ml)与Jurkat细胞 ( 1× 10 5/ml)混合培养 2 4小时后 ,用DNA电泳和流式细胞术双标法检测Jurkat细胞发生凋亡的情况。结果表明 :白血病细胞表面FasL表达量 ( 3.5 9± 1.0 5 ) %高于正常人 ( 0 .36± 0 .16 ) % ,P <0 .0 0 1,经IL 2和IFN γ刺激后其表达量明显增加 ( 7.78± 3.4 0 ) % ,P <0 .0 1;白血病细胞刺激前后诱导Jurkat细胞发生的凋亡率分别为 ( 8.2 8± 1.6 1) % ,( 10 .73± 2 .16 ) % ,差异具有显著性意义。结论 :FasL在髓系白血病细胞表面高表达且对Fas+的敏感细胞具有杀伤功能 ,推测Fas/FasL途径可能在白血病的“免疫逃逸”中发挥作用     

肝细胞肝癌患者血清AFP—IgM复合物表达水平及其临床意义

目的探讨肝细胞肝癌（HCC）患者血清甲胎蛋白-IgM免疫复合物（AFP—IgM）的表达水平及其临床意义。方法应用酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测79例HCC患者、20例中度肝硬化患者和30例健康对照者血清中AFP-IgM水平,并进行对比分析。结果AFP-IgM的浓度和阳性率分别为HCC组422．20×10^3AU／L和73％,肝硬化组268．85×10^3AU／L和20％,健康对照组119．71×10^3AU／L1和7％。HCC组阳性率显著高于肝硬化组和健康对照组（分别P〈0．01）;Ⅰ期和Ⅱ期HCCAFP-IgM阳性率（分别为89％和88％）高于Ⅲ期（30％,P〈0．05）;AFP-IgM的水平与肿瘤分期、大小有关。结论血清AFP-IgM对HCC的早期诊断具有重要意义,有望成为一个有用的辅助诊断HCC的生物标志。     

Clinical significance of half-hepatic blood flow occlusion technology in patients with hepatocellular carcinoma with cirrhosis

BACKGROUNDMost patients with primary hepatocellular carcinoma (HCC) have a history of chronic hepatitis B and usually present with varying degrees of cirrhosis. Owing to the special nature of liver anatomy, the blood vessel wall in the liver parenchyma is thin and prone to bleeding. Heavy bleeding and blood transfusion during hepatectomy are independent risk factors for liver cancer recurrence and death. Various clinical methods have been used to reduce intraoperative bleeding, and the Pringle method is most widely used to prevent blood flow to the liver.AIMTo investigate the effect of half-hepatic blood flow occlusion after patients with HCC and cirrhosis undergo hepatectomy.METHODSThis retrospective study included 88 patients with HCC and liver cirrhosis who underwent hepatectomy in our hospital from January 2017 to September 2020. Patients were divided into two groups based on the following treatment methods: the research group (n = 44), treated with half-hepatic blood flow occlusion technology and the control group (n = 44), treated with total hepatic occlusion. Differences in operation procedure, blood transfusion, liver function, tumor markers, serum inflammatory response, and incidence of surgical complications were compared between the groups.RESULTSThe operation lasted longer in the research group than in the control group (273.0 ± 24.8 min vs 256.3 ± 28.5 min, P < 0.05), and the postoperative anal exhaust time was shorter in the research group than in the control group (50.0 ± 9.7 min vs 55.1 ± 10.4 min, P < 0.05). There was no statistically significant difference in incision length, surgical bleeding, portal block time, drainage tube indwelling time, and hospital stay between the research and control groups (P > 0.05). Before surgery, there were no significant differences in serum alanine transaminase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), total bilirubin, and prealbumin levels between the research and control groups (P > 0.05). Conversely, 24 and 72 h after the operation the respective serum ALT (378.61 ± 77.49 U/L and 246.13 ± 54.06 U/L) and AST (355.30 ± 69.50 U/L and 223.47 ± 48.64 U/L) levels in the research group were significantly lower (P < 0.05) than those in the control group (ALT, 430.58 ± 83.67 U/L and 281.35 ± 59.61 U/L; AST, 416.49 ± 73.03 U/L and 248.62 ± 50.10 U/L). The operation complication rate did not significantly differ between the research group (15.91%) and the control group (22.73%; P > 0.05).CONCLUSIONHalf-hepatic blood flow occlusion technology is more beneficial than total hepatic occlusion in reducing liver function injury in hepatectomy for patients with HCC and cirrhosis.     

三七对系膜增生型肾炎外周血T细胞亚群及Fas／FasL表达的调节及意义

[目的]研究系膜增生型肾炎患者外周血T细胞亚群及Fas／FasL表达特点，探讨三七对系膜增生型肾炎T细胞亚群及Fas／FasL表达调节的意义。[方法]将120例系膜增生型肾炎患者随机分成2组，一组以常规法治疗，一组以常规法加三七治疗。用流式细胞仪检测2组患者治疗前后外周血T细胞亚群CD2、CD4、CD8及Fas／FasL表达，同时设置正常对照组。[结果]系膜增生型肾炎患者T细胞亚群明显失衡，表现为CD4为减少，CD8增加，CD4／CD8比值显著降低，Fas／FasL显著低于正常对照组（P〈0.01）。Fas／FasL的降低与CD4细胞呈正相关，（r=0．57，r=0．46，P〈0．05），与CD8细胞呈负相关（r=-0．7，r=-0．6，P〈0．05），三七组治疗后T细胞失衡明显纠正，Fas／FasL表达上调。[结论]系膜增生型肾炎T细胞亚群失衡，Fas／FasL表达低下，可能为系膜增生型肾炎发生和病变进展的免疫因素之一。三七具有诱导外周血T细胞发生凋亡的作用，通过下调过度增生的免疫活性细胞减轻系膜增生型肾炎免疫炎症的损害。     

两种不同类型腹透液对单个核细胞功能的影响

目的 研究不同浓度的葡萄糖-乳酸腹透液和葡萄糖-丙酮酸腹透液对单个核细胞活性和功能的影响,比较他们的生物相容性。方法 应用Ficoll密度梯度离心方法分离6例健康献血者的外周血单个核细胞(PBMC),与不同的液体共同孵育:(1)对照组:RPMI 1640培养液,含10％小牛血清(2)1.5％葡萄糖-乳酸腹透液(3)2.5％葡萄糖-乳酸腹透液(4)4.25％葡萄糖-乳酸腹透液(5)1.5％葡萄糖-丙酮酸腹透液(6)4.25％葡萄糖-丙酮酸腹透液。在37℃、5％CO_2培养箱内分别孵育10分钟、30分钟后,用MTT(亚甲基四唑蓝)法检测单个核细胞活性。并加入10ng/ml的内毒素(LPS)刺激20小时后,应用酶联免疫吸附分析(ELISA)方法检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNFα人白细胞介素8(I。-8)、可溶性肿瘤坏死因子受体(STNFRI)的浓度。结果PBMC与不同组腹透液共同孵育后,其活性均较对照组显著降低(P<0.05)。在内毒素刺激下产生TNFα、IL-8、sTNFR1的能力受到不同程度的抑制。其中4.25％葡萄糖-乳酸腹透液组抑制作用最显著,1.5％葡萄糖-丙酮酸腹透液组对PBMC产生细胞因子的抑制显著轻于乳酸腹透液组。在同样的缓冲条件下,葡萄糖浓度越高,对PBMC的抑制作用越强。结论 以葡萄糖为渗透剂、乳酸为缓冲液的传统腹透液明显抑制单个核细胞的活性和产生细胞因子的     

胃癌患者外周血单个核细胞和肿瘤组织表面分化抗原44变异体6检测的临床意义

目的探讨测定胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)及肿瘤组织细胞表面分化抗原44变异体6(CD44v6)含量(%)的临床意义。方法用流式细胞术(FCM)检测50例胃癌患者术前和术后1周及20名正常人PBMCCD44v6含量(%),以及术后胃癌及癌旁正常组织CD44v6含量。结果胃癌患者术前PBMCCD44v6含量(9.72%±6.65%)比正常对照组(3.11%±1.15%)及术后1周(4.44%±2.33%)明显增高(分别P<0.001和<0.01);胃癌及癌旁正常组织CD44v6含量分别为3.67%±0.63%及1.33%±0.51%(P<0.01);Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者PBMC及胃癌组织CD44v6含量(分别为12.56%±6.97%及3.91%±0.87%)均明显高于Ⅰ+Ⅱ期患者(分别为6.89%±3.37%和2.86%±0.65%,均P<0.05)。胃癌淋巴转移患者PBMC及胃癌组织CD44v6含量(分别为11.29%±5.36%和4.41%±0.79%)均明显高于无转移者(7.32%±4.28%和2.61%±0.78%,均P<0.05)。结论用FCM检测胃癌患者PBMCCD44v6含量能反映胃癌组织CD44v6改变,对胃癌诊断、进展与转移评价及术后疗效观察具有重要的临床意义。     

原发性肝癌中Bax及c-myc蛋白表达与凋亡指数的关系

目的　检测Bcl- 2、Bax及c -myc在肝细胞癌中的表达 ,探讨肝细胞癌中二者表达与凋亡指数的关系。方法　对 2 2例人肝细胞癌及癌旁组织分别进行Bax及c -myc的免疫组织化学研究和TUNEL技术标记 ,计数阳性细胞数。结果　在肝细胞癌中Bax蛋白呈低表达 ,表达率为 45 45 % ,与癌旁组织相比有显著差异 (P <0 0 1) ;c -myc在肝细胞癌及癌旁组织中均呈高表达 ,表达率分别为 81 82 %和 72 73% ,但二者无差异 (P >0 0 5 ) ;肝癌组织中凋亡指数为 9 5 5 % ,低于癌旁组织15 6 8% ,二者有显著差异 (P <0 0 1)。结论　肝细胞癌的发生与细胞凋亡受到抑制有关 ,Bax起到更关键的作用 ;Bcl- 2 /Bax异二聚体能更准确地反映凋亡发生的程度 ;凋亡指数有可能成为判定细胞癌变的指标。     

子宫内膜异位症患者外周血单个核细胞白细胞介素6的检测——附35例资料分析

目的：探讨子宫内膜异位症患者外周血中白细胞介素６（ＩＬ－６）水平变化对异位病灶组织的作用。方法：用生物学检测法测定子宫内膜异位症患者（３５例）、健康成年女性（２８名）外周血中单个核细胞（包括淋巴细胞及单核细胞）所产生的ＩＬ－６的活性。结果：子宫内膜异位症患者外周血中单个核细胞产生ＩＬ－６为（１１２±２５）ｋＵ／Ｌ,与对照组（７０±１１）ｋＵ／Ｌ比较,有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：子宫内膜异位症患者体内存在ＩＬ－６高水平状态,由此造成的免疫功能改变可能对子宫内膜异位症的异位组织生长有促进作用。     

肝细胞癌患者血清VEGF和NO含量测定及其临床意义

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)和一氧化氮(NO)在肝细胞癌患者血清中的表达水平,并探讨其临床意义。方法分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和分光光度法检测60例肝细胞癌、48例良性肝病患者和32名健康人血清中VEGF和NO的含量。结果良性肝病患者血清中VEGF和NO含量与健康人比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而肝细胞癌患者血清VEGF和NO含量较良性肝病患者和健康人明显增高(P<0.01),且随着肝细胞癌门静脉癌栓形成、肿瘤体积增大以及临床分期愈晚而显著增高(P<0.01)。血清VEGF与NO含量呈明显正相关(r=0.836,P<0.01)。结论VEGF和NO可能与肝细胞癌的发生、发展密切相关,治疗前检测血清VEGF和NO表达水平可以作为判断肝细胞癌侵袭、生长及临床分期的有价值指标。     

凋亡相关蛋白bax在肝细胞癌的表达及其意义

目的：探讨原发性肝细胞癌（简称肝癌）细胞凋亡相关蛋白bax的表达情况及其意义。方法：采用免疫组化ABC法检测bax蛋白在66例肝癌组织和24例正常肝组织,以及3种人肝癌细胞系HCC－9204、SMMC－7721、HHCC和1种人正常肝细胞系QZG的表达情况,并分析肝癌组织的bax蛋白表达阳性率与其病理分级间的关系。结果：bax蛋白在正常肝组织中表达阳性率为70．8％（17／24）,在肝癌组织中表达阳性率为43．9％（29／66）,二者差异显著（P＜0．05）。肝癌组织的bax蛋白表达阳性率与其病理分级间未见明显相关性（P＞0．05）。肝细胞系HCC－9204、SMMC－7721、HHCC的阳性细胞计数率分别为43．2％、58．3％和47．1％。正常肝细胞系QZG的阳性细胞计数率为61．0％。结论：与正常肝组织相比,肝癌组织可出现bax蛋白表达下降。肝癌细胞系和正常肝细胞系均可见中等程度的bax蛋白表达。